检索结果-内蒙古大学图书馆

中华检验医学杂志 2024年第2期47卷 197-204页

作者：陆昕怡孟庆泰黄萍段雅干陈智远徐鹏张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检... 详细信息

游离DNA(cfDNA)是存在于人体细胞外液中的DNA片段,在生理或病理条件下(如妊娠、肿瘤等),cfDNA的含量变化和分子特征等使其成为疾病诊疗的生物标志物之一。随着cfDNA富集技术以及测序、质谱等检测技术的发展,cfDNA的检测已形成完整的检验流程。基于cfDNA检测的液体活检技术在临床肿瘤诊疗、产前检查中已得到广泛应用,并且在自身免疫病诊疗中展现出较大的潜力。本综述描述了cfDNA检测技术的发展和液体活检在临床方面的应用,以及cfDNA在疾病诊断和治疗中的研究进展。

关键词：基因检测测序癌症产前检查自身免疫病

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人核糖核酸酶A超家族抗微生物活性及其作用机制

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中国生物化学与分子生物学报 2023年第4期39卷 507-515页

作者：黄萍孟庆泰张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室哈尔滨150081

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家... 详细信息

人核糖核酸酶A(human RNase A)超家族包含13个具有不同生物活性的成员(RNase 1~RNase 13),其蛋白质结构除具有催化保守序列外,还具有显著多样性的序列,决定了人类核糖核酸酶A可发挥核糖核酸酶活性之外的生物学功能。人核糖核酸酶A超家族成员在多种免疫细胞例如嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞中表达,并可被分泌以发挥多种多样的生物学功能,包括抗微生物活性、促进宿主防御、参与血管生成及精子成熟等。其中,人核糖核酸酶A超家族部分成员,可通过水解病毒RNA、抑制病毒复制、破坏细菌细胞壁、促进微生物凝集、损伤寄生虫细胞膜和线粒体膜等直接作用,以及通过宿主天然免疫细胞介导的间接作用,发挥抗微生物及寄生虫活性,参与宿主防御。本文对人核糖核酸酶A的抗微生物(包括病毒、细菌、真菌)和抗寄生虫活性及其作用机制进行综述,并对人核糖核酸酶A作为抗微生物活性物质和天然免疫分子,用于治疗严重和耐药微生物感染的前景进行展望。

关键词：人类核糖核酸酶A 抗微生物活性宿主防御先天免疫微生物感染

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630 nm LED照射对RBL-2H3过敏性鼻炎细胞模型的免疫调节作用

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国际免疫学杂志 2025年第2期48卷 131-137页

作者：谢文婷易斌任丹丹吴佳欣何军张凤民李爱梅宋楠刘海亮哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所哈尔滨北京创盈光电医疗科技有限公司北京

目的通过研究630 nm发光二极管(light emitting diode, LED)对RBL-2H3过敏性炎症细胞模型的影响, 考察630 nm LED对过敏性炎症的作用。方法采用630 nm LED作为光源, 分别用N-甲基-p-甲氧基苯乙基胺和甲醛缩合产物(Compound 48/80, C48/... 详细信息

