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金雀异黄素与5-氟尿嘧啶单独或联合抑制人胃癌BGC-823细胞的体外研究

重庆医科大学学报 2012年第12期37卷 1053-1058页

作者：王正文龚军朱明才汤为学崔海宁海南医学院附属医院普外科海口570102 四川省医学科学院.四川省人民医院肝胆胰外科成都610072 重庆医科大学附属第一医院普外科重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的:研究金雀异黄素(Genistein,Gen)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合应用对人胃癌细胞BGC-823的生长抑制是否具有协同作用及其可能的作用机制。方法:MTT法检测Gen、5-FU单独及联合对BGC-823细胞生长的抑制作用并用中效原理定量... 详细信息

目的:研究金雀异黄素(Genistein,Gen)与5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)联合应用对人胃癌细胞BGC-823的生长抑制是否具有协同作用及其可能的作用机制。方法:MTT法检测Gen、5-FU单独及联合对BGC-823细胞生长的抑制作用并用中效原理定量分析两药合用的剂量-效应关系。Gen、5-FU单独及联合处理BGC-823细胞72 h后,流式细胞术检测细胞周期分布的变化,并在透射电镜下观察细胞超微结构的改变。结果:Gen、5-FU单用或联合应用对BGC-823细胞的生长均有显著的增殖抑制作用且呈剂量和时间依赖性。两药联合应用时,当药物效应(抑制率)大于50%时,具有协同作用[合用指数(Combination index,CI)≤1];6.06 mg/L Gen作用72 h后,95.74%的BGC-823阻滞在G2/M期;1.23 mg/L 5-FU作用72 h后,G0/G1及S期细胞分别为58.26%和41.59%,0.81 mg/L Gen与1.01 mg/L 5-FU联合应用72 h后,67.99%的BGC-823细胞阻滞在G0/G1期。Gen、5-FU单独或联合均可诱导BGC-823细胞凋亡。结论:Gen和5-FU单独或联合应用,均对BGC-823细胞具有抑制增殖的作用,在一定浓度范围内,Gen与5-FU联合应用对胃癌细胞的增殖具有协同抑制作用,Gen与5-FU可能通过阻滞细胞周期和诱导细胞凋亡而抑制胃癌细胞的生长。该研究为Gen与5-FU可能联合用于胃癌的治疗提供了依据。

关键词：金雀异黄素 5-氟尿嘧啶胃癌抑制作用细胞周期凋亡

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人EGFR显性负性突变体抑制胃癌细胞促血管形成能力

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中国组织化学与细胞化学杂志 2013年第3期22卷 179-184页

作者：廖刚王子卫张能董浦江汤为学重庆医科大学附属第一医院胃肠外科重庆400016 云南省第一人民医院普通外科昆明650032 重庆医科大学附属第一医院实验研究中心重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的探讨人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor receptor,DNEGFR))对胃癌细胞促血管形成能力的影响及其分子机制,并检测其对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901... 详细信息

目的探讨人表皮生长因子显性负性突变体(dominant negative epidermal growth factor receptor,DNEGFR))对胃癌细胞促血管形成能力的影响及其分子机制,并检测其对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法选用2株人胃癌细胞,分为如下6组:SGC-7901及NCI-N87细胞未转染组(US组,UN组),SGC-7901及NCI-N87细胞pEGFP-N1质粒转染组(ES组,EN组),SGC-7901及NCI-N87细胞pEGFPN1-DNEGFR质粒转染组(DS组,DN组)。采用人脐静脉内皮细胞(humanumbilical vein endothelial cell,HUVEC)管腔结构形成实验检测体外促血管形成能力,采用酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)测定细胞培养液中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的水平,建立人胃癌细胞裸鼠移植瘤模型,标本微血管密度(microvessel density,MVD)检测体内促血管形成能力,标本体积检测其对裸鼠皮下移植瘤生长的影响。结果转染pEGFPN1-DNEGFR质粒的人胃癌细胞株出现HUVEC管腔结构形成抑制,培养液中VEGF水平降低,MVD计数降低,裸鼠皮下移植瘤体积变小。结论 DNEGFR可能通过下调VEGF分泌抑制胃癌细胞体外及裸鼠体内促血管形成能力,最终抑制裸鼠皮下移植瘤生长。

关键词：促血管形成能力显性负性突变体胃癌血管内皮生长因子表皮生长因子受体

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尾加压素Ⅱ介导卵圆细胞增殖的机制探讨

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中国病理生理杂志 2015年第10期 1833-1833页

