检索结果-内蒙古大学图书馆

中国免疫学杂志 2020年第18期36卷 2251-2253,2256页

作者：王美莲王舰史俊岩刘北星中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110122

网络授课是各大高校在今年春季授课中普遍采用的形式。我们在本校临床医学系学生病原生物课程关于细菌与病毒的抗感染免疫教学中采用了新的网络教学模式,通过课前布置预习内容,课上增加讨论以及课后总结归纳学习重点,使学生在教师指导... 详细信息

网络授课是各大高校在今年春季授课中普遍采用的形式。我们在本校临床医学系学生病原生物课程关于细菌与病毒的抗感染免疫教学中采用了新的网络教学模式,通过课前布置预习内容,课上增加讨论以及课后总结归纳学习重点,使学生在教师指导下自主学习从而扩展知识面,提炼课上重点并加强师生之间交流,网络授课在实践中取得了良好的教学效果。

关键词：网络授课病原生物学和免疫学教学改革

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一种产碱假单胞菌产生的地塞米松降解酶的提取纯化和鉴定

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生物医学工程学杂志 2015年第5期32卷 1044-1049页

作者：朱黎黎杨致邦杨茜石中全邓西川重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016 重庆三峡医药高等专科学校免疫学与病原生物学教研室重庆404120

将分离到的1株对地塞米松有降解作用的产碱假单胞菌进一步驯化。采用渗透休克法分离该菌各区域蛋白,将分离的具有高酶活性的胞内蛋白用硫酸铵盐析、离子交换层析和葡聚糖凝胶层析提取和纯化。纯化蛋白用HPLC检测其对地塞米松的降解活性... 详细信息

将分离到的1株对地塞米松有降解作用的产碱假单胞菌进一步驯化。采用渗透休克法分离该菌各区域蛋白,将分离的具有高酶活性的胞内蛋白用硫酸铵盐析、离子交换层析和葡聚糖凝胶层析提取和纯化。纯化蛋白用HPLC检测其对地塞米松的降解活性,酶切后质谱鉴定。结果表明驯化后的产碱假单胞菌对地塞米松的降解率从23.63%提高到52.84%,降解地塞米松的酶主要存在于该菌胞质内,分子量约为41kD;纯化后的酶蛋白比活力达到1.02U·mg-1,该蛋白的5条肽段的氨基酸序列与异戊酰辅酶A脱氢酶的部分序列匹配,可能是一种新的甾体类化合物降解酶。本文为用微生物修复技术清除水环境的地塞米松污染提供了新策略。

关键词：产碱假单胞菌地塞米松降解酶提取纯化鉴定

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异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌检测方法的临床应用评价

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中华微生物学和免疫学杂志 2012年第7期32卷 661-662页

作者：胡健马笑雪田园孙丹丹中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

近年来，随着甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）感染率的上升和万古霉素的广泛使用，临床上出现了万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌，包括万古霉素中介金黄色葡萄球菌（vancomycin—intermediateStaphylococcusaureus，VISA）和... 详细信息

近年来，随着甲氧西林耐药的金黄色葡萄球菌（MRSA）感染率的上升和万古霉素的广泛使用，临床上出现了万古霉素敏感性下降的金黄色葡萄球菌，包括万古霉素中介金黄色葡萄球菌（vancomycin—intermediateStaphylococcusaureus，VISA）和异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌（***—intermediateStaphylococcusaureus，hVISA）。2006年，美国临床和实验室标准协会（CLSI，原NCCLS）将万古霉素对金黄色葡萄球菌的折点进行了更新，但并未对hVISA做出明确的定义，

关键词：金黄色葡萄球菌临床应用评价万古霉素异质性中介检测甲氧西林耐药感染率

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利用酵母双杂交系统筛选Vero E6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白相互作用的基因

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中国人兽共患病杂志 2002年第5期18卷 48-50页

作者：王桂珍周正任程颖中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳1100012

目的　利用酵母双杂交系统 (yeasttwo -hybridsystem)筛选VeroE6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白 (N蛋白 )特异结合的蛋白质基因序列 ,研究汉坦病毒与其宿主细胞相互作用的机制。方法　构建含N蛋白基因的“诱饵”质粒 (pGBT9N)和含VroE6细... 详细信息

