检索结果-内蒙古大学图书馆

华西药学杂志 1990年第3期5卷 161-164页

作者：胡火珍邢一玲陶大昌郑雪莲杨正菀范佳清靳洪武华西医科大学基础医学院生物学与细胞生物学教研室成都610041 华西医科大学药学院药理学教研室

作者用鼠伤寒沙门氏菌回变试验,小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验,对白障明进行了诱变性试验研究。结果表明鼠伤寒沙门氏菌回变试验为阴性,该药可能不诱发基因突变,NIH小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验均... 详细信息

作者用鼠伤寒沙门氏菌回变试验,小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验,对白障明进行了诱变性试验研究。结果表明鼠伤寒沙门氏菌回变试验为阴性,该药可能不诱发基因突变,NIH小鼠骨髓红细胞微核试验及CHL细胞染色体畸变试验均为阴性,说明该药可能不诱发体内,体外染色体损伤作用。

关键词：白障明诱变性试验白内障

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吗啡诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型的研究

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中国药理学通报 2013年第11期29卷 1614-1617页

作者：彭菊刘伟罗超华陈小辉张文清莫志贤南方医科大学中医药学院中药药理学教研室广东广州510080 南方医科大学基础医学院细胞生物教研室广东广州510080

目的建立吗啡诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型,探讨诱导斑马鱼形成位置偏爱的最佳条件。方法根据条件性位置偏爱(CPP)原理和斑马鱼的生物学特性,对斑马鱼的天然偏爱进行测定后,腹腔注射不同浓度的吗啡,并与非偏爱箱(伴药箱)进行搭配;随... 详细信息

目的建立吗啡诱导的斑马鱼条件性位置偏爱模型,探讨诱导斑马鱼形成位置偏爱的最佳条件。方法根据条件性位置偏爱(CPP)原理和斑马鱼的生物学特性,对斑马鱼的天然偏爱进行测定后,腹腔注射不同浓度的吗啡,并与非偏爱箱(伴药箱)进行搭配;随之,斑马鱼注射等体积生理盐水,与偏爱箱进行搭配。经过连续3次的训练,观察吗啡诱导的斑马鱼CPP效应。结果斑马鱼注射40～50μg·g-1吗啡并进行连续3次CPP训练,能诱导其在伴药箱中的活动时间增加,与训练前相比,差异有显著性(P<0.01),与生理盐水组相比,差异也具有显著性(P<0.01)。结论斑马鱼进行腹腔注射给药40～50μg·g-1吗啡,并进行连续3次训练,能形成明显的CPP。

关键词：斑马鱼吗啡条件性位置偏爱药物依赖注射精神依赖

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叉头样转录因子3和白细胞介素10在慢性根尖周炎组织中的表达研究

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实用口腔医学杂志 2019年第5期35卷 653-657页

作者：吕广应刘乙臻张秀梅王琳源锦州医科大学附属第二医院牙周黏膜门诊 121000 锦州医科大学基础医学院细胞生物教研室

目的:探讨Treg细胞相关因子叉头样转录因子3(forkhead box P3,Foxp3)、白细胞介素10(Interleukin-10, IL-10)在慢性根尖炎中的表达情况。方法:收集15例慢性根尖周炎患牙的根尖病损组织作为实验组,15例需要拔除第三磨牙的健康牙龈组织作... 详细信息

目的:探讨Treg细胞相关因子叉头样转录因子3(forkhead box P3,Foxp3)、白细胞介素10(Interleukin-10, IL-10)在慢性根尖炎中的表达情况。方法:收集15例慢性根尖周炎患牙的根尖病损组织作为实验组,15例需要拔除第三磨牙的健康牙龈组织作为对照组,采用RT-PCR和Western blot法检测Foxp3、IL-10 mRNA和蛋白的表达情况。结果:实验组根尖病损组织中Foxp3、IL-10 mRNA和蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:在慢性根尖周炎中Treg细胞介导免疫应答增强,表明Treg细胞参与慢性根尖周炎的发病过程。

关键词： Treg细胞慢性根尖周炎 Foxp3 IL-10

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靶向ADAM17基因siRNA对前列腺癌PC-3细胞增殖能力的影响

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中华男科学杂志 2012年第8期18卷 687-691页

