检索结果-内蒙古大学图书馆

中国微生态学杂志 2014年第9期26卷 1016-1022页

作者：马红英田志颖杨致邦朱黎黎周海燕蒋仁举中国人民解放军海军第411医院门诊部上海200038 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的通过小鼠动物模型,探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染和用抗生素抗***治疗对食道下端菌群的影响,分析其与食道下端疾病发生的关系。方法将45只Balb/c小鼠随机均分为阴性对照组,感染组和治疗组。感染组和治疗组通过灌喂**... 详细信息

目的通过小鼠动物模型,探讨幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,***)感染和用抗生素抗***治疗对食道下端菌群的影响,分析其与食道下端疾病发生的关系。方法将45只Balb/c小鼠随机均分为阴性对照组,感染组和治疗组。感染组和治疗组通过灌喂***建立动物感染模型,治疗组再灌喂奥美拉唑,氨苄青霉素,克拉霉素根除***。三组小鼠均在用抗生素处理后同时处死,取食道下端组织提取细菌的DNA,以原核生物16S rDNA V6区通用引物采用聚合酶链发应-变性梯度凝胶技术(PCR-DGGE)检测,用Quantity One1-DAnalysis software对DGGE图谱进行菌群结构分析,并将DGGE图谱上的组间差异条带用16S rDNA V6区引物分别扩增后,DNA测序,BLAST比对鉴定。结果成功制备了小鼠幽门螺杆菌感染模型,用抗生素有效根除了***感染。小鼠食道下端DGGE指纹图谱分析显示,各组间条带数量比较差异均有统计学意义(P<0.05),多样性指数、丰富度指数差异有统计学意义(0.05>P>0.001),均匀度指数差异无统计学意义(P>0.05)。菌群聚类分析能很好地在相似性进化树中分开,主成分分析不同组的菌群分别聚集在不同的位置,BLAST比对分析对照组,感染组具有特有细菌。结论食道下端定植着由大量细菌构成的较稳定的菌群,***感染与治疗后菌群结构有明显变化。

关键词：食道下端菌群幽门螺杆菌抗生素聚合酶链反应-变性梯度凝胶电泳

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分离自HIV阳性者的弓形虫与RH株GRA6基因比较

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中国血吸虫病防治杂志 2014年第4期26卷 434-436页

作者：陈凌娟贾玉玺冷丽罗米高菊李伟申丽洁大理学院基础医学院寄生虫学教研室大理671003 昆明医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系重庆医科大学第一临床学院2011级本科云南省大理市第二人民医院

目的对分离自大理地区的HIV阳性者感染的弓形虫与RH株进行致密颗粒抗原(GRA6)基因的对比分析。方法采用巢式PCR方法对大理HIV阳性者血液样本与RH株基因组进行扩增,选取GRA6基因阳性扩增产物,用MseⅠ内切酶进行酶切电泳成像,并对基因序... 详细信息

目的对分离自大理地区的HIV阳性者感染的弓形虫与RH株进行致密颗粒抗原(GRA6)基因的对比分析。方法采用巢式PCR方法对大理HIV阳性者血液样本与RH株基因组进行扩增,选取GRA6基因阳性扩增产物,用MseⅠ内切酶进行酶切电泳成像,并对基因序列进行测定与分析。结果成功扩增出约800 bp大小的GRA6基因片段,MseⅠ内切酶内切后得到约600 bp和200 bp 2个条带。测序结果显示,HIV阳性者血样扩增产物与RH株扩增产物的GRA6基因仅存在2个碱基差异:第447对碱基处C变成G、第623对碱基处G变成T,而且在序列中的146 bp和690 bp处均找到MseⅠ酶切位点(TTAA)。结论初步判断大理地区的HIV阳性者感染的弓形虫基因型与弓形虫RH株一致,同属基因Ⅰ型。

关键词：刚地弓形虫 HIV GRA6 基因型大理

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肺孢子菌肺炎辅助诊断方法研究进展

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中国微生态学杂志 2014年第4期26卷 471-474页

作者：刘鹏月安春丽中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001 中国医科大学附属第一医院学生工作部七年制96期4班辽宁沈阳110001

