检索结果-内蒙古大学图书馆

国际遗传学杂志 2011年第3期34卷 135-140+152页

作者：张杰武李燕华聂春磊孔令宇徐晋哈尔滨医科大学第三附属医院头颈外科哈尔滨医科大学基础医学院细胞生物学教研室

目的研究ΔNp63促进头颈鳞癌细胞增殖及存活的作用及相关分子机制。方法筛选高表达ΔNp63的头颈鳞癌细胞系,采用RNAi方法分别抑制ΔNp63及P63表达。RT-PCR、Western印迹、MTT法、流式细胞术等检测细胞增殖和细胞周期等生物学行为改变;... 详细信息

目的研究ΔNp63促进头颈鳞癌细胞增殖及存活的作用及相关分子机制。方法筛选高表达ΔNp63的头颈鳞癌细胞系,采用RNAi方法分别抑制ΔNp63及P63表达。RT-PCR、Western印迹、MTT法、流式细胞术等检测细胞增殖和细胞周期等生物学行为改变;并检测相关周期调控蛋白的表达。结果ΔNp63在FaDu细胞中高表达,定位于细胞核。抑制ΔNp63及P63表达后,FaDu细胞增殖能力明显下降（t=3.66,P<0.01）,发生G;期细胞周期阻滞;CDK抑制物P21及P27蛋白表达上调,P53表达上调。结论ΔNp63对FaDu细胞增殖及存活发挥主导作用,ΔNp63通过抑制p21、p27的表达,促进肿瘤细胞的生长和增殖。

关键词： ANp63 RNA干扰头颈鳞癌细胞增殖

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血管内皮生长因子在人类和鼠成骨细胞中的选择性剪接表达

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中华实验外科杂志 2005年第7期22卷 835-836页

作者：李长有宋今丹原银栋范广宇中国医科大学附属第一医院骨科沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室卫生部重点实验室

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选... 详细信息

目的探讨血管内皮生长因子(VEGF)各种转录本亚型在成骨细胞分化中的作用。方法应用特殊设计的引物,逆转录聚合酶链反应(RTPCR)检测VEGFmRNA在人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63和胎鼠颅盖骨细胞(FRC)在第0、5、9、14天不同分化阶段中的选择性剪接表达。结果人类成骨细胞样细胞SaOS2和MG63表达所有的VEGFmRNA亚型,其中以VEGF121和VEGF165表达最强。鼠FRC细胞表达3种VEGFmRNA亚型(即VEGF120,VEGF144和VEGF164),其中以VEGF120和VEGF164表达最强。伴随着FRC细胞的增殖、分化和矿化,这些亚型的表达逐渐增强,并且在结节矿化后达到最高水平。结论小分子的VEGF121/120和VEGF165/164在成骨细胞的分化过程中表达增强,可能起重要的血管源性调节作用。

关键词：选择性剪接血管内皮生长因子(VEGF) 人类成骨细胞样细胞 SaOS-2 VEGF165 成骨细胞分化聚合酶链反应颅盖骨细胞方法应用 mRNA 细胞表达表达增强分化过程调节作用血管源性 A亚型转录本逆转录 FRC C细胞高水平

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基于四环素调控系统构建白蛋白启动子调控大鼠uPA转基因表达的慢病毒载体

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动物医学进展 2019年第8期40卷 29-33页

作者：张晟黎海燕廉梅刘宇肖东林晓琳南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 南方医科大学基础医学院肿瘤研究所广东广州510515 南方医科大学实验动物中心广东广州510515

