检索结果-内蒙古大学图书馆

安徽医科大学学报 2018年第4期53卷 520-525页

作者：宋乐任海风刘亚坤姜玉赵荣荣魏道严汪思应安徽医科大学基础医学院病理学与病理生理学教研室合肥230032

目的构建过表达miR-155-5p慢病毒表达载体,建立稳定过表达miR-155-5p的GES-1胃上皮细胞株。在细胞水平上观察细胞增殖能力的变化。方法第一部分:PCR扩增获得miR-155-5p基因片段;将该基因片段与已线性化的病毒载体连接;将重组质粒转化到... 详细信息

目的构建过表达miR-155-5p慢病毒表达载体,建立稳定过表达miR-155-5p的GES-1胃上皮细胞株。在细胞水平上观察细胞增殖能力的变化。方法第一部分:PCR扩增获得miR-155-5p基因片段;将该基因片段与已线性化的病毒载体连接;将重组质粒转化到DH5α细胞,进行克隆分离、质粒DNA提取和DNA测序。第二部分:序列证实了的GV-369-has-miR-155-5p载体和p Helper 1.0以及p Helper2.0载体共同转染到293-T细胞,用于慢病毒的包装,然后进行慢病毒收获、浓缩与纯化。将纯化的miR-155-5p慢病毒用来感染细胞,经过嘌呤霉素筛选后建立稳定过表达miR-155-5p的GES-1细胞株。qRT-PCR检测细胞株中miR-155表达;Western blot检测KLF4蛋白表达及MTT法检测稳定表达miR-155-5p细胞的增殖。结果过表达miR-155-5p的重组慢病毒构建成功;miR-155在恶性程度较高的SGC-7901胃癌细胞株中高表达(P<0.05);建立了miR-155-5p稳定过2018-01-09接收表达的GES-1细胞株;过表达miR-155-5p抑制GES-1细胞中KLF4蛋白表达(P<0.05),且促进细胞增殖。结论miR-155可能通过负向调控KLF4表达,参与调控胃癌发生发展。

关键词：慢病毒载体聚合酶链式反应技术微小RNA 胃癌细胞

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钙敏感受体表达变化对实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的影响

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临床医学进展 2019年第2期9卷 116-120页

作者：白淑芝吴昊姜哓姝吴昱哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨黑龙江省森工总医院黑龙江哈尔滨哈尔滨医科大学附属第二临床医院黑龙江哈尔滨

目的:观察钙敏感受体(CaSR)表达变化对实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的影响。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病4周组和糖尿病8周组。通过高糖高脂饮食喂养联合腹腔注射STZ (30 mg/kg)建立糖尿病模型。通过透射电镜观察各组大鼠心... 详细信息

目的:观察钙敏感受体(CaSR)表达变化对实验性糖尿病大鼠心肌超微结构的影响。方法:Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病4周组和糖尿病8周组。通过高糖高脂饮食喂养联合腹腔注射STZ (30 mg/kg)建立糖尿病模型。通过透射电镜观察各组大鼠心肌超微结构的改变,心肌组织CaSR蛋白的表达通过Western blot检测。结果:与对照组相比,糖尿病组大鼠心肌CaSR蛋白表达随着病程的延长逐渐降低,心肌结构损伤严重。结论:在大鼠糖尿病心肌病发生发展过程中CaSR的表达逐渐下降,可能导致糖尿病心肌损伤、发生糖尿病心肌病的原因之一。

关键词：钙敏感受体糖尿病心肌

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宫颈癌组织中IQGAP1和β-catenin的表达及意义

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山西医科大学学报 2019年第11期50卷 1515-1519页

作者：高蔷郑绘霞梁建芳山西医科大学基础医学院病理与病理生理学教研室太原030001 山西医科大学第一临床医学院病理科

目的观察宫颈癌中IQ结构域GTP酶激活蛋白(IQGAP1)和β连环蛋白(β-catenin)联合表达与宫颈癌的发生、发展相关性,并探讨临床意义。方法收集98例宫颈癌石蜡组织作为观察组,50例癌旁组织为对照组,采用免疫组织化学的方法检测IQGAP1和β-ca... 详细信息