目的通过研究630 nm发光二极管(light emitting diode, LED)对RBL-2H3过敏性炎症细胞模型的影响, 考察630 nm LED对过敏性炎症的作用。方法采用630 nm LED作为光源, 分别用N-甲基-p-甲氧基苯乙基胺和甲醛缩合产物(Compound 48/80, C48/80)、免疫球蛋白(immunoglobulin, Ig)E刺激RBL-2H3细胞(大鼠嗜碱性细胞白血病细胞)作为过敏性炎症的两种细胞模型。Compound 48/80刺激的RBL-2H3细胞模型分为对照组、C48/80组、C48/80+LED组三组。IgE刺激的RBL-2H3细胞模型分为对照组、IgE组、IgE+LED组三组。使用630 nm LED照射后, 细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8, CCK-8)比色法检测细胞活性, 甲苯胺蓝染色法及底物显色法检测RBL-2H3细胞脱颗粒率。采用实时定量PCR法检测细胞中白细胞介素(interleukin, IL)-4、IL-6、IL-13、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α和组胺H4受体(histamine-4 receptor, H4R)mRNA的表达水平。细胞培养上清液中IL-6蛋白表达的变化使用酶联免疫吸附分析法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测。结果 RBL-2H3细胞用波长630 nm, 光功率密度6 mW/cm2的LED照射后, RBL-2H3细胞的活力未受影响;与模型组相比, RBL-2H3过敏性炎症细胞模型的脱颗粒率降低, 差异具有统计学意义(F值分别为31.93、215.10、3780.00、3597.00, P值均<0.05);与C48/80组相比, 细胞上清液中IL-6的释放水平降低, 差异具有统计学意义(F=135.90, P<0.05);与模型组相比, 细胞内IL-4、IL-6、IL-13、H4R和TNF-α基因表达水平下调, 差异具有统计学意义(F值分别为858.40、25.50、211.40、520.50、66.54, P值均<0.05)。结论 630 nm LED照射可通过抑制过敏性炎症细胞模型的细胞脱颗粒和炎症因子表达发挥抗炎作用。

关键词： 630 nm LED 炎症脱颗粒过敏免疫调节

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人类风湿关节炎滑膜中ABC转运蛋白基因差异表达的生物信息学分析

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国际遗传学杂志 2022年第4期45卷 265-274页

作者：郑婷丹刘倩楠张涵旭潘越吴昊付英梅宋武琦哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所

目的本研究通过对来自GEO数据库的数据和实验室测序数据进行生物信息学分析, 分析ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运蛋白基因在类风湿关节炎中的表达情况, 分析ABC转运蛋白在类风湿关节炎中的作用机制。方法采用R语言软件对人... 详细信息

目的本研究通过对来自GEO数据库的数据和实验室测序数据进行生物信息学分析, 分析ATP结合盒(ATP-binding cassette, ABC)转运蛋白基因在类风湿关节炎中的表达情况, 分析ABC转运蛋白在类风湿关节炎中的作用机制。方法采用R语言软件对人类风湿关节炎(rheumatoid arthritis, RA)、骨关节炎(osteoarthritis, OA)滑膜组织以及正常(normal, N)滑膜组织, 体外实验中的人类滑膜成纤维细胞中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α, TNF-α)实验组和对照组的多基因差异表达谱数据集进行综合分析。将ABC转运蛋白的差异基因与其他差异基因相关联, 以获得相关性更大的差异基因。使用KEGG对具有更高相关性的差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)进行通路富集。利用Cytospace软件的STRING在线数据库, 通过蛋白质相互作用(PPI)网络分析鉴定枢纽(Hub)基因。结果 ABC转运蛋白基因差异表达:RA组与N组相比, ABCC4和ABCG1的表达显著增加, 而ABCA8的表达显著降低(P<0.001);RA组与OA组相比, ABCC4的表达显著增加, ABCA8的表达显著降低(P<0.001);与对照组相比, TNF-α组ABCA5的表达显著增加。与上述ABC家族具有高度相关性的差异表达基因的KEGG通路和蛋白质相互作用(PPI)网络分析进一步发现, 大多数已确定的通路参与炎症、增殖、细胞存活和血管生成的调节。结论本研究发现了在类风湿关节炎中潜在的一组ABC家族差异基因, 这将为RA的早期诊断提供潜在的生物标志物, 并将有助于研究ABC转运蛋白在RA中的作用机制以及分子靶向治疗。

关键词：类风湿关节炎 ABC转运蛋白 GEO数据库生物标志物生物信息学

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630nm LED照射促进TRPV1表达诱导成纤维样滑膜细胞凋亡

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激光生物学报 2022年第3期31卷 224-233页

作者：吴昊刘倩楠刘海亮张凤民宋武琦哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所哈尔滨150081

类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前,对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势,被用作辅助治疗手... 详细信息

