检索结果-内蒙古大学图书馆

热带医学杂志 2016年第5期16卷 573-575,585页

作者：杨洋季楠赵娜曹雅明王继春中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110122 阜新矿业集团总医院辽宁阜新123000 辽宁省人民医院辽宁沈阳110016 中国医科大学基础医学院免疫学教研室辽宁沈阳110122

目的研究预感染旋毛形线虫1周后C57BL/6小鼠抵御致死型约氏疟原虫攻击感染的能力。方法实验组在小鼠感染旋毛形线虫1周后感染约氏疟原虫,对照组单纯感染约氏疟原虫,观察小鼠原虫血症及生存率的变化。采用流式细胞仪技术检测脾细胞悬液中... 详细信息

目的研究预感染旋毛形线虫1周后C57BL/6小鼠抵御致死型约氏疟原虫攻击感染的能力。方法实验组在小鼠感染旋毛形线虫1周后感染约氏疟原虫,对照组单纯感染约氏疟原虫,观察小鼠原虫血症及生存率的变化。采用流式细胞仪技术检测脾细胞悬液中T细胞数量,酶联免疫吸附试验定量检测脾细胞培养上清中细胞因子,Real-Time PCR法检测转录因子的表达情况。结果与对照组相比,实验组小鼠原虫血症水平降低,差异有统计学意义(P<0.05),生存率并未发生改变。实验组小鼠于感染后3 d,CD4+IFN-γ+T细胞及其效应分子IFN-γ,转录因子T-bet相对表达量明显升高,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论旋毛形线虫预感染1周可增强C57BL/6小鼠对致死型约氏疟原虫的早期抗感染能力。

关键词：旋毛形线虫约氏疟原虫17XL 免疫反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

锌依赖的金属蛋白酶1促进巨噬细胞凋亡

引用

细胞与分子免疫学杂志 2015年第12期31卷 1585-1587,1592页

作者：李鹏何永林张继明方陈城重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW2... 详细信息

目的构建锌依赖的金属蛋白酶1(zmp1)基因的真核表达质粒,探讨其对巨噬细胞凋亡的影响。方法以卡介苗(BCG)基因组DNA为模板,采用PCR法扩增zmp1基因;克隆到真核表达质粒p EGFP-N1的多克隆位点中,构建真核表达质粒p EGFP-N1-zmp1并转染RAW264.7细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白表达,实时定量PCR(qRT-PCR)检测zmp1 mRNA的水平;藻红蛋白标记的膜联素Ⅴ/7-氨基放线菌素D(annexinⅤ-PE/7-AAD)双染色结合流式细胞术检测Zmp1蛋白对细胞凋亡影响。结果扩增出zmp1基因;真核表达质粒经过XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切及基因测序鉴定构建成功;转染细胞24 h后,经荧光倒置显微镜观察到绿色荧光;qRT-PCR结果显示转染p EGFP-N1-zmp1的RAW264.7细胞zmp1 mRNA的表达显著升高;转染后48 h,细胞早期凋亡率有所增加。结论在RAW264.7细胞中成功表达了Zmp1并能促进巨噬细胞凋亡。

关键词：卡介苗锌依赖的金属蛋白酶1(Zmp1) 真核表达 RAW264.7细胞细胞凋亡

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

脂肪干细胞诱导分化的现状及前景

引用

中国组织工程研究 2015年第6期19卷 969-974页

作者：赵娜中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁省沈阳市110001

背景:脂肪干细胞是由中胚层发育而来的多能干细胞,在特殊的生长因子和环境等诱导培养条件下,可以向不同的谱系分化。目的:详细阐述脂肪干细胞诱导分化的条件及鉴定方法。方法:应用计算机检索万方数据库及PubM ed数据库2005至2014年10年... 详细信息