目的　利用酵母双杂交系统 (yeasttwo -hybridsystem)筛选VeroE6细胞中与汉坦病毒核衣壳蛋白 (N蛋白 )特异结合的蛋白质基因序列 ,研究汉坦病毒与其宿主细胞相互作用的机制。方法　构建含N蛋白基因的“诱饵”质粒 (pGBT9N)和含VroE6细胞基因片段的“猎物”质粒 (PATC2 )。将两种质粒转入到酵母HF7c株 ,用选择培养基筛选带有两种质粒的克隆株 ,测定 β -半乳糖苷酶 (β -Gal)的活性确定 pGBT9N质粒的存在。用PCR方法扩增克隆株中VroE6细胞基因片段 ,根据插入片段的长度及限制性内切酶酶切图谱对所筛选的克隆株进行分组、测序 ,从人的基因库中查找与插入片段相关的基因序列。结果　在筛选出的克隆中 ,73 5 %的克隆所插入的基因与已知的Ubiqutin(泛素 )蛋白有很高的同源性 (大于 99% ) ,l6 2 %的克隆所插入基因与鼠蛋白激酶有约 72 %的同源性。结论　汉坦病毒N蛋白可能与VeroE6细胞中泛素蛋白以及某种蛋白激酶特异性结合 ,激发并产生某些信号传导 ,进而使病毒能利用宿主细胞完成其复制释放的功能。

关键词： Vero E6细胞酵母双杂交系统汉坦病毒核衣壳蛋白

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量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立

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中国人兽共患病学报 2011年第8期27卷 704-707页

作者：曾晶晶何梦博赵芝娜周世冠王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结... 详细信息

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μg/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于Mp感染的早期诊断。

关键词：肺炎支原体量子点标记技术抗原检测

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埃及伊蚊yellow基因家族的鉴别和表达谱分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第1期34卷 1-8页

作者：颜凤吕清巧程金芝牟小会翟慧杨迅商正玲吴家红贵州医科大学基础医学院人体寄生虫学教研室贵州医科大学现代病原生物学实验室贵阳550025

目的筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的yellow基因，分析其基因结构、基因进化以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。方法运用模式昆虫黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）Dm-yellow基因（GenBank登录号为AAF45497）... 详细信息

目的筛选并鉴定埃及伊蚊（Aedes aegypti）全基因组中的yellow基因，分析其基因结构、基因进化以及在不同发育时期和不同组织的表达谱。方法运用模式昆虫黑腹果蝇（Drosophila melanogaster）Dm-yellow基因（GenBank登录号为AAF45497）王浆主蛋白（MRJP）结构域氨基酸序列，在埃及伊蚊全基因组数据库中筛选并鉴定埃及伊蚊yell0叫基因家族．采用ExPASy在线相关工具包分析其理化性质和结构域，运用SignalP4．1预测信号肽．结合使用DNAstar、MAGA6．0和GeneDoc软件包进行同源性比对、保守性分析和系统进化树构建。提取埃及伊蚊总RNA，合成cDNA，利用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）法对埃及伊蚊不同发育时期（卵、I～Ⅳ龄幼虫、蛹以及未吸血雌蚊和雄蚊）和未吸血雌蚊不同组织（唾液腺、中肠、脂肪体和卵巢）的yellow基因表达谱进行相对定量分析。结果从埃及伊蚊全基因组中筛选出12条yellow基因（Aa-一yellow、Aa一yellow—b、Aa一yellow—c、Aa一yellow—d、Aa-yellow—e、Aa一yellow-f2、Aa—yellow-fb、Aa一yellow-fc、Aa—yellow—g、Aa—yellow—g2、Aa—yellow—h和Aa一fellow—x）。生物信息学分析结果显示，12条yellow基因均具有MRJP结构域和信号肽序列。同源性比对结果显示．埃及伊蚊yellow基因家族成员间同源性较低，为15％～49％：但其保守域间同源性较高，可达60％。系统进化树分析结果显示．12个yellow蛋白分为5个亚家族，其中11个在黑腹果蝇中均有直系同源蛋白存在。Ⅱ***结果显示，An—yellow-d和Aa-yelloW一Ⅳ在雄蚊中高表达（P〈0．01或P〈O．05），相对表达量分别为0．0189和0．0235；Aa一yelloW一尼在雌蚊和唾液腺中特异高表达（P〈0．01），相对表达量分别为0．0248和0．0349；Aa一yellow-f2在Ⅱ龄幼虫中特异高表达（P〈0．01），相对表达量为0．0934；Aa一yellow、Aa—yellow—e和Aa—yellow一加在Ⅲ龄幼虫中特异高表达（P〈0．01）．相对表达量分别为0．5621、0．0044和0．0084：Aa—yellow、Aa—yellow—e、Aa一yellow-f2、Aa—yelloW—fb、Aa一yellow-h和Aa一yellow一x等6条基因在卵巢中高表达（P〈0.01或P〈0．05），相对表达量分别为0．5694、0．0270、0．0065、0．0010、0．0848和0．0151；除Aa一yyellow一c（0．0040）和Aa一yellow一z（0．0074）外，其余基因几乎不在中肠表达。结论在埃及伊蚊基因组中获得的12条yelloW基因同源性较低．

