检索结果-内蒙古大学图书馆

第三军医大学学报 2007年第23期29卷 2292-2293页

作者：袁拥华杨晓兰李伟李龙江汤为学余瑜重庆医科大学药学院药物化学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法,建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。方法分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,采用不同的方法除盐、浓缩样品,然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品,... 详细信息

目的优化人肝癌细胞株QGY-7701的蛋白质样品制备方法,建立其亚细胞蛋白质组双向电泳技术。方法分步提取人肝癌细胞株QGY-7701细胞质、细胞膜和细胞核蛋白,采用不同的方法除盐、浓缩样品,然后分别采用2种不同的水化上样缓冲液重悬样品,进行双向凝胶电泳。结果使用三氯乙酸/丙酮的除盐效果好,样品损失少;采用上样缓冲液(7mol/L尿素+2mol/L硫脲+4%CHAPS+40mmol/L Tris+65mmol/L DTT+2%两性电解质)有利于蛋白的溶解,获得更多的蛋白信息,检出的细胞质蛋白点数可达(995±53),细胞膜蛋白点数可达(1035±58),细胞核蛋白点数可达(893±45)。结论获得了清晰的人肝癌细胞株QGY-7701亚细胞蛋白质组双向电泳图谱。

关键词：人肝癌细胞株QGY-7701 亚细胞蛋白质组双向电泳

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甲醛炎性痛增强大鼠海马NOS表达和NO生成

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中国应用生理学杂志 2007年第1期23卷 30-34,I0004页

作者：刘凌云吴迪李清君李文斌郭新华河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017 河北省人民医院神经内科河北石家庄050051

目的：观察甲醛炎性痛过程中大鼠痛行为、海马一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的变化以及变化的时程及区域特征。方法：采用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈变化；采用NADPH—d组织化学法和硝酸还原酶法分别测定大鼠海马NOS表达... 详细信息

目的：观察甲醛炎性痛过程中大鼠痛行为、海马一氧化氮合酶（NOS）活性及一氧化氮（NO）含量的变化以及变化的时程及区域特征。方法：采用辐射热甩尾法测定大鼠痛阈变化；采用NADPH—d组织化学法和硝酸还原酶法分别测定大鼠海马NOS表达和No含量。结果：皮下注射甲醛溶液后，大鼠出现伤害性感受反应及痛阈降低。注射甲醛后6h，海马CA1、CA2～3区及DG区NOS阳性细胞数目、阳性细胞染色深度均显著增加。海马NO含量亦显著增加；注射甲醛后12h时这些改变最为显著，48h时恢复至对照组水平。结论：甲醛炎性痛可诱导海马NOS活性增强及NO生成增多．这种改变可发生在海马各区．并具有一定的时程特征。

关键词：海马一氧化氮一氧化氮合酶痛觉过敏伤害性感受反应

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非小细胞肺癌红细胞膜带3蛋白功能的观察

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哈尔滨医科大学学报 2007年第6期41卷 535-536,540页

作者：刘晓滨白淑芝姜晓姝马艳伟邢丽娜哈尔滨医科大学第二临床医学院肿瘤放疗科哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的观察早晚期非小细胞肺癌患者红细胞膜带3蛋白功能变化。方法正常对照组:健康成年人15名;早期组:Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌15例;晚期组:Ⅳ期非小细胞肺癌15例。应用Cl-荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)分别检测3组红细胞膜... 详细信息

目的观察早晚期非小细胞肺癌患者红细胞膜带3蛋白功能变化。方法正常对照组:健康成年人15名;早期组:Ⅰ、Ⅱ期非小细胞肺癌15例;晚期组:Ⅳ期非小细胞肺癌15例。应用Cl-荧光探针6-甲基-3-磺丙基-1-喹啉-水化合物(SPQ)分别检测3组红细胞膜带3蛋白的阴离子转运活性。结果晚期组患者红细胞膜带3蛋白的离子转运活性明显比早期组升高。结论晚期非小细胞肺癌红细胞膜带3蛋白的离子转运活性升高。提示带3蛋白的阴离子转运活性与非小细胞肺癌的发生、发展有关。

关键词：带3蛋白阴离子转运活性非小细胞肺癌

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诺帝对HPV16型亚基因永生化人宫颈上皮细胞的诱导分化作用

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第三军医大学学报 2007年第1期29卷 43-46页

作者：赵敬赵涌卞修武重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016 第三军医大学西南医院病理学研究所重庆400038