目的观察宫颈癌中IQ结构域GTP酶激活蛋白(IQGAP1)和β连环蛋白(β-catenin)联合表达与宫颈癌的发生、发展相关性,并探讨临床意义。方法收集98例宫颈癌石蜡组织作为观察组,50例癌旁组织为对照组,采用免疫组织化学的方法检测IQGAP1和β-catenin在各组中的表达与宫颈癌临床病理特征及患者预后关系的相关性。结果宫颈癌组织中IQGAP1阳性率76.5%,高于癌旁组织中的表达(28.0%,P=0.001)。β-catenin在宫颈癌组织中的阳性率高于在癌旁组织中的表达(75.5%vs 6.0%,P=0.001)。宫颈癌组织中IQGAP1阳性率与年龄、肿瘤直径无关(P>0.05),与临床分期、是否伴有淋巴结转移、分化程度有关(P=0.001)。β-catenin在宫颈癌中的表达与年龄、肿瘤直径及分化程度无关,与临床分期、是否伴有淋巴结转移有关(P=0.001)。宫颈癌中IQGAP1和β-catenin表达呈正相关(r=0.468,P=0.001)。宫颈癌中IQGAP1和β-catenin共阳性表达的患者生存时间较单阳组、全阴组缩短。结论IQGAP1和β-catenin参与了宫颈癌的发生、发展,并与其高度侵袭性和转移性相关,二者相互协同,共阳性表达提示预后不良。

关键词：宫颈癌免疫组织化学预后

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丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡的作用及机制

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中草药 2019年第10期50卷 2398-2404页

作者：高昕乐陈阳罗婷赵晓朵庄晓东吴秀香凡栋陈燕玲何柳桦靳俊峰遵义医科大学珠海校区病理生理学教研室广东珠海519041 遵义医科大学珠海校区珠海市中药基础及应用研究重点实验室广东珠海519041 中山大学中山医学院广东广州510080 中山大学附属第一医院心血管内科广东广州510080

目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸... 详细信息

目的研究丹酚酸B抑制碘普罗胺诱导的人肾近端小管上皮细胞HK-2凋亡的作用及机制。方法将HK-2细胞分为对照组、模型(碘普罗胺)组、丹酚酸B各浓度(1、10、50、100、200μmol/L)处理组及丹酚酸B(200μmol/L)对照组。采用CCK-8法检测丹酚酸B对碘普罗胺诱导的HK-2细胞增殖的影响,DAPI染色法观察细胞核形态的变化,DCFH-DA染色荧光显微镜观察结合流式细胞术检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blotting法检测细胞Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3、磷酸化的蛋白激酶B(p-Akt)、磷酸化的细胞外调节蛋白激酶(p-ERK1/2)及Klotho蛋白表达量。结果与对照组比较,模型组细胞活力显著降低(P<0.01),部分细胞核出现染色质浓缩及核分裂等凋亡特征,ROS水平及Bax、cleaved Caspase-3、p-ERK1/2蛋白表达水平显著增加(P<0.05、0.01),而Bcl-2、p-Akt及Klotho蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01);丹酚酸B 50、100、200μmol/L可以部分逆转碘普罗胺的上述效应。但低浓度的丹酚酸B(1、10μmol/L)对碘普罗胺诱导的HK-2细胞无明显保护作用。结论丹酚酸B可以抑制碘普罗胺诱导的HK-2细胞凋亡,其机制可能与抗氧化应激,激活Akt信号通路、抑制ERK信号通路及上调Klotho蛋白表达有关。

关键词：丹酚酸B 碘普罗胺 Klotho 凋亡蛋白激酶B 细胞外调节蛋白激酶

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长期低蛋白饮食对中老年小鼠非特异性炎症反应和脾脏T细胞的影响

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中华老年医学杂志 2018年第2期37卷 215-219页

作者：王郝莹张丽君张琼郭建红山西医科大学基础医学院病理生理学教研室太原030001

目的探讨长期低蛋白饮食对中老年小鼠肝脏非特异性炎症反应和脾脏T淋巴细胞的影响及相关机制。方法14月龄雌性昆明小鼠数字抽签随机分为对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白＋西罗莫司组，另设2月龄雌性昆明小鼠为成年组，分别给予标准... 详细信息