关键词：埃及伊蚊 yellow基因家族 qRT—PCR 表达谱

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弓形虫可溶性抗原免疫-PCR检测技术的建立

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中国医科大学学报 2000年第S1期29卷 27-29页

作者：郑兰艳王海鹏中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的 :建立一种新的特异性强 ,敏感性高的弓形虫可溶性抗原检测方法。方法 :用链霉亲和素将生物素化的二抗和生物素化的 DNA偶联起来 ,通过 PCR扩增标记的 DNA检测固定的抗原 ,建立免疫 - PCR技术。通过选择最佳的链霉亲和素浓度和生物... 详细信息

目的 :建立一种新的特异性强 ,敏感性高的弓形虫可溶性抗原检测方法。方法 :用链霉亲和素将生物素化的二抗和生物素化的 DNA偶联起来 ,通过 PCR扩增标记的 DNA检测固定的抗原 ,建立免疫 - PCR技术。通过选择最佳的链霉亲和素浓度和生物素化 DNA的浓度 ,控制了非特异性扩增。结果 :免疫 - PCR检测抗原最低限为 1ng/m l,EL ISA法检测抗原的最低限为 0 .8μg/ml,敏感性约为 EL ISA的 80 0倍。结论 :免疫 - PCR是一种特异性强 ,敏感性高的弓形虫可溶性抗原检测方法。

关键词：免疫-聚合酶链反应可溶性抗原弓形虫

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miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2021年第8期37卷 1093-1099页

作者：杨伟玉刘驰谢辉林平于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院生物技术实验中心哈尔滨150081

前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义。来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明。本课题拟以前列腺癌... 详细信息

前列腺癌是男性患者中常见的恶性肿瘤,探讨前列腺癌的发病机制和寻找合适的治疗靶标具有重要的临床意义。来源于类固醇核激素受体超家族NR4A3在多种肿瘤的恶性进展中发挥重要作用,但其在前列腺癌中的作用尚未阐明。本课题拟以前列腺癌细胞为研究对象,揭示NR4A3在前列腺癌中的作用;在此基础上,寻找靶向NR4A3的miRNA,为前列腺癌的诊断和治疗提供新靶点。GEPIA网站预测显示,NR4A3在前列腺癌组织中呈低表达。qRT-PCR检测证实,NR4A3在前列腺癌细胞中也呈低表达(P<0.01);CCK8和克隆形成的结果显示,过表达NR4A3可使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.01),集落数量和大小显著减少。生物信息学网站预测,NR4A3可能是miR-20a靶基因。通过qRT-PCR检测发现,miR-20a在前列腺癌细胞中呈高表达(P<0.01),双荧光素酶报告基因结果证实,miR-20a能够与NR4A3的3’-UTR的2个位点靶向结合(P<0.05,P<0.001),且Western印迹结果显示,miR-20a可抑制NR4A3的表达;进一步CCK8检测发现,随着时间的延长miR-20a inhibitor能够使前列腺癌细胞活力显著下降(P<0.05),miR-20a mimic则得到与之相反的结果(P<0.05,P<0.01);而当共转染miR-20a mimic和pcDNA3.1-NR4A3重组质粒时,通过CCK8和克隆形成实验发现,上调NR4A3的表达可部分抵消miR-20a mimic对PC3细胞活力(P<0.05),集落数量和大小的促进作用。综上所述,miR-20a通过靶向NR4A3促进前列腺癌细胞增殖。

