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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第3期26卷 179-182页

作者：张晓莉于新慧唐小云宋宝辉凌虹刘亚威王志龙牡丹江医学院病原生物学教研室牡丹江157011 哈尔滨医科大学病原生物学教研室哈尔滨150081

目的探讨当归补血汤预防免疫抑制小鼠隐孢子虫感染的作用及机制。方法将48只BALB/c小鼠随机均分为4组,分别为正常对照组、免疫抑制组、大剂量预防组和小剂量预防组(8只/组)。除正常对照组外,其余3组每鼠每天灌胃醋酸地塞米松0.27mg/kg,... 详细信息

目的探讨当归补血汤预防免疫抑制小鼠隐孢子虫感染的作用及机制。方法将48只BALB/c小鼠随机均分为4组,分别为正常对照组、免疫抑制组、大剂量预防组和小剂量预防组(8只/组)。除正常对照组外,其余3组每鼠每天灌胃醋酸地塞米松0.27mg/kg,连续8d,诱导小鼠免疫抑制。大剂量预防组灌胃当归补血汤2g/kg,小剂量预防组每鼠灌胃当归补血汤1g/kg,连续8d。第9天除正常对照组外,各组均灌胃感染1×106个隐孢子虫卵囊。然后每天检查粪便,计数卵囊。于感染后第11天,眼球取血,流式细胞仪检测外周血T细胞亚群变化,ELISA检测血清sIL-2R水平;同时剖杀小鼠取十二指肠和空肠,ELISA检测肠液中sIgA水平,并观察十二指肠组织病理改变。结果与免疫抑制组相比,大剂量预防组小鼠卵囊排出数(35.0±4.21)明显减少(P<0.01),肠黏膜损伤明显减轻并出现再生修复的现象,CD4+T细胞数(47.483±4.082)及CD4+/CD8+比值(2.271±0.378)均增高(P<0.01),肠液中sIgA含量[(320.19±1.94)ng/ml]明显升高(P<0.01),外周血sIL-2R水平[(321.34±6.66)ng/ml]降低(P<0.01)。小剂量预防组各项指标与免疫抑制组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论大剂量当归补血汤对免疫抑制小鼠的隐孢子虫感染有明显的预防作用,可提高机体免疫功能。

关键词：当归补血汤免疫抑制微小隐孢子虫预防

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幽门螺杆菌HpaA重组蛋白的表达及免疫效果检测

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中国生物制品学杂志 2008年第6期21卷 493-496页

作者：栗俊杰杨致邦张任飞周侠夏丽君重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016

目的表达幽门螺杆菌hpaA基因的重组蛋白,并检测其抗原性和免疫原性。方法用PCR方法从*** DNA中扩增hpaA基因片段,插入原核表达载体pQE-30,转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白的相对分子质量和表达形式,Ni2+-NTA树脂... 详细信息

目的表达幽门螺杆菌hpaA基因的重组蛋白,并检测其抗原性和免疫原性。方法用PCR方法从*** DNA中扩增hpaA基因片段,插入原核表达载体pQE-30,转化大肠杆菌DH5α,进行诱导表达,SDS-PAGE分析表达蛋白的相对分子质量和表达形式,Ni2+-NTA树脂纯化后,用Westernblot鉴定其反应原性。用重组蛋白免疫家兔,检测其免疫原性。用重组蛋白免疫小鼠,分别检测胃黏膜、PP细胞悬液及小肠黏液中的IgG和sIgA的含量。结果重组表达质粒pQE30-hpaA构建正确,所得序列完整,插入的基因片段全长783bp,与基因文库中的hpaA基因同源性达97.3%。表达产物相对分子质量为30000,目的蛋白表达量占全菌总量的31.67%,主要存在于碎菌后上清中,纯度在90%以上。Westernblot显示该蛋白可与病人血清特异性结合,免疫血清能与重组蛋白反应,双扩散效价为1:16。小鼠体内IgG、IgA、sIgA含量明显高于PBS对照组。结论已获得高纯度的HpaA重组蛋白,该蛋白具有良好的抗原性和免疫原性,可用于研制幽门螺杆菌疫苗。

关键词：幽门螺杆菌 HpaA蛋白表达免疫效果

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PBL教学模式在病原生物学理论教学中的应用

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微生物学通报 2008年第4期35卷 608-610页

作者：王斯王美莲王继春郑兰艳史俊岩罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

PBL教学法是一种源自西方,近年来引入我国全新教学模式,它主要培养学生的自学能力,发展学生综合思考能力和解决实际问题能力。本文作者总结了中国医科大学病原生物学教研室三年来在理论课教学中采用PBL教学模式的实践经验,通过样本成绩... 详细信息

PBL教学法是一种源自西方,近年来引入我国全新教学模式,它主要培养学生的自学能力,发展学生综合思考能力和解决实际问题能力。本文作者总结了中国医科大学病原生物学教研室三年来在理论课教学中采用PBL教学模式的实践经验,通过样本成绩分析证明了PBL教学方法对于提高学生综合思考能力很有帮助,同时在意见反馈结果中也显示学生对于PBL教学模式有很高的热情,可以很好地发挥学生的主观能动性。

