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中国药理学通报 2017年第2期33卷 175-180页

作者：梁海海李天宇解岩单宏丽哈尔滨医科大学药学院药理学教研室省部共建生物医药重点实验室培育基地心血管药物研究教育部重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理学教研室黑龙江大庆163319

目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth facto... 详细信息

目的研究Lin28B/let-7d环路诱导肺成纤维细胞增殖、分化的作用及分子机制,为临床肺纤维化的治疗提供新的策略。方法气管注射博来霉素(bleomycin,BLM)造成小鼠肺纤维化模型;血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1诱导人胚肺成纤维细胞(MRC-5)纤维性变;qRT-PCR检测组织及细胞中Lin28B、collagen 1α1、collagen 3α1变化;Western blot检测Lin28B蛋白表达;MTT、Edu染色和免疫荧光实验分别检测细胞活力、增殖及成纤维细胞向肌成纤维细胞的转变。结果 Lin28B在肺纤维化小鼠和细胞中表达明显升高。Lin28B可诱导MRC-5细胞胶原合成增加,而过表达let-7d则减轻Lin28B的这一作用。进一步研究发现,Lin28B可诱导成纤维细胞增殖,并促进成纤维细胞向肌成纤维细胞转变,这一作用是通过抑制let-7d来实现的。结论 Lin-28B通过抑制let-7d进而促进成纤维细胞增殖、分化,最终增加成纤维细胞胶原合成,诱发肺纤维化的发生,Lin28B可能作为肺纤维化的治疗新靶点。

关键词：肺纤维化 Lin28B let-7d MRC-5细胞肌成纤维细胞细胞增殖

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食管鳞癌KYSE30细胞系中基因断裂和重排研究

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国际遗传学杂志 2017年第6期40卷 323-330页

作者：宫婷史志周詹厅张钰徐昕蔡岩白静傅松滨于旸郝佳洁王明荣哈尔滨医科大学大庆校区病理生理学教研室国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室哈尔滨医科大学医学遗传学研究室昆明理工大学医学院

目的分析食管鳞癌KYSE30细胞系中的基因断裂和重排,为食管癌基因重排及其作用的研究提供新的信息。方法通过比较基因组杂交微阵列(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)筛选和双色荧光原位杂交(fluorescence in si... 详细信息

目的分析食管鳞癌KYSE30细胞系中的基因断裂和重排,为食管癌基因重排及其作用的研究提供新的信息。方法通过比较基因组杂交微阵列(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)筛选和双色荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析断裂基因,采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)、RT-PCR和双色FISH等技术对断裂基因进行鉴定。结果 array-CGH筛选和双色FISH分析显示,PLCL1、SCFD2、JARID2、LHFPL3、GABBR2、GPC6、MYH10、MCTP1发生了断裂。通过分子水平的鉴定,发现了MYH10基因与13q21.32的融合、MCTP1基因的截短以及GPC6基因的重排。进一步通过FISH分析,在食管癌组织中发现了MYH10基因的断裂。结论在食管鳞癌KYSE30细胞系中存在PLCL1、SCFD2、JARID2、LHFPL3、GABBR2、GPC6、MYH10、MCTP等基因的断裂,其中MYH10、MCTP1和GPC6基因发生了重排,形成了融合和截短新的异常转录本。这些结果为深入探索影响食管癌发生发展的关键基因提供了新的线索。

关键词：食管鳞癌 KYSE30 断点基因重排

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瞬时受体电位香草酸受体3的功能及其激活因素研究进展

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山东医药 2016年第47期56卷 100-103页

作者：李忠华李晓蕾贵州医科大学第三附属医院贵州都匀558000 哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院病理教研室

瞬时受体电位香草酸受体(TRPV)通道蛋白是瞬时受体电位通道蛋白超家族中的重要成员。TRPV通道蛋白包括6个成员,其中TRPV3作为一种热敏感通道蛋白,在皮肤等多种组织中都有表达,参与温度传感、炎症反应、毛发生长和皮肤屏障完整性、钙调... 详细信息

瞬时受体电位香草酸受体(TRPV)通道蛋白是瞬时受体电位通道蛋白超家族中的重要成员。TRPV通道蛋白包括6个成员,其中TRPV3作为一种热敏感通道蛋白,在皮肤等多种组织中都有表达,参与温度传感、炎症反应、毛发生长和皮肤屏障完整性、钙调节等多种生理过程。TRPV3的激活因素包括温度、一些化学配体(如2-氨基乙氧基联苯硼酸盐)、内源性激动剂(如法尼基焦磷酸)和调节因子。

