检索结果-内蒙古大学图书馆

国际免疫学杂志 2019年第3期42卷 229-234页

作者：李烨曲丽欣董妥王迎晨张哲杜溪乔路冰高虹商蕾李宇 O.N.Reva V.I.Zlobin 曲章义哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学中俄医学研究中心环境相关疾病研究所自然疫源性疾病研究室 150081 比勒陀利亚大学生物信息学与计算生物学部生物化学系南非比勒陀利亚0002 俄罗斯伊尔库茨克国立医科大学生物医学技术研究所俄罗斯伊尔库茨克664003

目的克隆表达人腺病六邻体高变区片段,了解其结构和功能,为研发腺病毒基因工程重组疫苗奠定基础。方法根据生物信息学软件预测的腺病毒六邻体的高变区域,选择目标基因,设计其对应的引物,并以团队保存的人腺病毒六邻体核酸序列为模板,聚... 详细信息

目的克隆表达人腺病六邻体高变区片段,了解其结构和功能,为研发腺病毒基因工程重组疫苗奠定基础。方法根据生物信息学软件预测的腺病毒六邻体的高变区域,选择目标基因,设计其对应的引物,并以团队保存的人腺病毒六邻体核酸序列为模板,聚合酶链反应扩增目标基因,定向插入载体pQE32中构建工程质粒。通过酶切和基因测序鉴定阳性工程质粒,并诱导其在大肠杆菌M15中高效表达带有组氨酸标记的靶蛋白,应用镍树脂亲和层析的方法分离纯化靶蛋白。结果构建了含有人腺病毒六邻体高变区片段的重组质粒,同时探索出其在大肠杆菌M15中高效表达的条件,纯化目标蛋白,其分子量约为188000,与应用生物信息学分析预测的结果相同。结论成功地克隆、表达和纯化了人腺病毒六邻体高变区片段。

关键词：人腺病毒六邻体高变区片段蛋白质表达蛋白质纯化

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RNase L抑制肝癌细胞侵袭转移作用及机制研究

RNase L抑制肝癌细胞侵袭转移作用及机制研究

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第四届泛环渤海生物化学与分子生物学会2013年学术交流会

作者：吕桂香姜小晨郑晓飞高旭哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850

RNase L是一种核酸内切酶,可通过改变RNA的稳定性影响基因的表达及功能,在肿瘤的发病中发挥重要的作用,但是是否影响肝癌的发生发展及作用机制尚不清楚.

关键词：

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慢性应激大鼠抑郁模型的建立及其评价

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齐齐哈尔医学院学报 2006年第6期27卷 644-646页

作者：王建醒周丽徐华锋王淑英徐文弟哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150086 齐齐哈尔医学院医药研究所与生物化学教研室黑龙江大学生命科学院

目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及模型的有效性。方法利用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为。结果大鼠抑郁模型在第27天建立成功。抑郁组大... 详细信息

目的探讨建立慢性应激抑郁大鼠模型的实验方法及模型的有效性。方法利用慢性轻度不可预见性应激(CUMS)制作抑郁模型,观察动物的体重和摄食量的变化,用敞箱试验及液体消耗实验测定动物行为。结果大鼠抑郁模型在第27天建立成功。抑郁组大鼠敞箱试验得分、液体消耗试验中糖水消耗和糖水偏爱百分比均明显下降。结论慢性轻度不可预见性应激可以成功建立大鼠抑郁模型。

关键词：抑郁症应激模型 CUMS

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唯BH3域蛋白与细胞凋亡

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医学分子生物学杂志 2007年第2期4卷 143-146页

作者：张宇雯刘兴汉哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150086

唯BH3域蛋白是Bcl-2蛋白家族中的一类仅含有BH3同源区域的促凋亡分子。不同的凋亡刺激可以通过不同的途径活化不同的唯BH3域蛋白,且表现细胞类型特异性。唯BH3域蛋白通过与同一家族的其它抗凋亡或促凋亡蛋白相互作用,在启动线粒体通路... 详细信息

