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外源性野生型p53基因在两个肺腺癌细胞系中表达及对p16和p21基因的调控

中华医学遗传学杂志 2003年第5期20卷 409-412页

作者：金焰阎承慧吴焱刘艳张贵寅李璞傅松滨哈尔滨医科大学遗传学与细胞生物学教研室 150086

目的　探讨 p 53基因在肺癌细胞周期中的作用机制 ,以及裸鼠体内基因治疗的作用。方法　用以腺病毒为载体的野生型 p53基因 p Ad CMV-p53 (Ad-p53 )感染高转移肺腺癌 95D细胞系和高浸润肺腺癌 L -18系 ,对感染前后各细胞系的细胞生长曲... 详细信息

目的　探讨 p 53基因在肺癌细胞周期中的作用机制 ,以及裸鼠体内基因治疗的作用。方法　用以腺病毒为载体的野生型 p53基因 p Ad CMV-p53 (Ad-p53 )感染高转移肺腺癌 95D细胞系和高浸润肺腺癌 L -18系 ,对感染前后各细胞系的细胞生长曲线、p 53、p16和 p2 1基因的表达以及调亡进行分析。此外 ,用 Ad-p53对两细胞系进行了裸鼠体内感染实验。结果　体外实验中 ,导入 p 53基因细胞系的生长均得到抑制 ,并且最终都出现凋亡 ,感染后的细胞中 p53和 p 2 1基因的 m RNA表达量明显增高 ,p16基因的m RNA表达量则无明显变化。p53基因治疗后的裸鼠 ,其中 95D细胞系的肿瘤全部消失 ;L-18细胞系的腹腔注射组肿瘤全部消失 ,而皮下注射组无明显变化。结论　 p53基因是一个有效的肿瘤抑制基因 ,其诱导细胞凋亡的途径与 p16基因不同。腺病毒介导的野生型

关键词：肺腺癌基因表达基因转染肿瘤抑制基因 p53 pl6 p21

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柯萨奇B组病毒VP1胞质表达系统的建立

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中华实验和临床病毒学杂志 2005年第1期19卷 46-48页

作者：陈洪刘晶星陈淑云何平胡宝瑜李振红上海第二医科大学病原生物学教研室 200025

目的　利用T7RNA聚合酶介导的胞质表达系统增加目的抗原的表达量 ,提高基因疫苗的免疫效果。方法　 (1)构建带有T7启动子、脑心肌炎病毒 (EMCV) 5′非编码区和柯萨奇B组病毒衣壳蛋白VP1的质粒pT7EMCVP1。将该质粒和编码T7RNA酶的pAR 313... 详细信息

目的　利用T7RNA聚合酶介导的胞质表达系统增加目的抗原的表达量 ,提高基因疫苗的免疫效果。方法　 (1)构建带有T7启动子、脑心肌炎病毒 (EMCV) 5′非编码区和柯萨奇B组病毒衣壳蛋白VP1的质粒pT7EMCVP1。将该质粒和编码T7RNA酶的pAR 3132共转染HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞 ;(2 )将上述质粒分别转化减毒鼠伤寒沙门菌SL72 0 7,让带有不同质粒的两种载体细菌共感染小鼠腹腔巨噬细胞。结果　 (1)经共转染 ,在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞中 ,目的抗原VP1在胞质中的表达比单独转染真核表达质粒pcDNA3VP1增加 2～ 4倍 ;(2 )两种质粒载体细菌感染小鼠巨噬细胞后 ,目的抗原VP1也能在细胞中较好表达。结论　pT7EMCVP1和pAR 3132能在HeLa细胞和小鼠腹腔巨噬细胞胞质中表达。

关键词： VP1 小鼠腹腔巨噬细胞柯萨奇B组病毒 HeLa细胞抗原质粒共转染胞质种质表达量

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数字图像处理技术对隐孢子虫卵囊形态学参数的测定

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2005年第3期23卷 175-177页

作者：邴玉艳李岩安春丽中国医科大学病原生物学教研室沈阳110001

目的建立并分析小鼠隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确小鼠隐孢子虫卵囊的形态学变化特点。方法昆明株小鼠经地塞米松免疫抑制10d后,取粪便涂片、改良抗酸染色法检测小鼠隐孢子虫卵囊。应用摄像系统采集1190个小鼠隐孢子虫卵囊的图像,利用... 详细信息