关键词：瞬时受体电位通道瞬时受体电位香草酸受体温度传感钙离子载体瞬时受体电位香草酸受体化学配体瞬时受体电位香草酸受体激动剂

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PELP1调控ERα阳性乳腺癌细胞对紫杉醇敏感性的作用和机制研究

PELP1调控ERα阳性乳腺癌细胞对紫杉醇敏感性的作用和机制研究

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2015医学前沿论坛暨第十四届全国肿瘤药理与化疗学术会议

作者：张艳枝张冬梅王秀丽代佳利潘昱王麟哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院病理生理教研室

目的:研究雌激素受体（Estrogen receptor,ER）辅助调节因子脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1（proline-,glutamic acid-,leucine-rich protein 1,PELP1）参与调控ERα阳性乳腺癌细胞对紫杉醇（Paclitaxel,PTX）敏感性的作用与机制。方法:通过浓度递增筛选法分别在MCF-7、T47D乳腺癌细胞上建立PTX耐药株（MCF-7/PtR,T47D/PtR）,MTT法检测细胞活力,比较在有无雌二醇（Estradiol,E）、有无雌二醇-牛血清白蛋白（E-BSA）、有无ER阻断剂氟维司群（Fulvestrant,Ful）、是否干扰PELP1表达、有无PI3K抑制剂LY294002条件下PTX对细胞的半数抑制浓度（IC50）;Realtime-PCR、Western blot检测ERα、SRC-1、AIB1、PELP1、Akt、Bcl-2、Bad、Caspase3、Caspase8表达变化,Western blot检测Akt磷酸化、Caspase激活;免疫荧光检测PELP1/E-BSA,PELP1/ERα,ERα/E-BSA共定位,流式细胞术、TUNEL检测细胞凋亡;免疫组织化学检测原发性乳腺癌组织标本中ERα、PELP1、Akt、Bcl-2、Bad表达,做相关性分析。结果:PTX对MCF-7/PtR,T47D/PtR的IC50分别为相应对照组的18.2和26.7倍（P<0.05）;相对对照组,MCF-7/PtR、T47D/PtR细胞PELP1、BCL-2表达水平显著升高,Akt磷酸化增强,Caspase活化受到抑制;E上调MCF-7、T47D细胞对PTX的IC50、诱导Akt磷酸化、上调PELP1、BCL-2表达、抑制Caspase活化、抑制细胞凋亡,E-BSA也可产生与E相似的作用;敲减PELP1或采用Ful、LY294002预处理细胞可部分取消E-BSA上调PTX IC50的作用,敲减PELP1抑制E-BSA诱导的Akt磷酸化、BCL-2表达上调,增强PTX诱导的Caspase活化;在MCF-7/PtR细胞可观察到E-BSA、ERα、PELP1共定位;原发性乳腺癌组织中,ERα、PELP1、Bcl-2表达水平呈显著正相关。结论:PELP1通过激活ERα介导的雌激素非基因组信号转导通路抑制PTX诱导的细胞凋亡,从而在ERα阳性乳腺癌细胞对PTX耐药形成过程中发挥重要作用。

关键词：乳腺癌细胞 MCF PTX Caspase PELP1 紫杉醇机制研究

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hβ-arrestin2基因重组质粒构建及蛋白表达和定位

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现代肿瘤医学 2015年第9期23卷 1198-1200页

作者：刘彩红毛琪郭文东朱亚勤中国医科大学基础医学院细胞病理生物学研究室细胞生物学教研室教育部医学细胞生物学重点实验室辽宁沈阳110001 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验与技术学院免疫教研室黑龙江大庆163319

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测... 详细信息

目的:构建p EGFP-C1-β-arrestin2融合蛋白表达载体,并证实融合蛋白在细胞内的表达及定位。方法:以p GEX-5X-1-β-arrestin2为模板,PCR法扩增hβ-arrestin2编码序列,亚克隆至p EGFP-C1中,p EGFP-C1-β-arrestin2经双酶切初步鉴定再送测序公司检测正确后瞬时转染人胚肾细胞HEK293,Western blot检测融合蛋白表达。激光扫描共聚焦显微镜观察融合蛋白在HEK293细胞中的分布。结果:hβ-arrestin2编码序列被成功克隆至p EGFP-C1中,Western blot检测到融合蛋白表达,分子量约为77k Da,p EGFP-C1-β-arrestin2定位于HEK293细胞的细胞质中。结论:成功构建hβ-arrestin2基因真核表达载体,证实了融合蛋白定位在HEK293的细胞质中。

关键词： hβ-arrestin2基因蛋白质印记绿色荧光蛋白

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雌激素受体辅助调节因子PELP1在雌二醇诱导ERα阳性乳腺癌MMP-9表达中的作用

