检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2012年第14期12卷 2619-2622页

作者：闫俊霞郑海霞毕惠梅崔云霞房绍红周宏博哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 教育部黑龙江省部共建心肌缺血机理与诊疗技术重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞中胶原生成的影响及作用机制。方法:原代培养心肌成纤维细胞,将细胞分为正常糖组(NG,5.5mmol/L glucose)、高糖组(HG,25mmol/L glucose)、高糖+10mmol/L肌肽组、高糖+20mmol/L肌肽组、高糖+40mm... 详细信息

目的:探讨肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞中胶原生成的影响及作用机制。方法:原代培养心肌成纤维细胞,将细胞分为正常糖组(NG,5.5mmol/L glucose)、高糖组(HG,25mmol/L glucose)、高糖+10mmol/L肌肽组、高糖+20mmol/L肌肽组、高糖+40mmol/L肌肽组、高糖+SB组(HG+10μmol/L SB203580)、高糖+PD组(HG+10μmol/L PD98059)。ELISA检测胶原Ⅰ、Ⅲ的含量,Western blot检测TGF-β1、p-p38 MAPK和p-ERK(1/2)等蛋白的表达。结果:与正常糖组相比,高糖组中胶原Ⅰ和胶原Ⅲ含量增加(P<0.01);TGF-β1、p-p38和p-ERK等表达增加(P<0.01);与高糖组相比,高糖+肌肽组中胶原Ⅰ、Ⅲ、TGF-β1、p-p38、和p-ERK等均降低(P<0.05);高糖+SB组和高糖+PD组中胶原Ⅰ、Ⅲ表达减少(P<0.05)。结论:肌肽对心肌成纤维细胞中胶原生成具有抑制作用,且通过MAPK通路实现。

关键词：肌肽高糖培养胶原 TGF-β MAPK信号通路

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超声爆破微泡介导内皮抑素基因抑制兔颈动脉粥样硬化的实验研究

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中华超声影像学杂志 2011年第2期20卷 159-163页

作者：吴长君张春梅刘兴汉张士德张磊哈尔滨医科大学附属第一医院超声科 150001 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学病理教研室哈尔滨医科大学附属第二医院放射线科

目的探讨利用超声爆破微泡介导内皮抑素（endostatin,ES）基因转染对兔颈动脉粥样硬化斑块内新生血管及斑块生长的抑制作用.方法 20只颈动脉粥样硬化模型兔随机分为三组：A组,微泡＋超声;B组,对照质粒＋微泡＋超声;C组,ES质粒＋微泡＋... 详细信息

目的探讨利用超声爆破微泡介导内皮抑素（endostatin,ES）基因转染对兔颈动脉粥样硬化斑块内新生血管及斑块生长的抑制作用.方法 20只颈动脉粥样硬化模型兔随机分为三组：A组,微泡＋超声;B组,对照质粒＋微泡＋超声;C组,ES质粒＋微泡＋超声.建模2周行超声爆破微泡介导基因转染,间隔3周时重复转染1次.建模14周时行超声及数字减影血管造影（DSA）检查,病理检测病变血管新生内膜、斑块内新生血管及ES表达情况.结果超声显示A组和B组内膜明显增厚,斑块较大,管腔明显狭窄,收缩期峰值流速（PSV）增加,C组上述指标明显较A组和B组低（P＜0.05）.病理检测C组内中膜厚度（IMT）、内膜厚度（IT）、内中膜厚度比（IT/MT）、内膜面积（IA）、内中膜面积比（IA/MA）及新生内膜狭窄率与A组和B组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.C组颈动脉新生血管及血管内皮生长因子（VEGF）表达均较A组和B组低,内膜及胫前肌可见较多ES表达,而A组和B组无明显ES表达.结论一定超声辐照条件下,超声爆破微泡介导ES基因转染可抑制兔颈动脉粥样硬化病变的发展,有可能为动脉粥样硬化性疾病的基因治疗提供一种安全有效的方法 .