肺孢子菌肺炎是AIDS、器官移植受者、抗肿瘤放、化疗等各类继发或原发性免疫机能低下人群最常见的机会感染性疾病。通过显微镜检发现肺孢子菌是诊断肺孢子菌肺炎的金标准。但是,由于肺孢子菌主要寄生于肺泡腔内,目前临床采用的病原学检... 详细信息

肺孢子菌肺炎是AIDS、器官移植受者、抗肿瘤放、化疗等各类继发或原发性免疫机能低下人群最常见的机会感染性疾病。通过显微镜检发现肺孢子菌是诊断肺孢子菌肺炎的金标准。但是,由于肺孢子菌主要寄生于肺泡腔内,目前临床采用的病原学检测方法或受到创伤性取材方法的限制或受病原体检出率极低的困惑。而目前盛行的基因检测方法因其操作过程的复杂及昂贵的费用难以适应临床应用。探索和建立敏感、特异的、可以从非创伤性标本中诊断肺孢子菌肺炎的快速诊断方法为临床之急需。学者们对肺孢子菌的主要表面糖蛋白及葡聚糖等菌体组分及其抗体等的检测方法进行了不断的探索,取得了一定进展。我们就该领域的研究进展及其在肺孢子菌肺炎辅助诊断方面的意义进行了综述。

关键词：肺孢子菌肺炎主要表面糖蛋白葡聚糖抗体辅助诊断

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肺炎支原体感染鼠P1特异抗原的动态检测

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微生物学杂志 2014年第6期34卷 84-88页

作者：赵芝娜张晗何梦博陈博杨颖司文王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001 沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 中国医科大学附属二院儿科辽宁沈阳110004

通过实验动物模型探讨肺炎支原体感染动物肺泡灌洗液中特异抗原检出率的动态变化,为肺炎支原体感染的临床诊断提供理论依据。小鼠经鼻自然感染肺炎支原体,分别采集感染后不同时间点小鼠的支气管灌洗液,应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗... 详细信息

通过实验动物模型探讨肺炎支原体感染动物肺泡灌洗液中特异抗原检出率的动态变化,为肺炎支原体感染的临床诊断提供理论依据。小鼠经鼻自然感染肺炎支原体,分别采集感染后不同时间点小鼠的支气管灌洗液,应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测感染鼠肺泡灌洗液中肺炎支原体P1特异抗原,同时通过PCR检测肺组织肺炎支原体DNA及肺组织病理切片观察肺部炎性变化确定小鼠感染。结果显示,感染鼠肺炎支原体特异抗原在感染后第3天检出阳性率为75%,第7天达高峰为83%,之后随病程延长,抗原检测的阳性率逐渐下降,在感染后第14、21天检出阳性率分别为58%和25%。肺炎支原体特异抗原在感染早期检出率高。应用量子点标记肺炎支原体P1蛋白抗体,直接免疫荧光法检测肺炎支原体特异抗原可应用于肺炎支原体感染的早期诊断。

关键词：肺炎支原体特异抗原动态检测

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酪酸梭菌诱导结肠癌SW-480细胞凋亡及作用机制

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第三军医大学学报 2013年第22期35卷 2448-2451页

作者：杨金梅张德纯李科刘胜男朱辉重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的探讨酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡的作用及机制。方法采用不同浓度的酪酸梭菌(1.5×103、1.5×104、1.5×105、1.5×106、1.5×107、1.5×108CFU/mL)在不同作用时间(24... 详细信息

目的探讨酪酸梭菌(Clostridium butyricum,CB)诱导人结肠癌SW-480细胞凋亡的作用及机制。方法采用不同浓度的酪酸梭菌(1.5×103、1.5×104、1.5×105、1.5×106、1.5×107、1.5×108CFU/mL)在不同作用时间(24、48、72、96 h)处理结肠癌SW-480细胞后,CCK8法检测CB对SW-480细胞的增殖抑制。电镜观察CB对SW-480细胞形态的影响。Annexin V-FITC/PI双标法检测细胞凋亡。Caspase试剂盒检测SW-480细胞中Caspase-3和Caspase-9的活性。Western blot法检测SW-480细胞Bax和Bcl-2凋亡蛋白表达的变化。结果酪酸梭菌对SW-480细胞的生长抑制作用呈明显的时间-剂量依赖性;菌液浓度为1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL的酪酸梭菌处理后的SW-480细胞形成典型的凋亡小体;酪酸梭菌(1.5×107CFU/mL和1.5×108CFU/mL)处理能显著增强SW-480细胞Caspase-3和Caspase-9的活性,促进SW-480细胞凋亡(P<0.01);随着菌液浓度的增加,凋亡蛋白Bax的表达增强,而抑凋亡蛋白Bcl-2的表达减弱。结论酪酸梭菌可诱导SW-480细胞凋亡,其作用机制与凋亡相关基因Bax、Bcl-2和caspase-3、caspase-9的表达有关。