雌激素受体辅助调节因子PELP1在雌二醇诱导ERα阳性乳腺癌MMP-9表...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：张艳枝代佳利王鹏潘昱王麟哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院病理生理教研室哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室

目的:观察雌激素受体辅助调节因子脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1(Proline-,glutamic,?(Estrogen receptor?acid-,leucine-rich protein 1,PELP1)在雌激素调控雌激素受体)阳性乳腺癌细胞基质金属蛋白酶-9(Matrix?ER阳性乳腺癌细胞MMP-9表达的可能信号转导通路。方法:?metalloproteinase-9,MMP-9)表达中的作用,并初步探讨雌激素调控ER阳性MCF-7乳腺癌细胞株上构建敲减PELP1模式细胞株;2.分别采用1×10-8M雌二醇(Estradiol,?1.通过慢病毒转染PELP1-sh RNA的方法在ER E2)和不能透过细胞膜的牛血清白蛋白-雌二醇(Bovine serum albumin-E2,BSA-E2)处理MCF-7野生株、MCF-7 PELP1敲减株2min、5min、10min、30min、1h、6h、12h、24h,提取细胞总RNA及总蛋白,分别采用Real-time PCR、western Blot检测各时间点MMP-9 m RNA、蛋白表达水平;3.收集110例原发性乳腺癌组织标本,采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中PELP1、MMP-9表达水平,进行相关性分析。结果:***1-sh RNA组PELP1蛋白表达水平为阴性对照sh RNA组的13.6%(P<0.001),成功构建了敲减PELP1 MCF-7模式细胞株。***-7野生株MMP-9 m RNA与蛋白表达水平在E2处理后10min开始显著升高,1h达到最大;MCF-7 PELP1敲减株MMP-9 m RNA和蛋白表达水平在E2处理后30min开始显著升高,1h达到最大;E2处理后30min、1h,MCF-7 PELP1敲减株MMP-9 m RNA和蛋白表达水平均显著低于MCF-7野生株。3.E2-BSA处理后,MCF-7野生株MMP-9 m RNA与蛋白表达水平起始升高时间延迟至30min,仍于1h达到最大;MCF-7 PELP1敲减株MMP-9 m RNA和蛋白表达水平在E2-BSA处理后30min显著升高,但1h后开始下降;E2-BSA处理后30min、1h,MCF-7 PELP1敲减株MMP-9 m RNA和蛋白表达水平均显著低于MCF-7野生株。***1在原发性乳腺癌组织中呈单纯核表达、单纯浆表达、浆、核共表达以及阴性表达4种模式,PELP1单纯浆表达组和PELP1浆、核共表达组MMP-9表达阳性率显著高于PELP1单纯核表达组和PELP1阴性表达组(P=0.004)。结论:阳性乳腺癌细胞MMP-9表达可能是通过膜启动的类固醇激素信号转导通路实现的。?阳性乳腺癌细胞MMP-9表达需要PELP1的参与;3.E2诱导ER?阳性乳腺癌细胞MMP-9表达是一种快速反应;2.E2诱导ER?1.E2诱导ER

关键词：膜启动的类固醇信号转导通路乳腺癌 α脯氨酸-谷氨酸-亮氨酸富集蛋白1 基质金属蛋白酶-9 雌激素受体

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The neuroprotective effects of baicalin on ethanol-induced impairment via anti-oxidative and anti-apoptotic pathway

The neuroprotective effects of baicalin on ethanol-induced i...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：王鹏曲丽辉曹永刚张倩龙李淑芝朱辉哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院机能实验中心哈尔滨医科大学基础医学院生理教研室

Baicalin is a major bioactive ingredient from the roots of Scutellaria baicalensis Georgi and has various pharmacological actions such as anti-apoptosis and anti-oxidative ***,an involvement of baicalin in the ethanol-induced cerebral impairment remains ***,here we explored that the neuroprotective effects of baicalin on ethanol-induced impairment in C57BL/6 mice model with Lieber-De Carli liquid diet including *** utilizing Morris water maze test,we found that baicalin attenuated the cognitive dysfunction of mice treated with *** discuss the anti-apoptosis effects of baicalin on ethanol mediated neuronal impairment,histopathological examination such as Nissl staining and Neu N immunohistochemistry,molecular biological analysis such as Western Blot and quantitative PCR were used to evaluate the apoptosis of hippocampal *** analysis of above results showed that baicalin could attenuate apoptosis of hippocampal neurons after ethanol *** explore the anti-oxidative mechanism of baicalin in hippocampal neuronal impairment caused by ethanol,the oxidative stress injury of hippocampal neurons was evaluated by measuring levels of malondialdehyde(MDA),activities of catalase(CAT),Cu/Zn-superoxide dismutase(SOD),Mn-SOD,glutathione(GSH)and glutathione peroxidase(GSH-PX).In addition,Western blot analysis showed that baicalin modulated the protein expressions of mitogen-activated protein kinases(MAPKs),including ERK,JNK and ***,these results suggest that baicalin alleviates ethanol-mediated hippocampal neuronal impairment by anti-apoptosis and anti-oxidative,and then improves cognitive function of mice treated byethanol,which is likely to be related to MAPK signal pathway.