作者：林锋林平刘鑫李栋刘紫君邹海峰姜颖赵雪飞冯金发于晓光哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨靶向抑制ADAM17基因对雄激素非信赖性前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法:应用ADAM17 siRNA转染PC-3细胞后,通过RT-PCR、Western印迹方法分别检测ADAM17 mRNA和蛋白表达变化;MTT、BrdU掺入法检测下调ADAM17对PC-3细胞的增殖和DN... 详细信息

目的:探讨靶向抑制ADAM17基因对雄激素非信赖性前列腺癌PC-3细胞增殖的影响。方法:应用ADAM17 siRNA转染PC-3细胞后,通过RT-PCR、Western印迹方法分别检测ADAM17 mRNA和蛋白表达变化;MTT、BrdU掺入法检测下调ADAM17对PC-3细胞的增殖和DNA合成能力的影响;流式细胞术检测ADAM17 siR-NA对PC-3细胞细胞周期的影响;Western印迹检测下调ADAM17对PC-3细胞增殖相关基因表达的影响。结果:两对ADAM17 siRNAs均可有效地降低PC-3细胞ADAM17 mRNA和蛋白的表达;MTT结果显示与对照组(0.80±0.51)相比,两对ADAM17 siRNAs均可显著抑制细胞的生长(0.43±0.57、0.44±0.64,P均<0.05);Br-dU掺入实验显示与对照组(0.79±0.72)相比,ADAM17 siRNAs均能显著下调DNA的合成能力(0.48±0.43、0.54±0.59,P<0.05);流式细胞术结果显示,与对照组(41.38±1.53)%相比,ADAM17 siRNAs可显著增加G1期细胞数量[(61.83±2.41)%、(59.78±1.92)%,P均<0.05]、降低S期细胞数量[从(33.51±1.47)%减少到(23.64±2.56)%、(25.24±1.86)%,P均<0.05],同时伴随着cyclin D1蛋白的表达下降而p21蛋白的表达升高。结论:ADAM17 siRNA可以通过下调cyclin D1、上调p21的表达而抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,ADAM17可能成为前列腺癌基因治疗的靶点。

关键词：前列腺癌 ADAM17 PC-3细胞 cyclin D1 p21

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DNA甲基转移酶DNMT3A在人类常见病毒感染中的研究进展

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病毒学报 2023年第2期39卷 589-598页

作者：王绪萌于鑫翟爱霞王燕哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室哈尔滨150081 中山大学附属第八医院深圳518000

DNA甲基转移酶(DNA methylationtransferases,DNMTs)是哺乳动物建立与维持基因甲基化的酶类家族,参与基因表达和调控等生物学过程。其中DNA甲基转移酶3A(DNA methyltransferase 3 Alpha,DNMT3A)是机体重要DNMTs之一,DNMT3A突变或异常表达所诱导的基因甲基化引起机体相关因子活性失调进而诱发疾病发生,DNMT3A介导的基因甲基化与人类常见病毒感染所致疾病密切相关。本篇综述从人类常见病毒感染宿主的角度出发,对DNMT3A在促进病毒感染与诱发疾病中的作用进行阐述,为进一步探究以DNMT3A为病毒感染性疾病治疗靶点提供参考和思路。

关键词： DNA甲基转移酶 DNA methyltransferase 3 Alpha(DNMT3A) 人类常见病毒

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抑制Hmga2促进小鼠脂肪间充质干细胞成骨分化并加速骨缺损修复

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南方医科大学学报 2024年第7期44卷 1227-1235页

作者：柯志勇黄子城何若琳张倩陈思旭崔忠凯丁晶南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 上海交通大学医学院附属新华医院儿骨科上海200092

目的探讨高迁移率族蛋白A2(HMGA2)在脂肪间充质干细胞(ADSCs)成骨分化进程中的作用及其在骨缺损修复中的应用。方法通过GEO数据库和Rstudio软件,挖掘出在ADSCs“成脂-成骨”分化平衡中的关键节点因子HMGA2,并通过在线蛋白互作网络分析工... 详细信息