背景:脂肪干细胞是由中胚层发育而来的多能干细胞,在特殊的生长因子和环境等诱导培养条件下,可以向不同的谱系分化。目的:详细阐述脂肪干细胞诱导分化的条件及鉴定方法。方法:应用计算机检索万方数据库及PubM ed数据库2005至2014年10年间的文献,中文检索词为"脂肪干细胞,诱导,分化";英文检索词为"adipose derived stem cells,differentiation"。依据纳入排除标准选择37篇文献进行归纳总结。结果与结论:脂肪干细胞在抗坏血酸、胰岛素、地塞米松、转化生长因子β作用下可向软骨细胞分化;成脂诱导液的配方包括3-异丁基-1-甲基黄嘌呤(IBMX)、胰岛素、地塞米松、吲哚美辛;成骨分化常用的诱导剂包含地塞米松或维生素D3、抗坏血酸,β-甘油磷酸钠;碱性成纤维细胞生长因子、表皮生长因子及维生素B27可联合应用诱导脂肪干细胞成神经分化;向心肌细胞分化普遍应用的诱导因子是5-氮杂胞苷;血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共同作用可以诱导脂肪干细胞向血管内皮细胞分化。随着分子生物学和细胞生物学的迅速发展,脂肪干细胞的分化研究也会更加深入,在目前对脂肪干细胞诱导分化现象观察的基础上,应加强对其内在的分子机制及调控脂肪干细胞可塑性的基因和蛋白的研究。

关键词：干细胞细胞分化脂细胞成体干细胞脂肪干细胞诱导脂肪细胞软骨细胞骨细胞心肌细胞血管内皮细胞神经细胞

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

新型疟疾传播阻断疫苗候选抗原PbPSOP7基因截短片段的克隆及表达特点的研究

引用

微生物学杂志 2016年第4期36卷 41-46页

作者：李敏郑文琪何一雯王琳寇叙曹雅明罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110021 中国医科大学附属第一医院内分泌科辽宁沈阳110001 内蒙古医科大学附属医院外科实验室内蒙古呼和浩特010050 中国医科大学基础医学院免疫学教研室辽宁沈阳110021

传播阻断疫苗(transmission-blocking vaccines,TBVs)可以有效地阻断疟原虫从蚊媒向人的传播,是控制疟疾流行的关键,但目前的TBVs候选抗原十分有限,迫切需要寻找有效的候选抗原。动合子分泌蛋白7(putative secreted ookinete protein 7,... 详细信息

传播阻断疫苗(transmission-blocking vaccines,TBVs)可以有效地阻断疟原虫从蚊媒向人的传播,是控制疟疾流行的关键,但目前的TBVs候选抗原十分有限,迫切需要寻找有效的候选抗原。动合子分泌蛋白7(putative secreted ookinete protein 7,PSOP7)在疟原虫有性生殖阶段发挥着至关重要的作用,本研究对伯氏疟原虫抗原PSOP7(Pb PSOP7)进行简要的生物信息学分析,并应用原核表达系统高效表达纯化了截短的重组Pb PSOP7蛋白(r Pb PSOP7),免疫BALB/c小鼠后,获得小鼠高滴度多克隆抗体。经Western Blot方法证实该多克隆抗体可识别疟原虫抗原。间接免疫荧光实验显示,Pb PSOP7主要表达于疟原虫的合子与动合子表面。这些特点符合TBVs的基本设计理念,为确认和证实Pb PSOP7蛋白具有疟疾TBVs候选抗原的潜能奠定基础。

关键词：疟疾伯氏疟原虫传播阻断疫苗重组蛋白 PbPSOP7

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

高表达毒力因子ROP18的转基因刚地弓形虫株的建立及鉴定

引用

中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2015年第1期33卷 14-18页

作者：蒋宗儒安然杨杰万俐娟都建安徽医科大学基础医学院生化与分子生物学教研室安徽医科大学第一临床学院安徽病原生物学省级实验室合肥230032

目的构建并鉴定高表达毒力因子ROP18的转基因刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)虫株。方法 RTPCR扩增刚地弓形虫RH株速殖子的ROP18基因片段。将纯化的PCR产物克隆至p CR-BluntⅡ-Topo载体构建p ROP18质粒,PCR扩增ROP18基因序列。将纯化的PC... 详细信息