关键词：超声检查微气泡动脉粥样硬化基因疗法内皮抑素类

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携带Survivin-△3(T34A)的减毒鼠伤寒沙门菌疫苗与抗肿瘤效果初探

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实用预防医学 2012年第1期19卷 8-12页

作者：陈英利祁冬冬李翀朴金花张霞苏晓杰林雪松张涛黑龙江省佳木斯大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江佳木斯154000 哈尔滨医科大学(大庆)医学检验与技术学院内蒙古林业总医院宁夏石嘴山市第二人民医院

目的探讨携带Survivin-△3(T34A)基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF-7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-△3(T34A)基因,先后将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pVAX1载体,获得pVAX1-Survivin-△3(T34A)-E... 详细信息

目的探讨携带Survivin-△3(T34A)基因的减毒鼠伤寒沙门菌口服疫苗对乳腺瘤MCF-7注射细胞小鼠的保护作用及其效果。方法人工合成Survivin-△3(T34A)基因,先后将其克隆到真核表达载体pEGFP-N1和pVAX1载体,获得pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP真核表达载体,电转化至减毒鼠伤寒沙门菌;小鼠分别口服pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP转染沙门菌(实验组)、pVAX1-EGFP转染沙门菌(空质粒组)、沙门菌(对照组)和PBS(空白对照组)后,再皮下注射MCF-7乳腺癌细胞,采用Western-blotting检测Survivin-△3(T34A)蛋白水平,以及测定注射部位瘤块的体积大小。结果成功构建了真核表达载体pVAX1-Survivin-△3(T34A)-EGFP并转化到减毒鼠伤寒沙门菌得到表达;在空质粒组、细菌组、空白对照组和实验组小鼠中,肿瘤瘤块平均直径分别为(25.813±0.108)mm、(25.627±0.117)mm、(26.257±0.213)mm、(9.124±0.086)mm;实验组与其他组相比,差异有统计学意义(P<0.05),且能在血清中检测到Survivin-△3(T34A)-EGFP融合蛋白的存在。结论小鼠口服携带Survivin-△3(T34A)真核质粒的沙门菌后,能够抑制MCF-7乳腺瘤细胞的增殖和扩散。

关键词：存活素减毒鼠伤寒沙门菌 Survivin—△3 Survivin—△3(T34A) pVAX1

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稳恒磁场对体外培养的大鼠脑神经细胞影响的研究

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哈尔滨医科大学学报 2011年第4期45卷 301-303页

作者：马波陈丽娜何月涵吕亚娜哈尔滨医科大学生物物理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的观察稳恒磁场对体外培养的大鼠幼鼠脑神经细胞的影响。方法原代培养新生Wistar大鼠的脑皮质神经细胞,测定未照射对照组及30 mT和50 mT强度的稳恒磁场照射组细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量;细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(... 详细信息

目的观察稳恒磁场对体外培养的大鼠幼鼠脑神经细胞的影响。方法原代培养新生Wistar大鼠的脑皮质神经细胞,测定未照射对照组及30 mT和50 mT强度的稳恒磁场照射组细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量;细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和NO含量。结果 30mT强度照射组和50 mT强度照射组与对照组细胞内SOD活性、MDA含量、NO含量均有显著性差异;细胞培养液上清中LDH含量有显著差异。结论一定强度的稳恒磁场对大鼠幼鼠脑神经细胞造成损伤,且损伤程度存在强度-效应关系。

关键词：稳恒磁场神经细胞乳酸脱氢酶超氧化物歧化酶一氧化氮

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肿瘤抑素19肽诱发人肿瘤细胞HepG2凋亡机制研究

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哈尔滨医科大学学报 2011年第2期45卷 99-102页

作者：徐晖刘兴汉哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究肿瘤抑素19肽(T19肽)对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用并探讨其作用的分子机制,为临床联合应用抗肿瘤药物提供理论依据。方法采用亲和层析的方法提取T19肽,分离纯化后经Tricine-SDS-PAGE鉴定T19肽。MTT比色实验测定T19肽对肝癌... 详细信息