目的探讨长期低蛋白饮食对中老年小鼠肝脏非特异性炎症反应和脾脏T淋巴细胞的影响及相关机制。方法14月龄雌性昆明小鼠数字抽签随机分为对照组、低蛋白组、高蛋白组、高蛋白＋西罗莫司组，另设2月龄雌性昆明小鼠为成年组，分别给予标准基础饲料或自配特殊饲料，高蛋白＋西罗莫司组隔日腹腔注射西罗莫司。于实验3个月末处死小鼠，制备肝脏切片观察肝脏病理改变、检测CD68和mTOR蛋白表达；制备脾脏淋巴细胞悬液，通过流式细胞学检测脾脏CD4^＋T、CD8^＋T细胞百分比。结果肝组织切片低蛋白组和高蛋白＋西罗莫司组与对照组比较，肝细胞排列整齐、肝窦无明显扩张，时间相关性改变减轻；给予中老年小鼠低蛋白饮食或高蛋白饮食＋西罗莫司，其肝脏CD68表达低于对照组（P〈0．05），脾脏CD4^＋T、CD8^＋T细胞数均高于对照组（P〈0．05）；肝脏mTOR蛋白在低蛋白组和高蛋白＋西罗莫司组的表达均低于对照组（P〈0．05）；而高蛋白组与以上结果相反。结论长期给予低蛋白饮食有利于延缓脾脏T淋巴细胞的衰减，改善肝脏时间相关性结构及非特异性炎症改变，其机制可能与下调mTOR蛋白的表达相关。

关键词：衰老膳食,限制蛋白质 T淋巴细胞

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声动力疗法通过p38MAPK/SRF通路抑制血管平滑肌细胞表型转化和动脉内膜增生

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哈尔滨医科大学学报 2019年第4期53卷 331-336页

作者：李志韬关羽田振郭媛媛哈尔滨医科大学病理生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨市平房区农业农村局黑龙江哈尔滨150060 哈尔滨医科大学附属第二医院心内科黑龙江哈尔滨150081

目的研究声动力疗法(SDT)对血管损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和内膜增生的作用及机制。方法通过球囊损伤建立大鼠颈动脉内膜增生模型。应用HE染色、免疫组化、Western blot等方法观察加入p38MAPK抑制剂前后SDT对内膜增生和VSMC... 详细信息

目的研究声动力疗法(SDT)对血管损伤后血管平滑肌细胞(VSMCs)表型转化和内膜增生的作用及机制。方法通过球囊损伤建立大鼠颈动脉内膜增生模型。应用HE染色、免疫组化、Western blot等方法观察加入p38MAPK抑制剂前后SDT对内膜增生和VSMCs不同表型标记物表达的影响。结果与对照组相比,SDT处理后动脉新生内膜与中膜比值明显减少,免疫组化染色显示PCNA阳性细胞百分比显著减少,Western blot显示收缩型VSMCs标记物SM22α和α-SMA以及磷酸化p38 MAPK和血清应答因子(SRF)表达增加。应用p38MAPK抑制剂逆转了SDT对VSMC表型转化和内膜增生的抑制。结论SDT通过p38MAPK/SRF通路抑制VSMC表型转化和内膜增生。

关键词：声动力疗法血管平滑肌细胞表型转化 p38丝裂原活化蛋白激酶血清应答因子

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双侧卵巢切除术建立雌激素缺乏大鼠模型的研究

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山西医科大学学报 2020年第3期51卷 269-274页

作者：赵梓妍张艳丽常文慧靳雨月马建民丁怡潍坊医学院眼科学教研室潍坊261053 潍坊医学院应用药理学实验室潍坊261053 潍坊医学院病理生理学教研室潍坊261053 首都医科大学附属北京同仁医院北京同仁眼科中心北京市眼视光与视觉科学重点实验室

目的比较采用腹部切口与背部切口进行双侧卵巢切除术建立雌性SD大鼠雌激素缺乏模型的优缺点。方法12周龄雌性SD大鼠20只,各10只分别行腹部开口卵巢切除术和背部开口卵巢切除术,比较两种手术方法的切口大小、手术时间、术后恢复时间及术... 详细信息