关键词：酪酸梭菌结肠癌 SW-480细胞凋亡

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饮食低硒对小鼠肝、肾、脑组织硒结合蛋白1与硒蛋白P表达的影响

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中华地方病学杂志 2013年第6期32卷 636-638页

作者：孙美娜赵汉东张一彤李晖哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081

目的探讨饮食低硒对小鼠肝、肾、脑组织硒结合蛋白1（SBP1）和硒蛋白P（SelP）表达的影响。方法将C57BL／6小鼠按体质量随机分为4组：对照组和低硒4、12、24周组，每组10只，雌雄各半。对照组饲以普通饲料（含硒量为0．300mg／kg），饮... 详细信息

目的探讨饮食低硒对小鼠肝、肾、脑组织硒结合蛋白1（SBP1）和硒蛋白P（SelP）表达的影响。方法将C57BL／6小鼠按体质量随机分为4组：对照组和低硒4、12、24周组，每组10只，雌雄各半。对照组饲以普通饲料（含硒量为0．300mg／kg），饮用蒸馏水，第12周断颈处死；低硒各组饲以低硒饲料（含硒量为0．015mg／kg），分别于第4、12、24周时断颈处死。采用蛋白印迹（Western blot）法检测小鼠肝、肾、脑组织SBPl与SelP蛋白表达。结果低硒4、12、24周组小鼠肝组织中SBP1和SelP蛋白表达分别为0．11±0．01、0．36±0．01、0．59±0．02和0．41±0．01、0．39±0．02、0．25±0．02；肾脏组织中分别为0．60±0．03、0．20±0．02、0．03±0．01和O．88±0．01、0．73±0．03、0．85±0．02；脑组织中分别为0．54±0．03、0．11±0．01、0．01±0．01和0．50±0．02、0．49±0．03、0．38±0．02。低硒各组小鼠肝脏、肾脏、脑组织SBP1、SelP蛋白表达与对照组（1．00±0．00、1．00±0．00）比较明显降低（P均〈0．05），其中各脏器中SBPI的表达量随低硒喂养时间的延长各有不同．肝脏先降低后回升，肾脏和脑组织则持续降低。结论低硒饮食对小鼠肝、肾、脑组织内SelP和SBP1的表达量有一定的影响．

关键词：硒硒结合蛋白1 硒蛋白P

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异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

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南方医科大学学报 2013年第7期33卷 1036-1040页

作者：范贵荣杨致邦黄进重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室//基础医学实验教学中心//病原生物学与免疫实验室重庆400016

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128μg/ml异烟肼和无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养... 详细信息

目的探讨异烟肼对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含128μg/ml异烟肼和无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含异烟肼的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养。将含异烟肼和无异烟肼的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构。含异烟肼的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无异烟肼的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态。对返祖菌及诱导前接种菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无异烟肼的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。128μg/ml异烟肼浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论异烟肼成功诱导脓肿分枝杆菌L型,可用于脓肿分枝杆菌耐药机制和防治研究。

关键词：脓肿分枝杆菌 L型细菌异烟肼细胞壁

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利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用

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第三军医大学学报 2013年第16期35卷 1717-1720页

作者：范贵荣杨致邦黄进重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室基础医学实验教学中心病原生物学与免疫实验室重庆400016

目的探讨利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含256μg/mL利福平和无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含利福平的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养... 详细信息

