检索结果-内蒙古大学图书馆

pcDNA_(3.1)-OGP基因转染兔骨髓基质干细胞的表达及生物学效应的观察

中国矫形外科杂志 2010年第3期18卷 246-249页

作者：安刚吕松岑邓秋奎薛震李冀宏哈尔滨医科大学附属第二医院骨科哈尔滨150086 哈尔滨医科大学生化教研室哈尔滨150086

[目的]观察成骨生长肽(osteogenic growth peptid,OGP)基因转染兔骨髓基质干细胞后的表达及表达产物对骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的影响。[方法]构建重组真核表达载体pcDNA3.1-OGP,并在脂质体介导下,将其导入兔骨髓基质干细胞。通过G... 详细信息

[目的]观察成骨生长肽(osteogenic growth peptid,OGP)基因转染兔骨髓基质干细胞后的表达及表达产物对骨髓基质干细胞向成骨细胞分化的影响。[方法]构建重组真核表达载体pcDNA3.1-OGP,并在脂质体介导下,将其导入兔骨髓基质干细胞。通过G418筛选获得阳性克隆。用RT-PCR方法检测OGP基因在骨髓基质干细胞内的表达。I型胶原和碱性磷酸酶的检测观察转染pcDNA3.1-OGP后骨髓基质干细胞向成骨细胞分化情况。[结果]成功构建真核表达载体pcDNA3.1-OGP,用RT-PCR方法及碱性磷酸酶和Ⅰ型胶原检测证实OGP基因能在骨髓基质干细胞中表达并促进其向成骨细胞分化。[结论]经pcDNA3.1-OGP转染的兔骨髓基质干细胞不仅可以表达OGP,而且具有向成骨细胞系分化的特性。

关键词：成骨生长肽 pcDNA3.1载体骨髓基质干细胞基因转染

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ADAM17通过EGFR-PI3K/Akt/p27通路调控前列腺癌细胞增殖

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中国生物化学与分子生物学报 2010年第8期26卷 749-755页

作者：吴琦冯田孙希财林平边淑玲赵雪飞李聪于晓光哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 齐齐哈尔医学院生物化学与分子生物学教研室齐齐哈尔161006 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院病理科哈尔滨150081

ADAM17是金属蛋白酶家族(ADAMs)成员之一,研究发现ADAM17可以通过水解细胞表面蛋白的胞外结构域导致肿瘤细胞的增殖和转移.本课题前期研究结果显示,与LNCap细胞相比,ADAM17在DU145细胞中高表达,且与细胞增殖相关.为了研究ADAM17与前列... 详细信息

ADAM17是金属蛋白酶家族(ADAMs)成员之一,研究发现ADAM17可以通过水解细胞表面蛋白的胞外结构域导致肿瘤细胞的增殖和转移.本课题前期研究结果显示,与LNCap细胞相比,ADAM17在DU145细胞中高表达,且与细胞增殖相关.为了研究ADAM17与前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达的关系及调控机制,我们采用RNAi技术下调ADAM17的表达,加入PMA(一种ADAM17的激活剂)上调ADAM17的表达,通过细胞计数和CCK-8方法检测细胞增殖,RT-PCR检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17的表达;进一步阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导,RT-PCR方法检测p27mRNA的表达,Western印迹检测ADAM17、EGFR、pEGFR、Akt和pAkt的表达.结果显示ADAM17的表达与前列腺癌细胞的增殖呈正相关(P<0.05);p27mRNA的表达与ADAM17的表达呈负相关(P<0.05);分别阻断EGFR和PI3K/Akt信号转导通路,同时使ADAM17表达增加,与对照组(单独PMA处理组)相比,p27mRNA的表达均增加(P<0.05).提示ADAM17调控前列腺癌细胞增殖相关基因p27表达是通过EGFR-PI3K/Akt信号通路实现的.

关键词：前列腺癌 ADAM17 pEGFR pAkt p27

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微小核苷酸转基因小鼠导致心脏功能发生改变

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哈尔滨医科大学学报 2010年第2期44卷 198-199页

作者：高旭吕延杰单宏丽马宁孙丽华王宁张莹杨宝峰哈尔滨医科大学生化教研室哈尔滨医科大学药理学教研室省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081

本实验室自2006年起,经过3年时间,于2008年成功构建了心肌组织特异表达miR-1、miR-328的转基因模型小鼠,为研究miR-1、miR-328生物学功能及其与心血管疾病发病机制的关系提供了有力的转基因模型.