基于四环素调控系统构建白蛋白(albumin,Alb)启动子调控大鼠uPA(urokinase-type plasminogen activator,ruPA)转基因肝特异性过表达的慢病毒载体pLVX-Alb-TetOne-TRE-ruPA-T2A-CopGFP(pLATTRUTG)。以CTG0875-2-11质粒为模板,PCR扩增大鼠的uPA(ruPA)基因,3’端添加Flag标签,In-Fusion克隆至pLVX-Alb-TetOne-TRE-T2A-CopGFP(pLATTTG)质粒中,得到慢病毒载体pLVX-Alb-TetOne-TRE-ruPA-T2A-CopGFP(pLATTRUTG),所构建质粒经测序和酶切鉴定。将pLATTRUTG瞬时转染293T细胞,转染后24 h倒置荧光显微镜检测CopGFP表达;接着向6孔细胞培养板内加入强力霉素(Doxycycline,Dox),48 h后在倒置荧光显微镜下观察CopGFP表达(包括未加Dox的孔),随后收集细胞以提取总RNA和总蛋白,用于RT-qPCR检测ruPA及报告基因表达和Western blot检测标签蛋白Flag表达。酶切和测序确证我们成功构建了慢病毒载体pLATTRUTG;瞬转293T细胞后,24 h倒置荧光显微镜下可见零星细胞(约占0.1%)发弱的绿色荧光,加Dox 48 h后所有细胞展现强的绿色荧光,而不加Dox的孔内仍然只见到零星细胞(约占0.1%)发弱的绿色荧光。RT-qPCR和Western blot检测结果显示,与不加Dox的细胞相比,加Dox的细胞中ruPA、报告基因CopGFP和Flag表达水平显著升高。结果提示,成功基于四环素调控系统构建Alb启动子调控大鼠uPA转基因表达的慢病毒载体pLATTRUTG,为相关后续实验奠定了基础。

关键词：白蛋白启动子大鼠尿激酶桡足类绿色荧光蛋白四环素调控系统慢病毒载体

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应用凝集素芯片检测兔组织细胞膜表面糖谱

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中国医科大学学报 2009年第1期38卷 1-4页

作者：何群张艳宋春阳潘忠诚王天骄张玉魁赵雨杰中国医科大学基础医学院生物芯片中心卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001 沈阳医学院细胞生物学教研室沈阳110034

目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面... 详细信息

目的应用凝集素芯片检测兔不同组织细胞膜表面糖链类型。方法分别用不同胶原酶消化兔的脾、肾和肝组织,对消化后得到的细胞进行荧光标记,利用凝集素对糖链的特异亲和性捕获细胞,激光扫描仪检测细胞膜表面糖谱。结果兔不同组织细胞表面糖链类型不同:肝细胞特异亲和的凝集素为LTL,脾细胞为SNA和WGA,3种组织细胞共有DSL、MAL、AAL、STL。结论肝细胞膜表面特有糖链为L-岩藻糖,脾细胞特有糖链为唾液酸,使用凝集素芯片检测细胞膜表面的糖链特异性为建立各种细胞膜表面糖谱提供依据。

关键词：凝集素糖组学细胞膜

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羟基乙酰化姜黄素诱导的声动力治疗对巨噬细胞凋亡与坏死的影响

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中国应用生理学杂志 2015年第2期31卷 102-106页

作者：杨力明梁会娟彭成海程佳丽王欢翁丽清李志韬田野哈尔滨医科大学基础医学院病生教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨工业大学物理凝聚态实验室黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第四医院急诊内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学附属第一医院心内科黑龙江哈尔滨150001

目的:探讨羟基乙酰化姜黄素(HAC)介导的声动力治疗对人急性单核细胞白血病细胞核(THP-1)源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外诱导THP-1源巨噬细胞,通过单纯药物和单纯超声对细胞存活率的影响优化出声动力治疗的最适条件。将细胞分为4组(1&#... 详细信息

目的:探讨羟基乙酰化姜黄素(HAC)介导的声动力治疗对人急性单核细胞白血病细胞核(THP-1)源巨噬细胞凋亡的影响。方法:体外诱导THP-1源巨噬细胞,通过单纯药物和单纯超声对细胞存活率的影响优化出声动力治疗的最适条件。将细胞分为4组(1×105cells/ml):对照组、单纯超声组、单纯HAC组和声动力治疗组。应用声动力体外治疗巨噬细胞,药物HAC终浓度为5μg/ml,超声强度为0.5 W/cm2,超声时间为5 min。不同治疗方法后用无血清培养液培养6 h,用CCK-8法测定细胞存活率的变化,用Annexin V/PI法测定细胞凋亡、坏死变化。结果:CCK-8法测得声动力治疗后,细胞存活率明显下降(P<0.01),Annexin V/PI法测得声动力治疗后,细胞凋亡率和坏死率均升高,凋亡/坏死比升高(P<0.01)。结论:羟基乙酰化姜黄素介导的声动力治疗对THP-1巨噬细胞的凋亡有明显的诱导效应。

