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钙离子通道β2亚基基因rs4373814位点多态性与东北汉族人群原发性高血压易感性的关联研究

中国循环杂志 2015年第7期30卷 661-664页

作者：张海英宋娟娟李天晓王懿吕信鹏周宏博邓颖哈尔滨医科大学附属第二医院急诊医学科黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学生物技术实验教学中心

目的：探索钙离子通道β2亚基（CACNB2）基因rs4373814位点的多态性与东北汉族人群（黑龙江省及周边地区）原发性高血压易感性的关联性。方法：采用病例—对照研究方法,在哈尔滨医科大学附属第二医院就诊的患者中收集原发性高血压患者1 ... 详细信息

目的：探索钙离子通道β2亚基（CACNB2）基因rs4373814位点的多态性与东北汉族人群（黑龙江省及周边地区）原发性高血压易感性的关联性。方法：采用病例—对照研究方法,在哈尔滨医科大学附属第二医院就诊的患者中收集原发性高血压患者1 006例作为病例组,体检人群中随机选取同期血压正常者992例作为对照组,总计研究人群1 998例。应用Snapshot技术检测CACNB2基因rs4373814位点单核苷酸多态性,利用SPSS 19.0统计学软件进行数据分析处理。结果：CACNB2基因rs4373814位点危险等位基因C的频率分布在病例组和对照组间具有显著性差异[P=0.039,比值比（OR）=1.068,95%可信区间（CI）：1.004～1.137]。经Logistic回归校正性别、年龄、BMI、吸烟、饮酒后,发现显性模型CC＋GC/GG：增加高血压患病风险（P=0.037,OR=1.260,95%CI：1.013～1.567）。结论：CACNB2基因rs4373814位点单核苷酸多态性与东北汉族人群原发性高血压的易感性存在显著关联。

关键词：原发性高血压 CACNB2基因单核苷酸多态性关联研究

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银杏叶黄酮提取工艺及对Hela细胞Bcl-2 mRNA表达的影响

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哈尔滨医科大学学报 2005年第3期39卷 250-252页

作者：刘心平徐文弟哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的银杏叶黄酮提取工艺优化及抗肿瘤作用的研究。方法采用碱液法、乙醇法、丙酮法3种不同的提取方法,设定不同的固液比、提取时间,优化出最佳条件,用于银杏叶黄酮类化合物的提取。无血清培养Hela细胞,以银杏叶黄酮提取物为诱导剂,24h后... 详细信息

目的银杏叶黄酮提取工艺优化及抗肿瘤作用的研究。方法采用碱液法、乙醇法、丙酮法3种不同的提取方法,设定不同的固液比、提取时间,优化出最佳条件,用于银杏叶黄酮类化合物的提取。无血清培养Hela细胞,以银杏叶黄酮提取物为诱导剂,24h后用RTPCR方法检测Hela细胞中癌基因Bcl2的表达情况。结果70%乙醇、固液比1∶3、回流时间为2h的条件下,提取银杏叶黄酮类化合物得率最高。采用RTPCR方法检测显示,银杏叶黄酮类化合物作用Hela细胞24h后,Bcl2mRNA表达水平下降。结论70%乙醇、固液比1∶3、回流时间为2.5h,为银杏叶黄酮提取最佳条件。银杏叶黄酮能下调癌基因Bcl2mRNA表达水平,从而可能有抗肿瘤作用。

关键词：银杏叶黄酮 Bel-2 mRNA 抗肿瘤作用

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MYS2多态位点在中国26个人群中分布的研究

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人类学学报 2003年第1期22卷 63-68页

作者：薛雅丽包维东傅松滨 Tatiana Zerjal 朱苏玲徐玖瑾杜若甫张贵寅李璞 Chris Tyler-Smith 哈尔滨医科大学生物学教研室哈尔滨150086 中国科学院遗传学研究所北京100101 Department of Biochemistry

对中国 2 6个人群中Y染色体小卫星位点MYS2的分布进行了研究 ,结果显示 :MYS2 4是常见的等位基因类型 ,MYS2 3在中国不同人群中分布差异很大 (0— 32 4% ) ;并对该位点在不同人群中分布的频率进行了AMOVA分析 ,结果为 :不分组、南方... 详细信息

