检索结果-内蒙古大学图书馆

重金属污染物镉通过EMT机制加强结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为

世界华人消化杂志 2016年第30期24卷 4185-4192页

作者：钱燕陈丹蕾任海风王仕清于丹丹汪思应安徽医科大学基础医学院病理生理学教研室安徽省合肥市230032 安庆医药高等专科学校生理病理教研室安徽省安庆市246052

目的探讨重金属污染物镉(cadmium,Cd)对人结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为的影响及其相关机制.方法选用低浓度Cd诱导的人类结肠癌稳定细胞株HCT-116和未诱导的细胞株HCT-116为研究对象.通过MTT实验、平板克隆形成实验、黏附实验、T... 详细信息

目的探讨重金属污染物镉(cadmium,Cd)对人结肠癌细胞株HCT-116的恶性生物学行为的影响及其相关机制.方法选用低浓度Cd诱导的人类结肠癌稳定细胞株HCT-116和未诱导的细胞株HCT-116为研究对象.通过MTT实验、平板克隆形成实验、黏附实验、Tran swell细胞迁移和侵袭实验等,观察HCT-116细胞的恶性生物学行为的变化;蛋白免疫印迹法检测E-cadherin、Vimentin、E-盒结合锌指蛋白1、MMP-3、MMP-9等上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达水平.结果与对照组相比,Cd诱导组细胞的恶性生物学行为增强(P<0.05),且转化后的细胞间呈间充质样链接;相较于对照组,Cd诱导24 h后,间质样标志物Vimentin蛋白的相对表达量明显增加(2.20±0.11 vs 1.03±0.08,P<0.01)、MMP-3(5.76±0.20 vs 1.00±0.09,P<0.01)、MMP-9(3-46±0.05 vs 0.99±0.04,P<0.01)的蛋白相对表达量也上升,而上皮样标志物E-cadherin蛋白的相对表达显著下降(0.30±0.03 vs 1.0l±0.05,P<0.01),且他们均呈现时司依赖性结论形态学和分子生物学都提示HCT-116细胞在慢性低剂量Cd暴露后会引起EMT机制.

关键词：镉结直肠癌上皮-间质转化钙黏附蛋白E 波形蛋白

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新生大鼠海马神经元原代培养方法的优化与鉴定

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湖北科技学院学报（医学版） 2016年第4期30卷 284-287,290,370页

作者：郭明星陈浩宇梁璐张常娥广州医科大学病理生理学教研室广东广州511436

目的建立一种简单、高效、稳定的海马神经元原代培养方法,以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法 24h内新生鼠,用含B27的Neurobasal无血清培养基培养,显微镜下观察神经元的生长状态,MTS法测定不同时间神经元细胞的活力,并用Tau-1和MA... 详细信息

目的建立一种简单、高效、稳定的海马神经元原代培养方法,以获得高纯度、高活力的海马神经元。方法 24h内新生鼠,用含B27的Neurobasal无血清培养基培养,显微镜下观察神经元的生长状态,MTS法测定不同时间神经元细胞的活力,并用Tau-1和MAP-2抗体鉴定海马神经元的纯度。结果 1接种24h后,细胞完全贴壁,可见双突起和多个突起的神经元;72h后,海马神经元胞体饱满,立体感较强,突起之间相互形成突触联系,神经元极性完全建立;5～6d的神经元,突起形成密集的神经纤维网络。2MTS法测定结果显示,在培养1～8d时间内,海马神经元随着培养时间的延长,活力增加,第8d细胞活性到达高峰,继续培养时,活力开始下降。3Tau-1和MAP-2免疫荧光检测神经元,海马神经元纯度达到（85.5±5.4）%。结论本实验方法简单易行,神经元纯度高、细胞活性好,且体外存活时间长,是神经疾病体外研究的良好细胞模型。

关键词：海马神经元无血清原代培养方法优化与鉴定

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泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性机制研究

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中国病原生物学杂志 2017年第6期12卷 489-494页

