检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2005年第6期34卷 523-524页

作者：王舰史俊岩罗恩杰周正任中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究双歧杆菌DNA对小鼠肠上皮内淋巴细胞(iIEL)γ干扰素(IFN-γ)和白介素2(IL-2)产生水平的影响,探讨其对小鼠iIEL免疫激活作用。方法:提取双歧杆菌DNA,肌肉注射免疫小鼠,提取小鼠iIEL,以IFNγ和IL-2作为检测指标,测定其变化。结果... 详细信息

目的:研究双歧杆菌DNA对小鼠肠上皮内淋巴细胞(iIEL)γ干扰素(IFN-γ)和白介素2(IL-2)产生水平的影响,探讨其对小鼠iIEL免疫激活作用。方法:提取双歧杆菌DNA,肌肉注射免疫小鼠,提取小鼠iIEL,以IFNγ和IL-2作为检测指标,测定其变化。结果:DNA免疫小鼠产生IFN-γ和IL-2的水平与对照组相比明显提高(P<0.01)。结论:双歧杆菌DNA明显提高小鼠iIEL产生IFN-γ和IL-2的能力。

关键词：双歧杆菌DNA γ干扰素白介素2 肠上皮内淋巴细胞

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伯氏疟原虫T细胞免疫调节蛋白的表达及其对DC2.4的作用

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中国热带医学 2020年第3期20卷 205-211页

作者：周霞崔爱王琳罗恩杰中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110122

目的应用原核载体表达PbTIP胞外重组蛋白片段(rPbTIP)并在体外刺激树突状细胞DC2.4,研究在体外PbTIP片段蛋白对DC2.4细胞是否有一定的免疫调节功能。方法用实验室保存的含有pET32a(+)-rPbTIP载体的*** BL-21菌株表达并纯化rPbTIP蛋白;... 详细信息

目的应用原核载体表达PbTIP胞外重组蛋白片段(rPbTIP)并在体外刺激树突状细胞DC2.4,研究在体外PbTIP片段蛋白对DC2.4细胞是否有一定的免疫调节功能。方法用实验室保存的含有pET32a(+)-rPbTIP载体的*** BL-21菌株表达并纯化rPbTIP蛋白;然后在体外培养的DC2.4细胞中加入不同浓度的rPbTIP蛋白刺激,应用细胞增殖实验检测rPbTIP对DC2.4细胞是否有促进增殖的作用;对rPbTIP刺激后的DC2.4细胞进行RT-PCR检测,分析DC2.4细胞表面分子MyD88、NF-κB、TLR9、TLR4的mRNA含量变化;rPbTIP刺激DC2.4后,应用ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-10、TGF-β和IFN-γ细胞因子水平。结果成功表达出rPbTIP蛋白,纯化后蛋白浓度为1 mg/mL;1 ng/mL的rPbTIP对DC2.4细胞有一定促进增殖作用,并且细胞培养上清中TNF-α水平明显升高,有统计学意义(P<0.05),其他细胞因子水平变化无统计学意义(P>0.05);100 ng/L的rPbTIP对DC2.4细胞可能有一定抑制作用,并且可以上调DC2.4表面MyD88、NF-κB、TLR9 mRNA含量。结论在体外,rPbTIP蛋白对DC2.4细胞的免疫功能具有一定的调节作用,不同浓度rPbTIP蛋白的作用可能不同,需要进一步研究。

关键词：树突状细胞DC2.4 伯氏疟原虫 T细胞免疫调节蛋白 Toll样受体细胞因子

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斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质的初步研究

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中国医科大学学报 2003年第2期32卷 117-119页

作者：王继春罗恩杰刘英杰安春丽中国医科大学基础医学院病原生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:探讨斑须按蚊体内疟原虫雄配子体出丝的发生机制。方法:应用体外雄配子体出丝分析方法,检测斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质对柏氏疟原虫雄配子体出丝的诱导活性并比较其在按蚊吸血前后的变化。结果:斑须按蚊唾液腺抽... 详细信息