目的研究诺帝(Nordy)对HPV16型亚基因(E6、E7)永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)的诱导分化作用。方法MTT法检测诺帝对H8细胞增殖的抑制作用,流式细胞术(FCM)分析细胞周期,免疫细胞化学S-P法检测增殖细胞核抗原K i67的表达,TRAP-ELISA法检... 详细信息

目的研究诺帝(Nordy)对HPV16型亚基因(E6、E7)永生化人宫颈上皮细胞(H8细胞)的诱导分化作用。方法MTT法检测诺帝对H8细胞增殖的抑制作用,流式细胞术(FCM)分析细胞周期,免疫细胞化学S-P法检测增殖细胞核抗原K i67的表达,TRAP-ELISA法检测端粒酶活性变化。结果诺帝能够明显抑制H8细胞增殖;可阻滞细胞周期于G0/G1期,S期细胞减少;细胞核内K i67蛋白的表达水平明显下降;端粒酶活性明显降低。结论诺帝对H8细胞有诱导分化作用,这种作用可能是通过抑制增殖,阻滞细胞周期,降低端粒酶活性来实现的。

关键词：诱导分化宫颈永生化 HPV

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HIF-1α基因转染对β-淀粉样蛋白25-35诱导原代培养海马神经细胞凋亡的影响

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第三军医大学学报 2007年第7期29卷 595-598页

作者：刘凌云柴锡庆李清君程桂花河北医科大学基础医学院病理生理学教研室石家庄050017 河北化工医药职业技术学院药学系石家庄050017

目的构建人类缺氧诱导因子-1α(human hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因真核表达载体pSNAV-HIF-1α,并观察其对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导原代培养海马神经细胞凋亡及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法采用基因重组技... 详细信息

目的构建人类缺氧诱导因子-1α(human hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)基因真核表达载体pSNAV-HIF-1α,并观察其对β-淀粉样蛋白25-35(Aβ25-35)诱导原代培养海马神经细胞凋亡及细胞内游离钙离子浓度的影响。方法采用基因重组技术,将pBSKhHIF1αT7原核表达载体上HIF-1α基因序列克隆至真核表达载体pSNAV2.0,磷酸钙共沉淀法介导转染pSNAV-HIF-1α,Aβ25-35诱导原代培养海马神经细胞凋亡。Western blot检测HIF-1α蛋白表达,流式细胞术分析细胞凋亡百分率,激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙离子浓度。结果酶切、PCR及DNA测序结果均表明成功构建了重组质粒pSNAV-HIF-1α,磷酸钙共沉淀法介导的pSNAV-HIF-1α质粒转染显著增加了海马神经细胞HIF-1α蛋白表达(P<0.05),同时可显著降低Aβ25-35诱导海马神经细胞凋亡百分率及细胞内游离钙离子浓度上调(P<0.05)。结论缺氧诱导因子-1α基因转染可能通过抑制细胞内游离钙离子浓度上调使海马神经细胞对Aβ25-35产生抗凋亡作用。

关键词：缺氧诱导因子-1α 原代培养海马转染

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大蒜素对全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡的影响

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中国应用生理学杂志 2007年第4期23卷 402-403,429页

作者：任丽丽吴迪李清君李文斌郭新华刘凌云河北医科大学基础医学院病理生理学教研室河北石家庄050017 河北省人民医院神经内科河北石家庄050051

目的:观察大蒜素对全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡的影响。方法:采用大鼠全脑缺血/再灌注模型;应用DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流式细胞仪检测海马神经元凋亡情况。结果:缺血/再灌注大鼠海马DNA电泳呈现细胞凋亡特有的"... 详细信息

目的:观察大蒜素对全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡的影响。方法:采用大鼠全脑缺血/再灌注模型;应用DNA琼脂糖凝胶电泳、透射电镜和流式细胞仪检测海马神经元凋亡情况。结果:缺血/再灌注大鼠海马DNA电泳呈现细胞凋亡特有的"梯状条带",大蒜素预处理组未出现"梯状条带";透射电镜观察到缺血/再灌注海马部分神经元超微结构呈现明显的凋亡特征,大蒜素预处理可改善神经元超微结构;缺血/再灌注海马神经元凋亡率较假手术组明显增加,大蒜素预处理可明显降低缺血/再灌注大鼠海马神经元凋亡率。结论:大蒜素可抑制全脑缺血/再灌注诱导的海马神经元凋亡。

