检索结果-内蒙古大学图书馆

国际免疫学杂志 2018年第2期41卷 174-177页

作者：袁海燕黄磊高士豪田珍凌虹王甲业哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省教育厅病原生物学重点实验室、哈尔滨医科大学伍连德研究所 150081

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4，CTLA-4）是免疫球蛋白超家族成员，主要表达于活化的T淋巴细胞表面，是重要的T细胞调节因子，其通过负调控作用调节T细胞功能和免疫应答。在HIV-1感染中，T... 详细信息

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4，CTLA-4）是免疫球蛋白超家族成员，主要表达于活化的T淋巴细胞表面，是重要的T细胞调节因子，其通过负调控作用调节T细胞功能和免疫应答。在HIV-1感染中，T细胞功能发生异常，免疫应答出现障碍，因此了解HIV-1感染后机体的免疫调控功能及对HIV-1感染后CTLA-4对病毒的作用及其机制是非常必要的。

关键词：细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 Ⅰ型人类免疫缺陷病毒感染免疫调控

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含齐多夫定或替诺福韦的两组治疗方案的早期疗效评价

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国际免疫学杂志 2018年第2期41卷 154-157页

作者：王丽解洪明金春英高文霞杨丽云赵威凌虹哈尔滨市传染病院 150030 哈尔滨医科大学医学微生物学教研室、伍连德研究所、黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的评估HIV感染者/艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）病人接受一线抗反转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）早期（治疗4周）的疗效。方法2014年9月至2017年9月在哈尔滨市传染病院接受一线ART治疗和随访的HI... 详细信息

目的评估HIV感染者/艾滋病（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）病人接受一线抗反转录病毒治疗（antiretroviral therapy，ART）早期（治疗4周）的疗效。方法2014年9月至2017年9月在哈尔滨市传染病院接受一线ART治疗和随访的HIV/AIDS病人325例，药物组合分别为含齐多夫定（Zidovudine，AZT）或替诺福韦（Tenofovir，TDF）加拉米夫定（lamivudine，3TC）及依菲韦伦（Efavirenz，EFV）两组。用药前、用药后4周，分别测定CD4＋T淋巴细胞数和病毒载量（viral load，VL），评价治疗效果。结果共纳入325例HIV/AIDS病人，AZT组合116人，TDF组合209人，两组在性别、年龄、感染途径占比上差异无统计学意义。AZT和TDF组合在抗病毒治疗4周的病毒抑制率分别为80%和70%，差异有统计学意义（P＝0.049）。将两组病人的基线VL进行分区间对比研究发现，在低基线VL时（HIV-RNA〈105），AZT组合的病毒抑制率（88%）低于TDF组合（94%）但差异无统计学意义（P〉0.05）。基线病毒在高基线VL时（HIV-RNA≥105），AZT组合的病毒抑制率（74%）明显高于TDF组合（57%），差异有统计学意义（P＝0.03）。结论含AZT的治疗方案比TDF治疗方案在短期治疗（4周）具有较高的病毒抑制率，即AZT具有更快速的病毒学应答特性，对指导临床用药合理治疗HIV感染及AIDS有一定意义。

关键词：人类免疫缺陷病毒艾滋病高效抗反转录病毒治疗齐多夫定替诺福韦

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HIV-1gp120三聚体蛋白的小量表达与纯化的方法学研究

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中国病原生物学杂志 2017年第11期12卷 1084-1090,1094页

作者：张昊天凌虹哈尔滨市食品药品检验检测中心黑龙江哈尔滨150090 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省教育厅病原生物学重点实验室

目的利用分子生物学方法获得HIV-gp120三聚体蛋白并进行纯化。以期建立一种适合中小型实验室获得HIV-1包膜糖蛋白(Env)的纯化方法。方法培养HEK 293T细胞,分别在2%和10%胎牛血清(10%FCS)两种浓度下表达pLH-06044gp120T-His质粒(gp120T-H... 详细信息