作者：禹晓童王鹏雁王红霞王学江首都医科大学基础医学院病理生理学教研室北京协和医院病理科

目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对肝脏干细胞即卵圆细胞内活性氧(ROS)的影响及其参与UⅡ促细胞增殖的机制探讨。方法:通过流式细胞术,应用DCFH-DA探针检测UⅡ孵育卵圆细胞WB-F344后,胞内ROS水平变化。通过Western blot方法检测胞内NADPH氧化... 详细信息

目的:探讨尾加压素Ⅱ(UⅡ)对肝脏干细胞即卵圆细胞内活性氧(ROS)的影响及其参与UⅡ促细胞增殖的机制探讨。方法:通过流式细胞术,应用DCFH-DA探针检测UⅡ孵育卵圆细胞WB-F344后,胞内ROS水平变化。通过Western blot方法检测胞内NADPH氧化酶亚基、细胞周期蛋白E、细胞周期蛋白依赖性激酶2及信号通路蛋白ERK表达水平。采用流式细胞术

关键词：卵圆细胞细胞增殖尾加压素机制探讨介导

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血管紧张素Ⅱ1型受体自身抗体致血管内皮炎性损伤的研究

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中国心血管病研究 2012年第10期10卷 776-780,800页

作者：郑荣华张苏丽王可马秀瑞贺忠梅卫小红刘慧荣临汾职业技术学院基础教研室山西省041000 山西医科大学生理教研室细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西省041000 首都医科大学基础医学院生理学与病理生理学系山西省041000

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）自身抗体（AT1-AA）长期作用下大鼠血管内皮是否会发生炎性损伤。方法以人工合成的人AT1R的细胞外第二环功能表位肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原，主动免疫雌性Wistar大鼠9个月，建立AT广AA阳性的大鼠模... 详细信息

目的观察血管紧张素Ⅱ1型受体（AT1R）自身抗体（AT1-AA）长期作用下大鼠血管内皮是否会发生炎性损伤。方法以人工合成的人AT1R的细胞外第二环功能表位肽段（AT1R—ECⅡ）为抗原，主动免疫雌性Wistar大鼠9个月，建立AT广AA阳性的大鼠模型。血细胞涂片法检测大鼠血中血细胞变化情况，以激光共聚焦法检测大鼠血管内皮细胞细胞间黏附分子-1（ICAM-1）的表达，以免疫组化法检测血管内皮细胞血管细胞间黏附分子-1（VCAM-1）的表达。结果主动免疫的Wistar大鼠（n=9）血清中产生了高滴度的IgG类AT1-AA，从免疫2个月开始直到免疫结束，抗体维持在较恒定的高水平[免疫9个月时光密度值与同期溶剂对照组比较，（1．79±0．26）比（0．43±0．15），P〈0．01]。免疫结束时，同溶剂对照组相比，大鼠血中自细胞数目有升高趋势，血小板数量显著下降，而血红蛋白含量未变。大鼠胸主动脉内皮细胞ICAM-1[荧光值（2．97±0．50）比（1．63±0．48），P〈0．05]和VCAM-1[平均光密度值M00（O．27±0．04）比（0．17±0．04），P〈0．05]表达均显著上调。结论AT1-AA长期刺激可引起大鼠血管内皮细胞发生炎性损伤。

关键词： AT1受体抗体内皮炎症

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小鼠受精卵早期发育过程中mTORC1对S6K1的Thr389磷酸化的影响

小鼠受精卵早期发育过程中mTORC1对S6K1的Thr389磷酸化的影响

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中国病理生理学会第九届全国代表大会及学术会议

作者：徐小燕于艳秋于秉治中国医科大学基础医学院病理生理学教研室中国医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的:对受精卵这一天然的细胞周期模型进行深入研究,有利于揭示细胞周期调控机制。小鼠受精卵是脊椎动物中与人类种属较为接近的细胞周期模型。我们发现mTOR的表达和活性在小鼠受精卵早期发育的过程中有变化,但是mTOR的作用底物及调节... 详细信息