目的研究肿瘤抑素19肽(T19肽)对人肝癌细胞HepG2的诱导凋亡作用并探讨其作用的分子机制,为临床联合应用抗肿瘤药物提供理论依据。方法采用亲和层析的方法提取T19肽,分离纯化后经Tricine-SDS-PAGE鉴定T19肽。MTT比色实验测定T19肽对肝癌细胞的半数抑制浓度。HE染色、AO/EB实验验证T19肽促进细胞凋亡的作用。流式细胞仪检测细胞线粒体膜电位的变化,Western blot检测细胞色素C(Cyt C)从线粒体到胞浆的易位情况。结果 T19肽对肝癌细胞HepG2有一定的抑制作用并呈剂量依赖的方式。T19肽降低了线粒体膜电位,引起Cyt C从线粒体释放到胞浆。结论 T19肽通过线粒体途径引起肝癌细胞HepG2凋亡。

关键词：肿瘤抑素19肽凋亡线粒体细胞色素C

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miRNA“海绵”重组质粒的构建及对miR-483-5p的敲减

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哈尔滨医科大学学报 2011年第1期45卷 1-4页

作者：马宁王曦迪乔瑜李福源惠洋邹朝霞周凌云高旭哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的建立microRNA失功能(loss of function)研究模型,为功能研究提供实验材料。方法针对miR-483-5p成熟体序列设计含6个拷贝反义序列的DNA片段,称为"S-483",将其连接入含CAG启动子的pCAGGs载体中,构建pCAGGs-S-483重组质粒。... 详细信息

目的建立microRNA失功能(loss of function)研究模型,为功能研究提供实验材料。方法针对miR-483-5p成熟体序列设计含6个拷贝反义序列的DNA片段,称为"S-483",将其连接入含CAG启动子的pCAGGs载体中,构建pCAGGs-S-483重组质粒。利用脂质体技术瞬时转染Hep1-6细胞,经re-al-time PCR对成熟miR-483-5p含量进行检测。结果转染pCAGGs-S-483组miRNA-483含量(0.33±0.04)较转染空质粒组(1.00)明显下降(P<0.01),但对其它miRNAs无影响。结论 S-483海绵策略可有效"吸附"并降低miR-483-5p,成功构建了pCAGGs-S-483重组质粒,为其功能研究和miRNA敲减动物的建立提供了有益借鉴。

关键词： miRNA海绵 miR-483-5p 敲减

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p53基因在5-aza诱导小鼠胚胎干细胞向心肌样细胞分化中表达的研究

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哈尔滨医科大学学报 2011年第4期45卷 304-307,311页

作者：刘端阳董钦李凤兰马宁李晖哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4... 详细信息

目的检测p53基因及其蛋白在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中的变化,进而探讨p53基因及其蛋白在胚胎早期心肌分化过程中发挥作用的条件。方法以10μmol/L的5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化,分别选取诱导后1周、2周、3周4、周这4个时间点进行样品收集。Tr-izol法提取诱导后细胞的总RNA,应用RT-PCR方法检测p53基因、肌钙蛋白Ⅰ的表达情况;应用免疫细胞化学方法检测P53蛋白和心肌肌球蛋白重链的表达情况。结果在mRNA水平,p53在诱导后1周和诱导后3周表达量较诱导后2周4、周要高;在蛋白水平,随着诱导时间的延长,蛋白表达量没有降低,而是维持在一定的水平甚至有所增加。结论在5-aza诱导C3H10T1/2向心肌样细胞分化过程中,P53蛋白维持一定水平的表达是5-aza发挥其作用的先决条件。

关键词： p53 5-aza 细胞分化干细胞心肌诱导分化

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新生大鼠海马和皮层神经元的原代培养及鉴定

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沈阳药科大学学报 2011年第4期28卷 299-304页

作者：李春莉杨宝峰张景海焦军东黄文淑吴春福沈阳药科大学生命科学与生物制药学院辽宁沈阳110016 哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江哈尔滨150086

目的建立一种条件简单易存活,适用于生理、药理学研究的原代神经元培养方法。方法应用新生(48 h以内)大鼠采用急性分离、胰酶消化的方法培养海马和皮层神经细胞,并结合膜片钳及RT-PCR技术鉴定所培养的神经元电压依赖性离子通道的表达情... 详细信息