关键词：前列腺癌 miR-20a 核受体亚家族4 A组成员3 细胞增殖

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ccr重组酶基因介导SCCmec基因岛的剪切功能研究

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中国医科大学学报 2010年第3期39卷 161-164页

作者：马笑雪黄惠颖孙丹丹罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的构建携带ccrC和ccrAB重组酶基因的载体质粒,并导入耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中,验证ccrC重组酶具有把Ⅴ型SCCmec基因岛从细菌染色体上特异性剪切下来的功能。方法以携带Ⅴ型SCCmec基因岛的菌株81/0342的染色体DNA为模板,应用... 详细信息

目的构建携带ccrC和ccrAB重组酶基因的载体质粒,并导入耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)中,验证ccrC重组酶具有把Ⅴ型SCCmec基因岛从细菌染色体上特异性剪切下来的功能。方法以携带Ⅴ型SCCmec基因岛的菌株81/0342的染色体DNA为模板,应用PCR法扩增ccrC基因,再以携带Ⅱ型SCCmec基因岛的菌株N315的染色体DNA为模板,应用PCR法扩增ccrAB基因,分别克隆到温度敏感质粒pYT3上构建重组质粒pSR5C和pSR2AB,电穿孔技术交叉导入原野生菌株81/0342和N315中构建6株细菌转化株,在适宜温度培育下充分表达质粒,应用PCR法检测SCCmec基因岛从染色体上脱落,并连续10d传代培养细菌,应用影印实验检查细菌的药物敏感性变化。结果ccrC重组酶基因的PCR扩增产物为1.9kb,小于Ⅱ型SCCmec基因岛上携带的ccrAB重组酶基因。经鉴定证实成功构建了重组质粒pSR5C和pSR2AB,当菌株81/0342中导入重组质粒pSR5C和pSR2AB后,81/0342所携带的Ⅴ型SCCmec基因岛能从染色体上剪切下来,并以环状DNA结构存在于细菌中,而只有当N315中导入重组质粒pSR2AB时,N315所携带的Ⅱ型SCCmec基因岛才能脱落下来,SCCmec基因岛脱落的细菌成为对妥布霉素和头孢唑肟药物敏感的菌株。结论ccrC重组酶与ccrAB一样具有特异性剪切酶的功能,可单独介导Ⅴ型SCCmec基因岛的脱落,从而为社区MRSA所携带的Ⅴ型SCCmec基因岛在金黄色葡萄球菌之间的广泛传播提供了实验依据。

关键词：金黄色葡萄球菌 SCCmec基因岛 ccrC基因重组酶质粒

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PBL教学模式在病原生物学理论教学中的应用

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微生物学通报 2008年第4期35卷 608-610页

作者：王斯王美莲王继春郑兰艳史俊岩罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

PBL教学法是一种源自西方,近年来引入我国全新教学模式,它主要培养学生的自学能力,发展学生综合思考能力和解决实际问题能力。本文作者总结了中国医科大学病原生物学教研室三年来在理论课教学中采用PBL教学模式的实践经验,通过样本成绩... 详细信息

PBL教学法是一种源自西方,近年来引入我国全新教学模式,它主要培养学生的自学能力,发展学生综合思考能力和解决实际问题能力。本文作者总结了中国医科大学病原生物学教研室三年来在理论课教学中采用PBL教学模式的实践经验,通过样本成绩分析证明了PBL教学方法对于提高学生综合思考能力很有帮助,同时在意见反馈结果中也显示学生对于PBL教学模式有很高的热情,可以很好地发挥学生的主观能动性。

关键词： PBL 病原生物学成绩评估主观能动性

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