目的构建并鉴定高表达毒力因子ROP18的转基因刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)虫株。方法 RTPCR扩增刚地弓形虫RH株速殖子的ROP18基因片段。将纯化的PCR产物克隆至p CR-BluntⅡ-Topo载体构建p ROP18质粒,PCR扩增ROP18基因序列。将纯化的PCR产物亚克隆至p TUB8-myc GFPPftail-Ty1载体,构建p TUB8-ROP18-Ty1质粒。将质粒电穿孔转染刚地弓形虫RH株,刚地弓形虫悬液转移到长有贴壁细胞的培养瓶中培养,用含25μg/ml霉酚酸和50μg/ml黄嘌呤的DMEM培养基筛选高表达ROP18的刚地弓形虫RH株。免疫荧光和蛋白质印迹(Western blotting)检测ROP18在转基因刚地弓形虫株中的表达。吉氏染色比较弓形虫RH株和高表达ROP18的转基因RH株弓形虫分别感染人包皮成纤维细胞(HFF细胞)的增殖情况。20只昆明小鼠均分为2组,每鼠分别腹腔内注射1×103高表达ROP18弓形虫RH株和1×103弓形虫RH株,统计小鼠存活率。结果 RT-PCR扩增出1 665 bp的ROP18基因序列。经酶切和测序鉴定证明p TUB8-ROP18-Ty1质粒构建成功。Western blotting分析结果显示,高表达ROP18 RH株可表达相对分子质量(Mr)为56 000的蛋白,与ROP18-Ty1蛋白预期结果一致。免疫荧光结果发现,ROP18-Ty1定位于弓形虫前端的棒状体。吉氏染色结果表明,高表达ROP18 RH株弓形虫感染HFF细胞6、12和24 h后的速殖子数量分别为100.0±16.9、476.0±31.1和860.0±52.3,均显著高于RH株弓形虫(88.0±16.9,300.0±11.3,675.0±35.4)(P<0.05)。弓形虫毒力实验结果显示,RH株弓形虫感染小鼠在第8天均存活,第14天存活率下降至30%(3/10),至第16天全部死亡;高表达ROP18 RH株弓形虫感染小鼠在第5天均存活,第8天存活率下降至30%(3/10),至第9天全部死亡。结论构建了高表达毒力因子ROP18的转基因弓形虫虫株。

关键词：弓形虫 ROP18基因转基因虫株

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

肾综合征出血热患者NK细胞及其表面标志物的动态观察

引用

微生物学杂志 2016年第3期36卷 47-52页

作者：李敏刘红艳罗恩杰中国医科大学附属第一医院内分泌科辽宁沈阳110001 沈阳市传染病院辽宁沈阳110006 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001

通过动态观察肾综合征出血热患者不同临床阶段NK细胞及CD8+T细胞表面活化性/抑制性受体等分子的变化,探讨患者抗汉坦病毒感染的免疫机制,为本病的抗感染免疫治疗提供科学依据。收集肾综合征出血热患者血液样本57份,以健康人血做对照,用... 详细信息

通过动态观察肾综合征出血热患者不同临床阶段NK细胞及CD8+T细胞表面活化性/抑制性受体等分子的变化,探讨患者抗汉坦病毒感染的免疫机制,为本病的抗感染免疫治疗提供科学依据。收集肾综合征出血热患者血液样本57份,以健康人血做对照,用流式细胞仪检测各组样本NK细胞数及NK细胞亚群、NK细胞活化及抑制受体、CD8+T细胞数及其表面NK受体的表达水平。分析患者的发热期、少尿期、多尿期和恢复期上述观察指标的动态变化。结果显示,肾综合征出血热患者的NK细胞水平明显高于正常对照组(P<0.001)。患者的发热期、少尿期、多尿期和恢复期4个不同临床过程中NK细胞水平都处于升高状态,其中少尿期高于其他各期(P<0.01)。患者NK细胞抑制受体NKG2A表达总水平有下降趋势,在少尿期下降的比较明显(P<0.01),NK细胞活化受体NKG2D表达呈上升的趋势,不同病程中表达总体水平基本一致。患者的NK细胞亚群CD56^-CD16^+和CD56^(bri)CD16^(-/+)数量显著高于正常对照组(P<0.01),而CD56^(dim)CD16^+细胞NK亚群变化无统计学差异(P>0.05)。患者CD8^+T细胞总数及病程各期均显著高于对照组(P<0.01);病例组和对照组CD8^+T细胞表达NK活化受体NKG2D和抑制受体NKG2A无显著差异(P>0.05)。结果表明,肾综合征出血热患者的急性期NK细胞处于活化状态;其中CD56^(bri)CD16^(-/+)NK细胞亚群及CD56-CD16^+NK细胞在免疫调节方面发挥了重要的作用。