目的探讨高迁移率族蛋白A2(HMGA2)在脂肪间充质干细胞(ADSCs)成骨分化进程中的作用及其在骨缺损修复中的应用。方法通过GEO数据库和Rstudio软件,挖掘出在ADSCs“成脂-成骨”分化平衡中的关键节点因子HMGA2,并通过在线蛋白互作网络分析工具String和绘图软件Cytoscape,绘制HMGA2在成骨分化中的互作关系网络,预测其下游作用靶点。设计Hmga2 siRNA并转染小鼠原代脂肪间充质干细胞(mADSCs),诱导其体外成骨分化,在不同时间点(Day 3,Day 7,Day 14)收集样本,通过碱性磷酸酶染色和茜素红染色评估成骨分化能力,并通过RT-qPCR和Western blotting检测成骨特异性标志物Runt相关转录因子2(RUNX2)、骨桥蛋白(OPN)和骨钙素(OCN)的表达。将敲低Hmga2的mADSCs移植至小鼠不可自愈合颅骨缺损处,术后6周通过μCT扫描、骨组织学染色检测成骨标志物,评价骨缺损修复效果。结果GEO数据库分析结果显示HMGA2在ADSCs成脂分化进程中表达上调。蛋白互作网络分析提示在ADSCs成骨分化中,HMGA2的潜在作用靶点包括SMAD7、CDH1、CDH2、SNAI1、SMAD9、IGF2BP3、ALDH1A1。抑制Hmga2后,mADSCs中成骨分化相关标志物RUNX2、OPN和OCN的表达显著上调,且碱性磷酸酶的表达和钙结节的形成增加(P<0.05)。在小鼠颅骨缺损模型中,敲低Hmga2促进了骨缺损部位的新骨形成(P<0.05)。结论HMGA2是调控ADSCs成骨分化的重要因子,抑制Hmga2能显著促进ADSCs成骨分化,并加速体内骨缺损的修复。

关键词：脂肪间充质干细胞高迁移率族蛋白A2 成骨分化骨缺损修复

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苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡

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南方医科大学学报 2008年第3期28卷 478-480页

作者：张翠梅高建慧李德乐李璟施玉麒林骏罗深秋南方医科大学附属中山市博爱医院儿保科广东中山528403 南方医科大学基础医学院细胞生物教研室广东广州510515

目的体外研究苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随的细胞凋亡改变。方法体外培养K562细胞,采用不同浓度的苦参碱诱导K562细胞4d,分别采用倒置显微镜、透射电子显微镜观察诱导前后细胞的形态学和超微结构改变,进一步采用免疫细胞化学方法... 详细信息

目的体外研究苦参碱诱导K562细胞向红系分化伴随的细胞凋亡改变。方法体外培养K562细胞,采用不同浓度的苦参碱诱导K562细胞4d,分别采用倒置显微镜、透射电子显微镜观察诱导前后细胞的形态学和超微结构改变,进一步采用免疫细胞化学方法检测细胞周期调控蛋白p27kip1表达变化。结果与阴性对照组K562细胞相比,0.10g/L浓度的苦参碱诱导后K562细胞形态学和超微结构均显示有凋亡特征,同时细胞内p27kip1蛋白表达明显增加。结论苦参碱在体外诱导K562细胞向红系分化伴随凋亡,可能与p27kip1蛋白表达增加相关。

关键词：苦参碱 K562细胞细胞分化细胞凋亡

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肺孢子虫(菌)p55抗原嵌合基因的克隆及表达产物分析

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中国人兽共患病学报 2011年第9期27卷 774-777,786页

作者：王雪莲栾和芝刘彤赵雨杰安春丽中国医科大学基础医学院病原生物学教研室沈阳110001 秦皇岛港口医院检验科秦皇岛066000 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001 中国医科大学基础医学院生物芯片中心沈阳110001

目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则... 详细信息

目的构建肺孢子虫(菌)p55蛋白嵌合基因的原核表达载体,分析、鉴定及纯化表达产物。方法自NCBI网站的蛋白数据库中获取p55抗原及4个变异体信息,运用生物信息学方法预测可能的抗原表位,设计包含多个可能抗原表位的多肽,根据遗传中心法则及大肠杆菌密码子偏好性进行密码子优化,将氨基酸序列转化为核苷酸序列,将人工合成的嵌合基因(CAG)片段连接到质粒pGEX-6p-1(含GST标签)上,构建原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,酶切、测序鉴定。pGEX-6p-1/CAG转化大肠杆菌,异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达重组融合蛋白CAG-GST。表达产物用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)及Western-blotting分析鉴定。结果双酶切及测序结果显示重组质粒pGEX-6p-1/CAG构建成功。SDS-PAGE显示重组融合蛋白相对分子量约为69 000。Western-blotting结果显示,表达的融合蛋白为CAG-GST。结论成功构建表达p55蛋白嵌合基因的原核表达载体pGEX-6p-1/CAG,建立表达重组蛋白的原核表达系统。