关键词：大蒜素脑缺血/再灌注凋亡

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卷烟烟气凝集物诱发人支气管上皮细胞转化的初步研究

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安徽医科大学学报 2007年第3期42卷 265-268页

作者：徐国蕊郑红朱茂祥汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032 军事医学科学院放射医学研究所北京100850

目的建立卷烟烟气凝集物(CSC)诱发细胞转化的模型,模拟吸烟致肺癌的过程。方法利用CSC染毒体外培养的人支气管上皮细胞系BEP2D,诱导转化。结果以0·001支烟/ml剂量每代染毒24h,连续染毒30代共720h后,诱发细胞发生明显转化改变,细胞... 详细信息

目的建立卷烟烟气凝集物(CSC)诱发细胞转化的模型,模拟吸烟致肺癌的过程。方法利用CSC染毒体外培养的人支气管上皮细胞系BEP2D,诱导转化。结果以0·001支烟/ml剂量每代染毒24h,连续染毒30代共720h后,诱发细胞发生明显转化改变,细胞逐渐发生生长动力学和形态学的改变,生长失去接触抑制,获得对血清诱导末端分化的抗性和锚着独立性生长能力,与对照细胞比较均有统计学意义上的增强。结论从BEP2D到CSC转化的细胞能够在一定程度上模拟体内肿瘤的发生发展过程,可以为深入了解吸烟致肺癌发生多阶段过程中的细胞和分子机制提供研究模型。

关键词：亚硝胺类上皮细胞突变烟草/副作用烟雾/副作用支气管/细胞学

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单一剂量美法仑治愈荷瘤C57BL/6小鼠动物模型的建立

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大连医科大学学报 2007年第4期29卷 329-331,335页

作者：李传刚李墨林舒晓宏姜妙娜贾玉杰刘用楫大连医科大学第二临床学院泌尿外科辽宁大连116027 大连医科大学基础医学院病理生理学教研室大连医科大学药学院辽宁大连116027

[目的]建立单一剂量化疗药物治愈荷瘤小鼠的动物模型,为研究在体内化疗药物治愈肿瘤与机体免疫力和肿瘤细胞耐药之间的关系奠定基础。[方法]用MTT法在体外检测小鼠淋巴瘤EL4细胞对化疗药物美法仑的敏感性。野生型C57BL/6小鼠皮下接种小... 详细信息

[目的]建立单一剂量化疗药物治愈荷瘤小鼠的动物模型,为研究在体内化疗药物治愈肿瘤与机体免疫力和肿瘤细胞耐药之间的关系奠定基础。[方法]用MTT法在体外检测小鼠淋巴瘤EL4细胞对化疗药物美法仑的敏感性。野生型C57BL/6小鼠皮下接种小鼠淋巴瘤EL4细胞建立荷瘤小鼠模型,不同剂量的美法仑单次腹腔内注射,观察不同剂量的美法仑体内治疗的效果及其毒、副作用,找出美法仑可发挥最大抑瘤作用、并能使荷瘤小鼠的肿瘤消退、不再复发的最小治疗剂量。[结果]体外美法仑对EL4细胞的直接杀伤作用与所用美法仑的剂量呈正相关。接种1×105EL4细胞可使C57BL/6小鼠肿瘤进行性生长,接种后12 d平均肿瘤直径为6 mm,动物致死时间平均为(17.7±1.0)d。接种后12 d的荷瘤小鼠腹腔单次注射不同剂量的美法仑,观察发现:应用0.75 mg/kg^30 mg/kg的美法仑,肿瘤结节缩小的速率与所用美法仑的治疗剂量呈正相关;在肿瘤结节完全消退后,肿瘤的复发率与所用美法仑的治疗剂量呈负相关。7.5 mg/kg美法仑单次腹腔内注射后不但使野生型C57BL/6荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,治疗后2个月内无肿瘤复发,并且再次接种等量肿瘤细胞无肿瘤生长。[结论]单一剂量(7.5 mg/kg)的美法仑腹腔内注射是可以治愈野生型C57BL/6荷瘤小鼠的最低有效剂量。该动物模型的建立为研究化疗药物治愈恶性肿瘤的机制奠定了基础。

关键词：美法仑肿瘤治愈动物模型小鼠淋巴瘤细胞 C57BL/6小鼠

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奥沙利铂抗人结肠癌细胞株HT29增殖及其机制的研究

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第三军医大学学报 2007年第7期29卷 606-609页

