检索结果-内蒙古大学图书馆

中华流行病学杂志 2011年第8期32卷 804-807页

作者：马笑雪罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的调查医科大学学生鼻腔中金黄色葡萄球菌（金葡菌）的定植状况，解析鼻腔定植社区型甲氧西林耐药性金葡菌（MRSA）克隆的分子生物学特点。方法以无菌棉签从调查对象鼻腔中收集定植菌，鉴定出甲氧西林敏感性金葡菌（MSSA）和MRSA；多... 详细信息

目的调查医科大学学生鼻腔中金黄色葡萄球菌（金葡菌）的定植状况，解析鼻腔定植社区型甲氧西林耐药性金葡菌（MRSA）克隆的分子生物学特点。方法以无菌棉签从调查对象鼻腔中收集定植菌，鉴定出甲氧西林敏感性金葡菌（MSSA）和MRSA；多重PCR法分型MRSA携带的SCCmec基因岛；PCR测定pvl、seh、tsstl等毒素基因在菌株中的分布；脉冲场凝胶电泳（PFGE）检测MRSA菌株的脉冲场型。结果2009年977名学生488份样本中鉴定出葡萄球菌，其中凝固酶阴性葡萄球菌（CONS）和金葡菌分别为364份和124份，MRSA在金葡菌中所占比例为3．4％。2010年调查显示，657名学生中有310份样本鉴定为葡萄球菌属，其中CoNS为195份，金葡菌115份，MRSA在金葡菌中所占比例为7．7％。金葡菌在所有葡萄球菌属中所占比例为29．9％，而MRSA在金葡菌中所占比例为5．1％。MRSA菌株中共鉴定出5种SCCmec基因岛型，其中Ⅳa型最多（10株），为优势SCCmec基因岛类型。PFGE共有11种图谱型，7种（A～G）脉冲场型。10株MRSA均为pvl性。结论1株起源于社区，基因型为Ⅳa SCCmec—pulsotypeA且携带pvl毒素基因的特定MRSA克隆在健康大学生中传播。

关键词：金黄色葡萄球菌甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌社区分离型 SCCmec基因岛分型

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肺炎支原体重组P1蛋白多克隆抗体的制备及纯化

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中国生物制品学杂志 2011年第10期24卷 1208-1210页

作者：曾晶晶王舰赵芝娜刘忠顺董占双王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的制备肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)重组P1蛋白多克隆抗体,为Mp抗原诊断试剂的制备奠定基础。方法用Mp重组P1蛋白免疫家兔,ELISA法测定免疫血清抗体效价;硫酸铵沉淀及离子交换层析法纯化抗体;紫外分光光度法测定抗体的浓度;S... 详细信息

目的制备肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,Mp)重组P1蛋白多克隆抗体,为Mp抗原诊断试剂的制备奠定基础。方法用Mp重组P1蛋白免疫家兔,ELISA法测定免疫血清抗体效价;硫酸铵沉淀及离子交换层析法纯化抗体;紫外分光光度法测定抗体的浓度;SDS-PAGE分析抗体的纯度;量子点标记纯化抗体,分析抗体的免疫活性;直接免疫荧光法检测抗体的特异性。结果重组P1蛋白兔免疫血清抗体效价为1∶25 600;纯化的抗体浓度为3.689μg/μl;SDS-PAGE显示相对分子质量58 000的重链条带;用量子点标记纯化的抗体仍保持较高的免疫活性,与其他呼吸道常见病原菌均未发生特异性结合。结论获得的纯化Mp P1蛋白IgG抗体具有较高的免疫活性和特异性,可用于临床Mp感染的抗原诊断。

关键词：支原体,肺炎 P1蛋白多克隆抗体

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ICU病房中心静脉导管相关性血流感染的高危因素及预后分析

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中国微生态学杂志 2012年第6期24卷 523-526页

作者：肖丽卢岩彭松林李国福于晓江安春丽中国医科大学附属盛京医院护理部辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院医院感染管理办公室辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院肝胆脾病房辽宁沈阳110004 中国医科大学附属盛京医院ICU病房辽宁沈阳110004 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001