类风湿关节炎(RA)是一类以滑膜增生、滑膜关节损害、活动功能不全为主要特点的慢性全身性自我免疫炎症性病变。目前,对于RA的治疗包括药物治疗、外科手术治疗和物理疗法。物理疗法中光疗法由于其无侵袭力、无痛等优势,被用作辅助治疗手段普遍应用于临床。为此,本研究通过630 nm LED红光探讨了光生物调节法通过促进成纤维样滑膜细胞凋亡,从而治愈类风湿性关节炎的机理。JC-1染色试验表明,630 nm LED光照后线粒体膜电位去极化增强,膜电位降低;使用CASP3活性检测试剂盒和CASP9活性检测试剂盒进行试验,证明630 nm LED可以促进MH7A细胞中CASP3和CASP9酶的活性;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)试验显示,630 nm LED可以促进瞬时受体电位香草素1(TRPV1)的表达;蛋白质免疫印迹试验(Western blot)证明,经过630 nm LED红光照射可以促进MH7A细胞TRPV1蛋白的表达;CCK-8试验表明,630 nm LED可以显著性抑制MH7A细胞活力,但不能降低TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞活性;TUNEL试验证实,630 nm LED照射诱导MH7A细胞凋亡,但不能诱导TNF-α刺激下TRPV1拮抗剂处理的MH7A细胞凋亡。综上所述,630 nm LED红光在类风湿性关节炎中通过调控TRPV1促进TNF-α诱导的MH7A细胞凋亡,这对辅助缓解RA滑膜炎症有一定作用。

关键词：发光二极管类风湿关节炎细胞凋亡成纤维样滑膜细胞 TRPV1

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高通量测序技术在阴道感染性疾病的病原鉴定及诊断中的应用

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中国微生态学杂志 2021年第10期33卷 1220-1223页

作者：孙艺歌陈小贝张文莉张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学卫生检验中心

阴道感染性疾病是育龄妇女最常见的妇科疾病,其主要的类型有细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病。目前的临床诊断主要包括病原体的显微镜观察以及病原体代谢物的检测等,但因其诊断阳性率低、敏感性低等限制,导致抗感染药物选择困难、... 详细信息

阴道感染性疾病是育龄妇女最常见的妇科疾病,其主要的类型有细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病。目前的临床诊断主要包括病原体的显微镜观察以及病原体代谢物的检测等,但因其诊断阳性率低、敏感性低等限制,导致抗感染药物选择困难、治愈率低、复发率高等。本综述在比较阴道感染性疾病,特别是细菌性阴道病以及外阴阴道假丝酵母菌病临床常见诊断方法的基础上,介绍了高通量测序技术在细菌性阴道病和外阴阴道假丝酵母菌病的病原体鉴定及诊断中的应用,以期为阴道感染性疾病的诊断、治疗及愈后提供实验依据。

关键词：细菌性阴道病外阴阴道假丝酵母菌病高通量测序技术诊断

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630 nm LED红光通过AKT/FOXO3a信号通路抑制人巨噬细胞炎症因子释放的研究

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国际免疫学杂志 2024年第2期47卷 117-123页

作者：潘昱霖林默楠张凯波曹国丁易斌何军刘海亮张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室、伍连德研究所、黑龙江省感染与免疫重点实验室哈尔滨150081 北京创盈光电医疗科技公司北京100176

目的探讨630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)红光照射对人外周血单核细胞系THP-1来源巨噬细胞炎症反应的作用,寻找其可能发挥作用的信号通路与分子机制。方法人外周血单核细胞THP-1,经佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)... 详细信息