目的建立并分析小鼠隐孢子虫卵囊的形态学参数,明确小鼠隐孢子虫卵囊的形态学变化特点。方法昆明株小鼠经地塞米松免疫抑制10d后,取粪便涂片、改良抗酸染色法检测小鼠隐孢子虫卵囊。应用摄像系统采集1190个小鼠隐孢子虫卵囊的图像,利用计算机数字图像分析系统测定卵囊的长径(L)、横径(W)、周长、面积和等效直径。用SPSS数据处理软件(V11.0)分析测定各组数据,计算其卵形指数。结果1190个小鼠隐孢子虫卵囊长径均值为5.93μm,95%可信区间为3.31～8.51μm;卵囊横径的均值为4.96μm,95%可信区间为3.26～6.66μm;周长均值为18.03μm;面积的均值为16.08μm2;卵形指数(L/W)为1.19。结论利用计算机显微图像处理系统所获得的小鼠隐孢子虫卵囊形态学参数数据客观、精确,为量化及评价小鼠隐孢子虫卵囊的形态奠定了基础。

关键词：小鼠隐孢子虫卵囊数字图像处理形态学参数

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HPV-16-11 L1双价重组杆状病毒的构建及VLP形成

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中华微生物学和免疫学杂志 2006年第9期26卷 771-776页

作者：庄敏谷鸿喜李迪崔洪波刘希君魏兰兰凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086

目的将本地区流行株HPV-16 L1基因与HPV-11 L1基因双表达于杆状病毒昆虫细胞表达系统,组装成类病毒颗粒(virus like particles,VLP)。为研制同时预防宫颈癌和尖锐湿疣等多种疾病的HPV-16-11型基因工程疫苗奠定基础。方法对本地流行株HPV... 详细信息

目的将本地区流行株HPV-16 L1基因与HPV-11 L1基因双表达于杆状病毒昆虫细胞表达系统,组装成类病毒颗粒(virus like particles,VLP)。为研制同时预防宫颈癌和尖锐湿疣等多种疾病的HPV-16-11型基因工程疫苗奠定基础。方法对本地流行株HPV-16 L1基因进行亚克隆,构建pBluescript-HPV-16L1克隆质粒,并对其测序。再将质粒中HPV-16 L1基因切下,连接到pFastBacDual的强启动子phol后;从克隆质粒pSP73-HPV-11 L1切下HPV-11 L1,连接到pFastBacDual的弱启动子p10后,利用Bac to Bac系统在昆虫细胞Sf9中表达外源蛋白。SDS-PAGE和Western blot鉴定HPV-16 L1和HPV-11 L1蛋白的表达量及特异性,电镜观察昆虫细胞内VLP的存在。结果酶切和PCR法证实pFastBacDual-HPV-16 L1-HPV-11 L1转移质粒连接正确,转染昆虫细胞Sf9后,检测到HPV-16和HPV-11 L1特异蛋白,两种蛋白的相对分子质量(Mr)相近,约56×103;电镜观察到了VLP。结论本研究利用Bac to Bac系统构建Bacmid／HPV-16-HPV-11 L1,转染到Sf9昆虫细胞后重组外源蛋白得到高效表达,并经电镜证实昆虫细胞内存在较大量VLP,用此VLP免疫BALB／c小鼠后产生抗L1蛋白的抗体。共表达HPV L1蛋白可能为预防多型别HPV感染提供新途径。

关键词：人乳头状瘤病毒16型人乳头状瘤病毒11型 L1基因共表达类病毒颗粒杆状病毒

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阿苯达唑联合黄芪对华支睾吸虫感染大鼠肝功能异常的疗效观察

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中国地方病学杂志 2009年第5期28卷 505-508页

作者：刘平舒晶李懿宏文景山崔洪波任欢李殿俊哈尔滨医科大学免疫学教研室 150086 哈尔滨医科大学寄生虫学教研室 150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 哈尔滨医科大学肿瘤研究所 150086

目的观察阿苯达唑联合黄芪对华支睾吸虫感染大鼠肝功能异常的疗效。方法健康成年Wistar大鼠32只，按体质量随机分为对照组、未治疗组、阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组,每组8只。未治疗组、阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组大鼠给华支睾吸虫... 详细信息