目的利用分子生物学方法获得HIV-gp120三聚体蛋白并进行纯化。以期建立一种适合中小型实验室获得HIV-1包膜糖蛋白(Env)的纯化方法。方法培养HEK 293T细胞,分别在2%和10%胎牛血清(10%FCS)两种浓度下表达pLH-06044gp120T-His质粒(gp120T-His),获取表达上清液,以pcDNA3.1(+)空质粒转染上清作对照进行SDS-PAGE电泳,根据BSA系列浓度SDS-PAGE电泳后绘制的标准曲线比较10%FCS与2%FCS培养转染细胞目的蛋白表达量的差异;利用Ni-IDA QTZ 6FF亲和层析以咪唑浓度梯度洗脱2%胎牛血清培养的上清液并以变性及非还原条件进行电泳验证,再降低上样量并以相同方法验证小量纯化的可行性;利用Native PAGE以已知浓度的gp120T为标准溶液绘制标准曲线,计算产量与得率;采用酶联吸附免疫试验(ELISA)与多种广谱中和抗体进行反应,分析产物的活性。结果通过小量表达与纯化得到较高纯度的06044-gp120三聚体(gp120T-His),纯化后每1ml转染上清液至少得到约0.5μg三聚体蛋白,得率约为20%。结论采用一步亲和层析法纯化少量gp120三聚体操作简单,试验成本较低,蛋白得率高,纯度高,活性好。该方法可用于备选免疫原的纯化。

关键词：人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白三聚体纯化

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诱导广谱中和抗体的人类免疫缺陷病毒-1疫苗

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国际免疫学杂志 2017年第3期40卷 292-296页

作者：曹子茜李妍凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

由于人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）包膜糖蛋白的高度变异性及较弱的免疫原性,研制HIV疫苗遇到了极大的困难,目前还没有有效疫苗.包膜糖蛋白是诱导中和抗体的主要抗原.如何针对包膜蛋白设计出合理的免疫原,诱导具... 详细信息

由于人免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus,HIV）包膜糖蛋白的高度变异性及较弱的免疫原性,研制HIV疫苗遇到了极大的困难,目前还没有有效疫苗.包膜糖蛋白是诱导中和抗体的主要抗原.如何针对包膜蛋白设计出合理的免疫原,诱导具有交叉保护功能的广谱中和抗体已经成为研究HIV疫苗的主要目标.

关键词：人类免疫缺陷病毒-1 免疫原表位广谱中和抗体

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人类免疫缺陷病毒-1 gp41免疫原设计、免疫策略及免疫效果的研究进展

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国际免疫学杂志 2017年第3期40卷 297-302页

作者：白杨原晨凌虹庄敏黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室150081

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type,HIV-1）包膜蛋白gp41序列相对保守,其近膜区（MPER）具有一些已知广谱中和抗体（bNAbs）的表位.在HIV疫苗研究中,尽管利用gp41的MPER中和表位进行疫苗设计,但其免疫效果仍不理想.... 详细信息

人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus type,HIV-1）包膜蛋白gp41序列相对保守,其近膜区（MPER）具有一些已知广谱中和抗体（bNAbs）的表位.在HIV疫苗研究中,尽管利用gp41的MPER中和表位进行疫苗设计,但其免疫效果仍不理想.近年发现,一些靶向于gp120和gp41交界面的bNAbs为HIV疫苗的研制提供了新的靶标.如何更好的模拟天然状态的gp41结构以诱导bNAbs的产生仍是学者们的主要研究方向,有大量研究关于靶向于gp41的bNAbs的表位、gp41免疫原的修饰、免疫策略及免疫效果等,因而探讨gp41作为免疫原候选的可行性及提高其免疫效果的方法具有重要意义.

关键词：人类免疫缺陷病毒 gp41 广谱中和抗体免疫原设计免疫策略

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肺炎克雷伯菌临床分离株的庆大霉素耐药性和细菌铁载体的作用

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中国微生态学杂志 2017年第1期29卷 26-29页

作者：董春萍张文莉陈小贝付英梅赵吉子孙锐张凤民哈尔滨医科大学微生物教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学公共卫生学院黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院黑龙江哈尔滨150081

目的研究临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素庆大霉素的耐药性与其产铁载体的关系。方法采用K-B纸片法和肉汤稀释法确定70株临床分离的肺炎克雷伯菌对庆大霉素的药物敏感性;CAS琼脂实验检测肺炎克雷伯菌是否产铁载体;紫外可见分... 详细信息

