检索结果-内蒙古大学图书馆

国际遗传学杂志 2007年第3期30卷 169-172页

作者：马洪星栗亚张宇雯李冀宏刘岩刘远莉李丹刘兴汉黑龙江省部共建国家重点实验室培育基地一黑龙江省生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室

目的构建引入RGD序列人肿瘤抑素相关21肽(T21RGD)-内含肽-几丁质结合蛋白融合表达载体,实现目的肽的几丁质珠亲和层析一步纯化。方法人工设计合成T21RGD肽基因,经重组定向克隆插入到原核表达载体pTYB2,酶切和测序鉴定正确后转化入大肠杆... 详细信息

目的构建引入RGD序列人肿瘤抑素相关21肽(T21RGD)-内含肽-几丁质结合蛋白融合表达载体,实现目的肽的几丁质珠亲和层析一步纯化。方法人工设计合成T21RGD肽基因,经重组定向克隆插入到原核表达载体pTYB2,酶切和测序鉴定正确后转化入大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导其融合表达,对表达蛋白进行几丁质珠亲和层析,DTY诱导柱上裂解以获得T21RGD肽。经Trcine- SDS-PAGE和反相高效液相色谱(RP-HPLC)对纯化产物进行鉴定。结果质粒酶切和测序结果显示,含T21RGD肽基因按正确方向和序列插入质粒,融合蛋白表达量达菌体蛋白总量的50%以上,Trcine- SDS-PAGE显示了T21RGD肽目的条带与预期相符,反相高效液相色谱测定峰纯度达97%。结论成功构建T21RGD肽融合表达载体,实现了融合蛋白在大肠杆菌中高效表达和T21RGD肽几丁质珠亲和层析一步纯化,为进一步研究T21RGD肽抗肿瘤活性和作用机制奠定基础。

关键词：肿瘤抑素 RGD序列基因重组纯化

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新疆出血热病毒基因组抗原表位及其实验室检测价值的评价

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中华检验医学杂志 2023年第2期46卷 127-136页

作者：张花花赵国玉李阳史深安冉袁江玲刘东亮窦景锐雒涛孙素荣张渝疆新疆医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室乌鲁木齐830054 新疆维吾尔自治区疾病预防控制中心消毒与感染控制中心乌鲁木齐830002 乌鲁木齐市妇幼保健院乌鲁木齐830001 新疆大学生命科学与技术学院新疆生物资源与基因工程重点实验室乌鲁木齐830046

目的掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原表位谱分布,明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良... 详细信息

目的掌握克里米亚-刚果出血热病毒(CCHFV)核蛋白(NP)和糖蛋白(GP)片段的精细抗原表位谱分布,明确优势抗原表位在克里米亚-刚果出血热(CCHF)实验室检测中的价值。方法2014—2021年在新疆大学生命科学院实验室将CCHFV YL04057株采用改良生物肽合成方法分段表达出由8个氨基酸组成的最小合成短肽,以CCHFV多克隆抗体或单克隆抗体14B7(IgM)或CCHFV阳性羊血清为抗体,用免疫印迹方法鉴定出NP和GP片段上具有抗原活性的最小抗原表位(BCE),并采用邻接法将获得的具有序列多态性的BCE与不同地区的CCHFV进行空间聚类,确定BCE组合方式与地理区域分布的相关性,探讨其在建立血清学诊断中的应用价值。采用原核表达质粒(pET-32a、pGEX-KG)和带有不完整谷胱甘肽(GST188)标签的原核表达质粒(pXXGST-ST-1)构建和表达NP片段上6个不同肽段长度的优势抗原表位,建立间接酶联免疫吸附测定(ELISA)检测方法,以经免疫荧光法(IFA)鉴定的CCHF羊血清为对照,统计分析不同肽段长度的抗原表位重组蛋白与IFA检测结果的特异度、敏感度和总符合率。结果CCHFV NP和GP片段共有30个具有抗原活性的BCE,其中NP片段抗原表位集中的核心中间片段NP_(2)(aa 170~305)有6个BCE,两端的NP1(aa 1~200)和NP3(aa 286~482)有9个BCE;GP片段的Gc(aa 1~558)和Gn(aa 533~708)片段有14个BCE和1个包含15个氨基酸的长抗原肽(AP),NP片段BCE氨基酸序列的同源性为97.1%,GP片段对应的同源性为89.1%。在GP片段9个具有序列多态性的BCE中,由GnEc1、GnE2、GnE4、GcE3、GcE6和GcAP-4(Ap)6个组合BCE可将15株来自全球不同地区的CCHFV聚类成亚洲Ⅰ、亚洲Ⅱ、非洲Ⅰ、非洲Ⅱ和欧洲5个地理类群。构建表达的PET-32a-NP(全长)、PGEX-KG-NP_(2)(aa 170~305)、pGEX-KG-NP_(2-1)(aa 235~275)、PGEX-KG-NP_(2-1-1)(aa 237~256)、pXXGST-1-NP_(2-1-2)(aa 250~265)和PGEX-KG-NP_(2-1-3)(aa 260~276)6个重组蛋白CCHFV NP兔多克隆抗血清(pAb)免疫印迹反应阳性,以33份经IFA CCHF检测的羊血清为参照,以NP_(2)和NP_(2-1)2个片段构建的重组蛋白为抗原建立的间接ELISA检测方法检测敏感度、特异度和总符合率最好,敏感度分别为73.4%(11/15)和66.7%(10/15),特异度分别为100%(18/18)和94.4%(17/18),总符合率分别为87.9%(29/33)和81.8%(27/33)。结论CCHFV NP和GP上分布着数量较多的具有抗原免疫活性的BCE,其中,优势抗原表位在CCHF实验室血清学诊断中具有较高的应用价值。

