检索结果-内蒙古大学图书馆

中华创伤骨科杂志 2008年第7期10卷 665-669页

作者：李明罗深秋刘俊刘阳潘婷陈煜白晓春南方医科大学基础医学院实验教学中心广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 南方医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科

目的研究抗氧化剂VitC、VitE及还原型谷光甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢骨质疏松症大鼠骨生物力学及血清生化指标的影响，探讨抗氧化剂不同方案对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法4个月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧... 详细信息

目的研究抗氧化剂VitC、VitE及还原型谷光甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢骨质疏松症大鼠骨生物力学及血清生化指标的影响，探讨抗氧化剂不同方案对去卵巢大鼠骨质疏松症的治疗作用。方法4个月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检测体质量、子宫湿重、左侧股骨及腰椎骨密度、生物力学特性和血清生化指标Ca^2＋、肌肝（Cr）、碱性磷酸酶（ALP）水平，以确定骨质疏松模型建立成功。确定模型建立成功后，其余动物分为A（假手术）、B（去卵巢生理盐水对照组，OVX control）、C（VitC＋VitE）、D（GSH）、E（VitC＋VitE＋GSH）五组，每组10只。VitC[750mg／（kg·d）]、GSH[125mg／（kg·d）]腹腔注射，VitE[250mg／（kg·d）]灌胃，模型组每天以生理盐水腹腔注射。3个月后，检测各组动物左侧股骨及第5腰椎生物力学特性和血清生化指标。结果检测骨质疏松模型实验中，模型组动物同假手术组相比，体质量明显增加，子宫萎缩，子宫湿重显著降低，左侧股骨及腰椎骨密度明显降低，左侧股骨生物力学最大载荷显著降低，血清Ca^2＋、ALP、Cr水平升高。抗氧化剂治疗3个月后，与模型组相比，治疗组D、E组左侧股骨最大载荷、弹性载荷以及第5腰椎最大载荷均明显增加；血清ALP各组均显著降低；超氧化物歧化酶（SOD）、谷光苷肽过氧化物酶（GSH—Px）水平和血清抑制OH能力D、E组显著升高；丙二醛水平C、D组显著降低；各组血清Ca^2＋水平无明显改变。结论抗氧化剂用药组合GSH和GSH＋VitC＋VitE能明显改善骨生物力学最大载荷和弹性载荷及血清抗氧化指标抑制OH^-能力、SOD和GSH—Px，对骨质疏松具有较显著改善作用。

关键词：骨质疏松生物力学抗氧化剂大鼠

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PCR及Real-time PCR评价细菌DNA提取方法

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重庆医科大学学报 2008年第2期33卷 155-158页

作者：胡晓红彭惠民刘昕黄正根袁科重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 第三军医大学分子遗传学教研室重庆400038

目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提... 详细信息

目的:比较几种不同的细菌DNA提取方法,建立一种适于PCR和Real-time PCR的细菌DNA提取方法。方法:分别用蛋白酶K法、碱裂解法、Chelex-100+NP40、Chelex-100+TritonX-100法和水煮法提取同种浓度大肠杆菌DNA,测定OD260/280;用不同方法提取不同浓度的大肠杆菌DNA,进行PCR和实时荧光定量PCR扩增,比较灵敏度。结果:5种方法提取细菌DNA,其中Chelex-100+NP40法纯度(OD260/280=1.79±0.03)最高,此方法所提取的DNA产物进行PCR及Real-time PCR扩增未见假阳性及假阴性,其灵敏度为10个/ml细菌浓度。结论:Chelex-100+NP40的细菌DNA提取方法纯度及灵敏度高,且适应于PCR及Real-time PCR。

关键词： DNA提取 PCR 实时荧光定量PCR

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基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳系统对大肠癌中K-ras基因点突变的检测

基于微流控芯片的温度梯度毛细管电泳系统对大肠癌中K-ras基因点...