唯BH3域蛋白是Bcl-2蛋白家族中的一类仅含有BH3同源区域的促凋亡分子。不同的凋亡刺激可以通过不同的途径活化不同的唯BH3域蛋白,且表现细胞类型特异性。唯BH3域蛋白通过与同一家族的其它抗凋亡或促凋亡蛋白相互作用,在启动线粒体通路中起重要作用。有些唯BH3域蛋白在内质网通路和死亡受体通路中也起到一定作用。对该类蛋白的研究将有助于深化对凋亡的认识,并为疾病治疗提供新的方法和思路。

关键词：唯BH3域蛋白线粒体凋亡

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肿瘤抑素抗血管活性相关肽的表达及活性研究

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医学分子生物学杂志 2005年第3期2卷 157-161页

作者：付雪王淑静林雪松刘兴汉黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨市150086

目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75～95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达系统表达肿瘤抑素抗血管活性相关肽-21肽,检测其生物学活性。方法人工合成21肽基因序列(肿瘤抑素75～95位氨基酸),克隆到表达载体pTYB2上,转化大肠杆菌BL-21(DE_3),酶切和测序鉴定后,用IPTG诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化21肽。通过MTT实验,细胞生长曲线测定,小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验及组织病理学切片研究其活性。结果获得的可溶性21肽对人脐静脉内皮细胞的生长具有抑制作用。小鼠肝癌转移瘤模型的大体抑瘤实验抑瘤率达42.86%。组织病理学切片结果可见H22小鼠肝癌细胞死亡,血管数量减少。结论经初步检测获得具有抗血管活性的21肽,为进一步研究肿瘤抑素的作用机制和肿瘤的临床治疗奠定了基础。

关键词：肿瘤抑素蛋白表达蛋白纯化抗血管活性

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人内皮抑素抗肿瘤相关肽基因的克隆表达及活性研究

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医学分子生物学杂志 2007年第6期4卷 475-479页

作者：李丹刘兴汉赵炜明李冀宏马洪星张宇雯栗亚哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室--省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150081

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽，检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸（30肽，序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，几丁质亲和... 详细信息

目的克隆并表达人内皮抑素抗肿瘤相关肽，检测其生物活性。方法人工合成人内皮抑素1—30位氨基酸（30肽，序列25—31由RGIRGAD改为RGDRGD）所对应的核苷酸序列，连接到质粒pTYB2中，再转化至大肠埃希菌BL21（DE3）中表达，几丁质亲和层析树脂一步纯化30肽。通过MTT法、鸡胚绒毛尿囊膜（CAM）实验、小鼠体内抑瘤实验比较30肽和内皮抑素抗肿瘤活性。结果 MTT证实30肽体外对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）、胃癌7901细胞（SGC-7901）半数抑制浓度IC50为36μg／ml、47μg／nl，显著低于内皮抑素IC50179μg／ml、202μg／ml。CAM实验中30肽对血管的抑制作用更强。30肽在小鼠体内抑瘤率47．8％，效果优于内皮抑素28．7％。结论 30肽具有更强抗肿瘤活性，有可能成为治疗肿瘤的一种新药物。

关键词：内皮抑素 RGD序列克隆基因表达抗肿瘤活性

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蛋白质转导技术及其应用

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医学分子生物学杂志 2005年第2期2卷 119-122页

作者：陶站华王淑静刘兴汉哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地哈尔滨市150086

蛋白质转导结构域(protein transduction domain,PTD)是指一类能将其他生物大分子导入多种哺乳动物细胞的小分子阳离子多肽,它可以用于研究细胞内某些蛋白质的功能,还可以与具有治疗作用的蛋白质、多肽等生物大分子偶联,在缺血、肿瘤等... 详细信息

蛋白质转导结构域(protein transduction domain,PTD)是指一类能将其他生物大分子导入多种哺乳动物细胞的小分子阳离子多肽,它可以用于研究细胞内某些蛋白质的功能,还可以与具有治疗作用的蛋白质、多肽等生物大分子偶联,在缺血、肿瘤等多种疾病的治疗中有潜在的应用价值。

关键词：肿瘤治疗中多肽缺血治疗作用细胞内蛋白质转导结构域生物大分子哺乳动物细胞 PTD

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肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞胶原表达的影响

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现代生物医学进展 2012年第14期12卷 2619-2622页

