检索结果-内蒙古大学图书馆

国际遗传学杂志 2011年第3期34卷 123-126页

作者：曹丽华麻宏伟王述森王琳罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室中国医科大学附属盛京医院发育儿科

目的鉴定一个低磷酸盐血症性佝偻病家系的致病基因突变。方法采集患者外周静脉血,提取基因组DNA。PCR扩增PHEX基因22个外显子及外显子/内含子交界区序列,进行DNA测序分析。结果 DNA测序结果表明患儿PHEX基因第20内含子受体位点突变,IVS2... 详细信息

目的鉴定一个低磷酸盐血症性佝偻病家系的致病基因突变。方法采集患者外周静脉血,提取基因组DNA。PCR扩增PHEX基因22个外显子及外显子/内含子交界区序列,进行DNA测序分析。结果 DNA测序结果表明患儿PHEX基因第20内含子受体位点突变,IVS20-1G>T。结论 PHEX基因新剪接突变IVS20-1 G>T导致该家系低磷酸盐血症性佝偻病的发生。

关键词：低磷酸盐血症性佝偻病 PHEX 受体位点剪接突变

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病原体感染与铁代谢

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热带病与寄生虫学 2011年第4期9卷 240-242页

作者：韩甦张晓丽陈小贝张凤民哈尔滨医科大学基础医学院人体寄生虫学和微生物学教研室、黑龙江省病原生物学感染与免疫重点实验室哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生检验中心

铁(Iron)是人体必需的微量元素,广泛参与机体生命代谢活动,如通过催化氧化-还原反应参与细胞线粒体内电子传递和能量的代谢:参与构成血红蛋白、肌红蛋白在组织间协助氧和二氧化碳的运输:参与免疫反应、遗传物质DNA的合成等。铁缺乏会导... 详细信息

铁(Iron)是人体必需的微量元素,广泛参与机体生命代谢活动,如通过催化氧化-还原反应参与细胞线粒体内电子传递和能量的代谢:参与构成血红蛋白、肌红蛋白在组织间协助氧和二氧化碳的运输:参与免疫反应、遗传物质DNA的合成等。铁缺乏会导致机体贫血和免疫系统的损害;而铁沉积通过Fenton反应可增强自由基介导的氧化应激对组织和细胞造成损伤。由此可见,铁代谢与机体的生命活动密切相关。铁代谢的变化与病原体感染导致的疾病之间的关系正受到更多的关注。

关键词：铁代谢铁蛋白金属蛋白铁沉积病原体病原物

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小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议

作者：代炜李彦姝李妍孙长伏中国医科大学中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室口腔颌面头颈外科中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室细胞生物学卫生部重点实验室

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞内的表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/L,YRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序... 详细信息

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在涎腺腺样囊性癌细胞内的表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/L,YRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到人腺样囊性癌细胞ACC-2中,提取细胞蛋白进行Westernblot检测。利用免疫荧光显微镜观察

关键词： 3D3/LYRIC 涎腺腺样囊性癌 AEG-1

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GST-LM01融合蛋白表达载体的构建及其在原核细胞中的表达

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中国医科大学学报 2011年第11期40卷 961-963,978页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李慧李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室/细胞生物学教育部重点实验室/细胞生物学卫生部重点实验室沈阳110001 中国医科大学第94期临床医学系沈阳110001

目的:构建***01融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法:以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LM01基因全长及各个截短突变体,通过BamHI和EcoRI酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-... 详细信息

目的:构建***01融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法:以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LM01基因全长及各个截短突变体,通过BamHI和EcoRI酶切位点分别将其定向插入pGEX-5X-2载体中,构建原核表达质粒pGEX-5x-2-LM01及其截短突变体,通过酶切电泳鉴定和DNA序列测定正确后,转入***21中,经异丙基硫代B-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot鉴定。结果:酶切电泳及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5x-2-LM01及其截短突变体,并用Westernblot方法证实了GST-LM01全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论:成功构建了LM01全长及其截短突变体原核表达载体,并证实了其在原核细胞大肠埃希菌中的表达,为LM01结构与功能的研究提供了前提基础。

关键词：大肠杆菌谷胱甘肽转移酶基因表达突变限制性内切酶图谱法遗传载体原核细胞重组融合蛋白质类人类

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小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

小鼠3D3/LYRIC基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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2011国际暨全国第十一届头颈肿瘤学术大会

作者：代炜李彦姝李妍孙长伏中国医科大学附属口腔医院口腔颌面外科教研室口腔颌面-头颈外科中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌... 详细信息