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第二届中国医学细胞生物学学术大会暨细胞生物学教学改革会议

作者：张惠丹宋瑾王晓楠徐章润戴敬方瑾中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室东北大学分析科学研究中心沈阳建筑大学信息与控制工程学院

K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因。微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点。本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将温度梯... 详细信息

K-ras基因点突变发生于早期腺瘤向中期腺瘤的转变阶段,可能是大肠癌恶变的始动基因。微流控芯片技术是近年迅速发展起来的新的微型分析系统,具有微型化、自动化、集成化及便携化的特点。本研究以K-ras基因点突变作为检测对象,将温度梯度毛细管电泳(TGCE)系统

关键词：微流控芯片温度梯度毛细管电泳大肠癌K-ras 基因点突变

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氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响

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齐齐哈尔医学院学报 2008年第22期29卷 2689-2691页

作者：钟德泰张琪邹宇牛英才徐文娣王军黑龙江省神经精神病防治院齐齐哈尔医学院中心实验室哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠... 详细信息

目的观察氟西汀对抑郁症模型大鼠海马组织Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响。方法采用慢性不可预见性的温和刺激结合孤养建立抑郁症动物模型。采用实时荧光定量PCR法检测大鼠大脑组织Bcl-2和Bax mRNA的表达。结果与正常对照组比较,模型组大鼠海马组织Bcl-2 2-ΔΔCt显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05),表明模型组大鼠海马组织Bcl-2 mRNA表达下调。与模型组比较,氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bax 2-ΔΔCt显著降低,表明Bax mRNA表达下调;而氟西汀高剂量组和氟西汀低剂量组Bcl-2 2-ΔΔCt显著升高,表明Bcl-2 mRNA表达上调。结论慢性不可预见性温和刺激结合孤养可诱导大鼠脑组织Bcl-2表达下调,而氟西汀通过抑制海马组织Bax mRNA的表达和促进Bcl-2 mRNA表达,进而减少神经细胞凋亡的作用。

关键词：细胞凋亡抑郁症氟西汀实时荧光定量PCR

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2型糖尿病相关单核苷酸多态性c/t位点相似性分析

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中国老年保健医学 2008年第1期6卷 29-31页

作者：陈思娇胡怡高阳周锡明马建忠赵雨杰宋今丹中国医科大学附属第一医院老年医学研究室 110001 中国医科大学基础医学院数学统计教研室 110001 中国医科大学基因芯片中心 110001 分子生物学研究所卫生部细胞生物学重点实验室 110001

2型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)具有明显的家族遗传特点,但它的基因起源很大程度上并未得到深入了解。几种遗传因素共同影响提高了患2型糖尿病及相关代谢性疾病的风险性。通过对与2型糖尿病相关联的单核苷酸多态性位点(SNPs)做相似性... 详细信息

2型糖尿病(非胰岛素依赖型糖尿病)具有明显的家族遗传特点,但它的基因起源很大程度上并未得到深入了解。几种遗传因素共同影响提高了患2型糖尿病及相关代谢性疾病的风险性。通过对与2型糖尿病相关联的单核苷酸多态性位点(SNPs)做相似性分析来揭示2型糖尿病的基本机制,并作为标记来定位和识别与这一疾病相关的基因。

关键词：糖尿病单核苷酸多态性相似性分析系统进化树

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bFGF促进人大肠癌LoVo细胞增殖的信号转导机制

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世界华人消化杂志 2007年第1期15卷 34-38页

作者：周颖王桂玲中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁省沈阳市110001

目的:通过改变碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作用于LoVo细胞的时间,检测PKB活性和CyclinA的表达情况,进一步研究bFGF通过PI3-K/PKB通路调控大肠癌细胞生长的信号转导机制.方法:MTT法分析bFGF对LoVo细胞增殖程度的影响;(γ-32P)ATP掺入... 详细信息

目的:通过改变碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)作用于LoVo细胞的时间,检测PKB活性和CyclinA的表达情况,进一步研究bFGF通过PI3-K/PKB通路调控大肠癌细胞生长的信号转导机制.方法:MTT法分析bFGF对LoVo细胞增殖程度的影响;(γ-32P)ATP掺入法检测大肠癌LoVo细胞株中PKB的活性;RT-PCR法检测大肠癌LoVo细胞株中CyclinA的表达;Westernblot法检测bFGF作用LoVo细胞后CyclinA的表达.结果:bFGF以不同时间作用于LoVo细胞时,通过(γ-32P)ATP掺入法检测发现其可提高细胞PKB活性,PI3-K的抑制剂LY294002预处理后再施加bFGF,可显著降低PKB的活性,两者相比差异显著[704.32±12.35pmol/(mg·min)vs1352.79±19.85pmol/(mg·min),P<0.05].bFGF刺激LoVo细胞时CyclinA蛋白和CyclinAmRNA表达均高于其他各施加因素组,而PI3-K的抑制剂LY294002组的CyclinA蛋白和CyclinAmRNA明显降低.结论:bFGF刺激大肠LoVo细胞后可通过依赖PI3-K/PKB途径调节CyclinA的转录活性,促进其表达,进而促进细胞增殖.

