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IL-12、IL-7、IL-2体外协同诱导人PBMC增殖和PBMC杀瘤活性的实验研究

中国免疫学杂志 1998年第5期14卷 338-341页

作者：徐红薇吴长有李波任欢钟照华李呼伦邢淑贤田景先哈尔滨医科大学免疫学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

研究了重组ＩＬ１２、ＩＬ７、ＩＬ２协同对健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的体外增殖和杀瘤活性的影响。结果表明，高浓度ＩＬ２与低浓度ＩＬ２协同可引起ＰＢＭＣ明显增殖，若在该培养体系中加入低浓度的ＩＬ２，可... 详细信息

研究了重组ＩＬ１２、ＩＬ７、ＩＬ２协同对健康人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）的体外增殖和杀瘤活性的影响。结果表明，高浓度ＩＬ２与低浓度ＩＬ２协同可引起ＰＢＭＣ明显增殖，若在该培养体系中加入低浓度的ＩＬ２，可使这种增殖效应显著增强。如果加大ＩＬ１２剂量时会产生更强的细胞毒活性，并呈现剂量依赖关系。在此培养条件下的培养上清中亦检出了较高水平的ＩＦＮγ。对培养３～１４ｄ的协同刺激细胞表型分析显示，ＣＤ５６抗原阳性细胞百分率呈递增趋势，提示ＣＤ５６＋的ＮＫ细胞构成了产生增殖和杀伤效应的主要细胞群体。

关键词：白细胞介素 PBMC 增殖细胞毒肿瘤免疫疗法

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芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞产生胶原

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2011年第2期29卷 93-98页

作者：杜明占沈继龙吴强胡向阳储德勇安徽医科大学病理学教研室合肥230032 安徽医科大学病原生物学教研室安徽病原生物学省级实验室人兽共患病安徽省重点实验室合肥230032

目的观察芍药苷通过白细胞介素13(IL-13)信号转导通路调控3T3成纤维细胞的细胞激活、增殖和胶原产生。方法分别用不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L)或重组白介素13(rIL-13,6.25、12.5、50、100和200μg/L),在体外刺激... 详细信息

目的观察芍药苷通过白细胞介素13(IL-13)信号转导通路调控3T3成纤维细胞的细胞激活、增殖和胶原产生。方法分别用不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L)或重组白介素13(rIL-13,6.25、12.5、50、100和200μg/L),在体外刺激经无血清培养基培养12 h的3T3细胞,同时设空白对照组。培养24 h后,用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测rIL-13和芍药苷对细胞增殖的影响,并根据其结果选择1个适宜的rIL-13刺激浓度。用该浓度rIL-13(100μg/L)刺激无血清培养基培养12 h的3T3细胞12 h后,再分别加入不同浓度的芍药苷(200、400、600、800和1 000 mg/L),继续培养24 h,同时设空白对照组。用CCK-8法检测细胞增殖情况,碱裂解法测定培养上清羟脯氨酸含量。蛋白质印迹(Western blotting)分析α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、白介素13受体α1(IL-13Rα1)和信号转导和转录激活因子6(STAT6)的表达情况。RT-PCR检测细胞Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原(Col-Ⅲ)、IL-13Rα1和STAT6的mRNA水平。结果芍药苷能浓度依赖性地抑制3T3细胞增殖(r=-0.980,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.599,P<0.01)。rIL-13能明显促进3T3细胞增殖(r=0.538,P<0.05)。芍药苷(200、400、600、800和1 000mg/L)能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞增殖(1.780±0.177、1.636±0.073、0.965±0.066、0.623±0.037和0.337±0.022,r=-0.971,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=198.537,P<0.01)。芍药苷还能浓度依赖性地抑制rIL-13刺激的3T3细胞分泌羟脯氨酸(3.030±0.094、2.976±0.047、2.814±0.047、2.652±0.124和2.408±0.124,r=-0.916,P<0.01),且各浓度组间差异有统计学意义(F=13.642,P<0.01)。Western blotting分析结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞α-SMA、IL-13Rα1和STAT6蛋白的表达。RT-PCR结果显示,芍药苷能抑制rIL-13刺激的3T3细胞Col-Ⅰ、Col-Ⅲ、IL-13Rα1和STAT6 mRNA的转录水平。结论芍药苷通过IL-13/STAT6信号转导通路抑制成纤维细胞增殖、激活和胶原的产生,可能是芍药苷抗日本血吸虫病肝纤维化的机制之一。