对中国 2 6个人群中Y染色体小卫星位点MYS2的分布进行了研究 ,结果显示 :MYS2 4是常见的等位基因类型 ,MYS2 3在中国不同人群中分布差异很大 (0— 32 4% ) ;并对该位点在不同人群中分布的频率进行了AMOVA分析 ,结果为 :不分组、南方人群和北方人群的遗传学差异分别为 7 76 %、8 1 1 %和 1 42 %。南北方人群间、东北和西北人群间的差异分别为 4 34%和 1 57%。结论 :MYS2是研究中国人群遗传结构有价值的多态位点 ,中国不同人群之间存在一定的遗传学差异 ,中国南方人群间的遗传学差异较大 ,再次证实了中国人群的南北差异。

关键词： MYS2多态位点分布 Y染色体 AMOVA 中国人群

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周围神经侵犯与结直肠癌临床病理因素及预后的关系

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中华胃肠外科杂志 2017年第1期20卷 62-66页

作者：韩冬魏颖王曦迪王庚陈瑛罡哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学基础医学院人体解剖学教研室 150081 东北农业大学生命科学学院哈尔滨150030 哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科哈尔滨医科大学大肠癌研究所 150001

目的探讨周围神经侵犯（PNI）与结直肠癌临床病理因素及预后的关系。方法回顾性收集2011年1月至2012年6月期间于哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科行根治性手术治疗的372例结直肠癌患者的临床病理资料及术后标本。病理标本经... 详细信息

目的探讨周围神经侵犯（PNI）与结直肠癌临床病理因素及预后的关系。方法回顾性收集2011年1月至2012年6月期间于哈尔滨医科大学附属第二医院结直肠肿瘤外科行根治性手术治疗的372例结直肠癌患者的临床病理资料及术后标本。病理标本经苏木精-伊红染色后，将肿瘤细胞侵犯神经鞘任意一层或肿瘤细胞沿神经生长包绕超过神经周径1/3定为PNI阳性。采用χ2检验或Fisher确切概率法分析PNI与结直肠癌临床病理因素的关系；绘制Kaplan-Meier生存曲线并采用Log-rank检验对PNI阳性与阴性患者的3年生存率进行比较。结果全组372例结直肠癌患者共133例（35.8%）存在PNI阳性。其中PNI阳性患者中男性63例，女性70例；年龄〉 60岁者76例，≤60岁者57例；肿瘤位于回盲部6例，升结肠33例，横结肠7例，降结肠8例，乙状结肠22例，直肠57例；肿瘤直径〉 4 cm者83例，≤4 cm者50例；中高分化者48例，低分化者85例；肿瘤浸润深度T1期者2例，T2期者7例，T3期者93例，T4期者31例；淋巴结转移N0期者56例，N1期者41例，N2期者36例；肿瘤分期Ⅰ期者2例，Ⅱ期者40例，Ⅲ期者75例，Ⅳ期者16例。PNI阳性与肿瘤位置（χ2= 11.20，P= 0.048）、肿瘤大小（χ2= 21.80 ，P= 0.000）、分化程度（χ2= 60.90 ，P= 0.000）、浸润深度（χ2= 19.00 ，P= 0.000）、淋巴结转移（χ2= 19.70，P= 0.000）及肿瘤分期（χ2= 70.80，P= 0.000）有关，差异均有统计学意义，而与患者性别、年龄及脉管侵犯情况无关（均P 〉 0.05）。全组中位随访时间48 （8~ 62）月，PNI阳性患者的3年生存率为52.6%，明显低于PNI阴性患者的78.3%（P= 0.000）。进一步对Ⅱ期和Ⅲ期结直肠癌患者进行亚组分析显示，Ⅱ期和Ⅲ期PNI阳性患者的3年生存率分别为62.3％和43.5%，均明显低于Ⅱ期和Ⅲ期PNI阴性患者的91.7％和79.4%，差异均有统计学意义（均P= 0.000）。结论 PNI阳性可能提示结直肠癌患者的预后不良。Ⅱ期和Ⅲ期结直肠癌患者PNI状态的检测对判断预后有重要意义。

关键词：结直肠肿瘤周围神经侵犯预后

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SCN5A基因启动区+495bp～+584bp片段的克隆与功能分析

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哈尔滨医科大学学报 2007年第6期41卷 527-530页

作者：张振明李晖董钦刘宇李凤兰马宁李金波刘端阳舒畅逄淑超哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对... 详细信息