关键词：出血热病毒,克里米亚-刚果表位酶联免疫吸附测定核蛋白糖蛋白

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珍珠液对体外培养人瘢痕成纤维细胞生长的抑制

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中国组织工程研究与临床康复 2009年第46期13卷 9088-9091页

作者：农晓琳陈洪陈石海李佳荃李菊裳黎燕宁蒙宁张宏邓凌李昊广西医科大学口腔医学院口腔颌面外科广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学第一临床医学院整形美容科广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学医学实验中心广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学第一临床医学院皮肤性病科广西壮族自治区南宁市530021 广西医科大学公共卫生学院流行病及统计学教研室广西壮族自治区南宁市530021 瑞典林雪平大学生物医学及外科实验中心皮肤科实验室瑞典林雪平市SE-58185

背景:研究发现,珍珠液有促组织细胞再生、消除瘢痕等功效。目的:观察珍珠液对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖的影响。设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2008-09/12在广西医科大学医学实验中心完成。材料:瘢痕组织组织标本来自广西医科大... 详细信息

背景:研究发现,珍珠液有促组织细胞再生、消除瘢痕等功效。目的:观察珍珠液对人皮肤瘢痕成纤维细胞增殖的影响。设计、时间及地点:分组对比观察实验,于2008-09/12在广西医科大学医学实验中心完成。材料:瘢痕组织组织标本来自广西医科大学整形外科患者。珍珠液是珍珠的水解液,含有多种氨基酸、多肽、维生素、矿物质和天然酶等,购自北海国发生物有限公司。方法:参考Veelken方法进行成纤维细胞原代及传代培养,反复传代去除非成纤维细胞成分后,建立人皮肤瘢痕细胞系。取对数生长期的人皮肤瘢痕成纤维细胞3～5代,用胰蛋白酶消化成单细胞悬液,接种于96孔塑料培养板,密度为0.5×104/孔,每孔加入100μL的细胞悬液和100μL的DMEM培养基,常规培养24h后吸弃原培养液,实验分组:珍珠液组:加入已经配置的含珍珠液质量浓度为125.00,62.50,31.30,15.60,7.80,3.90,1.95,0.98mg/L的培养基200μL;对照组:每孔只加200μL的培养基。主要观察指标:MTT法检测成纤维细胞增殖情况,TUNEL法检测成纤维细胞凋亡情况。结果:珍珠液对成纤维细胞的半效抑制浓度IC50为15mg/L,除0.98mg/L质量浓度外,其余质量浓度均能有效地抑制成纤维细胞的生长,且呈剂量依赖性抑制成纤维细胞的生长,珍珠液的浓度越高,对成纤维细胞的抑制率越大。剂量IC50=15mg/L培养的成纤维细胞体积缩小、胞质少、密度变小,凋亡细胞多、呈棕黄色。对照组成纤维细胞体积大、胞质丰富、密度大。珍珠液作用后的细胞凋亡指数高于空白对照组(P<0.01)。结论:珍珠液能抑制体外培养皮肤瘢痕成纤维细胞的生长,并诱导其凋亡。