目的探讨利福平对脓肿分枝杆菌L型的诱导作用。方法将脓肿分枝杆菌分别接种于含256μg/mL利福平和无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养。含利福平的培养物经0.45μm孔径滤膜过滤,滤液接种于无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基内返祖培养。将含利福平和无利福平的培养物及返祖菌进行细胞壁染色和透射电镜观察其细胞壁完整性,扫描电镜观察其表面微观结构。含利福平的培养物转种L型菌琼脂平板培养,无利福平的培养物和返祖菌转种营养琼脂平板培养,观察其菌落形态。对诱导前接种菌和返祖菌的16S rDNA进行鉴定。结果在含256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌的细胞壁缺失,形态为球形,L型细菌琼脂平板上菌落呈典型油煎蛋样,而无利福平的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上呈圆形菌落。256μg/mL利福平浓度的结核分枝杆菌快速液体培养基中培养的脓肿分枝杆菌经返祖后,返祖菌细胞壁完整,形态为杆状,营养琼脂平板上菌落也呈圆形。16S rDNA鉴定返祖菌与诱导前接种菌的同源性达100%,为同一种细菌,即脓肿分枝杆菌。结论利福平成功诱导脓肿分枝杆菌L型。

关键词：脓肿分枝杆菌 L型细菌利福平细胞壁

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抗Trx单克隆抗体用于血吸虫病诊断的研究

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现代生物医学进展 2014年第6期14卷 1057-1061页

作者：吴玉龙程梅刘春会耿丽张珍杜镇镇李波清李雍龙滨州医学院病原生物学教研室山东烟台264003 南京医科大学卫生部抗体技术重点实验室江苏南京210029 滨州医学院护理学院山东滨州256603 华中科技大学基础医学院人体寄生虫学教研室湖北武汉430030

目的:建立双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)。方法:用重组日本血吸虫Trx(rTrx)蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法。通过检测日本血吸虫排泄-分泌物(excretorysecre... 详细信息

目的:建立双抗体夹心ELISA法检测日本血吸虫硫氧还蛋白(Thioredoxin,Trx)。方法:用重组日本血吸虫Trx(rTrx)蛋白免疫BALB/c小鼠,筛选高滴度、高特异性的单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA法。通过检测日本血吸虫排泄-分泌物(excretorysecretions,ES)与rTrx的浓度评价该方法的敏感性;通过对健康人血清的检测确定其特异性;通过对布氏姜片吸虫病、华支睾吸虫病、卫氏并殖吸虫病、囊虫病患者血清进行交叉反应试验,评价该方法的特异性。结果:获得2株稳定分泌抗rTrx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株,命名为McTrx1和McTrx2。以McTrx1为包被抗体,HRP-McTrx2为酶标抗体,建立的双抗体夹心ELISA可检测出ES的最低浓度为4.8μg/ml,检测出rTrx的最低浓度为1.2μg/ml。该方法的特异性为96%。结论:以抗rTrx蛋白单克隆抗体McTrx1与McTrx2为基础建立的双抗体夹心ELISA法具有较高的特异性。

关键词：日本血吸虫单克隆抗体硫氧还蛋白双抗夹心ELISA

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纳米细菌促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡

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第三军医大学学报 2013年第16期35卷 1688-1691页

作者：刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容许舸重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室生命科学院电镜组重庆400016

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺... 详细信息

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24、48、72 h,通过CCK-8检测其对细胞的毒性作用;培养12、24、48、72 h,取上清,经全自动生化分析仪测定LDH活性;作用72 h,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定其凋亡率,透射电镜观察其超微结构的变化情况。结果 CCK-8显示,NB组24、48、72 h对细胞的抑制作用均强于nHAP组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NB组LDH含量在24、48、72 h时均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);24、48、72 h均高于nHA组,但仅24、48 h有统计学差异(P<0.05)。nHAP组LDH活性仅在72 h与正常对照组比较有统计学差异(P<0.01);72 h后NB组细胞凋亡率高于nHAP组,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜下观察,NB组可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,nHAP组未见明显异常。结论 NB可以抑制乳腺癌细胞的生长,促进其发生凋亡,其导致细胞凋亡的成分不仅仅是NB羟基磷灰石的外壳,也可能与NB的其他组分或代谢产物有关。

关键词：纳米细菌纳米羟基磷灰石凋亡乳腺癌

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