关键词：芍药苷成纤维细胞 IL-13 IL-13Rα1 Ⅰ型胶原 Ⅲ型胶原

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Mago nashi:一个日本血吸虫性别决定基因的发现与鉴定

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中国人兽共患病杂志 2005年第1期21卷 34-36,40页

作者：汪学龙沈继龙沈际佳蒋作君安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

目的　运用免疫学方法筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )童虫cDNA文库 ,寻找血吸虫新基因 ,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Magonashi样蛋白基因。方法　用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库 ,随机挑取阳性重... 详细信息

目的　运用免疫学方法筛选日本血吸虫 (中国大陆株 )童虫cDNA文库 ,寻找血吸虫新基因 ,并克隆和鉴定一个日本血吸虫决定性别的Magonashi样蛋白基因。方法　用混合的血吸虫感染者血清免疫学筛选日本血吸虫童虫cDNA文库 ,随机挑取阳性重组克隆进行测序 ,以获得血吸虫基因 ,并通过BLAST程序进行比较及同源性分析 ,根据分析结果设计合成引物 ,用PCR法扩增出日本血吸虫Magonashi样蛋白基因 (SiM)编码序列 ,将其克隆入pGEM T载体和 pBKCMV载体 ,用双酶切、以质粒为模板进行PCR扩增和测序进行鉴定。结果　本研究共挑取 7个阳性克隆 ,通过测序获得了 5个有表达序列标签(ExpressedSequenceTag .EST)价值的序列 ,并进行了同源性分析 ;用PCR法扩增出大小为 4 4 1bpSjM开放阅读框 ,重组质粒pGEM SjM和 pBKCMV SjM经双酶切均可获得一条为PCR产物一致的DNA片段。结论　本实验获得了 5个有EST价值的序列 ,并成功地克隆了其中SjM编码基因。

关键词：日本血吸虫 cDNA文库免疫学筛选 Mago mshi样蛋白基因克隆

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不同B细胞亚群在多发性硬化中的作用

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中国免疫学杂志 2022年第4期38卷 488-494页

作者：孙美丽李呼伦(指导) 哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081

多发性硬化(MS)是一种以中枢神经系统(CNS)脱髓鞘及持续的炎症反应为特征的神经自身免疫性疾病。长期以来MS被认为是由T细胞介导的疾病,然而,临床上MS抗CD20 B细胞耗竭治疗(BCDT)效果出人意料,凸显了B细胞在MS中的重要作用。但随着BCDT... 详细信息

多发性硬化(MS)是一种以中枢神经系统(CNS)脱髓鞘及持续的炎症反应为特征的神经自身免疫性疾病。长期以来MS被认为是由T细胞介导的疾病,然而,临床上MS抗CD20 B细胞耗竭治疗(BCDT)效果出人意料,凸显了B细胞在MS中的重要作用。但随着BCDT在MS中的应用,治疗后的副作用也显现出来。随着人们对B细胞知识的不断加深,了解不同B细胞亚群在疾病中的不同作用或许是找到解决临床副作用的关键。已知B细胞发育过程中不同B细胞亚群对MS的相对贡献目前还只是部分阐明。为此,本文主要从B细胞发育过程中不同B细胞亚群在MS中的相对贡献进行阐述,为深入探讨B细胞在MS发病机制和临床治疗策略中的作用提供科学思路。

关键词： B细胞亚群多发性硬化抗CD20 B细胞耗竭治疗(BCDT)

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日本血吸虫14-3-3抗原编码基因的克隆及序列测定

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中国人兽共患病杂志 2001年第5期17卷 45-47页

作者：汪学龙沈继龙蒋作君安徽医科大学病原生物学教研室合肥230032

为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子 ,设计合成引物 ,以日本血吸虫成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增出日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原 (Sj14 - 3 - 3 )基因编码序列 ,其大小约 784bp ,将其克隆入pGEM -T载体 ,重组质粒pGEM -T -S... 详细信息

