目的研究活化的蛋白激酶C受体(Receptor for activated protein kinase C,RACK1)与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27生长增殖及其作用机制。方法采用Lipofect AMINE 2000在HGC27细胞中过表达RACK1,Western blotting检测HGC27细胞中W...
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目的研究活化的蛋白激酶C受体(Receptor for activated protein kinase C,RACK1)与蛋白激酶WEE1互作调控胃癌细胞株HGC27生长增殖及其作用机制。方法采用Lipofect AMINE 2000在HGC27细胞中过表达RACK1,Western blotting检测HGC27细胞中WEE1蛋白表达;免疫共沉淀验证RACK1和WEE1在HGC27细胞内存在相互作用;细胞内免疫荧光观测RACK1与WEE1在HGC27细胞中的表达定位情况。结果过表达RACK1后WEE1在胃癌细胞HGC27中的表达降低,RACK1与WEE1在HGC27细胞内存在相互作用且共定位在细胞质内。结论 RACK1与WEE1共同作用调控胃癌的发生发展过程,为RACK1成为临床上胃癌治疗的潜在靶点提供理论基础和实验依据。
目的探讨低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障过程中,caveolin-1对occludin表达及分布的影响。方法 Western blot检测occludin的表达,测量跨内皮细胞电阻值检测血肿瘤屏障通透性,双重免疫荧光染色法检测caveolin-1及occludin在脑微血管及...
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目的探讨低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障过程中,caveolin-1对occludin表达及分布的影响。方法 Western blot检测occludin的表达,测量跨内皮细胞电阻值检测血肿瘤屏障通透性,双重免疫荧光染色法检测caveolin-1及occludin在脑微血管及体外血肿瘤屏障内皮细胞内的定位表达。结果低频超声辐照后occludin表达及跨内皮细胞电阻随时间变化呈先下降后回升趋势,于低频超声辐照后1.5h,二者下降最为显著(P<0.01)。以低频超声辐照后1.5h为时间点,抑制caveolin-1的表达,occludin的表达增加(P<0.01),跨内皮电阻增高(P<0.05)。双重免疫荧光染色显示caveolin-1和occludin在正常和脑胶质瘤大鼠脑微血管共定位,在体外血肿瘤屏障内皮细胞膜上共定位;低频超声辐照后1.5h,caveolin-1在胞质中表达显著增多,并诱导occludin从胞膜转移至胞质。结论低频超声辐照选择性开放血肿瘤屏障的过程中,caveolin-1增加血肿瘤屏障通透性与下调occludin的蛋白表达并诱导其内化相关。
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