目的研究临床分离的肺炎克雷伯菌对氨基糖苷类抗生素庆大霉素的耐药性与其产铁载体的关系。方法采用K-B纸片法和肉汤稀释法确定70株临床分离的肺炎克雷伯菌对庆大霉素的药物敏感性;CAS琼脂实验检测肺炎克雷伯菌是否产铁载体;紫外可见分光光度法确定细菌产铁载体的量,根据中位数法将70株临床分离菌分为铁载体高产组(35株)和低产组(35株);应用SPSS统计学软件分析抗生素耐药性与其产铁载体是否相关。结果药物敏感性试验检测出菌株对庆大霉素的耐药率为50.00%(35/70);铁载体检测实验确定70株肺炎克雷伯菌均产生铁载体,肺炎克雷伯菌对庆大霉素的耐药性与铁载体产量呈正相关关系(r=0.3154,P<0.05),对庆大霉素耐药菌株铁载体产量明显高于敏感菌株(t=3.1650,P<0.05),且铁载体高产组耐药率及lgMIC值明显高于低产组(x^2=9.6570,t=3.1360,P<0.05)。结论 70株临床分离的肺炎克雷伯菌均产生铁载体,铁载体可能参与肺炎克雷伯菌对庆大霉素的耐药,干扰庆大霉素的抑菌或杀菌过程。

关键词：肺炎克雷伯菌耐药性铁载体

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Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜gp120与乙型肝炎病毒表面抗原免疫原性比较

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 313-318页

作者：王明霞王甲业李妍陈文江田丹袁丽庄敏凌虹哈尔滨医科大学医学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省感染与免疫创新团队黑龙江省普通高校病原学重点实验室150081

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044... 详细信息

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044毒株gp120三聚体（gp120T）、HBV表面抗原（HBsAg）蛋白与AddaVax佐剂免疫小鼠,背部皮下注射,共免疫3次,每次免疫间隔3周,第一、第二次免疫后7d和第三次免疫后3d、7d取血;第一次免疫后7d、第三次免疫后3d、7d取脾组织.用酶联免疫吸附实验（ELISA）及酶联免疫斑点实验（ELISpot）方法检测免疫小鼠血浆特异性结合抗体滴度及抗体分泌细胞（ASC）数量.结果 gp120T和HBsAg两种蛋白初次免疫后,动物均未产生明显的特异性抗体.两种蛋白加强免疫后特异性抗体水平明显升高,gp120T一次加强免疫及两次加强特异性抗体滴度逐渐升高,而HBsAg一次加强抗体滴度已经接近两次加强的水平.二次加强免疫后,gp120T和HBsAg免疫鼠脾脏特异性ASC数量差异不显著.结论 HIV-1包膜gp120T加强免疫诱导抗体水平达到高峰慢于HBsAg加强免疫,即加强免疫后gp120T诱导的回忆反应慢于HBsAg.

关键词： Ⅰ型人类免疫缺陷病毒 gp120 乙型肝炎病毒表面抗原

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人类免疫缺陷病毒-1包膜糖蛋白gp41的表达及优化

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国际免疫学杂志 2016年第2期39卷 101-106页

作者：包丽娜白杨姚岚庄敏凌虹哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的优化HIV．1本地流行株06044sp4t蛋白表达设计，为gp41免疫原的制备提供实验基础。方法以含HIV．106044gp41基因的质粒为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增gp41目的基因，分别构建原核表达载体pET26b：gp41T（含546—683f1．a片段... 详细信息

