检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2011年第6期40卷 484-486页

作者：王桂玲陈薇姜佩佳王孝会中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的构建GST-C/EBPα融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-C/EBPα为模板,用PCR法扩增C/EBPα全长及各个截短片段,通过EcoRI和XhoI酶切位点将C/EBPα全长及各个截短突变体定向插入pGEX-5X-1中,构建原... 详细信息

目的构建GST-C/EBPα融合蛋白表达载体,并在大肠埃希菌(***)中诱导表达。方法以质粒pcDNA3.1-C/EBPα为模板,用PCR法扩增C/EBPα全长及各个截短片段,通过EcoRI和XhoI酶切位点将C/EBPα全长及各个截短突变体定向插入pGEX-5X-1中,构建原核表达质粒pGEX-5X-1-C/EBPα及其截短突变体,并转化*** DH5α,筛选阳性重组子,限制性内切酶酶切鉴定和DNA序列测定正确后,转入*** BL21中,异丙基硫代β-D半乳糖苷诱导表达,SDS-PAGE和SDS-PAGE鉴定。结果酶切及测序结果证明,成功构建了原核表达质粒pGEX-5X-1-C/EBPα及其截短突变体,并用SDS-PAGE方法证实了GST-C/EBPα全长及各个截短突变体融合蛋白的表达。结论成功构建了C/EBPα原核表达载体及其截短突变体,并证实了融合蛋白的表达,为进一步纯化C/EBPα蛋白和研究C/EBPα的生物学功能奠定了基础。

关键词： CCAAT增强子结合蛋白α 截短突变体质粒原核表达

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沉默核糖核酸酶抑制因子促进膀胱癌BIU-87细胞生长和转移潜能

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第三军医大学学报 2011年第22期33卷 2357-2360页

作者：陈俊霞高娟朱军姜蓉重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室重庆400016

目的研究沉默核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达,对人膀胱癌BIU-87细胞增殖和侵袭能力及肿瘤生长的影响。方法通过用RI mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染膀胱癌BIU-87细胞,... 详细信息

目的研究沉默核糖核酸酶抑制因子(ribonuclease inhibitor,RI)基因表达,对人膀胱癌BIU-87细胞增殖和侵袭能力及肿瘤生长的影响。方法通过用RI mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染膀胱癌BIU-87细胞,通过筛选、鉴定后,用Am-blue法检测细胞增殖能力及用Western blot分析细胞中MMP-2和MMP-9的表达。将siRNA RI BIU-87(实验组)及对照组细胞皮下注射到BALB/c裸鼠中,观察肿瘤的生长和肿瘤微血管密度的变化,以及nm23-H1和E-cadherin在肿瘤中的表达。结果 RI基因表达下调显著增加了细胞的增殖,而且显著增强了MMP-2和MMP-9的表达。动物实验结果显示,实验组显著促进了肿瘤的生长(促瘤增长率31.85%),具有更大的瘤质量和更高的肿瘤微血管密度以及更低的nm23-H1和E-cadherin的表达。结论抑制RI基因的表达能显著提高膀胱癌细胞的生长和侵袭潜能,RI可能作为治疗膀胱癌的靶蛋白。

关键词：核糖核酸酶抑制因子膀胱癌细胞肿瘤生长转移

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人牛精浆蛋白相关新基因的cDNA克隆、定位和表达

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中国生物化学与分子生物学报 2002年第2期18卷 191-196页

作者：罗阳张学刘莹姜莉刘兴元于秉治中国医科大学基础医学院生物化学教研室沈阳110001 中国医科大学卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了... 详细信息

为了研究牛精浆 (bovineseminalplasma ,BSP)蛋白及其相关蛋白在受精及受精卵发育中的重要作用 ,寻找BSP蛋白相关新基因 .采用cDNA末端快速扩增 (RACE)技术 ,克隆了一个BSP蛋白相关基因的cDNA序列 .应用辐射杂种细胞系 (RH)技术进行了基因染色体定位 .通过RT PCR检测了该基因在人体各组织中的表达情况 .并将该基因编码的蛋白进行了原核表达 .新基因的cDNA长度为 10 5 2bp ,其开放阅读框架 (ORF)编码了一个含 2 2 3个氨基酸残基的蛋白质 ,氨基酸序列中含有 4个纤连蛋白Ⅱ结构域 ,与BSP蛋白在结构上具有一定的相似性 ,称其为人BSP相关蛋白 (humanBSP relatedproteins ,HBRP) .该基因定位于染色体 19q13,在大肠杆菌中表达为 5 2kD的融合蛋白 .研究结果提示 ,应用RACE方法克隆了一种新的人类与BSP蛋白相关的基因 ,推测其编码蛋白是与BSP蛋白功能相关的结合蛋白 ,通过基因重组技术大量获得表达蛋白 ,对进一步研究新蛋白的生物学功能具有重要的意义 .