关键词：碱性成纤维细胞生长因子蛋白激酶B Cyclin A 大肠癌

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滑菇多糖对K562白血病细胞增殖的抑制及Caspase-3基因表达的影响

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第四军医大学学报 2007年第15期28卷 1393-1396页

作者：赵俊霞郑力芬赵娟申园王彦玲闫蕴力河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室河北石家庄050017

目的:研究滑菇多糖(PNP)的抗肿瘤作用及诱导K562细胞凋亡的机制.方法:采用MTT法检测PNP对K562细胞增殖的抑制作用;绘制生长曲线;Hochest33258染色计算凋亡率;RT-PCR法、Western Blot方法检测凋亡相关基因Caspase-3的表达.结果:MTT分析表... 详细信息

目的:研究滑菇多糖(PNP)的抗肿瘤作用及诱导K562细胞凋亡的机制.方法:采用MTT法检测PNP对K562细胞增殖的抑制作用;绘制生长曲线;Hochest33258染色计算凋亡率;RT-PCR法、Western Blot方法检测凋亡相关基因Caspase-3的表达.结果:MTT分析表明,PNP作用48h后可明显抑制K562细胞的增殖;Hochest染色结果显示,PNP能诱导K562细胞出现典型的凋亡形态,且凋亡率随多糖浓度增加而增大,经PNP100,200,400mg/L的处理后,凋亡率分别是对照组的3.15,6.55和8.62倍.PNP能诱导凋亡相关基因Caspase-3在 mRNA水平上的表达;Western Blot显示PNP能诱导Caspase-3编码蛋白的表达,且随多糖浓度的增加表达量增加.结论:PNP对K562细胞增殖有抑制作用,并能促进其凋亡;PNP通过诱导凋亡相关基因Caspase-3表达促进细胞凋亡.

关键词：滑菇多糖 K562细胞白血病增殖凋亡 Caspase-3基因

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大鼠海马内注射β淀粉样蛋白对脑内小胶质细胞活化和神经元凋亡的影响

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中华老年医学杂志 2007年第1期26卷 43-46页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市110001

目的观察脑内β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42注射至大鼠双侧海马，对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后3、7、14d，用免疫组织化学和免疫荧光法检测... 详细信息

目的观察脑内β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42注射至大鼠双侧海马，对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后3、7、14d，用免疫组织化学和免疫荧光法检测CD11b、MHCⅡ及活化caspase-3的表达。结果海马内注射Aβ1-42后3d，大鼠脑内CD11b和MHCⅡ阳性小胶质细胞数量[分别为（345．22±75．86）和（200．22±42．88）]，较PBS组[分别为（98．61±20．79）和（35．43±12．46）]和Aβ42-1组[分别为（103．44±22．13）和（43．41±15．63）3明显升高（P〈0．01），7d达到高峰[分别为（486．22±81．51）和（223．62±66．99）]，表现为明显的激活状态。注射后3d，大脑皮质、海马的活化caspase-3阳性细胞数量（132．42±31．80）比PBS组（4．41±3．13）和AB㈨组（4．85±3．70）明显升高（P〈0．01），7d后更明显（165．24±33．95），以海马更为显著。结论海马内注射A？可以诱导小胶质活化和神经细胞凋亡，有可能作为研究阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）发病早期的动物模型。

关键词：淀粉样β蛋白小神经胶质细胞细胞凋亡阿尔茨海默病

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阻断磷脂酶C-γ1信号通路对大肠癌细胞株LoVo细胞增殖与凋亡的影响

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癌症 2007年第9期26卷 957-962页

作者：刘俊李明程宝鸾曾位森邹志鹏罗深秋广州军区广州总医院泌尿外科广州军区泌尿外科研究所广东广州510010 南方医科大学基础医学院实验教学管理中心广东广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515