目的为了研究大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域内的顺式作用元件对转录调控的影响。方法应用聚合酶链反应扩增大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp片段,与荧光素酶报告基因载体pGL3-promoter重组,以pGL3-promoter空载体为对照,瞬时转染人胚肾母细胞(HEK293)和小鼠胚胎心肌细胞(H9C2),检测荧光素酶活性。结果成功构建的pGL3-P1重组载体的荧光素酶活性与pGL3-promoter对照载体相比,在HEK293细胞无明显差别(P>0.05),在H9C2细胞荧光活性增高(22.5±5.4)倍(P<0.01)。结论大鼠心肌SCN5A基因启动区+495bp^+584bp区域存在对基因的转录调控活性具有增强作用的组织特异性顺式作用元件。

关键词： SCN5A基因转录调控顺式作用元件荧光素酶报告基因

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谷胱甘肽对乳酸脱氢酶活性影响的动力学研究

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哈尔滨医科大学学报 2005年第2期39卷 121-123页

作者：刘岩范业鹏哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase ,LDH)活性影响的动力学机制并求取抑制常数。方法　采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver Burk作图法分析动力学机制并用计算法求取抑制常数。结果　在pH7.0、... 详细信息

目的　研究谷胱甘肽(glutathione,GSH)对乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase ,LDH)活性影响的动力学机制并求取抑制常数。方法　采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver Burk作图法分析动力学机制并用计算法求取抑制常数。结果　在pH7.0、2 5℃、10 1.3kPa条件下,在由乳酸转变为丙酮酸的酶反应方向,加入不同浓度的GSH对LDH1及LDH5均具有可逆抑制作用,并存在量效关系。随GSH浓度增加,表观KmNAD + 及表观VmaxNAD + 逐渐减小,而表观KmNAD + /VmaxNAD + 不变;表观KmLac逐渐增大,表观VmaxLac不变,而表观KmLac/VmaxLac增大。结论　GSH相对于NAD+ 为LDH1及LDH5的反竞争抑制剂,相对于乳酸为LDH1及LDH5的竞争性抑制剂;GSH结合于E NAD+ 二元复合物从而降低了酶活性。抑制常数为:KLDH1 NAD+ GSH=0 .397mol/L和KLDH5 NAD+ GSH=0 .0 33mol/L。

关键词：谷胱甘肽乳酸脱氢酶抑制作用动力学

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谷胱甘肽、抗坏血酸对乳酸脱氢酶抑制作用的比较

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哈尔滨医科大学学报 2007年第2期41卷 179-181页

作者：徐娜刘岩范业鹏哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸对乳酸脱氢酶(LDH)促动力学的影响,并对二者进行比较。方法采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver-Burk作图法分析动力学机制,并用计算法求取抑制常数及抑制率/[I]。结果在pH7.0、25℃、101.3kPa条件下... 详细信息

目的探讨谷胱甘肽(GSH)和抗坏血酸对乳酸脱氢酶(LDH)促动力学的影响,并对二者进行比较。方法采用分光光度法追踪酶反应,用Lineweaver-Burk作图法分析动力学机制,并用计算法求取抑制常数及抑制率/[I]。结果在pH7.0、25℃、101.3kPa条件下,在L-P方向,固定[Lac],变化[NAD+],随GSH和抗坏血酸浓度增加,表观KmNAD+及表观VmaxNAD+都逐渐减小,而表观KmNAD+/VmaxNAD+不变;而固定[NAD+],变化[Lac],表观KmLac逐渐增大,表观VmaxLac不变,而表观KmLac/VmaxLac增大。反应体系加入GSH所求得的抑制常数大于加入抗坏血酸的抑制常数(KLDH1-NAD+-GSH=0.0418mmol/L;KLDH-NAD+-抗坏血酸=0.0397mmol/L和KLDH5-NAD+-GSH=0.0606mmol/L;KLDH5-NAD+-抗坏血酸=0.033mmol/L。)而抑制率/[I]小于加入抗坏血酸的抑制率/[I](im抗坏血酸LDHI=0.0336;im抗坏血酸LDH5=0.0281;imGSHLDH1=0.0066;imGSHLDH5=0.0059)。结论GSH和抗坏血酸二者都结合于LDH-NAD+二元复合物,形成死端三元复合物而抑制LDH催化的反应;GSH的抑制率/[I]小于抗坏血酸的抑制率/[I]。

