检索结果-内蒙古大学图书馆

生物医学工程学杂志 2011年第5期28卷 988-991页

作者：商庆龙马延秀郭志伟李立群郝美丽孙宇辉魏兰兰谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省高校病原学重点实验室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医院妇产科哈尔滨150001

鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素... 详细信息

鉴定人乳头瘤病毒(HPV)16型E2蛋白的重组表达菌株,通过正交试验快速优化诱导表达条件,增加目的蛋白的表达量。应用SDS-PAGE及Western blot分析鉴定表达后的蛋白。选取诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度OD600和诱导温度共4个主要外部因素。采用四因素两水平正交试验设计,以单位体积内HPV16 E2目的蛋白含量作为检测指标,结果用SPSS 13.0软件进行统计分析。结果表明,HPV16 E2菌株鉴定正确。HPV16 E2蛋白表达主要以不溶性蛋白为主,主要影响因素是诱导剂浓度和诱导温度,最佳诱导条件为37℃、1.0 mmol/L IPTG和OD600为1.0的条件下诱导7 h,正交试验对分子生物学反应的影响因素分析和条件优化有借鉴意义。

关键词：人乳头瘤病毒16型E2蛋白正交试验原核表达条件优化

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游离DNA检测技术及其在疾病诊疗中的应用和研究进展

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中华检验医学杂志 2024年第2期47卷 197-204页

作者：陆昕怡孟庆泰黄萍段雅干陈智远徐鹏张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检... 详细信息

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检验流程。基于cfDNA检测的液体活检技术在临床肿瘤诊疗、产前检查中已得到广泛应用,并且在自身免疫病诊疗中展现出较大的潜力。本综述描述了cfDNA检测技术的发展和液体活检在临床方面的应用,以及cfDNA在疾病诊断和治疗中的研究进展。

关键词：基因检测测序癌症产前检查自身免疫病

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人核糖核酸酶A超家族抗微生物活性及其作用机制

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第4期39卷 507-515页

作者：黄萍孟庆泰张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家... 详细信息

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家族成员在多种免疫细胞例如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达,并可被分泌以发挥多种多样的生物学功能,包括抗微生物活性、促进宿主防御、参与血管生成及精子成熟等。其中,人核糖核酸酶A超家族部分成员,可通过水解病毒RNA、抑制病毒复制、破坏细菌细胞壁、促进微生物凝集、损伤寄生虫细胞膜和线粒体膜等直接作用,以及通过宿主天然免疫细胞介导的间接作用,发挥抗微生物及寄生虫活性,参与宿主防御。本文对人核糖核酸酶A的抗微生物(包括病毒、细菌、真菌)和抗寄生虫活性及其作用机制进行综述,并对人核糖核酸酶A作为抗微生物活性物质和天然免疫分子,用于治疗严重和耐药微生物感染的前景进行展望。

关键词：人类核糖核酸酶A 抗微生物活性宿主防御先天免疫微生物感染

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β-内酰胺酶抑制剂研究进展

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中国抗生素杂志 2013年第11期38卷 805-809页

作者：蔡文辉张文莉付英梅张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江省医学科学院细菌学研究室哈尔滨150086 黑龙江中医药大学微生物与免疫学教研室哈尔滨150040

β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β... 详细信息

β-内酰胺酶抑制剂能抑制耐药菌产生的β-内酰胺酶,常与β-内酰胺类抗生素联合使用,能使抗生素中的β-内酰胺环免遭水解,保护抗生素的抗菌作用。1976年,英国从链霉菌中发现第一个β-内酰胺酶抑制剂克拉维酸,其能抑制部分广谱和超广谱β-内酰胺酶,常与阿莫西林联合应用,可使阿莫西林对某些细菌的MIC值降低。随着抗生素的大量使用以及具有β-内酰胺酶相关的耐药性的细菌的增加,许多β-内酰胺酶抑制剂相继被发现。根据β-内酰胺酶抑制剂的结构,主要将其分为含有β-内酰胺环结构的抑制剂和不含β-内酰胺环结构的抑制剂。本文就目前国内外β-内酰胺酶抑制剂的研究现状进行综述。

关键词： β-内酰胺酶酶抑制剂细菌耐药

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黑龙江省桦川县华支睾吸虫病调查分析

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中华地方病学杂志 2013年第6期32卷 651-653页

作者：韩甦张晓丽董云霞凌虹张凤民葛涛哈尔滨医科大学基础医学院人体寄生虫学和微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室及普通高校病原生物学重点实验室 150081 黑龙江省疾病预防控制中心病媒寄生虫病防治所

目的探讨黑龙江省桦川县居民华支睾吸虫的感染情况，为制定防治策略提供依据。方法2011、2012年，在桦川县通过整群随机抽样，采集粪便标本，采用改良加藤厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵，通过问卷调查收集调查对象年龄、性别、职业、饮食... 详细信息

