检索结果-内蒙古大学图书馆

乙型肝炎病毒拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系建立及鉴定

国际免疫学杂志 2019年第4期42卷 347-352页

作者：徐维祯谷鸿喜郝美丽马延秀李皓乐汪颖楠哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081 杭州师范大学医学院病原和免疫学教研室 311121 加州大学圣地亚哥分校圣地亚哥92092

目的建立乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系。方法利用携带有HBV拉米夫定YVDD耐药株或YMDD野生株的全基因真核表达重组质粒分别稳定转染HepG2细胞,G418筛选后建立稳定表达细胞株;酶联... 详细信息

目的建立乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)拉米夫定YVDD耐药株及YMDD野生株稳定表达细胞系。方法利用携带有HBV拉米夫定YVDD耐药株或YMDD野生株的全基因真核表达重组质粒分别稳定转染HepG2细胞,G418筛选后建立稳定表达细胞株;酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测HBV抗原表达情况;FT-PCR检测HBV DNA载量;FH-PCR-MC验证细胞株拉米夫定耐药变异类型;测序分析细胞株内HBV的基因变异情况。结果成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系;第1、10、30代细胞株HBsAg和HBeAg表达稳定;第30代细胞内及上清中HBV DNA载量高于10^4copies/mL;耐药株变异类型为YVDD;测序显示,细胞基因组携带的HBV耐药株基因存在A1762T/G1764A/rtM204V/rtL180M/rtV173L的多位点联合变异。结论成功建立HBV拉米夫定YVDD耐药株和YMDD野生株稳定表达细胞系,即HepG2-HBV/CV和HepG2-HBV/CM细胞,为筛选抗HBV拉米夫定耐药株的有效药物提供了理想的细胞模型。

关键词：乙型肝炎病毒 YMDD YVDD 稳定表达细胞系

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嵌合抗原受体T细胞免疫疗法的研究进展

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中华细胞与干细胞杂志（电子版） 2020年第4期10卷 251-256页

作者：罗宇希李菲菲刘康何治尧安徽医科大学第一临床医学院合肥230032 安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室合肥230032 四川省南充市中心医院(川北医学院第二临床学院)组织工程与干细胞研究所肿瘤生物治疗南充市重点实验室南充637000 四川大学华西医院临床药学部成都610041

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注,是一种新的肿瘤免疫疗法。目前,CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且,在临... 详细信息

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞是经基因工程修饰后表达靶向肿瘤细胞CAR分子的T细胞。CAR-T细胞治疗在血液肿瘤治疗中展现了显著的疗效而备受关注,是一种新的肿瘤免疫疗法。目前,CAR-T细胞治疗在实体瘤治疗中还面临着很大的挑战。而且,在临床应用的过程中仍会出现一些不良反应,如细胞因子释放综合征、神经毒性、归巢障碍、溶瘤综合征及脱靶效应等。本文就CAR-T疗法的基本原理及临床应用与不良反应展开做一综述。

关键词：嵌合抗原受体T细胞肿瘤细胞过继免疫治疗

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CYP4A11基因rs9333025 A/G多态性在云南彝族人群中的分布

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昆明医科大学学报 2019年第4期40卷 52-56页

作者：朱柯颖蒋涛盘婕范志祥张璐张延洁吴艳瑞龙莉昆明医科大学基础医学院临床医学专业云南昆明650500 昆明医科大学基础医学院细胞生物学和医学遗传学教研室云南昆明650500

目的研究云南省晋宁县彝族人群CYP4A11 rs9333025基因A/G多态性分布情况,为探讨CYP4A11基因相关性疾病的发病机制奠定基础。方法采用PCR-RFLP技术对云南省晋宁县303例彝族健康个体的CYP4A11基因A/G多态性进行分析,计算AA、AG、GG基因型... 详细信息

目的研究云南省晋宁县彝族人群CYP4A11 rs9333025基因A/G多态性分布情况,为探讨CYP4A11基因相关性疾病的发病机制奠定基础。方法采用PCR-RFLP技术对云南省晋宁县303例彝族健康个体的CYP4A11基因A/G多态性进行分析,计算AA、AG、GG基因型频率和A、G等位基因频率,与其他人群该位点多态性进行比较。结果云南省晋宁县彝族CYP4A11基因的AA、AG、GG基因型频率分别为2.31%、27.72%和69.97%,A和G等位基因频率分别为16.17%和83.83%。与日本人群比较,无论是基因型分布还是等位基因频率差异均有统计学意义(P<0.05);与汉族比较,基因型分布差异无统计学意义(P>0.05),但等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05);与蒙古族比较,基因型及等位基因频率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论CYP4A11基因rs9333025 A/G多态性分布存在一定民族差异。