背景与目的:磷脂酶C-γ1(phospholipase C gamma1,PLC-γ1)是跨膜信号转导中关键和重要的一个信号中介,是细胞增殖与细胞凋亡调控的一个重要分子,最近研究发现它在大肠癌等许多肿瘤组织中呈过表达状态,与肿瘤的发生、发展有密切关系。... 详细信息

背景与目的:磷脂酶C-γ1(phospholipase C gamma1,PLC-γ1)是跨膜信号转导中关键和重要的一个信号中介,是细胞增殖与细胞凋亡调控的一个重要分子,最近研究发现它在大肠癌等许多肿瘤组织中呈过表达状态,与肿瘤的发生、发展有密切关系。本研究主要探讨阻断PLC-γ1信号通路后对大肠癌LoVo细胞增殖、凋亡的影响,及其上述影响的信号机制。方法:以人大肠癌LoVo细胞作为研究模型,利用PLC-γ1特异的化学阻断剂U73122处理以阻断LoVo细胞中PLC-γ1信号通路,通过绘制细胞生长曲线、PI单染的流式细胞仪检测细胞周期而评估对其细胞增殖的影响,通过细胞形态观察及DNA片段琼脂糖凝胶电泳评估是否启动细胞凋亡,同时检测阻断PLC-γ1信号通路后HSP70、Caspase-3表达水平的变化来探讨可能的信号机制。结果:阻断PLC-γ1信号通路明显减缓大肠癌LoVo细胞的生长,其细胞增殖抑制率随药物作用时间和浓度的增加逐渐增高,10μmol/LU73122作用24、48h后其抑制效果可分别达到35%和45%,使LoVo细胞G1期细胞比例增加,而S期细胞比例降低,延缓细胞从G1期向S期的过渡,即抑制细胞周期的进行,阻断PLC-γ1信号通路后LoVo细胞未能出现凋亡特征性的形态学改变,DNA琼脂糖凝胶电泳未能检测到凋亡特征的梯状带的出现,不能引起Caspase-3的激活,同时PLC-γ1信号通路的阻断可上调HSP70的表达水平,HSP70的分子伴侣作用可能是其抑制大肠癌细胞周期进行的机制。结论:阻断磷脂酶C-γ1信号通路能够抑制大肠癌LoVo细胞的过度增殖、抑制其细胞周期的进行,其机制可能是通过上调热休克蛋白70的表达水平而实现,但不能启动LoVo细胞凋亡,磷脂酶C-γ1不是调控LoVo细胞凋亡的关键信号分子。

关键词：大肠肿瘤磷脂酶C-γ1 细胞增殖细胞凋亡信号转导

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曲古菌素A在胃腺癌细胞系SGC-7901中的作用

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中华胃肠外科杂志 2007年第4期10卷 376-379页

作者：李云龙邹小明郭宝良李晓林闫朝岐尤立光傅松滨哈尔滨医科大学附属第二医院普通外科 150086 哈尔滨医科大学附属第五医院普通外科哈尔滨医科大学附属第二医院基础医学院医学遗传学与生物学教研室 150086

目的研究曲古菌素A（TSA）在胃腺癌细胞系SGC-7901中的作用。方法四甲基偶氮唑蓝法测定TSA对SGC-7901的细胞毒性，荧光显微镜观察细胞核DNA的变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率，Western印迹检测组蛋白H3的乙酰化状态。结果SGC-790... 详细信息

目的研究曲古菌素A（TSA）在胃腺癌细胞系SGC-7901中的作用。方法四甲基偶氮唑蓝法测定TSA对SGC-7901的细胞毒性，荧光显微镜观察细胞核DNA的变化，流式细胞仪检测细胞周期和凋亡率，Western印迹检测组蛋白H3的乙酰化状态。结果SGC-7901细胞生长曲线表明，TSA浓度增高，细胞生长率下降。细胞凋亡率在75ng／mlTSA作用72h时与对照组比较，差异有统计学意义（P〈0．05）。凋亡细胞DNA变化主要表现为核染色质固缩及断裂，荧光染色增强。流式细胞仪分析出现明显的亚G1期峰，G1期细胞减少，细胞凋亡率达29．54％。TSA作用后，乙酰化的组蛋白如明显增多。结论TSA可以诱导SGC-7901细胞发生凋亡，组蛋白H3的乙酰化状态可能与细胞凋亡有关。

关键词：胃肿瘤曲古菌素A 细胞凋亡乙酰化组蛋白H3 细胞系SGC-7901

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