关键词： PBL 病原生物学成绩评估主观能动性

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日本血吸虫成虫生殖系统的激光共聚焦显微镜形态学观察

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2008年第5期26卷 392-394页

作者：张薇娜黄大可张鹏任翠平王晓楠张云霞沈际佳安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032 安徽医科大学基础医学院综合实验室合肥230032

BALB/c小鼠经皮感染日本血吸虫尾蚴(40±2条/只)35d后剖杀,获取成虫,经固定、染色、脱色、脱水、透明和封片等处理制成整装玻片标本,用激光共聚焦显微镜观察。显微镜下日本血吸虫的整体形态以及雄虫生殖系统中的睾丸、贮精囊和生殖... 详细信息

BALB/c小鼠经皮感染日本血吸虫尾蚴(40±2条/只)35d后剖杀,获取成虫,经固定、染色、脱色、脱水、透明和封片等处理制成整装玻片标本,用激光共聚焦显微镜观察。显微镜下日本血吸虫的整体形态以及雄虫生殖系统中的睾丸、贮精囊和生殖孔,雌虫生殖系统中的卵巢、卵黄腺、输卵管、卵黄管、受精囊、卵模、梅氏腺、子宫、雌性生殖孔以及虫卵等形态结构清晰。激光共聚焦显微镜技术可较好地观察日本血吸虫虫体各器官组织和细胞结构。

关键词：日本血吸虫生殖系统细胞学激光扫描共焦显微镜

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伏立康唑PLGA纳米微粒的制备及其形态和释放特点分析

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中国生物制品学杂志 2008年第1期21卷 42-44,53页

作者：吕桂香彭海生刘希君王菁华孙博戢玉环赵然王琪王广友王丹丹李呼伦哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨医科大学神经生物省重点实验室哈尔滨150081

目的制备伏立康唑PLGA纳米微粒,并分析其形态及释放特点。方法采用乳化-溶剂挥发法制备伏立康唑PLGA纳米微粒,用激光粒径分析仪及扫描电镜分别进行分散性和形态学分析,经HPLC分析其载药量及释放特点。结果经激光粒径分析,样品粒径峰值为... 详细信息

目的制备伏立康唑PLGA纳米微粒,并分析其形态及释放特点。方法采用乳化-溶剂挥发法制备伏立康唑PLGA纳米微粒,用激光粒径分析仪及扫描电镜分别进行分散性和形态学分析,经HPLC分析其载药量及释放特点。结果经激光粒径分析,样品粒径峰值为(126±20)nm,分布指数为1.5。电镜观察颗粒分布均匀,表面光滑。HPLC分析载药量为(1.9±0.6)%,包封率约为12%,24h内存在突释,第2天到第8天缓慢释放。结论已成功制备了伏立康唑PLGA纳米微粒,能实现缓慢释放,减少给药次数的目的。

关键词：伏立康唑聚乳酸-羟基乙酸共聚物纳米微粒控制释放

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人颗粒溶素对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位及细胞色素C释放的影响

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中华肝脏病杂志 2008年第8期16卷 604-607页

作者：伊正君付玉荣李俊明杨春何永林李娜朱道银山东省潍坊医学院临床学院临床免疫学教研室 261042 潍坊医学院基础部病原生物学教研室重庆医科大学基础医学院免疫学教研室

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡，线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响。方法将RT—PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4．1载体中构建真核表达质粒pBudCE4．1... 详细信息

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡，线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响。方法将RT—PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4．1载体中构建真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并将其转染肝癌细胞株SMMC一7721，用RTPCR、免疫细胞化学检测GLS的表达；用Hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况；用荧光染料Mitocapture^TM检测线粒体跨膜电位、用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放。结果成功构建了携带GLS的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS；在转染的肝癌细胞株SMMC-7721中，从转录和翻译水平都检测到了目标基因GLS的表达产物；重组质粒转染SMMC-7721细胞后，细胞核染色质固缩，呈致密浓染的凋亡状态，线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放。结论携带人GLS的真核表达质粒在肝癌细胞SMMC-7721中表达后有致细胞凋亡作用，引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一。

关键词：肿瘤细胞凋亡线粒体细胞色素C 基因疗法颗粒溶素

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癫痫患者脑组织海马神经元的形态变化和神经元特异性烯醇化酶表达

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中国地方病学杂志 2008年第6期27卷 641-643页

作者：谷佳睿李小光谷佳傲林志国靳占峰刘玉芳张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室 150081 第一临床医学院神经外科基础医学院病理学和法医学教研室