目的观察阿苯达唑联合黄芪对华支睾吸虫感染大鼠肝功能异常的疗效。方法健康成年Wistar大鼠32只，按体质量随机分为对照组、未治疗组、阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组,每组8只。未治疗组、阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组大鼠给华支睾吸虫囊蚴50个／只灌胃．对照组大鼠给生理盐水灌胃：阿苯达唑组大鼠在感染后10周每日每只给阿苯达唑50mg／kg灌胃，连续5d：阿苯达唑＋黄芪组大鼠在给阿苯达唑的同时腹腔注射黄芪注射液800mg／kg，连续30d。于感染后14周采集血样，检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、总胆红素（TBIL）、透明质酸酶（HA）、层粘连蛋白（LN）和Ⅲ型前胶原（PCⅢP）水平。结果大鼠血清ALT和LN水平组间比较，差异有统计学意义（F值分别为31．40、11．82，P〈0．01）。血清ALT和LN水平，未治疗组[（85．50±9．65）U／L、（64．20±4．18）μg／L]、阿苯达唑组[（65．29±7．78）U／L、（58．23±2．55）μg／L]较对照组[（47．88±4．88）U／L、（51．20±4．12）μg／L]明显升高（P〈0．05）；阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组[（50．25±9．29）U／L、（53．68±5．63）μg／L]较未治疗组明显下降（P〈0．05），阿苯达唑＋黄芪组下降较阿苯达唑组更明显（P〈0．05）。大鼠血清TBIL、PⅢNP和HA组间比较差异有统计学意义（χ^2值分别是15．309、21．418、19．759，P〈0．01）。血清TBIL、PⅢNP、HA水平，未治疗组（2．400μmol／L、46．220μg／L、310．885μg／L）、阿苯达唑组（1．200μmol／L、36．540μg／L、178．010μg／L）较对照组（0．700μmol／L、26．085μg／L、81．935μg／L）明显升高（P〈0．05）。大鼠血清TBIL水平，阿苯达唑＋黄芪组（0．750μmol／L）较未治疗组明显降低（P〈0．05）；大鼠血清PⅢNP和HA水平，阿苯达唑组和阿苯达唑＋黄芪组（30．470μg／L、100．240μg／L）较未治疗组明显降低（P〈0．05），与阿苯达唑组比较，阿苯达唑＋黄芪组大鼠血清TBIL、PⅢNP和HA水平下降更明显（P〈0．05）。结论大鼠感染华支睾吸虫后肝功能异常，经阿苯达唑联合黄芪治疗后肝功能得到改善，肝纤维化减轻，阿苯达唑联合黄芪治疗效果好于单独应用阿苯达唑治疗。

关键词：华支睾吸虫病大鼠药物疗法肝功能试验

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功能性自身抗体及其作用机制研究进展

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免疫学杂志 2019年第10期35卷 906-911页

作者：孟彩云宋武琦哈尔滨医科大学病原微生物学教研室

随着对自身抗体研究的不断深入,功能性自身抗体已成为自身抗体研究领域的新热点。这类免疫球蛋白大多为受体抗体,其在疾病中的作用机制为目前的热点研究内容。该类抗体对介导机体心血管功能异常、内分泌紊乱以及神经系统传导功能异常等... 详细信息

随着对自身抗体研究的不断深入,功能性自身抗体已成为自身抗体研究领域的新热点。这类免疫球蛋白大多为受体抗体,其在疾病中的作用机制为目前的热点研究内容。该类抗体对介导机体心血管功能异常、内分泌紊乱以及神经系统传导功能异常等具有重要作用。本文将对功能性自身抗体的作用机制以及应用价值进行综述。

关键词：功能性自身抗体作用机制受体抗体

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接头长度对MDC与CVB3VP1融合基因疫苗免疫效果的影响

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第12期27卷 1145-1149页

作者：韩小艳赵娜高志云揣侠羡鲜蓝佳明张永红王永祥河北医科大学病原生物学教研室石家庄050017

目的构建表达不同接头(linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗,观察接头长度对融合基因疫苗免疫效果的影响。方法构建表达接头长度分别为10、15和19个氨基酸的重组质粒pcDNA3/MDC-L-VP1;将6～8周龄雄性BALB/c小鼠... 详细信息

目的构建表达不同接头(linker)长度的巨噬细胞源趋化因子(MDC)与CVB3VP1融合基因疫苗,观察接头长度对融合基因疫苗免疫效果的影响。方法构建表达接头长度分别为10、15和19个氨基酸的重组质粒pcDNA3/MDC-L-VP1;将6～8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为A～E5组,分别肌肉注射pcDNA3、pcDNA3/VP1、pcDNA3/MDC-L10-VP1、pcDNA3/MDC-L15-VP1和pcDNA3/MDC-L19- VP1,每次接种100μg/只,4周注射1次,共3次,每次免疫后第14天眼眶静脉采血,用微量中和试验滴定血清中和抗体效价。第3次免疫后3周,每组取3只小鼠,制备脾细胞,用CCK-8法检测特异性CTL杀伤活性;每组取3只小鼠以3LD_(50) CVB3病毒攻击,第7天取血处死,检测血中病毒滴度。结果成功构建了3种不同接头长度的质粒;第3次免疫后,E组中和抗体滴度和小鼠脾淋巴细胞特异性CTL杀伤活性显著高于其他各组,血中病毒滴度显著低于其他各组(P<0.01)。结论融合基因疫苗pcDNA3/MDC-L19-VP1能诱导小鼠对CVB3VP1产生较强的体液和细胞免疫,有效地抑制了病毒的增殖。