作者：向征张才全汤为学重庆医科大学附属第一医院普通外科重庆市普通外科学重点实验室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;... 详细信息

目的观察抗肿瘤药物奥沙利铂对人结肠癌细胞株HT29体外增殖的影响,初步探讨其作用机制。方法采用人结肠癌细胞株HT29作为研究对象,MTT法检测不同浓度和作用时间的奥沙利铂对细胞增殖的抑制作用;透射电镜观察细胞形态和超微结构的改变;流式细胞仪分析细胞周期的分布及凋亡的情况;免疫细胞化学法检测细胞周期蛋白及凋亡相关基因蛋白的表达。结果奥沙利铂对HT29细胞的增殖有抑制作用而且呈剂量和时间依赖性。奥沙利铂作用72h后,电镜可见凋亡细胞及凋亡小体;流式细胞仪检测发现细胞阻滞于G2/M期,G0/G1、S期细胞减少及出现凋亡峰;免疫细胞化学显示Bax和Fas表达增强,CyclinB1、Bcl-2、PCNA表达减弱。结论奥沙利铂对HT29结肠癌细胞的增殖有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡有关。

关键词：奥沙利铂结肠癌增殖细胞周期凋亡

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广西黑衣壮族人群脂蛋白脂酶基因多态性与血脂水平关系的研究

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中华检验医学杂志 2007年第9期30卷 1023-1028页

作者：王勇尹瑞兴陈广琴林伟雄杨德寨潘尚领广西医科大学第一附属医院心血管病研究所南宁530021 广西医学科学实验中心广西医科大学基础医学院病理生理学教研室

目的探讨广西黑衣壮族人群脂蛋白脂酶(LPL)基因 PvuⅡ多态性及其与血脂水平的关系。方法采用整群抽样方法对325名20～80岁黑衣壮族人群的血压、身高、体重、体重指数、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度... 详细信息

目的探讨广西黑衣壮族人群脂蛋白脂酶(LPL)基因 PvuⅡ多态性及其与血脂水平的关系。方法采用整群抽样方法对325名20～80岁黑衣壮族人群的血压、身高、体重、体重指数、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、载脂蛋白(apo)Al、apo B 及 apo Al/apo B 比值进行测定;用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)和直接测序法检测 LPL-PvuⅡ位点基因型及等位基因分布频率,分析 LPL-PvuⅡ基因型与血脂和 apo 水平的关系。并将其结果与当地的331名汉族人群作比较。结果黑衣壮族人群 TC、TG、LDL-C 和 apo B 水平显著低于汉族人群[分别为(4.57±0.97)mmol/L比(4.79±0.99)mmol/L,P<0.01;(1.16±0.95)mmol/L 比(1.31±0.97)mmol/L,P<0.05;(2.30±0.68)mmol/L 比(2.52±0.77)mmol/L,P<0.01;(0.87±0.21)g/L比(0.95±0.22)g/L,P<0.01],而 HDL-C 水平和 apoAl/apo B 比值则显著高于汉族人群[分别为(2.17±0.51)mmol/L 比(2.01±0.47)mmol/L,P<0.01和(1.88±1.03)比(1.67±0.78),P<0.01],apo A1水平与汉族人群比较差异无统计学意义[(1.47±0.14)g/L 比(1.45+0.15)g/L,P>0.05]。黑衣壮族人群含 LPL-PvuⅡ酶切位点(P+)和不含该位点(P-)等位基因频率分别为52.92%和47.08%,汉族人群 P+和 P-等位基因频率分别为58.46%和41.54%(P<0.05)。黑衣壮族人群 P+P+、P+P-和 P-P-基因型的分布频率分别为23.08%、59.69%和17.23%,汉族人群 P+P+、P+P-和 P-P-基因型的分布频率分别为29.31%、58.31%和12.38%(P>0.05)。黑衣壮族和汉族人群 LPL-PvuⅡ不同基因型亚组间的血脂及 apo 水平比较差异均无统计学意义(均 P>0.05)。结论广西黑衣壮族人群 LPL-PvuⅡ等位基因频率与汉族人群比较有显著差异,但 P+P+、P+P-和 P-P-基因型频率与汉族人群比较差异无统计学意义,两民族人群 LPL-PvuⅡ多态性对血脂水平无明显影响。

关键词：脂蛋白脂酶载脂蛋白类基因壮族

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