目的探讨630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)红光照射对人外周血单核细胞系THP-1来源巨噬细胞炎症反应的作用,寻找其可能发挥作用的信号通路与分子机制。方法人外周血单核细胞THP-1,经佛波酯(phorbol myristate acetate,PMA)诱导为THP-1来源巨噬细胞,并用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)处理制备巨噬细胞炎症模型;未经630 nm LED红光照射的细胞设为对照组,实验组各组细胞接受光照能量强度分别为14.4、28.8和43.2 J/cm^(2);对不同能量强度LED红光照射处理后的巨噬细胞进行实时荧光定量PCR(real-time reverse transcription polymerase chain reaction,RT-qPCR)和酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA),检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α的mRNA与蛋白表达,Western blot检测蛋白激酶B(protein kinase B,AKT)和叉头框蛋白O3a(forkhead box O3a,FOXO3a)蛋白及其磷酸化(p-AKT、p-FOXO3a)表达,并分析其分子通路。结果巨噬细胞经LPS诱导后,与对照组相比,实验组细胞中iNOS的mRNA表达显著升高,同时伴随炎症因子IL-1β、TNF-α的mNRA表达水平显著提升,差异有统计学意义(t值分别为-48.73、-80.96、-38.45,P值均<0.001)。M1巨噬细胞经630 nm LED红光照射处理后,细胞中炎症因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平明显降低,同时IL-1β、TNF-α的蛋白表达水平下降,p-AKT/AKT蛋白比值和p-FOXO3a/FOXO3a蛋白比值明显降低,差异有统计学意义(t值分别为60.18、25.30、14.79、17.31、23.64、87.50,P值均<0.05)。SC79干预后,M1巨噬细胞的p-AKT/AKT蛋白比值显著升高,IL-1β的mRNA、蛋白表达显著增加,差异有统计学意义(t值分别为-18.08、-26.43、-18.06,P值均<0.05)。SC79激活M1巨噬细胞AKT磷酸化后,630 nm LED红光可以明显降低SC79干预后M1巨噬细胞中p-AKT/AKT蛋白比值,同时明显下调IL-1β、TNF-α的mRNA表达和IL-1β、TNF-α的蛋白表达,差异有统计学意义(t值分别为15.59、33.56、70.00、5.79、36.25,P值均<0.05)。然而与对照组相比,单独SC79干预后,M1巨噬细胞中TNF-α的mRNA与蛋白表达未显著改变(P>0.05)。结论630 nm LED红光主要通过下调AKT和FOXO3a蛋白磷酸化通路,抑制巨噬细胞中炎症因子释放。

关键词： 630 nm LED红光巨噬细胞蛋白激酶B 叉头蛋白O3a

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630 nm LED红光照射后THP-1来源M0巨噬细胞的蛋白质组学分析

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哈尔滨医科大学学报 2023年第1期57卷 1-6页

作者：林默楠曹国丁苏在雨潘昱霖宋武琦刘海亮张凤民哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的分析630 nm发光二极管(light emitting diode,LED)产生红光照射对人单核细胞白血病细胞(THP-1)来源M0巨噬细胞的作用与机制。方法用佛波酯(phorbol-12-myristate-13-acetate,PMA)处理THP-1细胞,制备THP-1来源M0巨噬细胞,并使用强度为28.8 J/cm^(2)的630 nm LED红光照射M0巨噬细胞,随后采用非标定量蛋白质组学分析方法筛选差异表达蛋白并进行基因本体论(gene ontology,GO)注释和富集;通过string在线网站(https://***/)和Cytoscape软件分析蛋白质互作情况,根据关键蛋白的作用,分析630 nm LED红光照射与THP-1来源M0巨噬细胞的关系。结果蛋白质组学结果显示,630 nm LED红光照射THP-1来源M0巨噬细胞后,62个差异表达蛋白能够显著富集在细胞对刺激反应、线粒体膜电势负性调控和平滑肌细胞增殖的调控等相关生物学进程。在显著性排名前10的生物学进程中,细胞对刺激反应相关生物学进程占70%,主要为对糖刺激反应(4个进程)、对神经生长因子反应(2个进程)等;进一步分析细胞应对刺激相关生物学进程中涉及的8个蛋白间蛋白互作情况结果显示,转录因子叉头箱蛋白O3亚基(forkhead box O3,FOXO3)、炎症相关蛋白前列腺素内过氧化物合酶2(prostaglandin-endoperoxide synthase 2,PTGS2)或称环加氧酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)和炎症因子白介素-18(interleukin-18,IL-18)为关键互作蛋白,并且在630 nm LED红光照射后的THP-1来源M0巨噬细胞中,FOXO3和IL-18的蛋白水平显著升高(P<0.05),PTGS2(COX-2)蛋白水平显著降低(P<0.05)。结论630 nm LED红光照射对THP-1来源M0巨噬细胞的作用,类似于糖和神经生长因子对细胞的刺激反应;通过上调THP-1来源M0巨噬细胞中FOXO3蛋白的表达抑制M0巨噬细胞中PTGS2(COX-2)介导的炎症状态。