关键词：珍珠液皮肤瘢痕成纤维细胞

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肌肽对高糖诱导的心肌成纤维细胞增殖的影响

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国际免疫学杂志 2017年第5期40卷 497-501页

作者：毕惠梅王利华崔云霞周宏博黑龙江省农垦总局总医院检验科哈尔滨150088 黑龙江省传染病防治院内八科哈尔滨150500 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 150081

目的研究肌肽（carnosine）对高糖环境下大鼠心脏成纤维细胞（cardiac flbroblasts，CFs）增殖的影响及机制。方法以CFs为研究对象，使用Brdu-酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assays，ELISA）检测法观察肌肽抑制高糖... 详细信息

目的研究肌肽（carnosine）对高糖环境下大鼠心脏成纤维细胞（cardiac flbroblasts，CFs）增殖的影响及机制。方法以CFs为研究对象，使用Brdu-酶联免疫吸附试验（enzyme-linked immunosorbent assays，ELISA）检测法观察肌肽抑制高糖环境下心肌成纤维细胞DNA的合成；细胞周期的测定采用流式细胞仪法；Western blot法观察不同条件下CFs中CDK2、CyclinE、PCNA、ERK1/2、p-ERK1/2及p21和p27的蛋白表达情况。结果肌肽能够抑制高糖环境下CFs的DNA合成，通过调节细胞周期和细胞周期的相关蛋白表达来实现这种作用。与高糖组比较，20 mmol/L肌肽组明显抑制了高糖刺激的大鼠CFs中CDK2、CyclinE、PCNA蛋白的表达增加（tCDK2＝6.19、tCyclinE＝5.7、tPCNA＝8.56，P〈0.05），差异具有统计学意义；与高糖组比较20 mmol/L肌肽则使p21、p27表达水平增加了（tp21＝5.16、tp27＝8.558，P〈0.05），具有统计学意义；与高糖组比较20 mmol/L的肌肽或20 mol/L的PD-98059（ERK1/2抑制剂）明显抑制了高糖刺激的大鼠CFs中p-ERK1/2的表达增加（t肌肽＝5.64、tPD＝8.68，P〈0.05），差异具有统计学意义。结论肌肽能够通过ERK1/2 MAPK信号通路抑制高糖环境下心肌成纤维细胞的DNA合成。

关键词：肌肽高糖心肌成纤维细胞细胞增殖

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北京男男性接触HIV感染者合并病毒性肝炎分析

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中国公共卫生 2011年第5期27卷 624-625页

作者：王万海马燕姜树林杨烨张晓曦邵一鸣张晓燕张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心北京市朝阳区疾病预防控制中心上海市公共卫生临床中心科研中心复旦大学生物医学研究院

男男性接触者（men who have with men,MSM）人群由于非保护性性交、多性伴、商业性行为等而处于感染艾滋病的高危险之中,已成为人类免疫缺陷病毒（HIV）易感的三大核心人群之一。近年,MSM人群与艾滋病/性传播疾病（STD）感染问题越来... 详细信息

男男性接触者（men who have with men,MSM）人群由于非保护性性交、多性伴、商业性行为等而处于感染艾滋病的高危险之中,已成为人类免疫缺陷病毒（HIV）易感的三大核心人群之一。近年,MSM人群与艾滋病/性传播疾病（STD）感染问题越来越受到关注。

关键词：艾滋病病毒阳性男男性接触者甲型肝炎病毒乙型肝炎病毒丙型肝炎病毒

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树舌多糖对小鼠HepA P16 P27 Rb基因表达的影响

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世界华人消化杂志 2004年第6期12卷 1353-1356页

作者：王玉于英君徐广有王璐周丽齐齐哈尔医学院生物遗传教研室黑龙江省齐齐哈尔市161042 黑龙江中医药大学生化教研室黑龙江省哈尔滨市150040 齐齐哈尔医学院微形态教研室黑龙江省齐齐哈尔市161042 哈尔滨医科大学国外医学遗传学编辑部黑龙江省哈尔滨市150086 齐齐哈尔医学院中心实验室黑龙江省齐齐哈尔市161042

目的:探讨树舌多糖抗肿瘤作用的机制. 方法:通过免疫组化、ELISA法分别测定瘤体和血清中抑癌基因P16,P27,Rb表达蛋白的量;通过透射电镜观察凋亡小体是否存在. 结果:树舌多糖作用后P16,P27,Rb基因表达蛋白的量与盐水组有差异具有统计学意... 详细信息