目的比较采用腹部切口与背部切口进行双侧卵巢切除术建立雌性SD大鼠雌激素缺乏模型的优缺点。方法12周龄雌性SD大鼠20只,各10只分别行腹部开口卵巢切除术和背部开口卵巢切除术,比较两种手术方法的切口大小、手术时间、术后恢复时间及术后并发症的情况。涂片检查阴道脱落细胞确定动情周期,ELISA法检测外周血血清雌二醇含量变化,判定大鼠雌激素缺乏模型的建立是否成功。结果背部开口术式的切口长约1.0-1.5 cm,手术时间为1.0 h,术后7-10 d伤口可恢复,无肠梗阻等严重并发症出现。腹部开口术式切口长约1.5-2.0 cm,手术时间为1.5-2.0 h,术后10-14 d伤口可恢复,1只大鼠术后并发肠梗阻。大鼠的动情周期分为动情前期、动情期、动情后期和动情间期。术前各个时期内的阴道脱落细胞形态及外周血雌二醇含量呈动态变化。术后2周阴道脱落细胞涂片检测显示大鼠动情周期变化消失。术后检测血清雌二醇含量较术前明显降低(P<0.05)。结论术后大鼠外周血雌二醇含量及阴道脱落细胞镜检结果提示,两种手术方法都可以成功建立雌激素缺乏大鼠模型。而且雌性SD大鼠背部开口双侧卵巢切除术具有简单易行、创伤较小、可重复性好和成功率高的优势,是进行雌激素相关疾病机制和防治研究的理想模型。

关键词：双侧卵巢切除术雌激素缺乏动物模型雌二醇动情周期

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一氧化氮对红细胞携氧特性的作用及体内吸入对小鼠耐缺氧能力的影响

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第三军医大学学报 2019年第12期41卷 1131-1135页

作者：苏文婷崔宇李晓栩官立彬黄缄沈宜重庆医科大学基础医学院干细胞与组织工程研究室病理生理学教研室重庆400016 陆军军医大学(第三军医大学)高原军事医学系高原生理学与病理学教研室特殊环境医学教育部重点实验室全军高原医学重点实验重庆400038 重庆医科大学实验教学管理中心重庆400016

目的研究一氧化氮(nitric oxide, NO)对红细胞携氧特性和小鼠耐缺氧能力的影响及两者的相互关系。方法取8周龄C57雄性小鼠外周血,置于氧离曲线测绘仪的氧合池中,通入含有NO的氮气,描绘通入不同浓度NO时的氧离曲线,计算氧亲和力参数P50... 详细信息

目的研究一氧化氮(nitric oxide, NO)对红细胞携氧特性和小鼠耐缺氧能力的影响及两者的相互关系。方法取8周龄C57雄性小鼠外周血,置于氧离曲线测绘仪的氧合池中,通入含有NO的氮气,描绘通入不同浓度NO时的氧离曲线,计算氧亲和力参数P50及希尔系数,探讨NO对小鼠外周血红细胞携氧特性的影响。小鼠按随机数字表法分为常氧组和缺氧组(5%O2),缺氧组再根据未吸入NO及吸入NO浓度(5、10、20 mL/m3)分为4组。小鼠被麻醉后,将其口鼻部置于自制的密闭玻璃箱。玻璃箱预先通入纯N2、NO、15%O2,将气体浓度预置为5%O2和相应浓度的NO。用血氧饱和度仪检测鼠尾血氧饱和度,同时记录小鼠的存活时间。结果通入100、200 mL/m3 NO均可使氧离曲线发生明显左移,显著降低P50(P<0.05)。与常氧组比较,缺氧小鼠血氧饱和度显著降低,吸入20 mL/m3 NO显著削弱小鼠在缺氧环境中血氧饱和度的降低程度(P<0.05)。与未吸入NO的缺氧对照组比较,吸入5、10、20 mL/m3 NO组小鼠存活时间均延长,其中10、20 mL/m3 NO组小鼠存活时间的延长差异具有统计学意义(P<0.05)。吸入20 mL/m3 NO时,缺氧条件下的存活时间与血氧饱和度呈正相关关系(P<0.05)。结论吸入NO增加细胞血红蛋白氧亲和力,改善缺氧条件下血氧饱和度;NO对红细胞携氧特性的改善作用与缺氧耐受力增强有关。

关键词：一氧化氮红细胞血红蛋白氧亲和力缺氧耐受

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BMP-7/Smads通路参与EndoMT在大鼠HHPH中的作用

BMP-7/Smads通路参与EndoMT在大鼠HHPH中的作用

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第七届全国呼吸系统重大疾病转化医学学术论坛

作者：武垣伶张晶晶黄丹娜高慧楼国强周卓琳 Lingfang Shi 王万铁温州医科大学病理生理学教研室 Division of Pulmonary and Critical Care Medicine Stanford University Medical School