目的:对受精卵这一天然的细胞周期模型进行深入研究,有利于揭示细胞周期调控机制。小鼠受精卵是脊椎动物中与人类种属较为接近的细胞周期模型。我们发现mTOR的表达和活性在小鼠受精卵早期发育的过程中有变化,但是mTOR的作用底物及调节机制还未明确。我们针对S6K1和Thr389位磷酸化S6K1的表达及亚细胞定位进行了探讨。通过使用shRNA干扰对应蛋白的表达,研究mTOR信号网络各分支在小鼠胚胎发育中对S6K1磷酸化的调控作用。方法:超排卵,RT-PCR,Western blotting,免疫荧光,显微注射。结果:S6K1表达没有明显变化,定位在1-细胞的胞浆中。Thr389磷酸化的S6K1在小鼠受精卵的G期和M期表达明显增高,主要定位在1-细胞胚胎的胞膜。S6K1与raptor存在共定位。削减mTOR或者raptor表达,可以明显抑制S6K1Thr389的磷酸化。结论:S6K1在整个1-细胞周期中有活性,并在G期和M期增强。Raptor亚基与mTOR结合可诱导S6K1的T389位磷酸化,并向细胞膜移动,参与受精卵的早期发育。

关键词：磷酸化受精卵早期发育 mTORC1 Thr389

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大鼠大脑皮质中Omi/HtrA2的年龄分布差异性及其可能的意义

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中国现代医生 2010年第21期48卷 9-13页

作者：刘静祎王可史瑞红秦华平高峰王晔赵欣刘慧荣张策山西医科大学细胞生理学省部共建教育部重点实验室山西太原030001 首都医科大学基础医学院病理生理学教研室北京100069

目的探讨年龄因素影响下大鼠大脑皮质细胞中Omi/HtrA2的表达差异及其与神经细胞凋亡的关系。方法采用正常成年及正常老年大鼠大脑皮质组织,经过Caspase-3、8、9、12活性检测和TUNEL法检测凋亡细胞;Western blot法检测Omi/HtrA2蛋白含量... 详细信息

目的探讨年龄因素影响下大鼠大脑皮质细胞中Omi/HtrA2的表达差异及其与神经细胞凋亡的关系。方法采用正常成年及正常老年大鼠大脑皮质组织,经过Caspase-3、8、9、12活性检测和TUNEL法检测凋亡细胞;Western blot法检测Omi/HtrA2蛋白含量变化;Real-timePCR法检测Omi/HtrA2 mRNA含量变化。结果衰老大鼠大脑皮质细胞凋亡明显高于成年大鼠,具体表现为:前者Caspase-3的比活性显著升高,阳性细胞凋亡数显著增高,与后者相比均有统计学差异(P<0.05)。与成年大鼠相比,衰老大鼠大脑皮质Caspase-9的比活性显著升高,二者相比差异有统计学意义(P<0.05);与成年大鼠相比,衰老大鼠大脑皮质Omi/HtrA2蛋白表达水平显著升高,二者相比差异有统计学意义(P<0.01);与成年大鼠相比,衰老大鼠大脑皮质Omi/HtrA2的mRNA水平也显著升高,二者相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论衰老大鼠大脑皮质凋亡水平增高,可能与Caspase-9途径活性增高以及Omi/HtrA2的基因和蛋白质表达水平增加有关。

关键词： Omi/HtrA2 衰老神经细胞凋亡

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地塞米松对实验性ARDS时细胞因子变化的影响

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新疆医科大学学报 2006年第4期29卷 296-299页

作者：黎静张建龙新疆医科大学第二附属医院呼吸内科新疆乌鲁木齐830028 基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830054

目的:探讨地塞米松在不同时间干预对兔油酸型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)血清TNF-α、IL-8及IL- 10的影响及治疗ARDS的理论基础。方法:经耳缘静脉注射油酸复制兔ARDS模型,用放射免疫及酶联免疫吸附试验测定血清中TNF-α、IL-8及IL-10水平... 详细信息

目的:探讨地塞米松在不同时间干预对兔油酸型急性呼吸窘迫综合征(ARDS)血清TNF-α、IL-8及IL- 10的影响及治疗ARDS的理论基础。方法:经耳缘静脉注射油酸复制兔ARDS模型,用放射免疫及酶联免疫吸附试验测定血清中TNF-α、IL-8及IL-10水平。结果:ARDS组兔血清TNF-α含量高于对照组(P<0．01);IL-8 含量与对照组相比无明显变化(P>0．05);而IL-10含量低于对照组(P<0．01)。不同时间应用地塞米松治疗后血清TNF-α、IL-8及IL-10均有不同的变化。结论:TNF-α、IL-8及IL-10在兔油酸型ARDS炎症过程中可能起重要作用。地塞米松可通过干预TNF-α、IL-8及IL-10分泌而减轻肺损伤。地塞米松干预时间与炎症的发生、发展存在一定关系。

关键词：急性呼吸窘迫综合征细胞因子地塞米松动物实验

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科研成果融入《病理生理学》课堂教学的探索

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中国继续医学教育 2024年第6期16卷 186-189页