关键词：人牛精浆蛋白相关新基因 cDNA克隆定位表达

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PLGF通过激活Rho/ROCK信号通路介导人脑微血管内皮细胞间紧密连接开放

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基础医学与临床 2013年第8期33卷 960-965页

作者：王淳李波方文刚陈誉华辽宁中医药大学基础医学院卫生生物教研室辽宁沈阳110032 中国医科大学基础医学院发育生物教研室卫生部细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HB... 详细信息

目的探讨胎盘生长因子(PLGF)影响人脑微血管内皮细胞(HBMEC)间通透性的分子机制。方法利用HBMEC构建体外血脑屏障模型,测定跨内皮细胞电阻抗(TEER)及检测HRP通过率,分析PLGF对血脑屏障完整性的影响;用Western blot法及免疫荧光法检测HBMEC间紧密连接相关蛋白质occludin和ZO-1的表达及分布,用蛋白激酶抑制剂干预和Western blot法检测Rho蛋白活性。结果 25 ng/mL PLGF 30 min显著降低体外血脑屏障模型TEER,使其通透性增高(P<0.05);增加S-occludin表达的同时降低了IS-occludin的表达,使ZO-1蛋白在细胞周边分布减少;此外,ROCK蛋白激酶抑制剂Y27632抑制了PLGF引起的体外血脑屏障透过性增高(P<0.05),并激活细胞内Rho激酶活性。结论 PLGF通过激活HBMEC内Rho/ROCK信号通路,影响HBMEC间紧密连接完整性,进而改变血脑屏障的通透性。

关键词：胎盘生长因子血脑屏障紧密连接 Rho ROCK

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深圳地区HIV阳性男男性行为人群肛门人乳头瘤病毒感染情况分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2025年第4期

作者：龚庭丹刘田阳秦杰张思维杨榕青初文竹魏兰兰庄敏哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省病原生物学重点实验室哈尔滨深圳市第三人民医院肝病研究所南方科技大学附属第二医院国家感染性疾病临床医学研究中心深圳深圳市第三人民医院胃肠外科南方科技大学附属第二医院深圳深圳市第三人民医院皮肤性病科南方科技大学附属第二医院深圳

目的探讨深圳地区HIV阳性男男性行为(men who have sex with men, MSM)人群中肛门部位人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染情况、基因型分布特征及其与HIV阴性MSM人群的差异, 为HIV阳性MSM群体的HPV筛查、疫苗接种及相关疾病... 详细信息

目的探讨深圳地区HIV阳性男男性行为(men who have sex with men, MSM)人群中肛门部位人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)感染情况、基因型分布特征及其与HIV阴性MSM人群的差异, 为HIV阳性MSM群体的HPV筛查、疫苗接种及相关疾病预防提供科学依据。方法以2023—2024年深圳市第三人民医院皮肤性病科招募的100例MSM为调查对象, 使用问卷调查的方式收集社会人口学特征、临床相关特征。采集MSM者肛门脱落细胞, 进行HPV型别检测。采集血液标本进行HIV抗体检测和T淋巴细胞检测。采用卡方检验来分析定性变量之间的相关性。结果本研究共纳入100例MSM, 其中58例确诊为HIV阳性, 42例确诊为HIV阴性。在HIV阳性MSM中, HPV感染率为93.10%(54/58), 高危型HPV感染率为79.31%(46/58), 低危型HPV感染率为75.86%(44/58), 其中最常见的类型依次是HPV6、11、16、52、18、59和68;在HIV阴性MSM中, HPV感染率为95.24%(40/42), 高危型HPV感染率为57.14%(24/42), 低危型HPV感染率为92.50%(37/40), 其中最常见的类型依次是HPV6、11、16、51和52。此外, HIV阳性MSM中高危型HPV16/18(P=0.032)、HPV58(P=0.020)、HPV59(P=0.031)、HPV68(P=0.007)的感染率显著高于HIV阴性MSM。HIV阳性MSM中最多有HPV十二重型别感染, HIV阴性MSM中最多有四重感染。HIV阳性MSM中有46例同时检测了CD4+T、CD8+T细胞数, 并计算CD4/CD8比值。在CD4/CD8比值的分组中, CD4/CD8≤0.9组HPV阳性率、高危型HPV阳性率和多重HPV感染率高于CD4/CD8>0.9组, 差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HIV阳性MSM中高危型HPV、多重HPV感染率均较HIV阴性者高, 且与免疫功能状态密切相关。因此, 应加强对HIV阳性MSM群体的HPV筛查和疫苗接种, 同时关注其免疫状态的管理, 以有效预防HPV相关的肛门癌等恶性肿瘤的发生。