目的:探讨斑须按蚊体内疟原虫雄配子体出丝的发生机制。方法:应用体外雄配子体出丝分析方法,检测斑须按蚊唾液腺中疟原虫雄配子体出丝诱导物质对柏氏疟原虫雄配子体出丝的诱导活性并比较其在按蚊吸血前后的变化。结果:斑须按蚊唾液腺抽提物可在中性pH条件下诱导柏氏疟原虫雄配子体出丝;吸血后蚊唾液腺抽提物的雄配子体出丝诱导活性明显减弱。结论:雌性斑须按蚊唾液腺中含有疟原虫雄配子体出丝诱导物质,并在吸血过程中消耗该物质。

关键词：斑须按蚊柏氏疟原虫唾液腺出丝配子体发生机制

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纳米细菌促进乳腺癌细胞MDA-MB-231凋亡

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第三军医大学学报 2013年第16期35卷 1688-1691页

作者：刘胜男张德纯张名均郭亚楠杨晓容许舸重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室生命科学院电镜组重庆400016

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺... 详细信息

目的观察纳米细菌(nanobacteria,NB)与纳米羟基磷灰石颗粒(nano hydroxyapatite,nHAP)对乳腺癌MDA-MB-231细胞的影响。方法实验分为NB组、nHAP组和正常对照组,其中NB组和nHAP组悬液的浓度均为2麦氏浊度(M),正常对照组仅加培养基,与乳腺癌MDA-MB-231细胞共同培养24、48、72 h,通过CCK-8检测其对细胞的毒性作用;培养12、24、48、72 h,取上清,经全自动生化分析仪测定LDH活性;作用72 h,经流式细胞仪(flow cytometry,FCM)测定其凋亡率,透射电镜观察其超微结构的变化情况。结果 CCK-8显示,NB组24、48、72 h对细胞的抑制作用均强于nHAP组和正常对照组,差异有统计学意义(P<0.01);NB组LDH含量在24、48、72 h时均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);24、48、72 h均高于nHA组,但仅24、48 h有统计学差异(P<0.05)。nHAP组LDH活性仅在72 h与正常对照组比较有统计学差异(P<0.01);72 h后NB组细胞凋亡率高于nHAP组,差异有统计学意义(P<0.01);透射电镜下观察,NB组可以看到胞质空泡样变,核固缩以及明显的凋亡小体,nHAP组未见明显异常。结论 NB可以抑制乳腺癌细胞的生长,促进其发生凋亡,其导致细胞凋亡的成分不仅仅是NB羟基磷灰石的外壳,也可能与NB的其他组分或代谢产物有关。

关键词：纳米细菌纳米羟基磷灰石凋亡乳腺癌

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斯氏按蚊配子体激活因子活性变化与产卵的关系

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中国人兽共患病学报 2007年第12期23卷 1194-1197页

作者：王继春蒋志云申莉刘英杰曹雅明中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院免疫学教研室沈阳110001

目的探讨斯氏按蚊唾液腺中疟原虫配子体激活因子的变化趋势与蚊卵发育及产出的关系。方法应用体外雄配子体出丝观察方法检测雌性斯氏按蚊唾液腺抽提物及卵巢匀浆上清中配子体激活因子对伯氏疟原虫雄配子体出丝诱导活性的动态变化;分别... 详细信息

目的探讨斯氏按蚊唾液腺中疟原虫配子体激活因子的变化趋势与蚊卵发育及产出的关系。方法应用体外雄配子体出丝观察方法检测雌性斯氏按蚊唾液腺抽提物及卵巢匀浆上清中配子体激活因子对伯氏疟原虫雄配子体出丝诱导活性的动态变化;分别采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和Bradford蛋白分析法检测两器官蛋白成分或含量的变化。结果吸血后按蚊唾液腺抽提物的出丝诱导活性显著下降,未产卵组和产卵组按蚊的活性分别于吸血后第8日和第4日恢复到吸血前水平;卵巢匀浆上清的诱导活性亦在吸血后下降,吸血后第2日显著升高,未产卵组保持该活性水平至吸血后第8日,产卵组诱导活性于吸血后第4日(产卵翌日)回落。两组按蚊唾液腺蛋白组成未见明显区别;吸血后第2日,卵巢的蛋白含量达到峰值,未产卵组按蚊卵巢蛋白含量维持在高水平直至吸血后第6日,而产卵组按蚊卵巢蛋白含量在吸血后第4日则恢复到吸血前的水平。结论按蚊唾液腺中配子体激活因子的消长与雌蚊体内蚊卵的发育、成熟及产出之间存在某种内在的生理联系。