目的:构建小鼠3D3/LYRIC真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位。方法:提取小鼠乳腺上皮细胞系C127的mRNA,反转录为cDNA。PCR扩增m3D3/LYRIC全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中。将构建的重组质粒测序并转染到腺样囊性癌细胞系ACC-2中,提取细胞蛋白进行Westernblot检测。利用免疫荧光显微镜观察pEGFP-m3D3/LYRIC在腺样囊性癌ACC-2细胞内定位。结果:m3D3/LYRIC全长基因序列克隆到了真核表达载体pEGFP-C1中,酶切鉴定片段大小1740bp。Westernblot检测到了融合蛋白GFP-m3D3/LYRIC表达,分子量约为91KD。pEGFP-C1-m3D3/LYRIC主要在细胞浆内定位,在细胞核内未见表达。结论成功构建了m3D3/LYRIC全长基因真核表达载体,pEGFP-m3D3/LYRIC蛋白主要定位于细胞浆内。

关键词： 3D3/LYRIC 腺样囊性癌 MTDH AEG-1

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不同胎龄人脐带血间充质干细胞研究

不同胎龄人脐带血间充质干细胞研究

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“细胞活动生命活力”——中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会

作者：马兰兰施萍庞希宁中国医科大学细胞生物学卫生部重点实验室干细胞与再生医学研究室中国医科大学基础医学院生理教研室中国医科大学附属第一医院全科医学教研室

目的:比较不同胎龄脐带血中MSCs数量和生长特性的差别,分析脐带血成功培养山MSCs的影响因素,探讨脐带血MSCs生物学特性。方法:应用单管多色荧光技术分析了不同胎龄脐带血中CD44、CD105阳性而CD34、CD45阴性细胞的数量,并提取脐带血中单... 详细信息

目的:比较不同胎龄脐带血中MSCs数量和生长特性的差别,分析脐带血成功培养山MSCs的影响因素,探讨脐带血MSCs生物学特性。方法:应用单管多色荧光技术分析了不同胎龄脐带血中CD44、CD105阳性而CD34、CD45阴性细胞的数量,并提取脐带血中单个核细胞进行培养和培养后免疫荧光染色。结果:52例脐带血中CD44(+)、CD105(+)/CD34(-)、CD45(-)细胞在10例28周～30周脐带血中的数量为15±0.2个/百万有核细胞;在12例31周～33周脐带血中为11±0.3个/百万有核细胞;在10例34周～36周脐带血中为10±0.1个/百万有核细胞;在10例37周～39周脐带血中为6±0.5个/百万有核细胞;在10例40周～42周脐带血中,为2±0.3个/百万有核细胞。37周～40周脐带血12份,28周～36周脐带血12例培养分别有1份和3份出现旋涡状排列的间充质样的细胞且免疫荧光染色呈CD45(-)和CD90(+)。结论:脐血中含有MSCs,随胎龄增加数量减少:胎龄小脐带血MSCs接种成功率高于胎龄大脐带血的接种成功率。

关键词：脐带血间充质干细胞流式细胞术

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组蛋白去乙酰化抑制剂在前列腺癌临床治疗中的研究进展

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国际外科学杂志 2011年第1期38卷 28-30页

作者：范博张开立郭恩忠大连医科大学附属第一医院泌尿一科大连116011 大连医科大学基础医学院细胞生物学教研室大连116044 中国医科大学附属盛京医院第二泌尿外科大连110004

组蛋白乙酰化和去乙酰化程度的失衡,可影响基因转录的正常进行,引起前列腺癌中抑癌基因的失活与原癌基因的激活,从而促进前列腺癌的发生.针对此现象,研究人员发现许多去乙酰化抑制剂可通过抑制组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性而促进前列... 详细信息

组蛋白乙酰化和去乙酰化程度的失衡,可影响基因转录的正常进行,引起前列腺癌中抑癌基因的失活与原癌基因的激活,从而促进前列腺癌的发生.针对此现象,研究人员发现许多去乙酰化抑制剂可通过抑制组蛋白去乙酰化酶（HDAC）活性而促进前列腺癌细胞的生长阻滞、分化及凋亡等,达到治疗目的,本文主要总结和回顾组蛋白乙酰化抑制剂在前列腺癌临床治疗方面的应用进展.