关键词：谷胱甘肽抗坏血酸乳酸脱氢酶抑制作用

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α-芋螺毒素特异性结合受体-神经型烟碱乙酰胆碱受体的同源模建及功能预测

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中国生化药物杂志 2012年第3期33卷 213-216页

作者：赵雪娇姜山何娟孙美娜李晖哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体能被其竞争性拮抗剂α-芋螺毒素选择性阻断的机理。方法采用同源模建的方法构建神经型烟碱乙酰胆碱受体α-7亚型的三维空间结构,并利用分子对接的方法与已知空间构像的α-芋螺毒素对接。结果已构建的神... 详细信息

目的探讨神经型烟碱乙酰胆碱受体能被其竞争性拮抗剂α-芋螺毒素选择性阻断的机理。方法采用同源模建的方法构建神经型烟碱乙酰胆碱受体α-7亚型的三维空间结构,并利用分子对接的方法与已知空间构像的α-芋螺毒素对接。结果已构建的神经型烟碱乙酰胆碱受体α-7亚型结构合理,并与已知空间构像的α-芋螺毒素对接成功。结论传统的烟碱型乙酰胆碱受体拮抗剂缺乏专一性,而靶向神经元神经型烟碱乙酰胆碱受体的α-芋螺毒素种类多,特异性强,与不同亚单位组成的受体亲和力不同,应用潜力很大。

关键词：神经型烟碱乙酰胆碱受体 α-芋螺毒素同源模建分子对接

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miRNA“海绵”重组质粒的构建及对miR-483-5p的敲减

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哈尔滨医科大学学报 2011年第1期45卷 1-4页

作者：马宁王曦迪乔瑜李福源惠洋邹朝霞周凌云高旭哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的建立microRNA失功能(loss of function)研究模型,为功能研究提供实验材料。方法针对miR-483-5p成熟体序列设计含6个拷贝反义序列的DNA片段,称为"S-483",将其连接入含CAG启动子的pCAGGs载体中,构建pCAGGs-S-483重组质粒。... 详细信息

目的建立microRNA失功能(loss of function)研究模型,为功能研究提供实验材料。方法针对miR-483-5p成熟体序列设计含6个拷贝反义序列的DNA片段,称为"S-483",将其连接入含CAG启动子的pCAGGs载体中,构建pCAGGs-S-483重组质粒。利用脂质体技术瞬时转染Hep1-6细胞,经re-al-time PCR对成熟miR-483-5p含量进行检测。结果转染pCAGGs-S-483组miRNA-483含量(0.33±0.04)较转染空质粒组(1.00)明显下降(P<0.01),但对其它miRNAs无影响。结论 S-483海绵策略可有效"吸附"并降低miR-483-5p,成功构建了pCAGGs-S-483重组质粒,为其功能研究和miRNA敲减动物的建立提供了有益借鉴。

关键词： miRNA海绵 miR-483-5p 敲减

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低氧对大鼠心肌细胞蛋白激A活性与SCN5A基因表达的影响

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哈尔滨医科大学学报 2009年第1期43卷 1-4,8页

作者：马宁李凤兰陈诗慧李金波刘端阳李晖哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究低氧对培养大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)与SCN5A基因表达的影响。方法将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组:对照组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)培养1h组、6 h组、12 h组和24 h组,利用非放射性方法测定各组细... 详细信息

目的研究低氧对培养大鼠心肌细胞蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)与SCN5A基因表达的影响。方法将原代培养的大鼠乳鼠心肌细胞随机分为5组:对照组、低氧(5%CO2+2%O2+93%N2)培养1h组、6 h组、12 h组和24 h组,利用非放射性方法测定各组细胞内PKA活性,利用RT-PCR和Western blot等方法检测各组SCN5A基因表达情况。结果各组PKA活性:低氧1h组和低氧6 h组高于正常组(P<0.01),低氧12 h组和24 h组低于正常组(P<0.01)。SCN5AmRNA相对表达量与蛋白质表达量:低氧1h组和低氧6h组显著高于对照组;低氧12 h组和低氧24 h组显著低于对照组。结论低氧对培养细胞内PKA活性与SCN5A基因的表达有一定调节作用,且对PKA的作用早于对SCN5A基因表达的作用,PKA可能参与影响大鼠心肌细胞缺氧后SCN5A基因的表达。

关键词：蛋白激酶A 心肌细胞低氧 SCN5A

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