目的调查ICU住院患者中心静脉导管相关性血流感染(CRBSI)的发生情况、高危因素及预后,为制定合适的防治策略提供依据。方法应用前瞻性研究方法,采用美国国家院内感染监测(NNIS)规定的统一标准系统,对2007年6月1日至2008年5月31日入住中... 详细信息

目的调查ICU住院患者中心静脉导管相关性血流感染(CRBSI)的发生情况、高危因素及预后,为制定合适的防治策略提供依据。方法应用前瞻性研究方法,采用美国国家院内感染监测(NNIS)规定的统一标准系统,对2007年6月1日至2008年5月31日入住中国医科大学附属盛京医院综合性ICU的所有符合条件的病例进行调查。结果 CRBSI感染率为13.2%(23例次/174),感染密度为12.0/1000导管日。单因素分析结果,中心静脉置管的个数、CRBSI发生前抗生素应用个数、导管日差异具有统计学意义(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果,CRBSI发生前抗生素应用个数≥3(OR=6.335)和中心静脉置管个数>1(OR=5.981)是CRBSI发生的独立危险因素(P<0.05);CRBSI组的病患粗死亡率、呼吸机日、住院总费用、药费、ICU内住院日、总住院日和平均日花费均高于非CRBSI的病患(P<0.05)。结论该院CRBSI发生率高,感染密度大,多个中心静脉置管以及抗生素应用频繁是CRBSI的高危因素。CRBSI者的预后及医疗费用的经济负担明显高于非CRBSI者。必须进一步加强有效的预防和控制措施。

关键词：重症监护病房导管相关性血流感染高危因素预后

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日本血吸虫Mago nashi蛋白编码基因功能的研究

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第2期29卷 87-92页

作者：张薇娜张鹏刘淼任翠平黄大可沈际佳安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院综合实验室合肥230032

目的研究日本血吸虫Mago nashi蛋白编码基因在虫体生殖器官发育方面的功能。方法体外PCR法合成Mago nashi双链RNA(dsRNA),将SjMago nashi基因dsRNA产物和阴性对照lacZ基因dsRNA产物分别电击转染至机械脱尾的日本血吸虫童虫体内,将部分... 详细信息

目的研究日本血吸虫Mago nashi蛋白编码基因在虫体生殖器官发育方面的功能。方法体外PCR法合成Mago nashi双链RNA(dsRNA),将SjMago nashi基因dsRNA产物和阴性对照lacZ基因dsRNA产物分别电击转染至机械脱尾的日本血吸虫童虫体内,将部分电击转染的童虫作体外培养,在培养后第1、3和5天以TRIzol法同时提取其总RNA和总蛋白。实时荧光定量RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分别检测Mago nashi基因和蛋白表达产物。电击转染的童虫注射入6只BALB/c小鼠体内,每鼠约1 000条,6周后取出虫体,盐酸卡红染色,在激光共聚焦显微镜下观察虫体内部各器官形态特征,测量虫体相关指标。结果在电击转染后的第1、3和5天,SjMago nashi dsRNA组目的基因的转录水平较阴性对照组分别下降了22%、69%和80%,蛋白质水平较阴性对照组分别下降了12%、39%和56%。激光共聚焦显微镜观察发现,SjMago nashi dsRNA组中的雄虫睾丸内有较多精子,呈泛雄性化表现,而雌虫的卵巢和卵黄腺无明显特征变化。与阴性对照组相比,SjMago nashi dsRNA组的雄虫的体宽、睾丸长和睾丸宽,雌虫的体宽、卵巢长和卵巢宽均明显缩小(P<0.05)。结论 SjMago nashi dsRNA可特异性抑制日本血吸虫靶基因及其编码蛋白的表达,SjMago nashi基因为日本血吸虫生殖相关基因,在生殖系统器官的正常发育中起一定作用。

关键词：日本血吸虫生殖双链RNA RNA干扰 Magonashi基因

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量子点标记肺炎支原体重组蛋白抗体检测抗原方法的建立

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中国人兽共患病学报 2011年第8期27卷 704-707页

作者：曾晶晶何梦博赵芝娜周世冠王桂珍中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结... 详细信息