目的探讨黑龙江省桦川县居民华支睾吸虫的感染情况，为制定防治策略提供依据。方法2011、2012年，在桦川县通过整群随机抽样，采集粪便标本，采用改良加藤厚涂片法粪检华支睾吸虫虫卵，通过问卷调查收集调查对象年龄、性别、职业、饮食习惯等信息，分析感染特点。结果共计调查了2248名居民．华支睾吸虫感染患者884例，感染率为39.32％。男性感染率[47．15％（611／1296）]明显高于女性[28．68％（273／952），X^2=34．55，P〈0．01]。感染率随年龄增长而上升，20～69岁人群感染率较高，其中50～59岁人群感染率最高[45．34％（219／483）]。职业分布以农民感染率最高[47．24％（420／889）]，其次为干部职员[38．38％（190／495）]。有明确的食鱼生史的居民中，华支睾吸虫感染率为53．38％（150／281）。结论桦川县的华支睾吸虫感染率较高，建议积极开展健康教育和群体化疗为主的综合防治策略，降低人群感染率。

关键词：华支睾吸虫病寄生虫病数据收集

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产生超广谱β-内酰胺酶的肺炎克雷伯菌的药物敏感性及其基因型研究

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国际遗传学杂志 2007年第1期30卷 1-4页

作者：付英梅张凤民张和光张文莉陈小贝赵月辉马佳毓哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省高校医学病原学重点实验室哈尔滨医科大学附属第二医院检验科

目的研究产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌基因型及其药敏特征。方法对2003年12月～2004年12月哈尔滨地区临床分离的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,测定菌株对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,并采用SHV型和TE... 详细信息

目的研究产生超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的肺炎克雷伯菌基因型及其药敏特征。方法对2003年12月～2004年12月哈尔滨地区临床分离的74株产ESBLs肺炎克雷伯菌,测定菌株对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性,并采用SHV型和TEM型特异性引物检测ESBLs的基因型。结果产ESBLs细菌对头孢吡肟、氨曲南、阿米卡星和环丙沙星的敏感率依次为71.6%、20.3%、54.1%、31.1%,对头孢哌酮/舒巴坦的敏感率为54.1%,69株（93.2%）对亚胺培南敏感。74株产ESBLs细菌中携带bla;和bla;基因的阳性例数分别是45例（60.8%）和23例（31.1%）。结论哈尔滨地区产ESBLs肺炎克雷伯菌对常用β-内酰胺类和非β-内酰胺类抗菌药物的敏感性降低,临床上需慎用酶抑制剂复合物及第4代头孢菌素,亚胺培南仍是治疗产ESBLs菌感染的首选药物。产ESBLs肺炎克雷伯菌bla;的流行频率高于bla;。

关键词：肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶多重耐药

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人Toll样受体4重组质粒的构建与鉴定

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国际免疫学杂志 2016年第6期39卷 543-546页

作者：钱钧郭彩玲崔洪波宋武琦李爱梅哈尔滨医科大学微生物学教研室、黑龙江省感染与免疫重点实验室、黑龙江省高校医学病原学重点实验室、伍连德研究所 150081

目的构建人Toll样受体4（TLa-4）3＇非编码区（UTR）野生型/突变型基因重组表达质粒.方法在293T细胞中提取基因组DNA为模板,扩增并获得TLR4基因的3＇UTR片段.根据TLR43＇UTR与miR-122的靶点预测,设计TLR4 3＇UTR突变型TLR4 3＇UTR-m1.... 详细信息

目的构建人Toll样受体4（TLa-4）3＇非编码区（UTR）野生型/突变型基因重组表达质粒.方法在293T细胞中提取基因组DNA为模板,扩增并获得TLR4基因的3＇UTR片段.根据TLR43＇UTR与miR-122的靶点预测,设计TLR4 3＇UTR突变型TLR4 3＇UTR-m1.将pmiR-RB-REPORT^TM质粒和TLR4 3＇UTR/TLR4 3＇UTR-m1 PCR产物双酶切,将酶切后的载体与PCR产物连接,转化入DHSα细胞,在含Amp抗生素的LB固体培养基上培养,筛选阳性菌株,进行PCR验证及序列测定.结果成功构建人TLR4 3＇UTR野生型/突变型重组质粒.结论构建的质粒可以用于TLR4与miR-122相互作用的研究,为研究miRNA的作用提供依据.

关键词： Toll样受体4 基因重组质粒

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人类内源性逆转录病毒在自身免疫病发生发展中作用的研究进展

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国际免疫学杂志 2019年第4期42卷 427-431页

作者：郑晓秋石力予钱钧哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省高校医学病原学重点实验室150081

人类内源性逆转录病毒(human endogenous retroviruses,HERV)是过去的逆转录病毒感染在人类基因组中的残留物,并已涉及人类生物学的不同方面.相关基因元件形成504个不同的家族,占人类基因组的8%.HERV编码活性逆转录病毒蛋白,其可能在体... 详细信息

人类内源性逆转录病毒(human endogenous retroviruses,HERV)是过去的逆转录病毒感染在人类基因组中的残留物,并已涉及人类生物学的不同方面.相关基因元件形成504个不同的家族,占人类基因组的8%.HERV编码活性逆转录病毒蛋白,其可能在体内发挥重要的生理功能,也可能参与肿瘤、自身免疫病、神经和感染性疾病的发生发展.自身免疫病是一组与自体反应性B细胞和T细胞应答有关的异常免疫反应.已确定的自身免疫病有80多种,这些疾病中最常见的疾病包括系统性红斑狼疮、多发性硬化症、Ⅰ型糖尿病、类风湿性关节炎等,现就HERVs与自身免疫病发病的相关性研究进行综述.