关键词： CYP4A11基因基因多态性彝族

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病原生物学实验教学改革实践

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基础医学教育 2019年第7期21卷 536-537页

作者：钱钧朱梅李爱梅哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室哈尔滨150081 黑龙江省医院南岗院区重症医学科

病原生物学实验是医学微生物学理论与实践相结合的纽带,但传统的实验教学内容多为验证性实验,没有很好地调动学生学习的主动性,实验教学改革势在必行。文章初步探索在基础本硕连读学生中开展系统性实验中增加临床案例讨论分析及学生自... 详细信息

病原生物学实验是医学微生物学理论与实践相结合的纽带,但传统的实验教学内容多为验证性实验,没有很好地调动学生学习的主动性,实验教学改革势在必行。文章初步探索在基础本硕连读学生中开展系统性实验中增加临床案例讨论分析及学生自主设计性实验内容,提高了学生的学习兴趣及科学思维能力,锻炼了学生的实践能力,取得较好效果。

关键词：病原生物学教学改革实验教学

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DEAD盒RNA解旋酶17在乳腺癌细胞中的表达及定位

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解剖科学进展 2019年第1期25卷 1-3页

作者：李洋邢瑶韩馥伊李丰中国医科大学基础医学院分子细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110122

目的研究DEAD盒RNA解旋酶17 (DDX17)在人乳腺癌细胞和组织中的表达和定位。方法蛋白印迹法检测DDX17在人乳腺癌细胞系中蛋白的表达,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测DDX17在MCF-7乳腺癌细胞中的定位。结果 DDX17在人乳腺肿瘤细... 详细信息

目的研究DEAD盒RNA解旋酶17 (DDX17)在人乳腺癌细胞和组织中的表达和定位。方法蛋白印迹法检测DDX17在人乳腺癌细胞系中蛋白的表达,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot检测DDX17在MCF-7乳腺癌细胞中的定位。结果 DDX17在人乳腺肿瘤细胞系中蛋白表达水平增高,激光共聚焦扫描显微镜和Western blot观察发现DDX17主要定位于MCF-7细胞核中。结论 DDX17在人乳腺癌细胞系中高表达,主要定位于乳腺癌细胞核内,可能是人乳腺癌重要的调节因子。

关键词： DEAD盒RNA解旋酶17 乳腺癌免疫印迹分析定位

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circular RNA与肿瘤

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解剖科学进展 2019年第4期25卷 484-486,490页

作者：王香琛张雅芳张建国黑龙江中医药大学基础医学院哈尔滨150040 哈尔滨医科大学人体解剖学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院乳腺外科哈尔滨150086

circularRNA(circRNA)是内源性RNA在剪切过程中产生的一种不具有3’帽和5’尾的由RNA共价连接形成的单链连续环状RNA。circRNA可与microRNA(miRNA)结合发挥miRNA海绵的作用,通过改变miRNA的表达水平影响多种肿瘤细胞的增殖、侵袭等生物... 详细信息

circularRNA(circRNA)是内源性RNA在剪切过程中产生的一种不具有3’帽和5’尾的由RNA共价连接形成的单链连续环状RNA。circRNA可与microRNA(miRNA)结合发挥miRNA海绵的作用,通过改变miRNA的表达水平影响多种肿瘤细胞的增殖、侵袭等生物学行为。多种circRNA在肿瘤组织中表达异常,并与肿瘤分期、转移等临床参数相关,提示circRNA可作为肿瘤的分子标记物。此外,circRNA在肿瘤抵抗放疗和化疗方面一定的作用。

关键词： circular RNA 分子标记物

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在肾脏高效导入miR-483-5p的方法

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南方医科大学学报 2018年第2期38卷 141-147页

作者：夏颖周雪娟古文清赵岩岩肖潇白晓春刘俊李明南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科广东广州510010