关键词：肾综合征出血热 NK细胞 NK细胞受体 CD8+T细胞 CD8+T细胞受体

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

黄芩素对肺炎克雷伯菌的耐药基因mRNA的抑制及其与头孢噻肟的协同抗菌作用

黄芩素对肺炎克雷伯菌的耐药基因mRNA的抑制及其与头孢噻肟的协同...

引用

中华中医药学会免疫学分会第二次学术交流会暨中华中医药学会免疫学分会青年委员会成立大会

作者：蔡文辉付英梅张文莉陈小贝王亚贤赵吉子张凤民黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150000 哈尔滨医科大学伍连德研究所微生物学教研室黑龙江哈尔滨150000 黑龙江中医药大学基础医学院微生物学与免疫学教研室黑龙江哈尔滨150000

目的:观察中药活性成分黄芩素与头孢噻肟联合对ESBL阳性肺炎克雷伯菌标准株的协同作用,并分析作用机制,为临床上抗生素的协同用药提供依据.方法:依据CLSI 2012的方法与判定标准,选取超广谱β-内酰胺酶阳性肺炎克雷伯菌标准株*** 700603... 详细信息

目的:观察中药活性成分黄芩素与头孢噻肟联合对ESBL阳性肺炎克雷伯菌标准株的协同作用,并分析作用机制,为临床上抗生素的协同用药提供依据.方法:依据CLSI 2012的方法与判定标准,选取超广谱β-内酰胺酶阳性肺炎克雷伯菌标准株*** 700603,并分别确定头孢噻肟、黄芩素的MIC值;应用微量棋盘稀释法,确定黄芩素与头孢噻肟联合的协同作用;采用PCR及RT-PCR方法,分析黄芩素对细菌耐药基因mRNA表达的影响.

关键词：黄芩素超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌协同抗菌作用 mRNA表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

金黄色葡萄球菌重组表皮剥脱毒素A的原核表达

引用

重庆医科大学学报 2015年第3期40卷 436-440页

作者：王毅肖异珠杨致邦欧阳莹李咏梅罗晓燕重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016 重庆医科大学附属儿童医院皮肤科重庆400014 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因... 详细信息

目的:通过基因工程技术获取重组表皮剥脱毒素A(recombine exfoliative toxin A,r ETA),为深入研究表皮剥脱毒素的致病机制提供实验材料。方法:根据Gen Bank公布的ETA基因序列设计引物,从金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,***)基因组中扩增ETA基因,插入原核表达载体p QE30,构建重组质粒p QE30-ETA。将p QE30-ETA转化表达菌*** M15,优化诱导表达条件,SDS-PAGE分析重组蛋白的表达,Western blot鉴定。重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后,注入BALB/C小鼠皮下,观察皮肤病理改变,鉴定重组蛋白的生物学活性。结果:重组质粒p QE30-ETA序列分析显示插入的基因片段全长927 bp,与基因文库中的ETA序列完全吻合。SDS-PAGE分析显示表达产物相对分子量约为27 k D,在IPTG终浓度0.1 mmol/L,诱导时间4 h,可得到最大表达量的可溶性蛋白,约为20%。Western blot显示与***产生的ETA蛋白在同一位置,重组蛋白经Ni2+-NTA树脂纯化后蛋白纯度达90%以上,注射重组蛋白的小鼠表皮内出现水疱和裂隙。结论:成功构建了重组质粒p QE30-ETA,表达了具有生物学活性的重组***表皮剥脱毒素A。