关键词：人类内源性逆转录病毒自身免疫病系统性红斑狼疮类风湿性关节炎多发性硬化

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Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜gp120与乙型肝炎病毒表面抗原免疫原性比较

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国际免疫学杂志 2016年第4期39卷 313-318页

作者：王明霞王甲业李妍陈文江田丹袁丽庄敏凌虹哈尔滨医科大学医学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省感染与免疫创新团队黑龙江省普通高校病原学重点实验室150081

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044... 详细信息

目的比较Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）及乙型肝炎病毒（HBV）包膜蛋白初次免疫及加强免疫后诱导产生抗体的规律,为提高HIV-1包膜蛋白诱导保护性抗体产生能力提供创新思路.方法以10周龄雌性C57BL/6小鼠为动物模型,分别用HIV-1 06044毒株gp120三聚体（gp120T）、HBV表面抗原（HBsAg）蛋白与AddaVax佐剂免疫小鼠,背部皮下注射,共免疫3次,每次免疫间隔3周,第一、第二次免疫后7d和第三次免疫后3d、7d取血;第一次免疫后7d、第三次免疫后3d、7d取脾组织.用酶联免疫吸附实验（ELISA）及酶联免疫斑点实验（ELISpot）方法检测免疫小鼠血浆特异性结合抗体滴度及抗体分泌细胞（ASC）数量.结果 gp120T和HBsAg两种蛋白初次免疫后,动物均未产生明显的特异性抗体.两种蛋白加强免疫后特异性抗体水平明显升高,gp120T一次加强免疫及两次加强特异性抗体滴度逐渐升高,而HBsAg一次加强抗体滴度已经接近两次加强的水平.二次加强免疫后,gp120T和HBsAg免疫鼠脾脏特异性ASC数量差异不显著.结论 HIV-1包膜gp120T加强免疫诱导抗体水平达到高峰慢于HBsAg加强免疫,即加强免疫后gp120T诱导的回忆反应慢于HBsAg.

关键词： Ⅰ型人类免疫缺陷病毒 gp120 乙型肝炎病毒表面抗原

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630 nm LED红光照射后THP-1来源M0巨噬细胞的蛋白质组学分析

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哈尔滨医科大学学报 2023年第1期57卷 1-6页

作者：林默楠曹国丁苏在雨潘昱霖宋武琦刘海亮张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的分析630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)产生红光照射对人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源M0巨噬细胞的作用与机制。方法用佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)处理THP-1细胞,制备THP-1来源M0巨噬细胞,并使用强度为28.8 J/cm^(2)的630 nm LED红光照射M0巨噬细胞,随后采用非标定量蛋白质组学分析方法筛选差异表达蛋白并进行基因本体论(gene ontology,GO)注释和富集;通过string在线网站(https://***/)和Cytoscape软件分析蛋白质互作情况,根据关键蛋白的作用,分析630 nm LED红光照射与THP-1来源M0巨噬细胞的关系。结果蛋白质组学结果显示,630 nm LED红光照射THP-1来源M0巨噬细胞后,62个差异表达蛋白能够显著富集在细胞对刺激反应、线粒体膜电势负性调控和平滑肌细胞增殖的调控等相关生物学进程。在显著性排名前10的生物学进程中,细胞对刺激反应相关生物学进程占70%,主要为对糖刺激反应(4个进程)、对神经生长因子反应(2个进程)等;进一步分析细胞应对刺激相关生物学进程中涉及的8个蛋白间蛋白互作情况结果显示,转录因子叉头箱蛋白O3亚基(forkhead box O3,FOXO3)、炎症相关蛋白前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)或称环加氧酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)和炎症因子白介素-18(interleukin-18,IL-18)为关键互作蛋白,并且在630 nm LED红光照射后的THP-1来源M0巨噬细胞中,FOXO3和IL-18的蛋白水平显著升高(P<0.05),PTGS2(COX-2)蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论630 nm LED红光照射对THP-1来源M0巨噬细胞的作用,类似于糖和神经生长因子对细胞的刺激反应;通过上调THP-1来源M0巨噬细胞中FOXO3蛋白的表达抑制M0巨噬细胞中PTGS2(COX-2)介导的炎症状态。

关键词：红光发光二极管人单核细胞白血病细胞THP-1细胞系巨噬细胞蛋白质组学叉头箱蛋白O3亚基前列腺素内过氧化物合酶2(环加氧酶2)

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