目的研究在肾脏高效导入目的基因miR-483-5p的方法。方法肾皮质注射miR-483-5p慢病毒:取35只C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组、慢病毒低剂量组(每侧肾皮质注射5μL慢病毒)和慢病毒高剂量组(每侧肾皮质注射20μL慢病毒),注射后7 d和21 ... 详细信息

目的研究在肾脏高效导入目的基因miR-483-5p的方法。方法肾皮质注射miR-483-5p慢病毒:取35只C57BL/6J小鼠,随机分为空白对照组、慢病毒低剂量组(每侧肾皮质注射5μL慢病毒)和慢病毒高剂量组(每侧肾皮质注射20μL慢病毒),注射后7 d和21 d处死取材;构建可诱导全身过表达miR-483-5p的转基因小鼠;利用cre-loxp系统构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠。3种模型小鼠利用全自动生化分析仪检测血清中尿素氮(BUN)水平判断肾功能,组织切片HE染色观察肾脏组织结构,TUNEL法检测肾脏细胞凋亡。Real-time q PCR检测miR-483-5p在肾脏的表达。结果 3种过表达miR-483-5p小鼠肾功能均正常,肾脏组织结构无明显变化,肾脏细胞无凋亡。肾皮质注射20μL LV3-miR-483-5p后21 d表达最高(1.2±0.43 vs8.6±1.09,P<0.001)。可诱导全身过表达miR-483-5p的转基因动物在肾脏表达效率较低(0.9±0.09 vs 1.7±0.19,P<0.05),Creloxp转基因小鼠可实现在肾脏特异性表达,且效率较高(1.6±1.13 vs 12.36±3.89,P<0.05)。结论首次构建肾小管特异过表达miR-483-5p的转基因小鼠模型,实现在肾小管特异高效表达,且不影响肾脏结构及功能,可以作为研究miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制的良好模型;C57BL/6J小鼠每侧肾皮质注射20μL LV3-miR-483-5p后21 d过表达miR-483-5p效率较高,不影响肾功能,对肾组织无损伤,且模型构建时间较短,为miR-483-5p在肾脏中的作用及其机制研究提供良好的实验模型。

关键词：慢病毒肾组织转基因技术 miR-483-5p

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雌二醇显著上调骨质疏松大鼠成骨细胞内抗氧化酶的表达

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南方医科大学学报 2018年第4期38卷 402-408页

作者：周雪娟夏颖赵岩岩古文清肖潇白晓春刘俊李明南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广州军区广州总医院泌尿外科广东广州510010

目的探讨雌二醇对成骨细胞内抗氧化酶表达的影响及在绝经后骨质疏松中的作用。方法构建去卵巢骨质疏松大鼠模型,随机分为SHAM组(假手术组),OVX组(去卵巢手术组),OVX+E2组(雌二醇+去卵巢手术组),3月后检测以下常规指标鉴定骨质疏松模型... 详细信息

目的探讨雌二醇对成骨细胞内抗氧化酶表达的影响及在绝经后骨质疏松中的作用。方法构建去卵巢骨质疏松大鼠模型,随机分为SHAM组(假手术组),OVX组(去卵巢手术组),OVX+E2组(雌二醇+去卵巢手术组),3月后检测以下常规指标鉴定骨质疏松模型是否成功:体质量、血清Ca2+、P、碱性磷酸酶(ALP)、酸性磷酯酶(ACP)以及骨密度。同时检测血清活性氧(H2O2)及抗氧化酶γ-GCS、GSH-px和GSH-ST水平;PCR和Western blot检测雌二醇对成骨样细胞MC3T3-E1、MG63和原代成骨细胞(OB)内关键的抗氧化酶γ-GCS mRNA和蛋白表达的影响;mRNA芯片检测雌二醇对成骨细胞前体MC3T3-E1内84种抗氧化酶表达的影响;利用PCR验证筛选出的有变化的抗氧化酶;利用CCK8检测雌二醇和抗氧化剂NAC对MC3T3-E1细胞增殖的影响。结果去卵巢手术组大鼠体质量增加,血清P、ALP、ACP升高,骨密度显著下降,表明造模成功。同时血清活性氧(H2O2)水平显著增加,而抗氧化酶γ-GCS水平显著下降。造模的同时给予雌二醇预防性治疗,可逆转骨质疏松表型,同时抑制血清活性氧水平,并提高抗氧化酶γ-GCS水平;雌二醇上调MC3T3-E1、MG63及OB中关键的抗氧化酶γ-GCS mRNA和蛋白水平;mRNA芯片筛查到雌激素上调MC3T3-E1细胞内6种抗氧化酶(Gpx6、Gstk1、Nos2、Prdx2、Ngb和Ccs)表达;PCR检测发现雌二醇均上调成骨样细胞MC3T3-E1、MG63及OB内Ccs和Ngb mRNA水平;雌二醇和抗氧化剂NAC促进成骨细胞MC3T3-E1增殖。结论雌二醇显著上调成骨样细胞内抗氧化酶γ-Gcs、Ccs和Ngb的表达。绝经后骨质疏松与体内活性氧增高,抗氧化水平下降密切相关。雌激素缺乏可能通过增加成骨细胞内活性氧水平,降低抗氧化酶水平,启动氧化应激级联反应,进而抑制成骨细胞增殖,加重骨质疏松的进程。

