检索结果-内蒙古大学图书馆

动物医学进展 2019年第8期40卷 29-33页

作者：张晟黎海燕廉梅刘宇肖东林晓琳南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515 南方医科大学实验动物中心广东广州510515

基于四环素调控系统构建白蛋白(albumin,Alb)启动子调控大鼠uPA(urokinase-type plasminogen activator,ruPA)转基因肝特异性过表达的慢病毒载体pLVX-Alb-TetOne-TRE-ruPA-T2A-CopGFP(pLATTRUTG)。以CTG0875-2-11质粒为模板,PCR扩增大鼠的uPA(ruPA)基因,3’端添加Flag标签,In-Fusion克隆至pLVX-Alb-TetOne-TRE-T2A-CopGFP(pLATTTG)质粒中,得到慢病毒载体pLVX-Alb-TetOne-TRE-ruPA-T2A-CopGFP(pLATTRUTG),所构建质粒经测序和酶切鉴定。将pLATTRUTG瞬时转染293T细胞,转染后24 h倒置荧光显微镜检测CopGFP表达;接着向6孔细胞培养板内加入强力霉素(Doxycycline,Dox),48 h后在倒置荧光显微镜下观察CopGFP表达(包括未加Dox的孔),随后收集细胞以提取总RNA和总蛋白,用于RT-qPCR检测ruPA及报告基因表达和Western blot检测标签蛋白Flag表达。酶切和测序确证我们成功构建了慢病毒载体pLATTRUTG;瞬转293T细胞后,24 h倒置荧光显微镜下可见零星细胞(约占0.1%)发弱的绿色荧光,加Dox 48 h后所有细胞展现强的绿色荧光,而不加Dox的孔内仍然只见到零星细胞(约占0.1%)发弱的绿色荧光。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,与不加Dox的细胞相比,加Dox的细胞中ruPA、报告基因CopGFP和Flag表达水平显著升高。结果提示,成功基于四环素调控系统构建Alb启动子调控大鼠uPA转基因表达的慢病毒载体pLATTRUTG,为相关后续实验奠定了基础。

关键词：白蛋白启动子大鼠尿激酶桡足类绿色荧光蛋白四环素调控系统慢病毒载体

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实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠体内免疫细胞变化的动态检测

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国际免疫学杂志 2019年第2期42卷 136-141页

作者：孙博刘江恒刘宇汪丹丹李呼伦王广友哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室 150081

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋... 详细信息

目的探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠体内CD4^+和CD8^+T细胞动态变化.方法 C57BL/6小鼠用MOG35-55多肽和完全弗式佐剂皮下两点免疫,并设立对照组,在EAE小鼠免疫后的不同时间点检测淋巴结中活化的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的比例变化,检测脊髓内浸润的CD4^+T细胞和CD8^+T细胞.结果成功建立EAE动物模型,在免疫后第11天开始发病,病理学检测发现脊髓内有大量淋巴细胞浸润和脱髓鞘的现象,免疫荧光染色发现在发病高峰期脊髓内开始出现CD4^+T细胞和CD8^+T细胞的浸润,而外周免疫器官淋巴结里,活化的CD4^+T细胞比例明显增多(P<0.05).结论 EAE中虽然外周活化的CD4^+T细胞比例升高,但CD4^+T细胞和CD8^+T细胞都会浸润到脊髓中.

关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎 CD4^+T细胞 CD8^+T细胞单核细胞

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急性淋巴细胞白血病患儿细胞因子水平与疾病状态的关系研究

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国际检验医学杂志 2021年第15期42卷 1816-1820页

作者：宋晓梅李化舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室/贵州省再生医学重点实验室/贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州省贵阳市妇幼保健院检验科贵州贵阳550004 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的观察急性淋巴细胞白血病患儿细胞因子水平与疾病状态的关系。方法选取2018年1月至2019年12月贵阳市妇幼保健院收治的212例急性淋巴细胞白血病患儿纳入急性淋巴细胞白血病组,根据患儿不同疾病状态将其分为初诊组(128例)、缓解组(84... 详细信息