关键词：肺孢子菌 p55蛋白嵌合基因重组融合蛋白

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Ser176/180磷酸化位点突变的IKKα真核表达载体的构建及鉴定

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细胞与分子免疫学杂志 2015年第9期31卷 1162-1166页

作者：何岩郑倩倩朱亚勤教育部医学细胞生物学重点实验室细胞病理生物学研究室中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的构建Ser176/180磷酸化位点突变的核因子κB抑制剂激酶α(IKKα)真核表达载体。方法通过PCR获得带有IKKαSer176/180突变位点和无义突变KpnⅠ位点的片段,以及带有无义突变KpnⅠ位点的片段,两片段分别经过HindⅢ/KpnⅠ以及KpnⅠ/EcoR... 详细信息

目的构建Ser176/180磷酸化位点突变的核因子κB抑制剂激酶α(IKKα)真核表达载体。方法通过PCR获得带有IKKαSer176/180突变位点和无义突变KpnⅠ位点的片段,以及带有无义突变KpnⅠ位点的片段,两片段分别经过HindⅢ/KpnⅠ以及KpnⅠ/EcoRⅠ双酶切,载体pEGFP经HindⅢ/EcoRⅠ双酶切后连接。共聚焦显微镜技术观察激活型/死型p EGFPIKKαKA/KD融合蛋白在真核细胞中的定位及其对P65核质易位的影响。Western blot法检测重组蛋白表达。结果测序显示载体构建成功。pEGFP-IKKαKA分布在细胞核和细胞质,并能使P65发生核穿梭。pEGFP-IKKαKD主要分布在细胞质,不能使P65发生核质易位。Western blot结果显示出融合蛋白的特异性条带。结论成功构建IKKα磷酸化位点激活型及死型的真核表达载体,在真核细胞中可有效表达。pEGFP-IKKαKA/KD在真核细胞中蛋白表达呈现不同定位,对下游P65的核质穿梭调控发挥不同效应。

关键词：核因子κB抑制剂激酶α 激酶突变型真核表达载体

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siIRE1α重组腺病毒对内质网应激介导凋亡的影响

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第三军医大学学报 2014年第11期36卷 1147-1152页

作者：韩晓凤李美玲张鹏夏飞郭风劲 400016重庆重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室

目的构建内质网跨膜蛋白肌醇酶1α(inositol-requiring enzyme 1 α,IRE1α)基因干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)重组腺病毒,并探讨内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)状态下其对C2C12细胞增殖凋亡的影响.方法人工合成靶向IRE1α的siRNA序列,连接到穿梭载体pSES-HUS上,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1在大肠杆菌BJ5183感受态中进行同源重组,得到pAdSES-HUS-IRE1αsiRNA重组质粒.通过脂质体介导在HEK293细胞中包装并扩增重组腺病毒Ad-IRE1α siRNA,在C2C12细胞中采用RT-PCR和Western blot检测其干扰效果,并通过FCM法和MTT检测Tm诱导ERS时病毒对C2C12细胞增殖凋亡的影响(分为4组:NC组、Tm单独处理组、Tm+ Ad-RFP组和Tm+ Ad-IRE1 α siRNA组),Western blot检测C2C12细胞中Cleaved Caspase-3和Chop蛋白的表达.结果成功获得了病毒滴度约为4.3×1011 PFU/mL的重组腺病毒Ad-IRE1α***-PCR和Western blot检测结果表明,该重组腺病毒有效地抑制了C2C12细胞中IRE1α的表达.FCM检测结果表明,ERS条件下,Tm+ Ad-IRE1α siRNA组S期的细胞比例分别比Tm单独处理组和Tm+ Ad-RFP组升高12.62％和14.80％ (P ＜0.05);凋亡率比Tm单独处理组和Tm+ Ad-RFP组降低16.64％和16.26％ (P ＜0.05).MTT实验结果与Cleaved Caspase-3和Chop蛋白的表达与FCM结果一致.结论重组腺病毒Ad-IRE1α siRNA在C2C12细胞中能有效抑制IRE1 α的表达;ERS状态下,RNA干扰IRE1α基因可促进C2C12细胞的增殖,抑制其凋亡.

关键词： IRE1α RNA干扰重组腺病毒 C2C12细胞增殖和凋亡

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