目的建立一种用CdSe/ZnS量子点标记技术用于肺炎支原体检测的方法。方法用重组Mp P1蛋白免疫动物制备免疫血清,硫酸铵沉淀法及离子层析法纯化IgG抗体,纯化抗体用CdSe/ZnS量子点标记,离心沉淀法纯化标记产物。用标记抗体检测Mp抗原。结果量子点标记抗体直接玻片荧光法检测Mp抗原具有较高的敏感性(检测灵敏度在0.001μg/mL),且与呼吸道常见病原菌无交叉反应。结论成功建立量子点标记技术检测肺炎支原体抗原方法,具有操作简单、检测快速的优良,适用于Mp感染的早期诊断。

关键词：肺炎支原体量子点标记技术抗原检测

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EV71型病毒驯化与手足口病动物模型的研究进展

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免疫学杂志 2011年第3期27卷 259-262页

作者：窦建琳安静兰州大学基础医学院病原生物学研究所 73000 首都医科大学基础医学院微生物学教研室 10006

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机... 详细信息

手足口病好发于幼儿,通常是自限性的发热、出疹性疾病,但是肠道病毒71型(EV71)感染引起的手足口病易于出现伴有神经症状的严重病例。EV71的免疫学发病机制较为复杂,从而妨碍了疫苗的研发。建立良好的手足口病动物模型有助于研究其发病机制,而建立动物模型的关键是通过病毒驯化获得EV71的神经细胞适应毒株。本文简要综述EV71的病毒驯化及手足口病动物模型的最新进展,以期推动相关研究。

关键词：手足口病 EV71病毒病毒驯化动物模型

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hsa-mir-373对肿瘤细胞中E-钙黏蛋白表达的影响

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生物技术通报 2011年第8期27卷 167-171,180页

作者：武卫华孔璟叶彬重庆医科大学分子医学与肿瘤中心基础医学院病原生物学教研室重庆400016

旨在探讨hsa-mir-373重组真核表达载体对肿瘤细胞中的E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。根据miR-Base数据库中hsa-mir-373序列,设计并构建hsa-mir-373重组表达质粒和对照质粒。采用脂质体转染技术将mir-373重组质粒和阴性对照质粒分... 详细信息

旨在探讨hsa-mir-373重组真核表达载体对肿瘤细胞中的E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达的影响。根据miR-Base数据库中hsa-mir-373序列,设计并构建hsa-mir-373重组表达质粒和对照质粒。采用脂质体转染技术将mir-373重组质粒和阴性对照质粒分别转染BIU87细胞株。采用荧光显微镜观测转染效果。Western blotting检测细胞的E-钙黏蛋白表达量,免疫细胞化学方法检测细胞E-钙粘蛋白的分泌。结果显示,酶切和测序证明hsa-mir-373真核表达载体构建成功。E-钙黏蛋白在转染细胞中表达有明显增加。人工构建的hsa-mir-373载体经转染后可增加肿瘤细胞中E-钙黏蛋白的表达量。

关键词： has-mir-373 BIU87细胞 E-钙黏蛋白

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肺孢子虫(菌)p55抗原嵌合基因的克隆及表达产物分析

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中国人兽共患病学报 2011年第9期27卷 774-777,786页

作者：王雪莲栾和芝刘彤赵雨杰安春丽中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001 秦皇岛港口医院检验科秦皇岛066000 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物芯片中心沈阳110001

目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则... 详细信息

目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则及大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,将氨基酸序列转化为核苷酸序列,将人工合成的嵌合基因(CAG)片段连接到质粒pGEX-6p-1(含GST标签)上,构建原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,酶切、测序鉴定。pGEX-6p-1/CAG转化大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白CAG-GST。表达产物用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western-blotting分析鉴定。结果双酶切及测序结果显示重组质粒pGEX-6p-1/CAG构建成功。SDS-PAGE显示重组融合蛋白相对分子量约为69 000。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白为CAG-GST。结论成功构建表达p55蛋白嵌合基因的原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,建立表达重组蛋白的原核表达系统。