目的观察急性淋巴细胞白血病患儿细胞因子水平与疾病状态的关系。方法选取2018年1月至2019年12月贵阳市妇幼保健院收治的212例急性淋巴细胞白血病患儿纳入急性淋巴细胞白血病组,根据患儿不同疾病状态将其分为初诊组(128例)、缓解组(84例),并将同期在该院常规体检的200例健康儿童纳入对照组,同期收治的50例急性髓细胞白血病患儿纳入急性髓细胞白血病组,对比各组血清白细胞介素(IL)-2、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞计数(WBC)水平,并分析初诊急性淋巴细胞白血病患儿血清IL-2、IL-10、TNF-α、WBC水平与临床特征的相关性。随访6个月,根据急性淋巴细胞白血病患儿有无复发分为复发组(72例)与未复发组(140例),比较各组细胞因子水平。结果急性淋巴细胞白血病组TNF-α、IL-10、WBC水平高于急性髓细胞白血病组与对照组,IL-2水平低于急性髓细胞白血病组与对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。初诊组IL-2水平明显低于缓解组,TNF-α、IL-10、WBC水平高于缓解组,差异有统计学意义(P<0.05)。初诊急性淋巴细胞白血病患儿血清IL-2、IL-10、TNF-α、WBC水平与患儿年龄、性别及肝大等无关(P>0.05),与患儿疾病危险程度分型有关(P<0.05)。与未复发组相比,复发组血清IL-2水平降低,IL-10、WBC、TNF-α水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论急性淋巴细胞白血病患儿血清IL-2水平降低,TNF-α、IL-10、WBC水平升高,以上指标水平变化能够反映出患儿免疫功能好坏,可作为疾病状态及预后的评估指标,判断患儿疾病复发风险。

关键词：急性淋巴细胞白血病白细胞介素-2 白细胞介素-10 肿瘤坏死因子-α 儿童

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案例教学在早期基础医学教育中的问题与对策

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基础医学教育 2020年第5期22卷 327-329页

作者：孙鸾刘晓蓉陆雪松南京医科大学基础医学院细胞生物学系南京210029 中南民族大学生物医学工程学院医疗仪器教研室

案例教学法近年来被广泛应用于医学院校的教育教学改革。基础医学课程是临床医学专业重要的基石。以细胞生物学课程为核心整合多个学科设计案例,在南京医科大学临床专业低年级学生中初步尝试了案例教学法。文章调研了低年级学生在案例... 详细信息

案例教学法近年来被广泛应用于医学院校的教育教学改革。基础医学课程是临床医学专业重要的基石。以细胞生物学课程为核心整合多个学科设计案例,在南京医科大学临床专业低年级学生中初步尝试了案例教学法。文章调研了低年级学生在案例学习时遇到的障碍和问题,总结了针对低年级学生的案例课程在编排上的特征,提出教师在教育教学改革中面临的新的机遇与挑战,希望这些实践经验为医学及相关专业开展教育教学改革提供宝贵的经验。

关键词：基础医学早期案例教学教学改革

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人脐带来源的间充质干细胞运载3型呼肠孤病毒在杀伤K562细胞过程中相关细胞因子表达分析

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国际检验医学杂志 2021年第16期42卷 1947-1951页

作者：宋晓梅刘雨思赵书利李晨赵砚驰李化舒莉萍贵州医科大学细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室/贵州省再生医学重点实验室/贵州医科大学基础医学院免疫学教研室贵州贵阳550004 贵州省贵阳市妇幼保健院检验科贵州贵阳550004 延安大学基础医学院陕西延安716000 长江航运总医院肿瘤科湖北武汉430014 中国医学科学院成体干细胞转化研究重点实验室贵州贵阳550004

目的选择具有肿瘤归巢能力的人脐带来源的间充质干细胞(MSCs)作为细胞载体运载溶瘤病毒3型呼肠孤病毒(Reovirus3),并与慢性粒细胞白血病K562细胞共同培养,探讨细胞培养体系中相关细胞因子对MSCs运载Reovirus3杀伤K562细胞的影响,为利用... 详细信息