关键词：斯氏按蚊伯氏疟原虫配子体激活因子唾液腺卵巢

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脓肿分枝杆菌耐利福平机制的研究

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中国人兽共患病学报 2013年第12期29卷 1172-1176页

作者：范贵荣杨致邦黄进高继业重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室基础医学实验教学中心病原生物学与免疫学实验室重庆400016

目的探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制。方法采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度。通过利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度的变化情况来分析... 详细信息

目的探讨脓肿分枝杆菌耐利福平的机制。方法采用棋盘微量稀释法,分别测定利福平在加入不同浓度的改变细胞壁通透性的试剂和主动外排泵抑制剂时对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度。通过利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度的变化情况来分析细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平机制中的作用。结果随着TWEEN-80、Trixon X-100、甲苯、乙醚、CCCP、利血平和泮托拉唑浓度的增加,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度逐渐降低。对于TWEEN-80、Trixon X-100、CCCP和泮托拉唑,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至小于32μg/mL,0.1%的TWEEN-80、0.006 25%的Trixon X-100、0.1μg/mL的CCCP和32μg/mL的泮托拉唑为最适浓度;对于甲苯、乙醚和利血平,利福平对脓肿分枝杆菌的最低抑菌浓度由512μg/mL降至64μg/mL,0.25%的甲苯、0.25%的乙醚和8μg/mL的利血平为最适浓度。它们均能促进利福平对脓肿分枝杆菌的抑菌作用。结论细胞壁通透性和主动外排在脓肿分枝杆菌耐利福平的机制中有重要作用。

关键词：脓肿分枝杆菌利福平细胞壁通透性主动外排

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免疫沉淀联合质谱筛选与纳尔逊湾正呼肠孤病毒σNS互作的宿主RNA结合蛋白

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安徽医科大学学报 2023年第9期58卷 1546-1550页

作者：李润林胡思漫骆丽可贾雪娇刘梦琦李永刚陶晓莉锦州医科大学基础医学院病原生物学教研室锦州121000

目的筛选出宿主细胞中与纳尔逊湾呼肠孤病毒(NBV)非结构蛋白σNS互作的RNA结合蛋白并分析其生物信息学功能。方法本研究通过构建NBVσNS真核表达载体pEF-HA-MB-S3,验证正确后转染HEK293T细胞,所得的细胞蛋白裂解液经RNase A处理后,利用... 详细信息

目的筛选出宿主细胞中与纳尔逊湾呼肠孤病毒(NBV)非结构蛋白σNS互作的RNA结合蛋白并分析其生物信息学功能。方法本研究通过构建NBVσNS真核表达载体pEF-HA-MB-S3,验证正确后转染HEK293T细胞,所得的细胞蛋白裂解液经RNase A处理后,利用免疫沉淀富集σNS结合蛋白,经LC-MS/MS质谱分析技术鉴定分析互作蛋白,并且借助相关生信工具挖掘蛋白性质和具体功能。结果本实验成功筛选出32个与NBVσNS蛋白存在互作的候选RNA结合蛋白;生物分析结果显示,这些蛋白主要定位于细胞质与细胞核中,并且主要参与细胞代谢、生物调控、病毒翻译与转录等生物学过程。结论本研究初步分析与NBVσNS互作的RNA结合蛋白功能,为深入研究σNS蛋白在NBV生命周期中的作用机制奠定基础。

关键词：纳尔逊湾病毒 σNS蛋白 RNA结合蛋白宿主蛋白免疫沉淀

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人颗粒溶素对肝癌细胞SMMC-7721凋亡、线粒体跨膜电位及细胞色素C释放的影响

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中华肝脏病杂志 2008年第8期16卷 604-607页

作者：伊正君付玉荣李俊明杨春何永林李娜朱道银山东省潍坊医学院临床学院临床免疫学教研室 261042 潍坊医学院基础部病原生物学教研室重庆医科大学基础医学院免疫学教研室

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡，线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响。方法将RT—PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4．1载体中构建真核表达质粒pBudCE4．1... 详细信息