关键词：雌二醇抗氧化酶骨质疏松

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LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿外周血单个核细胞基因表达谱的RNA-Seq分析

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广西医科大学学报 2019年第5期36卷 803-808页

作者：朱兰玉覃霞方玲舒伟林有坤广西医科大学第一附属医院皮肤性病科南宁530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室南宁530021

目的:分析LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿外周血单个核细胞基因表达谱的转录组测序(RNA-seq)结果。方法:将3例LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿作为病例组,1例正常儿童为对照组,应用RNA-seq技术对两组外周血单个核细胞进行全转录组测... 详细信息

目的:分析LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿外周血单个核细胞基因表达谱的转录组测序(RNA-seq)结果。方法:将3例LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿作为病例组,1例正常儿童为对照组,应用RNA-seq技术对两组外周血单个核细胞进行全转录组测序,分析差异表达基因,并对这些差异基因进行GO功能和Pathway显著性富集分析。结果:病例组与对照组差异表达基因共有135个,其中下调91个,上调44个。差异基因功能涉及DNA复制、能量代谢、信号转导、炎症等方面,其中MCM、GINS2、CDC45与DNA复制有关;IL-8、FOS、CXCR2等与炎症有关;TOP2A、ABCG1、KIF4A、KIF2C、KIF20A、KIF14、KIF11、KIF18B、KIFC1、KIF15等与细胞能量代谢有关;BUB1、AURKB、BUB1B、PKMYT1、MELK与蛋白激酶活性有关。GO功能显著性富集分析结果显示:差异基因的功能主要包括生物学行为调控、细胞组分形成及分子功能,集中表现在生物学过程部分行为的调控。Pathway显著性富集分析10条具有显著性差异的通路,其中细胞周期及细胞衰老通路明显富集。结论:调控细胞周期的相关基因的表达量改变可能参与LMNA基因R527C纯合突变早老症患儿疾病的发生和发展。

关键词：儿童早老症 RNA-Seq R527C LMNA

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生命科学实验耗材市场及关键制造技术的现状、挑战与对策

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中国医疗器械信息 2019年第13期25卷 35-39页

作者：刘佳吴茉莉华南理工大学医学院广东广州510006 大连医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁大连116044

随着生命科学相关领域的迅速发展,生命科学实验耗材产品的需求量急剧增加,行业市场规模不断扩大。2018年全球生命科学实验耗材销售额为336.8亿美元,预计每年还将以15%~20%的速度增长。它们的种类和质量不断完善和提高,向着更加方便、智... 详细信息

随着生命科学相关领域的迅速发展,生命科学实验耗材产品的需求量急剧增加,行业市场规模不断扩大。2018年全球生命科学实验耗材销售额为336.8亿美元,预计每年还将以15%~20%的速度增长。它们的种类和质量不断完善和提高,向着更加方便、智能、精准、高效、实验数据管理更加系统化和数字化的方向发展。目前,国外跨国公司在关键技术及市场方面仍占主导地位,但巨大的国内外市场需求和日益增强的制造能力为我国实验耗材企业突破各种发展壁垒提供了良好的契机,为其健康快速发展创造有利的条件。

关键词：生物医药实验耗材市场关键技术趋势

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