目的选择具有肿瘤归巢能力的人脐带来源的间充质干细胞(MSCs)作为细胞载体运载溶瘤病毒3型呼肠孤病毒(Reovirus3),并与慢性粒细胞白血病K562细胞共同培养,探讨细胞培养体系中相关细胞因子对MSCs运载Reovirus3杀伤K562细胞的影响,为利用细胞因子治疗或者辅助MSCs运载Reovirus3治疗慢性粒细胞白血病提供依据。方法通过体外试验从脐带中分离培养出MSCs,选用对数生长期的MSCs荷载Reovirus3,与对数生长期的K562细胞进行体外细胞培养,分为对照组:K562细胞;MSCs组:K562细胞+MSCs;Reovirus3组(阳性对照组):K562细胞+Reovirus3;实验组:K562细胞+Reovirus3+MSCs。细胞共培养24、48、72 h,收集各组细胞培养上清液,采用ELISA双抗体夹心法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-2、IL-4、IL-5、IL-6和IL-17水平。结果培养24、48、72 h时MSCs组和实验组TGF-β、IL-6水平与对照组比较均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),Reovirus3组比对照组TGF-β、IL-6水平虽有所升高,但差异均无统计学意义(P>0.05);培养48 h时MSCs组、Reovirus3组和实验组TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4水平虽然均高于对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05),培养48 h时4组细胞培养上清液均未检测出IL-5和IL-17;培养24、72 h时4组细胞培养上清液均未检测出TNF-α、IFN-γ、IL-2、IL-4、IL-5及IL-17。结论MSCs运载Reovirus3在体外试验的细胞培养体系中可有效抑制K562细胞,除了溶瘤病毒Reovirus3的溶瘤作用外,可能还与培养体系中的细胞因子促进细胞凋亡从而抑制K562细胞的增殖有关。

关键词：间充质干细胞 3型呼肠孤病毒慢性粒细胞白血病 K562细胞细胞因子

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活化转录因子4基因敲除小鼠完全缺失晶状体致小眼症

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动物医学进展 2019年第7期40卷 39-42页

作者：张晟林晓琳和法莲彭珊申红芬南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515 中山大学中山医学院广东广州510080

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/... 详细信息

旨在研究活化转录因子4(ATF4)基因敲除对小鼠眼睛发育的影响。将小鼠分为野生型(WT)组和ATF4敲除(KO)组,采用器官大体观察和组织病理学分析,明确ATF4基因敲除后对小鼠眼睛发育的影响。结果发现,WT小鼠眼球大小及组织结构正常。而ATF4^-/-小鼠眼球体积缩小;脉络膜和视网膜层层次结构基本存在,各个层次结构紊乱;神经节细胞层细胞数基本正常,约2层细胞,但细胞排列不整齐;内丛状层结构疏松,厚度增加;外核层细胞层次增加,超过10层,同时结构松散、形成裂隙和囊样结构;内核层细胞层次减少、约6层~8层细胞,细胞排列轻度紊乱。整个视网膜在局部形成乳头状突起;脉络膜基本正常,但没有乳头状的睫状突形成。眼球内玻璃体缺失,由水肿的纤维结缔组织构成,中央可见多个小血管。总之,ATF4^-/-小鼠展示了小眼表型,同时ATF4^-/-小鼠眼睛结构异常。

关键词：活化转录因子4 基因敲除小鼠晶状体小眼症

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TNF-α及其受体与乳腺癌的研究进展

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现代免疫学 2019年第3期39卷 261-264页

作者：张华许凤燕哈尔滨医科大学黑龙江省医学科学院《国际免疫学杂志》编辑部哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室哈尔滨150081

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤。炎症细胞、炎性细胞因子以及趋化因子所形成的肿瘤微环境为肿瘤的增殖、侵袭和转移提供了条件。TNF-α是炎症反应中最早产生的细胞因子之一,它的产生可以诱导其他炎性细胞因子和趋化因子的级联... 详细信息