目的构建携带人颗粒溶素（GLS）的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并研究其表达后对肝癌细胞SMMC-7721凋亡，线粒体跨膜电位与细胞色素C转位的影响。方法将RT—PCR扩增出的人GLS编码基因克隆入pBudCE4．1载体中构建真核表达质粒pBudCE4．1／GLS并将其转染肝癌细胞株SMMC一7721，用RTPCR、免疫细胞化学检测GLS的表达；用Hoechst法及电镜检测细胞的凋亡状况；用荧光染料Mitocapture^TM检测线粒体跨膜电位、用Western blot法检测细胞色素C从线粒体的释放。结果成功构建了携带GLS的真核表达质粒pBudCE4．1／GLS；在转染的肝癌细胞株SMMC-7721中，从转录和翻译水平都检测到了目标基因GLS的表达产物；重组质粒转染SMMC-7721细胞后，细胞核染色质固缩，呈致密浓染的凋亡状态，线粒体膜跨电位下降并伴随有细胞色素C从线粒体至细胞质的释放。结论携带人GLS的真核表达质粒在肝癌细胞SMMC-7721中表达后有致细胞凋亡作用，引起线粒体跨膜电位下降与细胞色素C的释放可能是其诱导肿瘤细胞凋亡的途径之一。

关键词：肿瘤细胞凋亡线粒体细胞色素C 基因疗法颗粒溶素

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中国大陆地区乙型脑炎病毒一步法TaqMan荧光定量RT-PCR检测方法的建立

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中华微生物学和免疫学杂志 2016年第2期36卷 158-160页

作者：牟小会吕清巧颜凤程金芝郑棉扬商正玲吴家红韦艳贵州医科大学基础医学院现代病原生物学实验室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵阳550025 贵州医科大学基础医学院公共卫生学院劳动卫生与环境卫生学教研室贵阳550025

流行性乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis virus，JEV）是黄病毒科黄病毒属的单股正链RNA病毒，三带喙库蚊是其主要的传播媒介，感染人体后可引起流行性乙型脑炎（乙脑）。人群对本病普遍易感，15岁以下儿童发病率较高。

关键词：流行性乙型脑炎病毒 PCR检测方法 TaqMan 中国大陆地区荧光定量 encephalitis 一步法单股正链RNA病毒

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原头蚴体外形成棘球蚴的优化培养体系研究

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第三军医大学学报 2019年第5期41卷 415-423页

作者：吴宏烨李锴王芬刘许诺范俊杰叶彬重庆医科大学基础医学院病原生物学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的建立适合细粒棘球绦虫原头蚴在体外形成棘球蚴的培养体系。方法以RPMI1640或DMEM培养基为基质,胎牛血清或绵羊血清为营养成分,人肝细胞株L02为饲养细胞设计配伍2大类、6个组培养体系;培养细粒棘球绦虫原头蚴45 d,根据各组原头蚴的... 详细信息

目的建立适合细粒棘球绦虫原头蚴在体外形成棘球蚴的培养体系。方法以RPMI1640或DMEM培养基为基质,胎牛血清或绵羊血清为营养成分,人肝细胞株L02为饲养细胞设计配伍2大类、6个组培养体系;培养细粒棘球绦虫原头蚴45 d,根据各组原头蚴的头节外翻率、成囊率和囊泡大小情况,寻找适合原头蚴形成棘球蚴的体外培养体系最佳配伍;在最佳配伍的培养体系继续培养棘球蚴囊泡至180 d。结果在起初的45 d期间,DMEM体系的E组(DMEM+胎牛血清+人肝细胞株L02)培养的棘球蚴生长最快,20 d起原头蚴成囊率高于其他各组(P<0.05),25 d起棘球蚴囊泡大于其他各组(P<0.05),45 d时原头蚴成囊率达到100%;在其后的46～180 d内,棘球蚴囊泡持续增大,至80 d时肉眼可见透明囊泡,至180 d时最大囊泡直径达2.2 mm。结论添加胎牛血清及人肝细胞株L02的DMEM培养基有利于体外培养的原头蚴发育为棘球蚴囊泡。

关键词：细粒棘球绦虫原头蚴成囊棘球蚴培养体系

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