关键词：金黄色葡萄球菌葡萄球菌性烫伤样皮肤综合征表皮剥脱毒素A 原核表达

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

香菇C_(91-3)转录组Unigene 28447基因的蛋白表达及其对细胞凋亡和周期的影响

引用

大连医科大学学报 2015年第3期37卷 214-219页

作者：曹淑云刘奔钟民涛伦永志张伟王晓丽李星云曹靖宁安红黄敏大连医科大学基础医学院微生物教研室辽宁大连116044 大连大学医学院病原生物学教研室辽宁大连116622

目的克隆香菇C91-3转录组中Unigene 28447基因,对其进行生物信息学分析,并研究该基因结构域的生物学活性。方法提取香菇C91-3菌丝体中的总RNA,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得香菇菌丝体Unigene 28447基因全长;构建基因... 详细信息

目的克隆香菇C91-3转录组中Unigene 28447基因,对其进行生物信息学分析,并研究该基因结构域的生物学活性。方法提取香菇C91-3菌丝体中的总RNA,用3'-Full RACE、5'-Full RACE方法获得香菇菌丝体Unigene 28447基因全长;构建基因表达载体,进行原核诱导表达,将表达蛋白进行纯化、复性。运用MTT法、流式细胞仪法研究蛋白对肿瘤细胞生长、周期及凋亡的影响。结果成功构建重组质粒p ET32a(+)-Unigene,诱导重组蛋白表达,并进行纯化、复性。MTT法显示不同浓度蛋白对肿瘤细胞的生长抑制作用与对照组比较差异均有显著性意义(P<0.05),流式细胞仪显示此蛋白具有诱导肿瘤细胞改变周期和凋亡的作用(P<0.05)。结论初步鉴定Unigene 28447基因的结构域具有抗肿瘤活性。

关键词：香菇C91-3 克隆重组蛋白

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

多药耐药纹带棒杆菌的重复序列PCR分型与耐药机制的研究

引用

中华医院感染学杂志 2015年第5期25卷 965-967,977页

作者：李科张德纯张名均杨金梅杨小容刘胜男李世超重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的对引起医院感染暴发的多药耐药纹带棒杆菌(MDRCs)进行重复序列PCR研究,为MDRCs的亲缘性分析提供可靠的方法,并对MDRCs的耐药机制进行初步研究。方法用基因外重复回文序列-PCR(REPPCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)技术... 详细信息

目的对引起医院感染暴发的多药耐药纹带棒杆菌(MDRCs)进行重复序列PCR研究,为MDRCs的亲缘性分析提供可靠的方法,并对MDRCs的耐药机制进行初步研究。方法用基因外重复回文序列-PCR(REPPCR)和肠细菌基因间共有重复序列-PCR(ERIC-PCR)技术对临床分离的32株MDRCs进行分型研究,根据细菌的耐药表型选择对应的耐药基因进行检测。结果 REP-PCR和改良ERIC-PCR分型技术分别将32株MDRCs分为6型和8型,两种方法的分辨指数分别为0.585和0.696;所有菌株中与大环内酯类抗菌药物相关的核糖体甲基化酶基因(ermX)检出率为90.6%,与四环素耐药相关的核糖体保护蛋白基因(tetW)的检出率为100.0%,菌株耐药基因的检出与耐药表型完全相符。结论重复序列PCR(rep-PCR)分型方法可用于纹带棒杆菌的分型研究及医院感染MDRCs的亲缘性分析,ERIC-PCR的分辨能力优于REP-PCR;中国重庆地区的MDRCs分别介导ermX和tet(W)基因对大环内酯类和四环素类抗菌药物高水平耐药。

关键词：多药耐药纹带棒杆菌重复序列聚合酶链反应

来源：评论

学校读者我要写书评

暂无评论

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：

通借通还

建议与咨询 留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

时间限定

文献类型

馆藏选择

核心期刊

语言

文献类型

帮助

文字说明：

检索规则说明：

检索范例：

分类表

所选分类

限定检索结果

文献类型

馆藏范围

日期分布

学科分类号

主题

机构

作者

语言

请选择保存的检索档案： 新增检索档案 确定 取消

请选择收藏分类： 新增自定义分类 确定 取消

通借通还

建议与咨询留下您的常用邮箱和电话号码，以便我们向您反馈解决方案和替代方法

请选择保存的检索档案：

请选择收藏分类：