关键词：人类免疫缺陷病毒人乳头瘤病毒男男性行为基因型

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基于16S rRNA基因扩增子测序技术研究云南野生小型哺乳动物肠道菌群多样性

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北京大学学报（自然科学版） 2022年第2期58卷 326-336页

作者：苏佳何锴连春盎张雪余珂北京大学深圳研究生院环境与能源学院深圳518055 南方医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室广东省单细胞技术与应用重点实验室广州510515

以生活在同一生境,但具有不同进化关系和不同食性的野生哺乳类动物(鼠科、猬科和鼩鼱科)为研究对象,通过16S rRNA基因扩增子测序,分析和比较其肠道菌群。共识别出5378个操作分类单位(OTUs),主要隶属Firmicutes(40.55%),Proteobacteria(3... 详细信息

以生活在同一生境,但具有不同进化关系和不同食性的野生哺乳类动物(鼠科、猬科和鼩鼱科)为研究对象,通过16S rRNA基因扩增子测序,分析和比较其肠道菌群。共识别出5378个操作分类单位(OTUs),主要隶属Firmicutes(40.55%),Proteobacteria(34.60%)和Bacteroidetes(13.67%)。Firmicutes和Bacteroidetes是鼠科的优势菌门,Proteobacteria是猬科和鼩鼱科的优势菌门。多样性分析表明,鼠科、猬科与鼩鼱科的肠道微生物多样性及群落结构具有显著性差异;LEfSe分析表明,鼠科中存在更多与复杂碳水化合物发酵相关的细菌,猬科和鼩鼱科中含较多氨基酸发酵菌;益生菌(如Lactobacillus和Lactococcus等)共存于这3类野生小型哺乳类动物中,起调控宿主健康的作用。研究结果揭示,宿主食性与进化关系影响着野生小型哺乳动物肠道菌群结构,而肠道菌群可能在多种方面对宿主起益生作用。

关键词：野生小型哺乳动物肠道菌群 16S rRNA基因扩增子测序宿主饮食

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姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的抑制作用

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吉林大学学报（医学版） 2019年第2期45卷 228-233,470页

作者：徐振华苏荣健锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121000 锦州医科大学生命科学研究院遗传学教研室辽宁锦州121000

目的:探讨姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度姜油酮和索拉非尼单独或联合对人肝癌HepG2细胞进行干预,MTT法检测细胞增殖率,根据其结果选择姜油酮和索拉非尼的适合浓度。实... 详细信息

目的:探讨姜油酮联合索拉非尼对人肝癌HepG2细胞迁移和侵袭的影响,并阐明其相关作用机制。方法:采用不同浓度姜油酮和索拉非尼单独或联合对人肝癌HepG2细胞进行干预,MTT法检测细胞增殖率,根据其结果选择姜油酮和索拉非尼的适合浓度。实验分为对照组(DMSO)、姜油酮组(30μmol·L^(-1))、索拉非尼组(3μmol·L^(-1))和联合组(姜油酮30μmol·L^(-1)+索拉非尼3μmol·L^(-1)),采用细胞划痕实验检测各组HepG2细胞划痕愈合率,Transwell实验检测各组HepG2细胞穿膜细胞数,Western blotting法检测各组HepG2细胞中基质金属蛋白酶2 (MMP-2)和基质金属蛋白酶9 (MMP-9)蛋白表达水平。结果:MTT实验,与对照组比较,姜油酮组和联合组细胞增殖率明显降低(P<0.01)。细胞划痕实验,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞划痕愈合率降低(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组HepG2细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。Transwell实验,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞穿膜细胞数减少(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组穿膜细胞数明显降低(P<0.01)。Western blotting法检测,与对照组比较,姜油酮组和索拉非尼组HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平降低(P<0.05);与姜油酮组和索拉非尼组比较,联合组HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。结论:姜油酮可通过降低HepG2细胞中MMP-2和MMP-9蛋白表达来抑制人肝癌细胞迁移和侵袭能力,且与索拉非尼联用效果更佳。

关键词：肝肿瘤姜油酮索拉非尼细胞迁移细胞侵袭

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刺五加多糖诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡

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细胞生物学杂志 2008年第2期30卷 239-242页

作者：赵俊霞闫永鑫赵娟王彦玲闫蕴力河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室石家庄050017

研究刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)诱导H446细胞凋亡及其可能的作用机制。采用MTT法检测ASPS对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色和流式细胞技术检测经ASPS处理后H446细胞凋亡的形态特征... 详细信息