目的:探讨树舌多糖抗肿瘤作用的机制. 方法:通过免疫组化、ELISA法分别测定瘤体和血清中抑癌基因P16,P27,Rb表达蛋白的量;通过透射电镜观察凋亡小体是否存在. 结果:树舌多糖作用后P16,P27,Rb基因表达蛋白的量与盐水组有差异具有统计学意义,免疫组化结果:bP<0.01, vs(1)(2);aP<0.05,vs(2)(3);dP<0.01,vs(3).ELISA结果: aP<0.05,vs(3);bP<0.01,cP<0.05,vs(4);dP<0.01,vs (3)(4);fp<0.01,vs(4);gP<0.05,hP<0.01,vs(3).且P16, P27表达的量与Rb呈负相关mr=-0.094(1),nr=-0.446 (1),再有观察到凋亡小体的存在. 结论:树舌多糖通过激活抑癌基因,抑制肿瘤的生长促进肿瘤细胞凋亡.

关键词：树舌多糖小鼠 HepA P16 P27 Rb基因表达免疫组化细胞周期

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利扎曲普坦治疗偏头痛随机双盲多中心对照研究

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中国新药与临床杂志 2005年第3期24卷 219-222页

作者：王文昭赵忠新常履华邓丽影王维治谭兰苏炳华中国人民解放军第二军医大学附属长征医院神经内科上海200003 昆明医学院第一附属医院神经内科云南昆明650032 江西医学院第二附属医院神经内科江西南昌330006 哈尔滨医科大学第二临床医学院神经内科黑龙江哈尔滨150086 青岛大学医学院附属医院神经内科山东青岛266003 上海第二医科大学生物统计教研室上海200025

目的:评价利扎曲普坦片对偏头痛急性发作的有效性和安全性。方法:共入组偏头痛病例115例。其中先给利扎曲普坦后给安慰剂 57例,先给安慰剂后给利扎曲普坦 58例。治疗前 2组的一般资料、临床评价和实验室指标无显著差异。结果:利扎曲普... 详细信息

目的:评价利扎曲普坦片对偏头痛急性发作的有效性和安全性。方法:共入组偏头痛病例115例。其中先给利扎曲普坦后给安慰剂 57例,先给安慰剂后给利扎曲普坦 58例。治疗前 2组的一般资料、临床评价和实验室指标无显著差异。结果:利扎曲普坦组和安慰剂组的 2h内头痛消失率分别为(57±s5)%和 (37±4)% (P<0. 01)。利扎曲普坦组 2h内头痛缓解率为 (67±4)%,安慰剂组 2h内头痛缓解率为(50±5)% (P<0. 01)。治疗中,仅1例出现一过性的血小板减少,无肝、肾功能等影响。结论:利扎曲普坦治疗偏头痛安全性好,可作为治疗偏头痛急性发作的有效药物。

关键词：偏头痛多中心研究随机对照试验双盲法利扎曲普坦

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上皮-钙粘蛋白在小鼠胚胎植入中的作用

上皮-钙粘蛋白在小鼠胚胎植入中的作用

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中国生理学会第21届全国代表大会暨学术会议

作者：刘国艺倪江祝诚中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室哈尔滨医科大学生理学教研室中科院动物所计划生育生殖生物学国家重点实验室

胚胎植入是哺乳动物生殖过程的重要环节,主要包括胚泡在子宫内膜的定位、粘附和侵入。基质金属蛋白酶(MMP)是降解细胞外基质的重要酶类,在植入中起重要作用。钙粘蛋白家族是一类重要的细胞粘附分子,包括多个亚型,其中上皮-钙粘蛋白是最... 详细信息

胚胎植入是哺乳动物生殖过程的重要环节,主要包括胚泡在子宫内膜的定位、粘附和侵入。基质金属蛋白酶(MMP)是降解细胞外基质的重要酶类,在植入中起重要作用。钙粘蛋白家族是一类重要的细胞粘附分子,包括多个亚型,其中上皮-钙粘蛋白是最重要的亚型之一,它主要介导细胞-细胞间的粘附,但是否参与在胚胎植入过程尚不清楚。本实验用原位杂交的方

关键词：钙粘蛋白胚胎植入小鼠胚胎子宫内膜

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重组人内皮抑素30肽的抗肿瘤作用研究

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现代肿瘤医学 2009年第12期17卷 2280-2282页