关键词：红光发光二极管人单核细胞白血病细胞THP-1细胞系巨噬细胞蛋白质组学叉头箱蛋白O3亚基前列腺素内过氧化物合酶2(环加氧酶2)

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实验室水平单克隆抗体制备方法及相应纯化策略的研究进展

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中国生物制品学杂志 2022年第2期35卷 228-232,238页

作者：徐梦蔚宋武琦(综述) 付治美张凤民(审校) 哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省免疫与感染重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081

单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)是由单一B细胞产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。mAb已广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞术等医学诊断技术;并可作为亲和层析中重要的配体用于蛋白质的... 详细信息

单克隆抗体(monoclonal antibody,mAb)是由单一B细胞产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。mAb已广泛应用于酶联免疫吸附试验、放射免疫分析、免疫组化和流式细胞术等医学诊断技术;并可作为亲和层析中重要的配体用于蛋白质的提纯;也可与化疗药物或放疗物质连接,利用mAb的导向作用,直接杀伤靶细胞,用于肿瘤导向治疗。mAb的纯度是其产品重要的质量指标之一,不同方法制备的mAb需根据其物理化学属性(等电点、分子量、疏水性等)来选择不同的纯化步骤,去除不同的杂质,以满足实验需求。本文就实验室水平的mAb制备方法及去除制备过程中产生污染物相应纯化策略的研究进展作一综述。

关键词：单克隆抗体污染物纯化

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630 nm LED照射阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化

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激光生物学报 2021年第6期30卷 541-547页

作者：潘越宋武琦张凤民刘海亮哈尔滨医科大学医学微生物学教研室哈尔滨医科大学伍连德研究所哈尔滨150081

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞,可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明,630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子,然而,630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本... 详细信息

M1型巨噬细胞为经典活化型巨噬细胞,可分泌多种促炎因子和趋化因子促进炎症的发展。我们前期研究已经证明,630 nm发光二极管(LED)照射能抑制巨噬细胞释放炎症因子,然而,630 nm LED对巨噬细胞极化的调控作用及其分子机制尚不清楚。在本研究中,我们评估了630 nm LED照射对单核细胞(THP-1)来源的M1型巨噬细胞极化的影响,探讨了其对M1型巨噬细胞极化的作用机制。体外培养THP-1细胞,用佛波酯(PMA)将其诱导成巨噬细胞。用脂多糖(LPS)和干扰素-γ(IFN-γ)处理巨噬细胞,使其极化成M1型巨噬细胞,极化的同时用波长为630 nm、功率密度为40.02 mW/cm^(2)的LED对其进行照射。采用噻唑蓝(MTT)法、细胞计数试剂盒(CCK-8)法和乳酸脱氢酶(LDH)活性检测试剂盒检测细胞活力,用实时定量PCR法检测M1型巨噬细胞相关因子mRNA的表达水平,采用免疫印迹和细胞免疫荧光检测M1型巨噬细胞中STAT1的核转位。结果显示,M1型巨噬细胞经630 nm LED照射后,其活性未受影响,但M1型巨噬细胞相关因子干扰素调节因子5(IRF5)、趋化因子配体9(CXCL9)、CXL10、CXCL11 mRNA的表达水平显著降低,并且阻滞转录因子STAT1向核内转移。综上所述,630 nm LED照射可通过阻滞STAT1核转位抑制M1型巨噬细胞极化,此研究可能对治疗巨噬细胞极化相关疾病提供新的思路。

关键词：发光二极管 M1型巨噬细胞极化单核细胞 STAT1 核转位

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