目的优化HIV．1本地流行株06044sp4t蛋白表达设计，为gp41免疫原的制备提供实验基础。方法以含HIV．106044gp41基因的质粒为模板，采用聚合酶链反应（PCR）扩增gp41目的基因，分别构建原核表达载体pET26b：gp41T（含546—683f1．a片段）及去掉N一端（NHR）和C一端（CHR）七价重复序列中间部分loop区（582～627aa）的pET26b—Sr41T（AL），经测序确认后，转化至大肠杆菌感受态细胞BL21（DE3）中，IPTG诱导表达。用聚丙烯酰氨凝胶电泳（SDS-PAGE）及Westernblot检测并鉴定重组表达蛋白。优化了重组蛋白的诱导表达条件。结果pET26b-gp41T和pET26b—gp41T（AL）重组表达质粒均能表达gp41蛋白，glMlT（△L）蛋白表达量高于gp41T；不同IPTG浓度诱导的蛋白表达量没有区别；用1mmol／LIPTG诱导后，37℃条件下表达量最高。Westernblot结果显示，gp41T（△L）与His抗体结合性能好。结论实验获得了稳定表达HIV-106044gp41的原核表达载体以及表达条件，为大量制备gp41蛋白免疫原奠定了基础。

关键词：人类免疫缺陷病毒-1 Gp41 原核表达优化

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融合肽抑制剂T20抵抗株包膜蛋白热变异位点547对人类免疫缺陷病毒-1生物学功能的影响

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国际免疫学杂志 2016年第3期39卷 210-217页

作者：赵海娇原晨张雪莹凌虹庄敏哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室150081

目的分析人类免疫缺陷病毒（HIV）的融合肽抑制剂T20抵抗突变株热变异位点547对病毒生物学功能的影响。方法采用PCR和定点突变方法构建HIV包膜蛋白（Env）突变体pSM-HXB2-DIV／DIM／SIM和PSM—LAI-DIV四种表达质粒，并构建了含有547D突... 详细信息

目的分析人类免疫缺陷病毒（HIV）的融合肽抑制剂T20抵抗突变株热变异位点547对病毒生物学功能的影响。方法采用PCR和定点突变方法构建HIV包膜蛋白（Env）突变体pSM-HXB2-DIV／DIM／SIM和PSM—LAI-DIV四种表达质粒，并构建了含有547D突变并置换HXB2或LAI株gp120部分的Env质粒，pSM-LAIgp120／HXB2gp41-DIV（L／H-DIV）和pSM-HXB2gp120／LAIsp4t—DIV（H／L-DIV）。假病毒感染实验和细胞融合实验分析Env的功能；Westernblot检测Env表达。圆二色谱（CD）分析6螺旋束（6HB）的稳定性；PyMOL软件分析含有547D的6HB结构。结果HXB2为骨架的547DIV、DIM及SIM和LAI为骨架的DIV假病毒的感染性低于其野生型（wt），前者的各变异Env的融合活性也明显降低；L／H—DIV假病毒感染性与HXB2wt相似，但融合活性明显低于wt；H／L—DIV假病毒的感染性低于两种野生型，融合活性与LAI叭相似，但低于HXB2wt。CD结果证明547D突变降低6HB的稳定性；结构分析显示，547D突变没有改变NHR中该位点与CHR中Q652位点之间的氢键，但可能通过增加NHR的负电荷从而减少病毒与T20的结合。结论547D突变降低LAI与HXB2株的感染性和HXB2株的融合活性；该突变通过降低6HB稳定性和增加gp41所带负电荷来减少病毒与T20的结合。

关键词：人类免疫缺陷病毒融合肽抑制剂 T20 抵抗突变

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小RNA对胞内菌生长、毒力及铁水平的调节作用

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微生物与感染 2016年第5期11卷 302-306页

作者：吴铮李文静李爱梅付英梅张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

细菌小RNA（small RNA,sRNA）是一类长度为50-500个碱基,具有调控转录、翻译和mRNA稳定性的非编码调节性RNA。随着越来越多的sRNA被鉴定,部分细菌的sRNA功能已逐步阐明,主要参与调控细菌的基因表达、增殖、毒力及对环境的应激反应等生... 详细信息

细菌小RNA（small RNA,sRNA）是一类长度为50-500个碱基,具有调控转录、翻译和mRNA稳定性的非编码调节性RNA。随着越来越多的sRNA被鉴定,部分细菌的sRNA功能已逐步阐明,主要参与调控细菌的基因表达、增殖、毒力及对环境的应激反应等生物学过程。本文就胞内菌（如沙门菌、李斯特菌、嗜肺军团菌等）sRNA对其自身在宿主细胞内的生长、毒力和铁水平的调控作用进行综述。

关键词：细菌小RNA 胞内菌毒力生长

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