检索结果-内蒙古大学图书馆

中国医科大学学报 2012年第10期41卷 870-872,876页

作者：高建郑倩倩李彦姝周末中国医科大学实验技术中心三部沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室沈阳110001

目的通过激光共聚焦技术,观察SGC-7901胃癌细胞系在不同固定液作用下的细胞骨架及连接蛋白荧光染色。方法接种SGC-7901细胞24 h后,分别用4%多聚甲醛、2.5%戊二醛及95%乙醇室温固定20 min,5%BSA(含0.2%Triton X-100)封闭透膜1 h,直标荧... 详细信息

目的通过激光共聚焦技术,观察SGC-7901胃癌细胞系在不同固定液作用下的细胞骨架及连接蛋白荧光染色。方法接种SGC-7901细胞24 h后,分别用4%多聚甲醛、2.5%戊二醛及95%乙醇室温固定20 min,5%BSA(含0.2%Triton X-100)封闭透膜1 h,直标荧光一抗避光37℃孵育1 h,DAPI室温染核15 min,激光共聚焦扫描显微镜扫描。结果 4%多聚甲醛对细胞骨架微丝结构及连接蛋白Zo-1细胞膜定位均有较好的固定作用,2.5%戊二醛对微丝结构基本起到固定作用,而95%乙醇对于微丝的固定效果略差。后两种固定液固定细胞均出现连接蛋白胞质表达的非特异染色现象。结论 4%多聚甲醛对细胞骨架及细胞间连接蛋白的固定效果较优,荧光染色标记结果为后续研究提供依据。

关键词：固定液细胞骨架连接蛋白激光共聚焦

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小鼠肝癌及肝正常组织B4GalT糖基转移酶家族mRNA表达差异及其对细胞膜相关糖链的影响

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生命科学研究 2012年第1期16卷 48-53页

作者：马汝海王冬青潘忠诚王天骄何群赵雨杰中国医科大学基础医学院化学教研室中国辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院教育部细胞生物学重点实验室生物芯片中心中国辽宁沈阳110001

探讨肝癌模型鼠与正常小鼠肝组织B4GalT(β-1,4-半乳糖转移酶)家族mRNA表达差异以及对细胞膜相关糖链的影响.采用RT-PCR方法检测肝癌模型鼠和正常对照小鼠肝癌组织中B4GalT家族7个成员以及唾液酸α-2,3转移酶ST3GalⅢ、ST3GalⅣ、ST3Ga... 详细信息

探讨肝癌模型鼠与正常小鼠肝组织B4GalT(β-1,4-半乳糖转移酶)家族mRNA表达差异以及对细胞膜相关糖链的影响.采用RT-PCR方法检测肝癌模型鼠和正常对照小鼠肝癌组织中B4GalT家族7个成员以及唾液酸α-2,3转移酶ST3GalⅢ、ST3GalⅣ、ST3GalⅥ、α-1,6-岩藻糖转移酶FUT8 mRNA表达差异,应用凝集素芯片检测细胞膜表面半乳糖、岩藻糖、唾液酸表达情况.结果显示:与正常对照组相比,肝癌模型鼠肝组织中B4GalT-1和B4GalT-3、ST3GalⅣ和ST3GalⅥ、FUT8呈现高表达,肝癌细胞膜半乳糖、岩藻糖、唾液酸类型糖链增加,提示B4GalT-1和B4GalT-3与肝癌细胞膜半乳糖链增加相关.由于细胞Galβ-1,4-GlcNAc糖表位在ST3GalⅢ、ST3GalⅣ或ST3GalⅥ催化下与唾液酸α-2,3连接生成s-lewis x抗原前体,本实验中B4GalT-1和B4GalT-3与ST3GalⅣ、ST3GalⅤ、FUT8 mRNA表达具有相关性,提示B4GalT-1和B4GalT-3可能与ST3GalⅣ、ST3GalⅥ以及FUT4协同作用,导致肝癌细胞膜半乳糖、岩藻糖、唾液酸类型糖链增加.