研究刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)诱导H446细胞凋亡及其可能的作用机制。采用MTT法检测ASPS对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色和流式细胞技术检测经ASPS处理后H446细胞凋亡的形态特征及凋亡率的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因bax、bcl-2、p53表达的变化。MTT分析表明,ASPS作用48h后可明显抑制H446细胞的增殖,半数抑制浓度(IC50值)为476.36μg/ml;Hoechst染色结果:H446细胞在ASPS诱导下出现典型的凋亡形态;流式细胞术检测结果显示:对照组及浓度为240、480、960μg/ml药物处理组凋亡率分别是(5.02±0.4)%、(11.12±1.8)%、(19.89±2.5)%、(22.54±1.8)%;Western印迹显示:在ASPS的诱导下bax、p53的表达量提高,而bcl-2的表达量下降。研究表明,ASPS对H446细胞增殖有抑制作用,并能促进其凋亡;ASPS通过上调bax、p53表达,下调bcl-2表达促进H446细胞凋亡。

关键词：刺五加多糖小细胞肺癌H446细胞株 bax基因 bcl-2基因 p53基因

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含EGFP的人BMP2表达载体在人皮肤成纤维细胞中的表达

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上海第二医科大学学报 2004年第12期24卷 1007-1010页

作者：邹嫣琼王英陈玉英胡庆沈李慧易静上海第二医科大学基础医学院细胞生物学教研室上海200025

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正... 详细信息

目的构建带加强型绿色荧光蛋白 (EGFP)基因的人骨形成蛋白 2 (hBMP2 )真核表达载体 ,观察其在正常人皮肤成纤维细胞中的表达情况。方法构建携带hBMP2和EGFP基因的真核表达载体 pcDNA3 hBMP2 IRES EGFP(pcBE) ,将其转染NIH3T3细胞和正常人皮肤成纤维细胞后 ,采用RT PCR和免疫组化染色方法分别检测人BMP2和EGFP基因在mRNA和蛋白质水平上的表达情况。结果转染后的NIH3T3和正常人皮肤成纤维细胞均能转录人BMP2mRNA和表达人BMP2蛋白 ,同时显示绿色荧光。结论 pcBE真核表达载体可在正常人皮肤成纤维细胞内有效表达人BMP2蛋白 ,并以其荧光报告基因起示踪作用。

关键词： BMP2 人皮肤成纤维细胞正常人真核表达载体 EGFP基因转染绿色荧光蛋白 RNA 转录报告基因

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h载脂蛋白E_4/h淀粉样前体蛋白转基因鼠自发变换行为的研究

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中华精神科杂志 2006年第3期39卷 182-185页

作者：廖峥嵘李英敏琦祖和薛越强杨鹏河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室石家庄050017 河北医科大学病理教研室石家庄050017 中国医学科学院基础所生化室

目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶... 详细信息

目的建立h载脂蛋白E_4(h-apo E_4)/h淀粉样前体蛋白(h-APP)双转基因鼠模型,探讨人apo E_4及人突变APP基因在脂质代谢及早老痴呆疾病(AD)中的作用。方法将h-apo E_4转基因鼠及h-APP转基因鼠交配,建立h-apo E_4/h-APP双转基因鼠。通过酶法检测鼠血清胆固醇。Y迷宫检测鼠自发变换行为。结果经聚合酶链反应初选,Southern杂交进一步鉴定,获得h-apoE_4/APP双转基因鼠(10只)。h-apo E_4/h-APP转基因鼠血清胆固醇水平[9月龄(2.76±0.75)mmol/L,12月龄(3.35±1.23)mmol/L]明显高于同龄对照组鼠(10只)[9月龄(2.03±0.30)mmol/L,12月龄(2.16±0.50)mmol/L](P＜0.05),分别是同龄对照组鼠的1.3倍和1.2倍。12月龄h-APP转基因鼠和h-apo E_4转基因鼠血清胆固醇水平[h-APP鼠(2.38±0.37)mmol/L,h-apo E_4鼠(2.67±0.59) mmol/L]均明显高于同龄对照组鼠[(2.16±0.5)mmol/L](P＜0.05)。转基因鼠自发变换行为[h-apo E_4/h-APP(0.74±0.03)%,h-APP(0.80±0.05)%,h-apo E_4(0.72±0.07)%]与对照组鼠[(0.95±0.06)%]的差异有统计学意义(P＜0.01或＜0.05)。结论h-apo E_4基因与血清胆固醇水平有关,h-apo E_4基因及h-APP基因的异常表达对实验鼠的空间记忆能力有影响。

关键词：载脂蛋白E类淀粉样β蛋白前体小鼠,转基因胆固醇空间行为

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