为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子 ,设计合成引物 ,以日本血吸虫成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增出日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原 (Sj14 - 3 - 3 )基因编码序列 ,其大小约 784bp ,将其克隆入pGEM -T载体 ,重组质粒pGEM -T -Sj14 - 3 - 3经双酶切和以质粒为模板进行PCR扩增 ,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段 ,序列测定结果表明具有一个长度为 765bp的完整开放阅读框 ,与曼氏血吸虫 14 - 3 - 3核苷酸序列有高度同源性。本实验克隆了日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原的编码基因 ,并进行了序列测定 ,为进一步研究提供了条件。

关键词：日本血吸虫 14-3-3抗原基因克隆序列测定

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在多发性硬化的免疫病理过程中不同免疫细胞的作用

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中国免疫学杂志 2015年第12期31卷 1585-1590页

作者：孙博李呼伦哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081

多发性硬化(Mutiple sclerosis,MS)是一种在临床治疗和基础研究中都处于重要地位的自身免疫性疾病,导致MS启动的原因至今不明,临床上也始终没有特异有效的治疗方法。尽管如此,在基础研究中人们对MS的发病机制已经有了很多认识。人们发现... 详细信息

多发性硬化(Mutiple sclerosis,MS)是一种在临床治疗和基础研究中都处于重要地位的自身免疫性疾病,导致MS启动的原因至今不明,临床上也始终没有特异有效的治疗方法。尽管如此,在基础研究中人们对MS的发病机制已经有了很多认识。人们发现在MS的病理过程中不仅仅是CD4+T细胞参与了对中枢神经系统的损伤过程,其他众多的继发性免疫系统细胞和固有免疫系统细胞也都发挥了各自的作用。为此,本文对参与MS发病过程的各种免疫细胞的作用以及研究进展进行了总结,为全面认识MS的免疫病理过程提供理论依据,为探索MS的治疗方法提供新的思路和线索。

关键词：多发性硬化免疫发病机制固有免疫系统继发性免疫系统免疫细胞

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蚊的自然免疫应答

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中国人兽共患病杂志 2005年第7期21卷 620-624页

作者：郑学礼南方医科大学病原生物学教研室广州510515

昆虫以多样化生存在地球上,它们经常接触病原体,以群落进行繁殖,它们抵御病原生物入侵的自我保护性免疫应答,对于其成功生存起着重要作用.昆虫防御机制是由许多生理屏障所组成.如疟原虫和它的媒介蚊虫之间产生了一系列的相互作用, 此种... 详细信息

昆虫以多样化生存在地球上,它们经常接触病原体,以群落进行繁殖,它们抵御病原生物入侵的自我保护性免疫应答,对于其成功生存起着重要作用.昆虫防御机制是由许多生理屏障所组成.如疟原虫和它的媒介蚊虫之间产生了一系列的相互作用, 此种作用涉及疟原虫在蚊虫上皮的入侵和迁移[1],在蚊虫体内, 疟原虫遇到一种新的宿主环境, 暴露于蚊虫自然防御监测系统之下, 可能激发蚊虫产生一系列地防御反应,在一定情况, 此种反应可终止全部疟原虫的发育, 产生抗性蚊虫株.目前, 科学工作者已经筛选出两个冈比亚按蚊的抗性虫株. 在一个抗性虫株内, 疟原虫的动合子到达蚊虫的中肠上皮均被黑化成囊;而在另外一株抗性蚊虫体内, 动合子均被裂解在蚊虫中肠上皮细胞内[2-3].甚至在易感虫株体内, 也有大量疟原虫的丢失,仅有少量配子体在蚊虫中肠的肠腔发育为动合子, 然后极少量的动合子侵入逆行到中肠上皮, 发育成卵囊.在感染阶段后期, 卵囊破裂, 释放的子孢子极少部分侵入涎腺.鉴定蚊免疫应答的成分,评价这些分子抗寄生虫活性,最终目的产生转基因蚊,杀死摄取的寄生虫,以达到控制蚊媒病的目的.本文主要集中在蚊天然免疫应答过程中抗菌肽、免疫信号通道、丝氨酸蛋白激酶、细胞介导的免疫应答、铁成分代谢方面的研究,综述如下:

关键词：保护性免疫应答疟原虫生物入侵生理屏障防御机制相互作用媒介蚊虫监测系统多样化病原体虫体内生存昆虫

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柯萨奇病毒B3型VP1基因在酿酒酵母中的表达

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中国人兽共患病杂志 2005年第7期21卷 558-560,565页

作者：黄孝天陈宏新陈洪吴斌贝刘晶星上海第二医科大学病原生物学教研室

目的在酿酒酵母AH109中表达柯萨奇病毒B3型VP1基因,并检测VP1蛋白对报告基因的转录自激活作用。方法用乙酸锂法将重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌-酵母菌穿梭载体pGBKT7-VP1转化酵母菌。通过表型鉴定、PCR法验证质粒导入宿主菌后,Western... 详细信息

目的在酿酒酵母AH109中表达柯萨奇病毒B3型VP1基因,并检测VP1蛋白对报告基因的转录自激活作用。方法用乙酸锂法将重组柯萨奇B3病毒VP1基因的细菌-酵母菌穿梭载体pGBKT7-VP1转化酵母菌。通过表型鉴定、PCR法验证质粒导入宿主菌后,Westernblotting验证VP1蛋白的表达,最后经营养缺陷培养基和酶底物X--αGal反应检测VP1基因对报告基因的转录自激活作用。结果表型鉴定和PCR法均证实pGBKT7-VP1质粒转入酵母菌成功,Westernblotting证实AH109能表达VP1蛋白,营养缺陷型培养基和酶底物X--αGal反应结果显示VP1蛋白对3种报告基因均无转录自激活作用。结论柯萨奇病毒B3型VP1蛋白可作为酵母双杂交系统的诱饵蛋白,为筛选与其相互作用的宿主细胞蛋白提供了基础。

关键词：柯萨奇病毒 B3 VP1基因表达

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表位疫苗:疫苗研制新策略

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2004年第6期22卷 365-367页

作者：王新军张兆松滨州医学院病原生物学教研室滨洲256603 南京医科大学病原生物学系南京210029

人类通过接种疫苗已控制了许多重大感染性疾病并且消灭了天花,这是有史以来,人类征服疾病最为辉煌的成绩.传统疫苗是将病原体灭活或减毒而制成的,但存在生物危害性和遗传变异致使原疫苗效力丧失等问题.表位疫苗(epitope vaccine)是用抗... 详细信息

人类通过接种疫苗已控制了许多重大感染性疾病并且消灭了天花,这是有史以来,人类征服疾病最为辉煌的成绩.传统疫苗是将病原体灭活或减毒而制成的,但存在生物危害性和遗传变异致使原疫苗效力丧失等问题.表位疫苗(epitope vaccine)是用抗原表位制备的疫苗,包括合成肽疫苗(synthetic peptide vaccine)、重组表位疫苗(recombinant epitope-based vaccine)及表位核酸疫苗(epitope DNA vaccine,minigenes/epigenes),是目前研制感染性疾病和恶性肿瘤疫苗的方向.

关键词：表位疫苗疫苗研制疫苗效力天花感染性疾病抗原表位减毒遗传变异接种疫苗生物危害

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病毒来源的microRNA的研究进展

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病毒学报 2019年第6期35卷 972-977页

作者：屈允月钟照华佟雷哈尔滨医科大学微生物学教研室

微小RNA(microRNA,miRNA/miR)是一类长度约为18~22个核苷酸的小非编码单链RNA,能够参与机体发育、细胞增殖、分化和肿瘤发生等一系列生物过程。病毒与宿主细胞一样,也可以编码miRNA,并在病毒感染过程中发挥重要的作用。本文从病毒编码mi... 详细信息

微小RNA(microRNA,miRNA/miR)是一类长度约为18~22个核苷酸的小非编码单链RNA,能够参与机体发育、细胞增殖、分化和肿瘤发生等一系列生物过程。病毒与宿主细胞一样,也可以编码miRNA,并在病毒感染过程中发挥重要的作用。本文从病毒编码miRNA的发现,经典与非经典的生物合成途径,以及病毒编码miRNA对宿主细胞和病毒自身作用机制等方面进行概述,以期为研究病毒来源的miRNA的生物学功能提供一定参考。

关键词：微小RNA(miRNA/miR) 病毒细胞来源的miRNA 病毒编码的miRNA 非经典生物合成途径 miRNA作用靶点

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