关键词： B4GalT 肝癌细胞膜糖基化

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TFEB调控脂质代谢稳定动脉粥样硬化斑块的新机制

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基础医学与临床 2016年第1期36卷 116-120页

作者：仲昭宇田野杨力明李弘哈尔滨医科大学基础医学院病理生理教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院心内科黑龙江哈尔滨150081

TFEB作为一种新型转录因子,可由m TOR、细胞应激等自噬调节因子激活,介导自噬、溶酶体相关基因以及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)的表达,促进脂质外排、抑制炎性因子释放。... 详细信息

TFEB作为一种新型转录因子,可由m TOR、细胞应激等自噬调节因子激活,介导自噬、溶酶体相关基因以及过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、过氧化物酶体增殖活化受体γ共激活因子-1α(PGC-1α)的表达,促进脂质外排、抑制炎性因子释放。TFEB调节脂质代谢可作为一种新机制,起到抑制动脉粥样硬化进展、稳定斑块的作用。

关键词：转录因子EB 动脉粥样硬化自噬 PPARα PGC-1α

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YTHDF1异常表达对结直肠癌细胞增殖、迁移及CD4^(+)T、CD8^(+)T和Treg细胞浸润的影响

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临床与实验病理学杂志 2022年第9期38卷 1045-1050页

作者：张亚楠刘杭丰郑锦秀郗彦凤杨涛山西医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室太原030001 山西医科大学基础医学院药理学教研室太原030001 山西医科大学基础医学院细胞生理学教育部重点实验室太原030001 山西省肿瘤医院病理科太原030013

目的分析YTHDF1在结直肠癌中的表达及其对肿瘤细胞功能和CD4^(+)T、CD8^(+)T、Treg细胞浸润的影响。方法利用TCGA数据库和免疫组化法检测结直肠癌及癌旁组织中YTHDF1的表达;利用CCK-8、平板克隆实验和划痕愈合、Transwell实验分别检测敲... 详细信息

目的分析YTHDF1在结直肠癌中的表达及其对肿瘤细胞功能和CD4^(+)T、CD8^(+)T、Treg细胞浸润的影响。方法利用TCGA数据库和免疫组化法检测结直肠癌及癌旁组织中YTHDF1的表达;利用CCK-8、平板克隆实验和划痕愈合、Transwell实验分别检测敲减YTHDF1对细胞增殖、迁移能力的影响;应用ssGSEA评估YTHDF1表达与免疫细胞相对丰度的关系,并采用免疫组化法验证。结果TCGA数据库分析显示结直肠癌组织中YTHDF1 mRNA的表达水平高于正常组织,与患者年龄、临床分期和淋巴结转移显著相关(P<0.05);结直肠癌组织中YTHDF1的免疫评分(7.0±2.1)高于癌旁组织(5.0±1.5)(P<0.01);敲减YTHDF1可抑制结直肠癌细胞的增殖和迁移能力(P<0.05);YTHDF1与CD4^(+)T细胞(r=-0.6104)、CD8^(+)T细胞(r=-0.5347)浸润水平呈负相关,与Treg细胞浸润水平呈正相关(r=0.4482)。结论YTHDF1能促进结直肠癌细胞增殖和迁移,与CD4^(+)T、CD8^(+)T和Treg细胞浸润相关。

关键词：结直肠肿瘤 YTHDF1 增殖迁移免疫细胞浸润

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葡萄糖调节蛋白78对L858R突变的非小细胞肺癌erlotinib敏感性的影响

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中国医科大学学报 2018年第8期47卷 701-704页

作者：王倩文徐振华王志静苏荣健陈学军谷艳娇锦州医科大学基础医学院病理学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁锦州121001 锦州医科大学生命科学研究院辽宁锦州121001

目的观察葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对L858R突变非小细胞肺癌对erlotinib敏感性的影响。方法应用基因转染技术干预H3255细胞中GRP78及其突变体的表达,应用MTT方法检测erlotinib对细胞增殖的抑制情况,应用流式细胞术和FITCTUNEL分析凋亡情... 详细信息

目的观察葡萄糖调节蛋白78(GRP78)对L858R突变非小细胞肺癌对erlotinib敏感性的影响。方法应用基因转染技术干预H3255细胞中GRP78及其突变体的表达,应用MTT方法检测erlotinib对细胞增殖的抑制情况,应用流式细胞术和FITCTUNEL分析凋亡情况,应用免疫印迹技术检测表皮生长因子受体(EGFR)、细胞外信号调节激酶(ERK)的表达及磷酸化水平。结果过表达GRP78及其多肽结合结构域删除的突变体降低H3255细胞对erlotinib的敏感性,抑制erlotinib诱导的细胞凋亡,促进EGFR、ERK的磷酸化。结论 GRP78通过其ATPase结构域促进非小细胞肺癌细胞对erlotinib耐药。

关键词：葡萄糖调节蛋白78 非小细胞肺癌表皮生长因子受体 L858R突变 erlotinib

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大鼠肝抑素纯化及其对再生肝细胞和肝癌细胞增殖的影响

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上海医科大学学报 1997年第1期24卷 7-10页

作者：孙亚平成令忠刘银坤朱继红张夏英顾云娣中国科学院上海细胞生物学研究所 20031 上海医科大学基础医学院组织胚胎学教研室 200032 上海医科大学基础医学院生物化学教研室200032