作者：李晋唐薇薇申莲花袁冰舒徐尚福李丽娟遵义医科大学基础医学院医学仪器分析教研室贵州遵义563006 遵义医科大学病理生理学教研室贵州遵义563006 遵义医科大学药理学教研室贵州遵义563006

科研作为医学院校的重要组成部分,越来越多的高等院校关注如何将科研成果转化为教学资源的研究,将科研成果应用于教学成为医学教育中的一个重要课题。《病理生理学》是医学本科教学中的哲学,理论性强,同时兼顾实验性,学习难度较高且内... 详细信息

科研作为医学院校的重要组成部分,越来越多的高等院校关注如何将科研成果转化为教学资源的研究,将科研成果应用于教学成为医学教育中的一个重要课题。《病理生理学》是医学本科教学中的哲学,理论性强,同时兼顾实验性,学习难度较高且内容相对枯燥,因此,笔者在本课程的课堂教学过程中对如何建立科研成果与教学内容的联系与整体设计,如何将科研资源融入《病理生理学》课堂教学,使教学内容得以丰富和升华,形成教学与科研的良性互动,积极探索发展“科研反哺教学”进行了深刻的总结和反思,致力于推动《病理生理学》课堂教学革新,着力提高教育教学质量,不仅让学生透彻理解并掌握课堂教学内容,还能提升学生的科研思维能力,促进学生综合素质的全面提升,对医学生过渡进入研究生学习阶段具有重要意义。

关键词：科研成果课堂教学病理生理学医学生科研思维人才培养

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pEGFP-HuR真核表达载体的构建及热休克刺激后细胞内定位的改变

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新疆医科大学学报 2013年第7期36卷 933-937页

作者：于文燕艾斯克.吐拉洪周宁买买提祖农.买苏尔罗海华张传丽孙宏卫孙湛马小娟新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室乌鲁木齐830011 新疆医科大学第一附属医院肿瘤中心二科乌鲁木齐830054 新疆医科大学附属肿瘤医院内4科乌鲁木齐830011 南方医科大学病理生理学教研室广州510515

目的构建人抗原R(HuR)的绿色荧光真核表达载体,初步探讨其生物学功能。方法克隆构建pEGFP-HuR(绿色荧光蛋白HuR)真核表达载体,并使用脂质体转染的方法将pEGFP-HuR转染入NIH 3T3细胞,Western blotting(WB)检测其表达,并给予热休克处理,... 详细信息

目的构建人抗原R(HuR)的绿色荧光真核表达载体,初步探讨其生物学功能。方法克隆构建pEGFP-HuR(绿色荧光蛋白HuR)真核表达载体,并使用脂质体转染的方法将pEGFP-HuR转染入NIH 3T3细胞,Western blotting(WB)检测其表达,并给予热休克处理,利用荧光显微镜观察其在细胞内定位及与应激小体的共定位情况。结果 pEGFP-HuR真核表达载体构建成功,转染入细胞后,利用WB技术及荧光显微镜技术均能观察到其在细胞内高表达,并主要定位于细胞核内,给予热休克处理后,HuR向胞外移出并形成颗粒状小体,与应激小体的主要成分G3BP1蛋白存在共定位。结论 HuR主要定位于细胞核内,给予热休克处理后,HuR向胞外移动并与应激小体形成共定位,提示HuR定位的改变可能在应激时具有重要意义。

关键词：人抗原R 热休克细胞内定位

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培养科研能力的病理生理学实验教学探索

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基础医学教育 2021年第9期23卷 625-627页

作者：周鑫王彦杨艳萍牛利刘清华山西医科大学基础医学院病理生理学教研室太原030001 山西医科大学附属第一医院内分泌科

病理生理学在基础医学中具有举足轻重的地位,而实验教学内容是病理生理学的重要组成部分。为加强学生科研能力的培养及实践技能的提升,围绕病理生理学实验教学进行教学改革措施。通过培养学生的科研设计能力,锻炼学生的动手操作能力,树... 详细信息

病理生理学在基础医学中具有举足轻重的地位,而实验教学内容是病理生理学的重要组成部分。为加强学生科研能力的培养及实践技能的提升,围绕病理生理学实验教学进行教学改革措施。通过培养学生的科研设计能力,锻炼学生的动手操作能力,树立学生的科研诚信态度及创新精神,探索新的以科研能力培养为导向的新型教学模式,以充分调动学生的学习积极性,提升教学质量,提高实验教学效果。

关键词：病理生理学实验教学科研能力教学改革

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