关键词：转基因小鼠 miR-1 miR-328 心功能

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RAS与脑心综合征关系的初步探讨

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哈尔滨医科大学学报 2010年第1期44卷 45-48,52页

作者：张艳丽王晓丽吴会蔚李超孙丽华霍荣杨宝峰王玲哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的观察脑缺血所致心脏损害,血浆及心肌局部血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的变化及卡托普利对其的影响,探讨脑心综合征的发病机制。方法用线栓法栓塞右侧大脑中动脉建立脑心综合征模型,检测心电图,电镜下观察心肌细胞的亚显微结构... 详细信息

目的观察脑缺血所致心脏损害,血浆及心肌局部血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)的变化及卡托普利对其的影响,探讨脑心综合征的发病机制。方法用线栓法栓塞右侧大脑中动脉建立脑心综合征模型,检测心电图,电镜下观察心肌细胞的亚显微结构,放射免疫法测定血浆和心肌局部AngⅡ的含量。结果电镜结果显示大鼠脑缺血后心肌细胞有明显损伤;放射免疫结果显示脑缺血2h血浆和心肌局部AngⅡ水平均高于假手术组(P<0.01);在给予卡托普利后心肌损伤减轻,AngⅡ含量降低。结论脑缺血可以引起明显的心肌损伤,肾素-血管紧张素系统(RAS)可能参与脑心综合征的发生发展。

关键词：脑心综合征血管紧张素Ⅱ 心肌损伤

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凝胶层析分离蛋白质实验方法的优化

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哈尔滨医科大学学报 2010年第6期44卷 627-628页

作者：薛金艳李俏俏王云飞王爱民山东万杰医学院生物化学教研室山东淄博255213 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的建立一种简单,操作方便,实验结果可靠且重复性好的生化实验。方法用G75凝胶,柱高20cm,内径1~1.5 cm,分离两组样品：血红蛋白与溴酚蓝;牛血清蛋白与酪氨酸,点样,洗脱并收集。540 nm和280nm检测样品的吸光值,绘制洗脱曲线。结果在层... 详细信息

目的建立一种简单,操作方便,实验结果可靠且重复性好的生化实验。方法用G75凝胶,柱高20cm,内径1~1.5 cm,分离两组样品：血红蛋白与溴酚蓝;牛血清蛋白与酪氨酸,点样,洗脱并收集。540 nm和280nm检测样品的吸光值,绘制洗脱曲线。结果在层析柱上出现明显移动速度不同的色带,洗脱曲线显示每组样品可呈现两个洗脱峰。结论本实验改变了以往的复杂处理操作程序,适用于本科生和研究生进行科研训练的实验方法。

关键词：凝胶层析血红蛋白与溴酚蓝牛血清蛋白与酪氨酸洗脱分光光度法

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联合应用细胞学检查与P53蛋白检测提高甲状腺癌术前诊断率

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哈尔滨医科大学学报 2010年第5期44卷 497-499页

作者：王芳赵炜明周丽艳哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 佳木斯大学检验医学院黑龙江佳木斯154002 哈尔滨医科大学科研处黑龙江哈尔滨150081

目的研究细针穿刺细胞学与P53蛋白检测联合应用,以提高甲状腺癌术前诊断的准确率。方法收集术前进行细针穿刺作细胞学检查和免疫组织化学法(S-P)作P53蛋白表达检测的甲状腺肿瘤患者40例,联合二者的结果对甲状腺癌的术前诊断率进行研究... 详细信息

目的研究细针穿刺细胞学与P53蛋白检测联合应用,以提高甲状腺癌术前诊断的准确率。方法收集术前进行细针穿刺作细胞学检查和免疫组织化学法(S-P)作P53蛋白表达检测的甲状腺肿瘤患者40例,联合二者的结果对甲状腺癌的术前诊断率进行研究。结果 40例中经术后病理诊断为甲状腺癌的为28例;术前经细胞学检查诊断为甲状腺癌的为23例,P53蛋白检测阳性的为16例,二者的灵敏度分别为82.14%和57.14%,细胞学与P53蛋白联合检测的灵敏度为92.86%。结论术前经细针穿刺作细胞学检查联合P53蛋白检测可以提高甲状腺癌的术前诊断率。

关键词：细针穿刺细胞学 P53蛋白甲状腺癌

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microRNA与宫颈癌关系的研究

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科技信息 2011年第21期 411-411页

作者：王磊单良哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨市红十字中心医院妇产二科黑龙江哈尔滨150076

MicroRNA（miRNA,微小RNA）是一大家族小分子非编码单链RNA,长约19~25个碱基。最新研究表明miRNA可参与多种调节途径,包括细胞增殖凋亡、细胞分化、生殖以及肿瘤发病机制等。实验证据表明,miRNA可通过调控其靶基因参与的多种信号通路,... 详细信息

MicroRNA（miRNA,微小RNA）是一大家族小分子非编码单链RNA,长约19~25个碱基。最新研究表明miRNA可参与多种调节途径,包括细胞增殖凋亡、细胞分化、生殖以及肿瘤发病机制等。实验证据表明,miRNA可通过调控其靶基因参与的多种信号通路,影响宫颈癌的发生发展,为宫颈癌发病机制的研究和诊断治疗提供了新的思路。本文就近年来miRNA与宫颈癌发生发展、诊断治疗的相关研究进展作一综述。

关键词： microRNA 宫颈癌研究

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母亲解偶联蛋白(UCP2)基因多态性与后代神经管畸形的关系

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中国妇幼保健 2010年第24期25卷 3445-3448页