制备大鼠肝抑素（ＨＣ）纯品，研究它对再生肝细胞和肝癌细胞体外增殖的影响。用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ阴离子交换层析法提取ＨＣ纯品，用液法检测ＨＣ样品的生物活性。结果：提取的ＨＣ纯品的ＳＤＳ电泳纯度达８９．５％，Ｍｒ... 详细信息

制备大鼠肝抑素（ＨＣ）纯品，研究它对再生肝细胞和肝癌细胞体外增殖的影响。用ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ阴离子交换层析法提取ＨＣ纯品，用液法检测ＨＣ样品的生物活性。结果：提取的ＨＣ纯品的ＳＤＳ电泳纯度达８９．５％，Ｍｒ１３．５ × １０３；该ＨＣ纯品对大鼠再生肝细胞和人肝癌细胞体外增殖有明显抑制作用，抑制率分别为６３．１％（０．２ｍｇ／Ｌ）和７７．７％（０．３ｍｇ／Ｌ），但对人胃癌细胞增殖无抑制效应。结论：结果提示提取的ＨＣ是抑制再生肝细胞和肝癌细胞增殖的特异性因子。

关键词：肝肿瘤肝细胞肝癌细胞肝抑素纯化

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抗氧化剂对去卵巢大鼠骨密度和血清生化指标的影响

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中华内分泌代谢杂志 2008年第4期24卷 368-371页

作者：李明白晓春刘俊刘阳潘婷陈煜罗深秋南方医科大学基础医学院实验教学管理中心广州510515 南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广州510515 中国人民解放军广州军区广州总医院泌尿外科南方医科大学基础医学院人体解剖与组织胚胎学教研室广州510515

目的研究抗氧化剂维生素C、E及还原型谷胱甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢大鼠骨密度及血清生化指标的影响。方法4月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检... 详细信息

目的研究抗氧化剂维生素C、E及还原型谷胱甘肽（GSH）不同配伍用药方法对去卵巢大鼠骨密度及血清生化指标的影响。方法4月龄雌性SD大鼠70只，随机取50只行双侧卵巢切除术，20只行假手术。3个月后随机从手术组和假手术组各取10只大鼠检测体重、子宫湿重、左侧股骨及腰椎骨密度和血清生化指标Ca^2＋、肌酐、碱性磷酸酶（ALP）水平，以确定骨质疏松模型建立成功。确定模型建立成功后，其余动物分为A（假手术）、B（去卵巢生理盐水对照组）、C（维生素C＋维生素E）、D（GSH）、E（维生素C＋维生素E＋GSH）5组，每组10只。药物用量维生素C（750mg·kg^-1·d^-1）、GSH（125mg·kg^-1·d^-1）腹腔注射，维生素E（250mg·kg^-1·d^-1）灌胃，模型组每天以生理盐水腹腔注射。3个月后，检测各组动物左侧股骨及腰椎骨密度和血清生化指标。结果抗氧化剂治疗3个月后，与模型组相比，左侧股骨及腰椎骨密度三个治疗组均明显增加，其中D、E组增加最显著；血清ALP各组均显著降低；超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—Px）水平和血清抑制OH^-能力D、E组显著升高；丙二醛水平C、D组显著降低；各组血清Ca^2＋水平无明显改变。结论抗氧化剂维生素C、维生素E及GSH显著增加去卵巢骨质疏松模型大鼠骨密度，阻止血清抗氧化成分（SOD、GSH-Px）减少，提高血清抑制OH^-能力，降低脂质过氧化物丙二醛。

关键词：骨质疏松骨密度抗氧化剂

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胃癌细胞中p21活化激酶4的表达和定位

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中国医科大学学报 2009年第8期38卷 565-568页

作者：邵阳光李妍王春玉佟宇鑫李丰中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 中国医科大学生物科学与生物技术系沈阳110001

目的构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达。方法以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1... 详细信息

目的构建真核表达载体pEGFP-PAK4,利用它鉴定p21活化激酶4(PAK4)在胃癌细胞中的定位,并检测外源性和内源性PAK4在胃癌细胞中的表达。方法以pCAN2-MYC-PAK4为模板,采用PCR法进行人PAK4编码序列的扩增,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中。将pCAN2-MYC-PAK4质粒瞬时转染到胃癌BGC-823细胞中,用Western blot方法检测MYC-PAK4融合蛋白的表达;并用Western blot方法检测不同胃癌细胞系中内源性PAK4的表达;瞬时转染pEGFP-PAK4到胃癌BGC-823细胞中,用激光扫描共聚焦显微镜观察PAK4的定位。结果(1)hPAK4编码序列被成功克隆至真核表达载体pEGFP-C1中;(2)证实了MYC-PAK4融合蛋白及内源性PAK4在胃癌细胞中的表达;(3)转染pEGFP-PAK4后,在胃癌BGC-823细胞胞质内可见明亮的绿色荧光。结论成功地构建了pEGFP-PAK4载体,证实了外源性和内源性PAK4的表达,证明在胃癌BGC-823细胞中PAK4主要定位于细胞质,为进一步研究PAK4的生物学特性及其信号转导通路奠定了基础。