目的:探讨骨形成蛋白-7 (BMP-7)/Smads通路参与的内皮-间质转分化(endothelial-mesenchymaltransdifferentiation,EndoMT)在大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压(Hypoxia-hypercapnia pulmonary hypertension,HHPH)中的作用。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞(RPAECs)分为常氧对照(C)组、低氧高二氧化碳(HH)组、BMP受体激动剂rhBMP-7 (HB)组、BMP受体抑制剂DMH-1(HBD)组和溶剂(HD)组。C组置于常氧培养箱中培养,其余4组置于低氧高二氧化碳培养箱中培养。采用免疫荧光标记法观察细胞CD31和α-SMA表达水平;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测各组细胞α-SMA、CD31、Smad1/5/8 mRNA和蛋白质的表达水平;CCK-8法检测细胞增殖水平;Transwell小室法检测细胞迁移水平。结果:与C组相比,HH组α-SMA mRNA和蛋白质表达水平升高(P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8 mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平降低(P<0.01),细胞增殖减少而迁移增多(P<0.01)。与HH组相比,HB组细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平降低(P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8 mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平升高(P<0.05,P<0.01),增殖增多而迁移减少(P<0.05,P<0.01)。与HB组相比,HBD组细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平升高(P<0.05,P<0.01),而CD31 mRNA和蛋白质表达水平、Smad1/5/8mRNA和P-Smad1/5/8蛋白质表达水平降低(P<0.05,P<0.01),增殖减少而迁移增多(P<0.05)。结论:低氧高二氧化碳可促进RPAECs发生EndoMT,从而促进HHPH的发展,其机制可能与抑制BMP-7/Smads通路有关。

关键词： BMP-7/Smads通路内皮-间质转分化 HHPH 肺动脉内皮细胞

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TGF-β1/Smads通路参与内皮-间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉高压中的作用

TGF-β1/Smads通路参与内皮-间质转分化在低氧高二氧化碳性肺动脉...

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第七届全国呼吸系统重大疾病转化医学学术论坛

作者：黄丹娜张晶晶武垣伶高慧楼国强周卓琳 Lingfang Shi 王万铁温州医科大学病理生理学教研室 Division of Pulmonary and Critical Care Medicine Stanford University Medical School

目的:该文主要探讨转化生长因子β1(Transforming growth factor,TGF-β1)/Smads通路与大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压及内皮-间质转分化(endothelialmesenchymal transition,EndoMT)的关系。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞随机分为6组:常... 详细信息

目的:该文主要探讨转化生长因子β1(Transforming growth factor,TGF-β1)/Smads通路与大鼠低氧高二氧化碳性肺动脉高压及内皮-间质转分化(endothelialmesenchymal transition,EndoMT)的关系。方法:将大鼠肺动脉内皮细胞随机分为6组:常氧(N)组、低氧高二氧化碳(H)组、TGF-β受体激动剂rhTGF-β1 (T)组、TGF-β受体抑制剂SB-431542 (S)组、溶剂柠檬酸(A)组和溶剂DMSO (D)组。N组置于常氧环境,其余5组置于低氧高二氧化碳环境并用不同药物处理。采用CD31和α-SMA免疫荧光双标法鉴定大鼠肺动脉内皮细胞;CCK-8法检测细胞活力;Transwell小室法检测细胞迁移;逆转录-PCR和Western blot分别检测细胞CD31、α-SMA、Smad2/3mRNA和蛋白质的表达情况。结果:低氧高二氧化碳环境下,细胞α-SMA mRNA和蛋白质表达水平上调,Smad2/3 mRNA和P-Smad2/3蛋白质表达水平上调,而CD31 mRNA和蛋白质表达水平下调,细胞活性降低而迁移增多;使用外源性TGF-β1可促进低氧高二氧化碳环境下的上述作用;而使用SB-431542则逆转低氧高二氧化碳环境下TGF-β1的作用。结论:低氧高二氧化碳能促进大鼠肺动脉内皮细胞发生EndoMT;抑制TGF-β1/Smads通路能抑制EndoMT,从而缓解低氧高二氧化碳性肺动脉高压。

关键词：低氧高二氧化碳内皮-间质转分化 TGF-β1/Smads通路肺动脉内皮细胞

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