乳腺癌是全球女性发病率最高的恶性肿瘤。炎症细胞、炎性细胞因子以及趋化因子所形成的肿瘤微环境为肿瘤的增殖、侵袭和转移提供了条件。TNF-α是炎症反应中最早产生的细胞因子之一,它的产生可以诱导其他炎性细胞因子和趋化因子的级联反应。TNF-α需要与肿瘤坏死因子受体Ⅰ(tumor necrosis factor receptorⅠ, TNFRⅠ)和肿瘤坏死因子受体Ⅱ(tumor necrosis factor receptorⅡ, TNFRⅡ)2种受体结合发挥生物学功能。在乳腺癌中TNF-α往往与TNFRⅠ结合使促凋亡途径被抑制,与TNFRⅡ结合引起细胞存活、增殖和炎症反应增强。文章就TNF-α及其受体与乳腺癌发生、发展的相关研究进展作一综述,为深入了解TNF-α及其受体在乳腺癌发病及其转归中的作用提供科学依据。

关键词：肿瘤坏死因子α 肿瘤坏死因子受体Ⅰ 肿瘤坏死因子受体Ⅱ 乳腺癌

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Genistein对雌性大鼠卵巢颗粒细胞FSHR基因表达的影响

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中国医药导报 2019年第14期16卷 16-18页

作者：温海霞张亚楠哈尔滨医科大学基础医学院生理学教研室

目的观察Genistein对雌性大鼠卵巢颗粒细胞卵泡刺激素受体(FSHR)基因表达的影响,及其与雌激素受体(ER)的关系。方法选取25~28日龄雌性大鼠,皮下注射孕马血清促性腺激素,建立促卵泡发育模型,分离卵巢颗粒细胞进行培养,分别给予Genistein(... 详细信息

目的观察Genistein对雌性大鼠卵巢颗粒细胞卵泡刺激素受体(FSHR)基因表达的影响,及其与雌激素受体(ER)的关系。方法选取25~28日龄雌性大鼠,皮下注射孕马血清促性腺激素,建立促卵泡发育模型,分离卵巢颗粒细胞进行培养,分别给予Genistein(0、0.1、1、5、10、100μmol/L)及雌激素受体阻断剂ICI182,780(1μmol/L)处理24h后,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测芳香化酶基因上游调控因子FSHR mRNA的表达。结果与空白对照组比较,10μmol/LGenistein组FSHR mRNA表达显著增加(P<0.05)。ICI 182,780(1μmol/L)预处理细胞30min后加入1和10μmol/L Genistein,其FSHR mRNA表达分别较1和10μmol/L Genistein组显著下降(P<0.05或P<0.01)。结论10μmol/L的Genistein可上调雌性大鼠卵巢颗粒细胞中FSHR表达,且该作用可能是通过ER介导的。

关键词： Genistein 雌性大鼠卵巢颗粒细胞卵泡刺激素受体

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不同亚型乳腺癌中与腋窝淋巴结转移相关的miRNA分子的鉴定

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家有孕宝 2020年第20期2卷 29-30页

作者：孙琳李世攀林晓雨刘建兵山西省第二人民医院普外科山西医科大学基础医学院医学细胞生物与遗传学教研室山西太原 030001

目的乳腺癌是女性癌症患者中出现最多的恶性肿瘤,并且约20％的患者存在癌转移.MiRNAs的异常表达在癌症的转移机制中发挥着重要作用.本研究拟应用生物信息学方法鉴定与不同亚型乳腺癌腋窝淋巴结转移相关的miRNA分子,为乳腺癌的精准诊断... 详细信息