作者：温鸿清南克俊刘兴汉崔宪珍西安交通大学医学院第一附属医院肿瘤内科陕西西安710061 西安市第二医院陕西西安710003 哈尔滨医科大学生物化学及分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨重组人内皮抑素30肽对肝癌细胞的生物活性及其可能的作用途径。方法:建立HepG2肝癌细胞的单层细胞和多细胞球模型,采用MTT方法和流式细胞技术检测重组人内皮抑素30肽对单层细胞和多细胞球的生长抑制率和细胞调亡率;采用免疫组... 详细信息

目的:探讨重组人内皮抑素30肽对肝癌细胞的生物活性及其可能的作用途径。方法:建立HepG2肝癌细胞的单层细胞和多细胞球模型,采用MTT方法和流式细胞技术检测重组人内皮抑素30肽对单层细胞和多细胞球的生长抑制率和细胞调亡率;采用免疫组化和图像分析技术了解重组人内皮抑素30肽与肝癌细胞表面整合素结合的情况。结果:MTT实验表明,在二维细胞中,重组人内皮抑素30肽对HepG-2肝癌细胞表现出明显的抑制作用。在单层细胞和多细胞球中,重组人内皮抑素30肽均可导致细胞凋亡。免疫组化结果显示,无论在单层细胞还是多细胞球中,使用重组人内皮抑素30肽组HepG-2肝癌细胞表面的α5β1整合素和αVβ3整合素的表达均比对照组明显降低(P<0.05)。结论:重组人内皮抑素30肽对HepG2肝癌细胞具有直接的杀伤作用。重组人内皮抑素30肽可与HepG-2肝癌细胞表面的α5β1整合素和αVβ3整合素结合发挥其抗肿瘤作用。

关键词：肝癌内皮抑素 RGD序列整合素

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非创伤性诊断指标优势组合对肝纤维化诊断价值的初步研究

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中华肝脏病杂志 2001年第5期9卷 261-263页

作者：李成忠万谟彬曾民德茅益民范竹萍曹爱平李继强邱德凯苏炳华何清波陆伦根叶军蔡雄陈成伟王吉耀胡德昌张清波巫善明周霞秋朱金水张惠泉第二军医大学附属长海医院感染科上海200433 上海第二医科大学附属仁济医院上海市消化疾病研究所上海第二医科大学生物统计学教研室上海市闸北区中心医院消化科上海市普陀区中心医院上海第二军医大学附属长征医院南京军区上海肝病临床研究中心复旦大学医学院中心医院复旦大学医学院华山医院上海市传染病医院上海第二医科大学瑞金医院上海市第六人民医院上海市市北医院

目的探讨非创伤性诊断指标的优势组合及其对肝纤维化的诊断价值。方法以肝活检组织学分级分期为标准，检测200例慢性肝病患者同期血清学指标、免疫学指标、肝纤维化血清标志物及B超、CT、MRI，运用逐步回归方法判别分析获得肝纤维化... 详细信息

目的探讨非创伤性诊断指标的优势组合及其对肝纤维化的诊断价值。方法以肝活检组织学分级分期为标准，检测200例慢性肝病患者同期血清学指标、免疫学指标、肝纤维化血清标志物及B超、CT、MRI，运用逐步回归方法判别分析获得肝纤维化非创伤性诊断指标的优势组合,并计算其敏感性、特异性及准确率。结果以S_0为无纤维化组，S_1＋S_2＋S_3＋S_4为纤维化组，获得指标组合：B超门静脉每分钟血流流量参数、年龄、B超肝右叶最大斜径、CT/MRI肝表面波浪状表现、γ-谷氨酰转肽酶(GGT)，其诊断敏感性为80.36％，特异性为86.67％，准确率为81.10％；以S1+S2为轻度肝纤维化组，S3＋S4为重度肝纤维化组，获得指标组合：透明质酸(HA)、A/G比值、B超脾长径，其诊断敏感性为59.57%，特异性为91.26%，准确率为81.33%；以S_1＋S_2＋S_3为纤维化组，S_4为肝硬化组，获得指标组合：HA、CT/MRI肝内胆管附近小囊状改变情况、B超肝包膜厚度、年龄、症状积分，其诊断敏感性为77.78%，特异性为91.45%，准确率为89.63%。结论非创伤性诊断指标的优势组合对诊断肝纤维化具有较高的敏感性和特异性，其诊断价值高于单一指标。

关键词：肝纤维化诊断逐步回归优势组合非创伤性指标

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