作者：刘志贞解军罗天娥李佩珍山西医科大学生物化学教研室山西太原030001 山西医科大学流行病学与统计教研室遵义医学院珠海分校流行病学教研室

目的:探索山西省母亲解偶联蛋白(UCP2)基因多态性与后代神经管畸形发生的关系。方法:采用1:1配对病例对照研究方法,对山西省116例曾孕育过NTDs患儿的母亲和116例配对的未孕育过任何畸形患儿的母亲采血并进行UCP2基因的多态性分析。结果... 详细信息

目的:探索山西省母亲解偶联蛋白(UCP2)基因多态性与后代神经管畸形发生的关系。方法:采用1:1配对病例对照研究方法,对山西省116例曾孕育过NTDs患儿的母亲和116例配对的未孕育过任何畸形患儿的母亲采血并进行UCP2基因的多态性分析。结果:病例组母亲3’末端缺失纯合子基因型D/D显著高于对照组母亲(P<0.01),而A55V基因多态性与NTDs无相关(P>0.05)。结论:母亲UCP2基因第8外显子45bpD/I多态性可能是后代发生神经管畸形的遗传危险因素。

关键词：神经管畸形解偶联蛋白基因多态性交互作用

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谷胱甘肽硫转移酶M1基因多态性与低出生体重的相关性

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国际遗传学杂志 2010年第4期33卷 198-200页

作者：付中秋刘心平哈尔滨医科大学附属第二医院儿内科哈尔滨医科大学生物化学教研室

目的为探讨谷胱甘肽硫转移酶M1基因(glutathione S-transferases M1 gene,GSTM1)多态性与低出生体重的关系。方法采用病例对照研究方法 ,收集母亲和新生儿资料,用等位基因特异性PCR方法分析母亲GSTM1基因型。应用Logistic回归,对母体GS... 详细信息

目的为探讨谷胱甘肽硫转移酶M1基因(glutathione S-transferases M1 gene,GSTM1)多态性与低出生体重的关系。方法采用病例对照研究方法 ,收集母亲和新生儿资料,用等位基因特异性PCR方法分析母亲GSTM1基因型。应用Logistic回归,对母体GSTM1基因与新生儿低出生体重的相关性进行分析。结果 GSTM1缺失基因型对低出生体重影响未显示显著相关性[OR=1.553,95%CI(0.705·2.863);OR=2.016,95%CI(10.961·2.942)]。结论母亲GSTM1基因多态性与低出生体重无相关性。

关键词：谷胱甘肽硫转移酶M1 多态性基因低出生体重

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程序性细胞死亡蛋白5在米非司酮诱导前列腺癌细胞凋亡中的协同作用

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肿瘤 2010年第7期30卷 566-570页

作者：于靖邹海峰裴天仙林平王爽姜雪于晓光天津市胸科医院检验科天津300051 哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 天津药物研究院新药安全评价研究中心天津300193

目的:观察程序性细胞死亡蛋白5(programmed cell death 5,PDCD5)在米非司酮(mifepristone,MIF)诱导的前列腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测不同浓度(5、10、20、50、100μmol/L)的MIF作用前列腺癌PC-3M细胞24～96 h... 详细信息

目的:观察程序性细胞死亡蛋白5(programmed cell death 5,PDCD5)在米非司酮(mifepristone,MIF)诱导的前列腺癌细胞凋亡中的作用,并探讨其机制。方法:MTT法检测不同浓度(5、10、20、50、100μmol/L)的MIF作用前列腺癌PC-3M细胞24～96 h后的吸光度(D)值,找到最佳作用时间及浓度。将真核表达载体PCI-neo-PDCD5用脂质体介导的方法转染入PC-3M细胞后,采用细胞免疫荧光法检测PDCD5蛋白的表达水平。在转染PDCD5基因的细胞中加入最佳作用浓度的MIF,继续培养24、48 h后,采用TUNEL和吖啶橙(acrine orange,AO)/溴化乙锭(ethidium bromide,EB)法检测细胞凋亡情况,Western印迹法检测凋亡相关蛋白caspase-3的表达变化。结果:MTT检测结果显示,与对照组相比,5、10μmol/L MIF组的D值没有显著变化(P>0.05),20、50和100μmol/L MIF组的D值显著降低(P<0.05),说明MIF对前列腺癌PC-3M细胞的抑制作用呈时间和剂量依赖性。PDCD5基因真核表达载体成功转染入PC-3M细胞,并得到高表达。TUNEL和AO/EB检测结果显示,与对照组及单独应用MIF组相比,转染PDCD5基因并加入MIF后的细胞凋亡率显著增加(P<0.01);Western印迹结果显示,caspase-3蛋白在PDCD5与MIF联合作用时的表达明显增加(P<0.01)。结论:外源性PDCD5在MIF诱导的前列腺癌细胞凋亡中有明显的正协同作用,推测其有望成为前列腺癌临床治疗的一个辅助药物。

关键词：前列腺肿瘤细胞凋亡凋亡调节蛋白质类米非司酮转染基因,PDCD5

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