目的乳腺癌是女性癌症患者中出现最多的恶性肿瘤,并且约20％的患者存在癌转移.MiRNAs的异常表达在癌症的转移机制中发挥着重要作用.本研究拟应用生物信息学方法鉴定与不同亚型乳腺癌腋窝淋巴结转移相关的miRNA分子,为乳腺癌的精准诊断与治疗提供理论基础.方法从NCBI的GEO数据库下载不同亚型乳腺癌的miRNA表达芯片数据集,然后利用GEO2R工具进行数据分析,获得差异表达miRNA.结果本研究获得Luminal A型、Luminal B型、HER-2过表达型、三阴型乳腺癌腋窝淋巴结转移相关的关键miRNA分子各自为2、17、4及25个.其中,Luminal B型与三阴型乳腺癌之间存在有4个相同的与腋窝淋巴结转移相关的差异表达miRNA,分别是hsa-miR-432-5p、hsa-miR-495-3p、hsa-miR-337-5p、hsa-miR-382-5p.结论不同分子分型的乳腺癌腋窝淋巴结转移受到不同差异表达miRNA的调控,这些关键miRNA的鉴定将有助于对不同分型乳腺癌疾病机理的理解,为乳腺癌的精准治疗提供理论基础.

关键词：乳腺癌腋窝淋巴结转移,miRNA

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磷脂酶A2对冠状动脉粥样硬化大鼠疾病严重程度的评估价值

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解放军医药杂志 2021年第10期33卷 1-5页

作者：唐静怡段肖翠范艳平刘立立李静王健飞史平解放军联勤保障部队第九八〇(白求恩国际和平)医院干部病房石家庄050082 河北医科大学基础医学院细胞生物学教研室石家庄050017 承德医学院临床医疗系河北承德067000 河北省军区保定第二离职干部休养所河北保定071000

目的探讨磷脂酶A2(Lp-PLA2)与冠状动脉粥样硬化大鼠疾病严重程度和稳定性的关系。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为健康组、模型1组、模型2组。健康组给予普通饲料喂养并注射等量生理盐水;模型1组连续4 d腹腔注射维生素D320万U/(kg·d)... 详细信息

目的探讨磷脂酶A2(Lp-PLA2)与冠状动脉粥样硬化大鼠疾病严重程度和稳定性的关系。方法SPF级雄性SD大鼠随机分为健康组、模型1组、模型2组。健康组给予普通饲料喂养并注射等量生理盐水;模型1组连续4 d腹腔注射维生素D320万U/(kg·d),并使用高脂饲料喂养7周;模型2组给予一次性腹腔注射维生素D380万U/kg,喂养方式、时间同模型1组。模型1组和模型2组分别在造模成功后使用阿托伐他汀灌胃4周;健康组大鼠给予等量生理盐水灌胃。记录各组大鼠体质量变化;测量各组大鼠主动脉粥样硬化斑块面积(PA)、血管管腔面积(LA),计算校正斑块面积(PA/LA);检测各组大鼠三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)及Lp-PLA2和超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平。结果与健康组比较,模型1、2组大鼠喂养2、3周体质量增加(P<0.05)。模型1、2组大鼠造模后及治疗后血管LA低于健康组(P<0.05)。与造模后比较,模型1、2组治疗后血管LA增加,主动脉粥样硬化PA及PA/LA降低,但模型2组治疗后血管LA低于模型1组,主动脉粥样硬化PA及PA/LA高于模型1组(P<0.05)。与健康组比较,治疗后模型1、2组大鼠TG、TC、LDL-C、hs-CRP含量及Lp-PLA2活性均显著升高,且模型2组TG、TC、LDL-C、Lp-PLA2活性高于模型1组,但hs-CRP含量低于模型1组(P<0.05);与造模后比较,模型1、2组大鼠治疗后TG、TC、LDL-C、hs-CRP含量及Lp-PLA2活性均显著降低(P<0.05)。结论血清Lp-PLA2水平能反映冠状动脉粥样硬化疾病严重程度和稳定性,且随着冠状动脉粥样硬化病变严重程度和不稳定性增加而升高。

关键词：冠状动脉疾病磷脂酶A2 脂蛋白类 LDL 三酰甘油 C反应蛋白大鼠 Sprague-Dawley

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