关键词：羟基乙酰化姜黄素声动力治疗巨噬细胞凋亡

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中国老年学杂志 2023年第19期43卷 4637-4642页

作者：刘建兵李文龙王伟李莉郝敏山西医科大学第二医院妇产科山西太原036000 山西医科大学基础医学院医学细胞生物与遗传学教研室山西太原036000

目的拟筛选宫颈鳞癌预后相关的miRNAs分子并探索其可能的作用机制,为改善宫颈鳞癌预后提供实验依据。方法通过生物信息学方法比较分析宫颈鳞癌患者和正常对照的基因表达情况,获得差异表达的miRNA;然后进行生存分析,找到与预后相关的关键... 详细信息

目的拟筛选宫颈鳞癌预后相关的miRNAs分子并探索其可能的作用机制,为改善宫颈鳞癌预后提供实验依据。方法通过生物信息学方法比较分析宫颈鳞癌患者和正常对照的基因表达情况,获得差异表达的miRNA;然后进行生存分析,找到与预后相关的关键miRNA;最后通过构建lncRNA-miRNA-mRNA竞争性内源RNA(ceRNA)网络及基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)分析,探索预后相关的ceRNA网络。结果共获得宫颈鳞癌中差异表达的miRNA 106个,其中,9个miRNAs(hsa-miR-425-5p、hsa-miR-145-3p、hsa-miR-1307-3p、hsa-miR-200c-3p、hsa-miR-142-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-155-5p、hsa-miR-210-5p、hsa-miR-142-3p)与预后显著相关。成功构建了一个宫颈鳞癌预后相关的ceRNA网络,其中包括5个miRNA节点、132个mRNA节点、44个lncRNA节点和181条边。最后,GO和KEGG分析显示该网络主要涉及蛋白结合、生长因子结合、转录因子的活化、DNA特异序列的结合等功能,主要参与环磷酸鸟苷酸-蛋白激酶(cGMP-PK)G、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)、叉头框蛋白(Fox)O信号通路等的调节。结论hsa-miR-425-5p等9个miRNAs与宫颈鳞癌预后显著相关,并可能通过lncRNA-miRNA-mRNA ceRNA网络的方式参与预后调控,为宫颈鳞癌预后相关机制研究提供新思路。

关键词：宫颈鳞癌 miRNA 竞争性内源RNA(ceRNA)网络

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细胞周期相关蛋白DCT1染色体及细胞定位与其组织表达的研究

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中国医科大学学报 2010年第2期39卷 105-107,111页

作者：刘琦王述森高锦兰曹丽华罗阳中国医科大学基础医学院医学基因组学教研室卫生部细胞生物学重点实验室沈阳110001

目的对候选抑癌基因DOC-1R((Deleted in oral cancer-1 related,CDK2AP2)相关基因DCT1(DOC-1Rterminal1)进行染色体定位分析并观察其细胞内定位,检测该基因在人类组织中的表达。方法通过辐射杂交细胞系对其进行染色体定位分析,同时构建E... 详细信息

目的对候选抑癌基因DOC-1R((Deleted in oral cancer-1 related,CDK2AP2)相关基因DCT1(DOC-1Rterminal1)进行染色体定位分析并观察其细胞内定位,检测该基因在人类组织中的表达。方法通过辐射杂交细胞系对其进行染色体定位分析,同时构建EGFP-DCT1质粒并转染HeLa细胞,荧光显微镜观察DCT1蛋白在细胞内的定位。此外,应用荧光定量PCR的方法检测该基因在16个正常人类组织中的表达。结果DCT1基因定位于5q31,其编码产物在HeLa细胞中定位于核膜,该基因在正常人类的16个组织中均有表达,其中在脾中表达水平较高。结论DCT1可能为细胞周期调控相关基因,在人类组织中普遍表达。

关键词： DCT1基因 DOC-1R基因染色体定位细胞定位基因表达

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小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段的克隆及其GST融合蛋白的表达和纯化

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中国医科大学学报 2006年第5期35卷 454-457页