作者：闫俊霞郑海霞毕惠梅崔云霞房绍红周宏博哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 教育部黑龙江省部共建心肌缺血机理与诊疗技术重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞中胶原生成的影响及作用机制。方法:原代培养心肌成纤维细胞,将细胞分为正常糖组(NG,5.5mmol/L glucose)、高糖组(HG,25mmol/L glucose)、高糖+10mmol/L肌肽组、高糖+20mmol/L肌肽组、高糖+40mm... 详细信息

目的:探讨肌肽对高糖环境下心肌成纤维细胞中胶原生成的影响及作用机制。方法:原代培养心肌成纤维细胞,将细胞分为正常糖组(NG,5.5mmol/L glucose)、高糖组(HG,25mmol/L glucose)、高糖+10mmol/L肌肽组、高糖+20mmol/L肌肽组、高糖+40mmol/L肌肽组、高糖+SB组(HG+10μmol/L SB203580)、高糖+PD组(HG+10μmol/L PD98059)。ELISA检测胶原Ⅰ、Ⅲ的含量,Western blot检测TGF-β1、p-p38 MAPK和p-ERK(1/2)等蛋白的表达。结果:与正常糖组相比,高糖组中胶原Ⅰ和胶原Ⅲ含量增加(P<0.01);TGF-β1、p-p38和p-ERK等表达增加(P<0.01);与高糖组相比,高糖+肌肽组中胶原Ⅰ、Ⅲ、TGF-β1、p-p38、和p-ERK等均降低(P<0.05);高糖+SB组和高糖+PD组中胶原Ⅰ、Ⅲ表达减少(P<0.05)。结论:肌肽对心肌成纤维细胞中胶原生成具有抑制作用,且通过MAPK通路实现。

关键词：肌肽高糖培养胶原 TGF-β MAPK信号通路

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Puma基因转染对胃癌SGC-7901细胞的促凋亡作用及机制

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中国肿瘤 2008年第2期17卷 137-141页

作者：张宇雯刘兴汉马洪星曲天舒李冀红栗亚哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑... 详细信息

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑制,Hoechst33342染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期和线粒体膜电位的变化,Westernblot检测细胞色素C(CytC)和凋亡诱导因子(AIF)的转位。[结果]外源性puma基因在pEGFP-C1-PUMA转染的SGC-7901细胞中实现了表达。PUMA表达使SGC-7901细胞的增殖能力降低并诱导凋亡,转染24、48、72h的生长抑制率分别为19.3%、34.7%、42.2%,凋亡率分别为19.6%、35.4%、46.6%。PUMA表达的SGC-7901细胞DNA合成受到抑制,周期阻滞在G0/G1期;线粒体膜电位明显下降,CytC、AIF从线粒体进入胞浆。[结论]puma基因转染可有效抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,促进其凋亡。促凋亡机制主要是线粒体途径,与线粒体膜电位降低和CytC、AIF从线粒体释放有关。

关键词： puma基因凋亡胃肿瘤线粒体

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人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白的克隆表达和纯化

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哈尔滨医科大学学报 2017年第3期51卷 191-194页

作者：崔奇董妥王迎晨李宇齐彬彬 Vladimir I.Zlobin Yuri P.Dzhioev Oleg N.Reva 曲章义哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 俄罗斯伊尔库茨克国立医科大学生物医学技术研究所俄罗斯伊尔库茨克664003 比勒陀利亚大学生物信息学与计算生物学部生物化学系南非比勒陀利亚市0002

目的克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础。方法以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至p QE32质粒,... 详细信息

目的克隆、表达人腺病毒六邻体蛋白基底区片段,为后续研究六邻体蛋白的抗原性及蛋白结构,进而研发腺病毒的基因工程疫苗及诊断试剂奠定基础。方法以3型人腺病毒核酸为模板,用PCR法扩增六邻体基底区片段,将该片段定向克隆至p QE32质粒,在大肠杆菌表达系统中表达带有组氨酸标签的重组蛋白片段,利用镍亲和层析法对重组蛋白进行纯化。结果构建出重组表达质粒,通过测序验证了克隆结果的正确性;在大肠杆菌表达体系中获得了高效表达。结论成功表达并获得了纯化的人3型腺病毒六邻体基底区重组蛋白片段。

关键词：腺病毒六邻体蛋白表达蛋白纯化

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