关键词：肺孢子菌 p55蛋白嵌合基因重组融合蛋白

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特定双歧杆菌菌株对炎症性肠病小鼠的影响

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微生物学通报 2011年第3期38卷 383-387页

作者：金丹孟繁平崔逢德李红花金寿起延边大学基础医学院免疫学与病原生物学教研部吉林延吉133000 韩国延世大学原州医科大学微生物学教研室

为了观察特定双歧杆菌菌株对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的Balb/c小鼠结肠炎的影响,探讨该双歧杆菌菌株对炎症性肠病(IBD)的防治作用及其可能机制。将小鼠分为3组:正常对照组、模型组(DSS组)、实验组(DSS+Bf组)。用已挑选好的双歧杆菌菌株预... 详细信息

为了观察特定双歧杆菌菌株对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的Balb/c小鼠结肠炎的影响,探讨该双歧杆菌菌株对炎症性肠病(IBD)的防治作用及其可能机制。将小鼠分为3组:正常对照组、模型组(DSS组)、实验组(DSS+Bf组)。用已挑选好的双歧杆菌菌株预先处理小鼠4周后,用4%DSS溶液诱导急性结肠炎。实验结束后,检测每组小鼠结肠的长度及结肠炎炎症程度,利用半定量RT-PCR法检测小鼠肠道派伊尔结细胞中IL-10的表达,利用免疫组化实验检测肠道黏膜中IL-10分泌阳性细胞。结果实验组小鼠结肠的平均长度为7.80 cm±0.21 cm,虽较正常对照组(9.10 cm±0.82 cm)缩短,但较模型组(6.80 cm±0.31 cm)其缩短程度减少;结肠炎炎症程度肉眼评分结果:模型组和实验组分别为8.60±0.24分和6.60±0.68分,两组之间均有显著性差异(P<0.05),显微镜下评分结果为实验组(6.80±0.73分)较模型组(8.80±0.37分)明显减少(P<0.05);实验组小鼠肠道派伊尔结细胞IL-10的表达和肠道黏膜IL-10分泌阳性细胞数明显多于模型组。该实验所用的双歧杆菌菌株减轻了DSS诱导的小鼠肠道炎症反应,并且增强了肠道免疫细胞的IL-10的表达及分泌。

关键词：双歧杆菌炎症性肠病白介素-10

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HHIP基因启动子区甲基化在食管癌细胞系中的研究

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第三军医大学学报 2011年第5期33卷 477-480页

作者：邱宗林许强张婷王永峰陈香梅叶彬鲁凤民重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 北京大学医学部病原生物学系北京100191 重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探索人食管癌细胞系Hedgehog信号通路相关基因的表达状况、HHIP基因启动子区甲基化状态与HHIP表达的关系。方法采用RT-PCR方法检测5个食管癌细胞系Hedgehog信号通路SHH、PTCH1、SMO、HHIP和Gli的表达情况。用基于甲基化敏感酶和甲... 详细信息

目的探索人食管癌细胞系Hedgehog信号通路相关基因的表达状况、HHIP基因启动子区甲基化状态与HHIP表达的关系。方法采用RT-PCR方法检测5个食管癌细胞系Hedgehog信号通路SHH、PTCH1、SMO、HHIP和Gli的表达情况。用基于甲基化敏感酶和甲基化依赖酶酶切、并结合荧光定量PCR方法分析食管癌细胞系HHIP基因启动子区甲基化状态,并检测DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)处理前后食管癌细胞系HHIP mRNA表达的变化。结果 SHH、PTCH1、SMO和Gli mRNA在5个食管癌细胞系中都有较高表达。HHIP在Kyse450细胞系的表达较高,约为其余4个细胞系表达量的3～5倍。与之相应,Kyse450细胞HHIP基因CpG岛为非甲基化状态,其余4个细胞系CpG岛都发生了高甲基化。采用5-Aza-CdR去除甲基化后,HHIP基因表达较处理前增加了10～20倍。结论 Hedge-hog信号通路的异常激活可能参与了食管癌的发生、发展过程,食管癌细胞系HHIP基因的表达抑制与其基因启动子区CpG岛高甲基化相关。

关键词： Hedgehog信号 HHIP基因食管癌细胞系

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