作者：王欣刘彤陈莹陈杰中国医科大学公共卫生学院尘肺研究室辽宁沈阳110001 中国医科大学基础医学院细胞生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:获取小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段,并高效表达和纯化GST-TSR2-3融合蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从小鼠肺总RNA中,获得编码TSR2-3的基因片功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入*** BL21宿主菌中,I... 详细信息

目的:获取小鼠TSR2-3/TSP-1基因片段,并高效表达和纯化GST-TSR2-3融合蛋白。方法:应用RT-PCR技术,从小鼠肺总RNA中,获得编码TSR2-3的基因片功能片段,测序后,通过酶切克隆至表达载体pGEX-5X-2,构建重组表达载体,并导入*** BL21宿主菌中,IPTG诱导表达重组的GST融合蛋白,亲和层析纯化表达产物,SDS-PAGE和Western blot进行分析鉴定。结果:获得小鼠TSR2-3基因片段,测序结果与GenBank的基因序列一致,重组GST融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot分析,在相对分子量39 kDa处,出现特异性蛋白条带,重组蛋白经GST亲和层析柱纯化后,得到了高纯度的融合蛋白。结论:成功克隆小鼠TSR2-3基因片段,并在*** BL21中高效表达,亲和层析后获得高纯度GST-TSR2-3融合蛋白。

关键词： TSR2—3基因克隆表达纯化

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抗小鼠TLR2胞外段单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发小鼠腹膜炎的影响

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南方医科大学学报 2009年第8期29卷 1521-1524页

作者：杨翠兰赵文忠黄恩平罗深秋南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 广东省计划生育科学技术研究所广东广州510600

目的观察抗小鼠TLR2胞外段(mTLR2ECD)单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发的小鼠腹膜炎的主要作用。方法用腹腔灌洗、细胞计数及特异染色、免疫组化、ELISA等各种方法检测了抗体TSP-2对模型动物的扭身次数、腹腔灌洗液的伊文思兰渗出、腹腔... 详细信息

目的观察抗小鼠TLR2胞外段(mTLR2ECD)单表位抗体TSP-2对酵母多糖诱发的小鼠腹膜炎的主要作用。方法用腹腔灌洗、细胞计数及特异染色、免疫组化、ELISA等各种方法检测了抗体TSP-2对模型动物的扭身次数、腹腔灌洗液的伊文思兰渗出、腹腔白细胞浸润的数量变化、腹腔肥大细胞脱颗粒情况以及腹腔灌洗液离心上清中PAF和TNFα水平的影响。结果与PBS处理组和正常兔IgG组相比,抗体TSP-2能促使小鼠因腹腔炎症引起的扭身次数减少,腹腔灌洗液中伊文思蓝OD值降低,腹腔灌洗液中白细胞渗透减少以及C48/80诱导的腹腔肥大细胞脱颗粒降低。结论抗体TSP-2可能通过对肥大细胞脱颗粒的抑制作用减轻酵母多糖诱导的小鼠腹膜炎炎症症状。

关键词： mTLR2 TSP-2 酵母多糖腹膜炎

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真核细胞翻译延长因子在病毒性疾病中的作用

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国际病毒学杂志 2020年第5期27卷 433-436页

作者：刘欣宇钟照华哈尔滨医科大学基础医学院微生物教研室 150081

真核细胞翻译延长因子(eukaryotic elongation factor 1A,eEF1A)是真核生物体内参与蛋白质合成的重要分子,它通过与转运RNA(transfer ribonucleic acid,tRNA)结合发挥主要生物学功能。但越来越多的研究发现,eEF1A在多种病毒的转录与翻... 详细信息

真核细胞翻译延长因子(eukaryotic elongation factor 1A,eEF1A)是真核生物体内参与蛋白质合成的重要分子,它通过与转运RNA(transfer ribonucleic acid,tRNA)结合发挥主要生物学功能。但越来越多的研究发现,eEF1A在多种病毒的转录与翻译过程中也能发挥重要作用,说明eEF1A与病毒感染有着密切的联系。eEF1A一方面参与了病毒的复制过程,另一方面以分子伴侣的形式调控病毒性疾病的病理进程。本文对eEF1A在病毒性疾病发生发展过程中发挥的作用与机制进行综述。

关键词： eEF1A RNA病毒病毒复制病毒性疾病肿瘤

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