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和... 详细信息

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和正常无精神与神经疾病的尸检者（20例）。HE染色，光镜下观察脑组织中海马区齿状回颗粒细胞层神经元形态学改变；免疫组织化学方法检测NSE表达，比较两组NSE阳性表达率。结果癫痫患者脑组织海马颗粒细胞层中均可见核固缩的神经元，约占全部神经元的15．80％，还可见到肿胀的神经元：NSE阳性表达的神经元呈棕黄色，在出现核固缩的神经元中，发生NSE阳性表达占28．66％；癫痫病人脑组织海马NSE阳性表达率为（7．9±5．6）％。对照组脑组织海马神经元形态正常，细胞核大而圆，位于胞体中央。核仁明显，NSE阳性表达率为（39．0±17．4）％。与对照组相比，癫痫患者含棕黄色颗粒的神经元数目减少，两组NSE阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=-5．13，P〈0．01）。结论癫痫患者脑组织中海马神经元形态改变和NSE表达异常．可能是癫痫患者发病的主要因素之一。

关键词：癫痫海马神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学

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不同温度下铜绿蝇蛹期发育形态观察

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中国法医学杂志 2008年第5期23卷 324-326,I0001页

作者：王贺王玲李泽民河北医科大学基础医学院病原生物学教研室河北石家庄050017

目的观察不同温度下铜绿蝇蛹形态变化特征规律并进行发育阶段划分。方法在16℃、20℃、24℃、28℃、32℃下饲养铜绿蝇,于化蛹起,每隔12h取样1次,直至半数羽化。解剖样本,在体视显微镜下观察其体表形态变化。结果铜绿蝇蛹形态发育过程包... 详细信息

目的观察不同温度下铜绿蝇蛹形态变化特征规律并进行发育阶段划分。方法在16℃、20℃、24℃、28℃、32℃下饲养铜绿蝇,于化蛹起,每隔12h取样1次,直至半数羽化。解剖样本,在体视显微镜下观察其体表形态变化。结果铜绿蝇蛹形态发育过程包含Ⅰ蛹体分头、胸、腹;Ⅱ头咽骨贴壁;Ⅲ原头出现;Ⅳ呼吸角破壳;Ⅴ翅与足出现及褐化;Ⅵ鬃毛出现及褐化;Ⅶ复眼轮廓形成及色素化等7个时间标志性特征,并据此将蛹期划分为9个阶段。结论在已知现场环境温度的前提下,蝇蛹形态变化具有阶段性特征,以此划分蛹期阶段,可望作为推断死后间隔时间(PMI)的参考。

关键词：法医昆虫学死后间隔时间形态变化铜绿蝇蛹期

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特异性IgG抗体作为宿主抗约氏疟原虫再感染关键效应分子的研究

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中国人兽共患病学报 2008年第10期24卷 909-912页

作者：朱晓彤陈光刘英杰王继春曹雅明中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001 佳木斯大学基础医学院寄生虫学教研室佳木斯154000 中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001

目的探讨再感染早期宿主保护性免疫应答的相关机制。方法采用致死型约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii 17XL,Py17XL)感染抵抗型DBA/2小鼠,待全部小鼠自愈后用同种疟原虫株再次攻击。吉姆萨薄血膜染色法观察小鼠原虫血症水平;被动转移实验评... 详细信息

目的探讨再感染早期宿主保护性免疫应答的相关机制。方法采用致死型约氏疟原虫(Plasmodiumyoelii 17XL,Py17XL)感染抵抗型DBA/2小鼠,待全部小鼠自愈后用同种疟原虫株再次攻击。吉姆萨薄血膜染色法观察小鼠原虫血症水平;被动转移实验评估免疫血清的保护性作用;流式细胞仪检测脾中T、B细胞亚群动态变化。结果2/3小鼠能够完全抵御同种疟原虫再感染,仅1/3小鼠出现一过性低水平原虫血症,且于再感染后第8d自愈;免疫血清显著抑制初次感染小鼠原虫血症水平并延长其生存期;与初次感染相比,再感染早期脾CD4+T细胞、B220+和B220lowCD138+(浆细胞)亚群数目显著增加。结论特异性IgG抗体在宿主抗再感染免疫中发挥重要作用,记忆性T、B细胞可能为宿主保护性免疫应答的关键参与者。

关键词：约氏疟原虫再感染保护性免疫抗体

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氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

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药学服务与研究 2008年第3期8卷 204-208页

作者：李小彦武文明栗俊杰廖飞陈全重庆医科大学药学院重庆400016 重庆医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院免疫学教研室重庆400016

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组。12周末时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocystein... 详细信息

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制。方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组。12周末时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)含量;常规方法检测各组大鼠肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率;放射免疫法检测肾组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;免疫组化法检测肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth fac-tor,CTGF)表达;透射电镜观察肾脏超微结构。结果:12周末时,DM模型组大鼠血浆Hcy的含量明显增加,肾皮质CTGF表达显著升高,肾组织AngⅡ含量显著增多,肾重/体重、血糖、尿白蛋白排泄率、尿素氮、血肌酐显著增高,肾脏超微结构改变明显。氯沙坦治疗组上述指标显著低于DM模型组(P<0.01),肾脏超微结构改变明显较轻。结论:氯沙坦对DM大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制值得进一步研究。

关键词：糖尿病肾病氯沙坦结缔组织生长因子血管紧张素Ⅱ 大鼠

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