目的建立一种条件简单易存活,适用于生理、药理学研究的原代神经元培养方法。方法应用新生(48 h以内)大鼠采用急性分离、胰酶消化的方法培养海马和皮层神经细胞,并结合膜片钳及RT-PCR技术鉴定所培养的神经元电压依赖性离子通道的表达情况。结果体外培养的神经细胞生长状态良好,免疫荧光染色鉴定结果表明该方法培养的神经元纯度可达90%以上;全细胞电压依赖性离子通道表达情况良好。结论应用该方法培养神经细胞操作简单并保持了良好的生理特性,可用于神经元生理特性考察及药理实验研究,是体外培养神经元较理想的方法。

关键词：神经培养海马皮层鉴定表达

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糖尿病肾病早期大鼠肾脏中硫氧还蛋白相互作用蛋白的表达研究

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中国糖尿病杂志 2011年第3期19卷 183-186页

作者：靳玉宏郑海霞贾慧婕房绍红崔云霞毕惠梅闫俊霞周宏博哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 150081 北京市西城区平安医院

目的探讨糖尿病肾病(DN)早期大鼠肾组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)表达的变化。方法 Wistar大鼠随机分成正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,4周时取大鼠肾脏,HE染色观察大鼠肾组织的病理变... 详细信息

目的探讨糖尿病肾病(DN)早期大鼠肾组织中硫氧还蛋白相互作用蛋白(Txnip)表达的变化。方法 Wistar大鼠随机分成正常对照组(NC组)、糖尿病模型组(DM组)。腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病模型,4周时取大鼠肾脏,HE染色观察大鼠肾组织的病理变化,免疫组化检测大鼠肾组织中Txnip的表达分布,Western blot和RT-PCR进一步检测Txnip蛋白和基因的表达。结果在DN早期,与NC组肾组织相比,DM组的肾小管和肾小球中均发现Txnip蛋白和基因的表达增加。结论 Txmp表达的变化在大鼠DN早期发挥重要作用。

关键词：糖尿病肾病硫氧还蛋白相互作用蛋白大鼠

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骨化三醇对实验性自身免疫性脑脊髓炎的治疗作用及相关机制

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中国生物制品学杂志 2011年第11期24卷 1325-1328页

作者：汪占文杨金凤孔庆飞詹晓霞穆莉莉李乐乐孙博张瑶王广友李呼伦张迎庆周明言湖北工业大学生物工程学院武汉430068 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江省高校神经生物学重点实验室哈尔滨150081

目的探讨骨化三醇(Calcitriol)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(Experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)的治疗作用及相关机制。方法用含200μg髓鞘少突胶质细胞糖蛋白35-55肽段(Myelin oligodendrocyte glycoprotein 33-35,MOG33-35)、250μg结核菌素的50μl弗氏不完全佐剂(IFA)皮内免疫C57BL/6小鼠,并分别于免疫当天和第2天注射百日咳毒素,建立EAE实验性动物模型(EAE组);骨化三醇组从免疫当天起隔日腹腔注射骨化三醇100 ng进行治疗,观察两组小鼠临床评分的差异;于EAE发病高峰期处死小鼠,取脊髓及淋巴结,通过HE及LFB染色观察脊髓中炎细胞浸润及髓鞘脱失;采用流式细胞术检测两组淋巴细胞CD4+T细胞亚型的分布。结果与EAE组比较,骨化三醇组发病延缓且发病较轻,临床评分差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01或P<0.001);骨化三醇组较EAE组小鼠脊髓白质炎性细胞浸润明显减少,脱髓鞘斑块明显减轻;骨化三醇组与EAE组相比,Th17细胞亚群明显受到抑制(P<0.05),而Th2和Treg细胞水平明显升高(P均<0.05)。结论骨化三醇可以延缓EAE发病,减轻临床症状及病理改变,并能够通过调节CD4+T细胞亚群平衡,即抑制Th17细胞,上调Th2和Treg细胞水平发挥对EAE的预防和治疗作用。

关键词：骨化三醇实验性自身免疫性脑脊髓炎治疗抗原 CD4

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