关键词： Baicalin Ethanol Oxidative stress Apoptosis MAPKs

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rhAng-1对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障血管内皮细胞间连接的影响

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 147-152页

作者：于航贾庆波薛一雪哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学附属第五医院胸外科黑龙江大庆163319 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng... 详细信息

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng-1+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组。用伊文思兰渗透性实验检测血脑屏障通透性;TTC法检测脑梗死面积;按Zea Longer评分标准对大鼠神经功能损伤进行评分;用免疫组化、RT-PCR和West-ern blot法检测occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达。结果:rhAng-1可明显降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性,降低脑梗死面积;rhAng-1可使细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达增加。结论:rhAng-1通过上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性。

关键词：重组人血管生成素1 局灶性脑缺血/再灌注 ZO-1 occludin VE-cadherin

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Inward rectifier K+ currents are regulated by Ca MKⅡ in endothelial cells of primarily cultured bovine pulmonary arteries

Inward rectifier K+ currents are regulated by Ca MKⅡ in end...

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中国生理学会第24届全国会员代表大会暨生理学学术大会

作者：曲丽辉于磊王艳丽 Xin Jin 张倩龙陆萍于秀峰 Ningren Cui Chun Jiang 朱大岭哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理学教研室哈尔滨医科大学大庆校区药学院生物制药教研室哈尔滨医科大学第一临床医学院风湿免疫教研室 Department of Biology Georgia State University50 Decatur StreetAtlantaGA 30302USA

Endothelium lines vascular walls and regulates vascular *** endothelial cells sense and respond to chemical and mechanical stimuli in the circulation,and couple the stimulus signals to vascular smooth muscles,in which several membrane receptors and ion channels play a *** about these surface-expressing proteins may help to understand endothelium function and its role in certain vascular *** we show a K+current in primarily cultured pulmonary arterial endothelial cells(PAECs)that is regulated by the Ca2+/calmodulin(Ca M)-dependent protein kinase Ⅱ(Ca MKⅡ).In whole-cell voltage clamp,the PAECs showed large inward rectifier K+currents that were sensitive to micromolar concentrations of extracellular Ba2+,but insensitive to intracellular ATP and p *** excised inside-out patches,an inward rectifier K+current was observed with single-channel conductance 32.43±0.45 p S and Popen 0.27±*** PCR analysis showed strong expression of Kir2.1 in the endothelial *** current did not respond to intracellular GDP-β-S and extracellular cholera *** vascular regulators were *** K+current was insensitive to carbachol,neither to the e NOS inhibitor *** to the Ca M inhibitor W-7 and Ca MKⅡ inhibitor KN-62 strongly suppressed the ***,vasodilation was suppressed by W-7 and Ba2+in isolated and perfused pulmonary arterial ***,these results suggest that the PAECs express an inward rectifier K+current that is likely to be Kir2.1,and such a K+channel appears to be targeted by Ca MKⅡ-dependent intracellular signaling systems.

关键词： Inward rectifier K+ currents endothelial cells Ca MKⅡ primarily cultured bovine pulmonary arteries

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正交实验法优选蓝莓提取工艺

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中国医药 2013年第S1期8卷 73-74页

作者：解岩黄伟王鹏王晓艳 163319 哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室

目的研究影响蓝莓提取的各种因素,确定最佳提取的工艺条件.方法以乙醇浸膏收率、抗感染效果为指标,采用正交实验,考察乙醇提取次数、加醇量、醇浓度、提取时间四个因素的影响.结果在考察因素中,对乙醇浸膏收率、抗感染效果影响程度... 详细信息

目的研究影响蓝莓提取的各种因素,确定最佳提取的工艺条件.方法以乙醇浸膏收率、抗感染效果为指标,采用正交实验,考察乙醇提取次数、加醇量、醇浓度、提取时间四个因素的影响.结果在考察因素中,对乙醇浸膏收率、抗感染效果影响程度均为醇浓度C＞提取次数A＞提取时间D＞加醇量B.结论综合考虑两方面因素,其中以抗感染效果为主要指标,最后确定蓝莓的最佳提取工艺为A1B3C2D2,即用75％乙醇10倍量,每次4h,提取2次.

关键词：蓝莓正交实验法提取工艺

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