关键词：柯萨奇病毒B3 巨噬细胞源趋化因子接头基因疫苗

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美国《Emerging Infectious Disease》2005年第9期有关人兽共患病论文摘译

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中国人兽共患病杂志 2005年第11期21卷 F0002-F0003页

作者：袁小松（摘译）沈继龙（审校）安徽医科大学病原生物学教研室

P1337 南非狂犬病的生态学//Bingham J 狂犬病是非洲家犬和某些野生犬的常见病.非洲狂犬病起于20世纪,这与此间发生的有利于该病流行的生态学变化相一致.我提出一个学术性观点,以便于理解非洲犬类狂犬病生态学.

关键词： Disease 人兽共患病论文摘译美国变异性克-雅氏病 Variant 大肠埃希菌印度尼西亚 HIV-1 南部非洲

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CVB3腺病毒载体疫苗Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用的免疫效果

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中华微生物学和免疫学杂志 2009年第6期29卷 533-537页

作者：闫立景李剑温婵李嘉蓝佳明揣侠高志云张永红金玉怀王永祥河北医科大学病原生物学教研室石家庄050017

目的构建重组腺病毒Ad／MDC—VP1，观察Ad／MDC-VPl与DNA疫苗联合应用的免疫效果。方法构建、包装重组腺病毒Ad／MDC—VP1并检测目的蛋白的表达。BALB／c小鼠随机分为Ad／MDC—VPl、pcDNA3／MDC—VP1、pcDNA3／MDC-VP1＋Ad／MDC—VP1和P... 详细信息

目的构建重组腺病毒Ad／MDC—VP1，观察Ad／MDC-VPl与DNA疫苗联合应用的免疫效果。方法构建、包装重组腺病毒Ad／MDC—VP1并检测目的蛋白的表达。BALB／c小鼠随机分为Ad／MDC—VPl、pcDNA3／MDC—VP1、pcDNA3／MDC-VP1＋Ad／MDC—VP1和PBS4组，肌肉注射免疫小鼠。用ELISA法和微量中和试验法分别检测血清柯萨奇病毒B3（CVB3）VP1 IgG和中和抗体滴度；CCK-8法检测淋巴细胞增殖活性和特异性CTL杀伤活性；用致死量CVB3攻击小鼠后，检测血中病毒滴度并观察小鼠的存活率。结果成功构建并包装了重组腺病毒Ad／MDC-VPI，检测到目的蛋白的表达。pcDNA3／***1＋Ad／MDC—VP1组血清CVB3VP1IgG滴度、淋巴细胞增殖指数、CTL杀伤酒生和对小鼠的保护率明显高于其他各组（P〈0．05），血清病毒滴度低于其他各组（P〈0．05）。结论Ad／MDC—VP1与DNA疫苗联合应用能显著提高小鼠细胞和体液免疫应答。

关键词：柯萨奇病毒B3 腺病毒载体疫苗 DNA疫苗 Prime—boost免疫策略

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蝇蛆生态处理猪粪对家蝇产卵和孵化的影响

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第1期22卷 9-10页

作者：杨鹤萍徐大刚吴健桦薛纯良上海第二医科大学病原生物学教研室上海200025

目的　观察猪粪经蝇蛆生态处理后 ,家蝇孳生繁殖的变化。　方法　分别以经蝇蛆处理和未处理的猪粪作为家蝇孳生繁殖场所 ,比较两种孳生场所家蝇产卵量和孵化率。　结果　处理猪粪中家蝇的产卵量仅占总产卵量的17 7% ,未处理猪粪中家蝇... 详细信息

目的　观察猪粪经蝇蛆生态处理后 ,家蝇孳生繁殖的变化。　方法　分别以经蝇蛆处理和未处理的猪粪作为家蝇孳生繁殖场所 ,比较两种孳生场所家蝇产卵量和孵化率。　结果　处理猪粪中家蝇的产卵量仅占总产卵量的17 7% ,未处理猪粪中家蝇的产卵量占总产卵量的 82 3 %。处理的猪粪中的蝇卵孵化率为 41 4% ,未处理猪粪中的蝇卵孵化率为 85 1%。　结论　猪粪经蝇蛆生态处理后。

关键词：蝇蛆生态处理猪粪家蝇孵化率

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