关键词： p21活化激酶4 绿色荧光蛋白融合蛋白转染胃癌

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配对盒基因6/小鼠胚胎干细胞细胞系的建立及干细胞生物学特性分析

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解剖学报 2019年第4期50卷 451-458页

作者：丁玲高杰李红胡蓉苏敏贵州医科大学基础医学院组织学胚胎学教研室贵阳550004 贵州医科大学贵州省细胞工程生物医药技术国家地方联合工程实验室/贵州省再生医学重点实验室贵阳550004

目的建立配对盒基因6(Pax6)/小鼠胚胎干细胞(m ESCs)细胞系并鉴定其干细胞生物学特性。方法体外培养m ESCs,将重组载体p EF1α-Pax6-IRES-AcGFP和空载体p EF1α-IRES-AcGFP分别用脂质体法转染m ESCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用... 详细信息

目的建立配对盒基因6(Pax6)/小鼠胚胎干细胞(m ESCs)细胞系并鉴定其干细胞生物学特性。方法体外培养m ESCs,将重组载体p EF1α-Pax6-IRES-AcGFP和空载体p EF1α-IRES-AcGFP分别用脂质体法转染m ESCs,经G418梯度及荧光蛋白双筛选后,使用细胞免疫荧光染色、免疫印迹法及RT-PCR技术检测Pax6的表达情况,流式细胞术检测Pax6/m ESCs阳性细胞的比例。将获得正确的细胞系分别采用细胞免疫荧光染色对其干细胞标志物阶段特异性胚胎抗原1(SSEA1)、八聚体结合转录因子4(OCT4)进行检测,碱性磷酸酶(AP)染色法对其多能性进行检测,流式细胞术检测增殖指数Ki67。将Pax6/m ESCs进行肾背囊下移植,移植物行HE染色观察其分化能力。结果 Pax6成功在m ESCs内表达,经G418筛选后,获得Pax6/m ESCs细胞系,流式结果显示,Pax6阳性率为90%,免疫荧光显示,干细胞标志物SSEA1、OCT4表达阳性且AP染色阳性,并且在体内移植后能向3个胚层分化。结论 Pax6成功在m ESCs内表达,经G418筛选后,获得细胞系Pax6/m ESCs并维持良好的干细胞特性。

关键词：配对盒基因6 小鼠胚胎干细胞基因转染 G418筛选流式细胞术小鼠

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大鼠海马内注射β淀粉样蛋白对脑内小胶质细胞活化和神经元凋亡的影响

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中华老年医学杂志 2007年第1期26卷 43-46页

作者：郭大文马怡然方文刚陈誉华中国医科大学基础医学院发育生物学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳市110001

目的观察脑内β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42注射至大鼠双侧海马，对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后3、7、14d，用免疫组织化学和免疫荧光法检测... 详细信息

目的观察脑内β淀粉样蛋白（β-amyloid，Aβ）沉积早期对脑内胶质活化和细胞凋亡的影响。方法通过立体定位技术将Aβ1-42注射至大鼠双侧海马，对照组注射反序列Aβ42-1或PBS。分别于注射后3、7、14d，用免疫组织化学和免疫荧光法检测CD11b、MHCⅡ及活化caspase-3的表达。结果海马内注射Aβ1-42后3d，大鼠脑内CD11b和MHCⅡ阳性小胶质细胞数量[分别为（345．22±75．86）和（200．22±42．88）]，较PBS组[分别为（98．61±20．79）和（35．43±12．46）]和Aβ42-1组[分别为（103．44±22．13）和（43．41±15．63）3明显升高（P〈0．01），7d达到高峰[分别为（486．22±81．51）和（223．62±66．99）]，表现为明显的激活状态。注射后3d，大脑皮质、海马的活化caspase-3阳性细胞数量（132．42±31．80）比PBS组（4．41±3．13）和AB㈨组（4．85±3．70）明显升高（P〈0．01），7d后更明显（165．24±33．95），以海马更为显著。结论海马内注射A？可以诱导小胶质活化和神经细胞凋亡，有可能作为研究阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease，AD）发病早期的动物模型。

关键词：淀粉样β蛋白小神经胶质细胞细胞凋亡阿尔茨海默病

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