关键词：组蛋白乙酰化组蛋白乙酰化转移酶抑制剂前列腺癌

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hLMO3基因真核表达载体的构建及蛋白的表达和定位

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解剖科学进展 2011年第4期17卷 347-350页

作者：顾卉佟宇鑫刘彤李妍李丹妮袁正伟中国医科大学附属盛京医院实验研究中心辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物教研室细胞生物学教育部卫生部重点实验室辽宁沈阳110001 中国医科大学临床医学系辽宁沈阳110001

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进... 详细信息

目的构建hLMO3真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法以人胎脑文库cDNA为模板,PCR扩增hLMO3基因cDNA全长,亚克隆至pEGFP表达载体中。将构建的重组质粒进行酶切测序鉴定,并转染到人上皮细胞HEK293细胞中,提取细胞蛋白进行Western blot检测。利用激光扫描共聚焦显微镜观察pEGFP-hLMO3在HEK293细胞内的定位。结果 hLMO3基因cDNA全长克隆到了真核表达载体pEGFP中,酶切鉴定片段为440bp;Western blot检测到融合蛋白在HEK293细胞表达,分子量约为42kDa,pEGFP-LMO3在人HEK293细胞中主要定位于细胞核内。结论成功构建了hLMO3基因cDNA全长的真核表达载体,pEGFP-LMO3蛋白在HEK293细胞中主要定位于细胞核内。

关键词： hLMO3基因质粒构建基因表达与定位人HEK293细胞

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限制性片段长度多态性结合微流控芯片电泳检测大肠癌K-ras基因点突变

限制性片段长度多态性结合微流控芯片电泳检测大肠癌K-ras基因点...

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中华医学会医学细胞生物学分会第三届全国学术会议

作者：张惠丹宋瑾任辉徐章润王晓楠方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室医学细胞生物学教育部重点实验室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳 110001 沈阳市肛肠医院大肠外科沈阳 110002 东北大学分析科学研究中心沈阳 110004

目的 K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因.微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点.本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将限制... 详细信息

目的 K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因.微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点.本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将限制性片段长度多态性(RFLP)与微流控芯片相结合,建立将样品进样、分离、检测和记录等步骤连续自动处理的基因突变检测平台.方法 PCR扩增含有K-ras基因第一外显子的第12位密码子的片段,并进行Mva Ⅰ酶切,酶切产物以微流控电泳系统进行检测.采用光刻及高温封接技术制作通道为十字交叉形的玻璃微流控芯片,结合激光诱导荧光检测系统,建立微流控毛细管电泳技术平台.采用该平台对6种已知突变类型的大肠癌细胞系及98例大肠癌石蜡包埋组织中的K-ras基因突变进行检测.同时将大肠癌K-ras基因野生型细胞株HT29和纯合突变细胞株SW480以不同比例混合,研究系统的检测灵敏度.结果 RFLP结合微流控芯片电泳平台可在5 min内实现对K-ras基因的高效检测,6种大肠癌细胞系中K-ras基因的纯合突变、杂合突变及野生型均被准确检出.对不同比例野生型/纯合突变型混合细胞的检测显示系统的检测灵敏度可达1/10 000.该系统对98例石蜡包埋组织标本中K-ras的突变检出率为28.6％(28/98),显著高于测序的检出率13.3％(13/98).结论本研究建立的RFLP结合微流控芯片电泳平台能够对K-ras基因突变进行高效检测,具有灵敏度高、特异性强、快速和低成本等优势,为快速进行肿瘤基因突变筛查及早期诊断提供了新的技术平台.

关键词：微流控芯片限制性片段长度多态性大肠癌 K-ras基因点突变

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微小RNA在肿瘤诊治中的应用

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中华临床医师杂志（电子版） 2011年第16期5卷 4821-4823页

作者：范博白珊珊张亮张开立大连医科大学附属第一医院泌尿外一科 116044 大连医科大学附属第一医院普外三科 116044 辽宁省肿瘤医院肿瘤内一科大连医科大学基础医学院细胞生物学教研室

在小分子RNA家族中,微小RNA(miRNA)是一类存在于动植物中长度约为18～25个核苷酸的单链RNA,通过特异性结合靶mRNA引起相应基因沉默,抑制相关蛋白合成,从而进行转录后基因水平调控,参与生物发育的进行,维持细胞功能的稳定等,同时在肿瘤... 详细信息

在小分子RNA家族中,微小RNA(miRNA)是一类存在于动植物中长度约为18～25个核苷酸的单链RNA,通过特异性结合靶mRNA引起相应基因沉默,抑制相关蛋白合成,从而进行转录后基因水平调控,参与生物发育的进行,维持细胞功能的稳定等,同时在肿瘤的形成中扮演着双重角色:作为抑癌基因控制肿瘤的形成、转移与扩散,也可作为癌基因促进肿瘤的发生、

关键词： RNA 肿瘤细胞凋亡表达谱基因沉默癌细胞抑癌基因反义寡核苷酸

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