作者：张帅张舜文吴芳吴江东章乐张杰董江涛张玉清柳小玲梁粟朱荟云张大龙武青青张万江石河子大学医学院病理生理学教研室新疆地方与民族高发病教育部重点实验室西部地区高发人兽共患传染性疾病防治协同创新中心新疆石河子832002 南京医科大学基础医学院石河子大学医学院第一附属医院

目的探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制。方法采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼最... 详细信息

目的探讨泛素样蛋白蛋白酶体系统对单耐异烟肼结核分枝杆菌耐药性的影响及其机制。方法采用刃天青显色法,比较单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因(Pup、Dop、PafA、Mpa基因)分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值的差异;比较加入改变细胞壁通透性试剂后,单耐异烟肼结核分枝杆菌(对照组)与4种基因分别过表达和缺失单耐异烟肼结核分枝杆菌菌株异烟肼MIC差值间的差异。结果 (1)与单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC值过表达PafA基因株增加1.03μg/ml,过表达Dop、Mpa基因株分别降低1.03μg/ml、0.68μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.898,P>0.05);过表达Pup基因株异烟肼的MIC值增加8μg/ml,差异有统计学意义(t=2.185,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株异烟肼的MIC值分别降低4.82、4.98、4.99、4.9μg/ml,差异均有统计学意义(F=35.809,P<0.05)。(2)与加入改变细胞壁通透性试剂后单耐异烟肼结核分枝杆菌相比,异烟肼的MIC差值过表达Pup基因株增加7.78μg/ml,差异有统计学意义(t=2.173,P<0.05);缺失Pup、Dop、PafA、Mpa基因株分别降低4.58、4.73、4.75、4.68μg/ml,差异均有统计学意义(F=33.598,P<0.05);过表达Dop、Mpa基因株分别降低1μg/ml和0.7μg/ml,过表达PafA基因株增加0.97μg/ml,差异均无统计学意义(F=1.935,P>0.05)。结论结核分枝杆菌泛素样蛋白蛋白酶体系统可能通过调控单耐异烟肼结核分枝杆菌细胞壁的通透性影响其耐药性。

关键词：结核分枝杆菌泛素样蛋白-蛋白酶体系统耐药性异烟肼机制

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绿原酸对视网膜母细胞瘤细胞株HXO-RB44的生长抑制作用

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西安交通大学学报（医学版） 2016年第5期37卷 734-738页

作者：赵静滨何熹微姚素艳刘建生郑德宇锦州医科大学解剖学教研室辽宁锦州121001 辽宁抚顺市眼病医院辽宁抚顺113008 辽河油田总医院眼科辽宁盘锦124010 锦州医科大学病理生理学教研室辽宁锦州121001

目的探讨绿原酸(CHA)对体外培养人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株HXO-RB44的作用及机制。方法应用CCK-8体外抑制实验,筛选CHA对体外培养传6代的人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度。Western blot检测人Rb细胞株HXO-RB44中抑癌基因Rb1和P16及... 详细信息

目的探讨绿原酸(CHA)对体外培养人视网膜母细胞瘤(Rb)细胞株HXO-RB44的作用及机制。方法应用CCK-8体外抑制实验,筛选CHA对体外培养传6代的人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度。Western blot检测人Rb细胞株HXO-RB44中抑癌基因Rb1和P16及细胞周期蛋白(Cyclin D2)和细胞周期蛋白依赖激酶(CDK 4)的表达变化;ELISA检测培养基中乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果 CCK-8体外抑制实验结果显示,CHA对人Rb细胞株HXO-RB44的最佳抑癌浓度为80μmol/L。经80μmol/L CHA处理5d的HXO-RB44细胞株中,抑癌基因Rb1和P16均有少量表达,而在阳性对照组(HT1080细胞)和未处理的HXO-RB44细胞几乎没有表达。CHA处理5d的HXO-RB44细胞株的Cyclin D2和CDK4的表达明显低于阳性对照组(HT1080细胞)和未处理的HXO-RB44细胞(P<0.01)。CHA处理5d的HXO-RB44的培养基中LDH的含量为(226.75±42.74)U/L,明显低于正常培养的细胞培养基(425.84±31.67)U/L(P<0.01)。结论 80μmol/L CHA可能通过增加HXO-RB44抑癌基因的表达,降低细胞周期蛋白的表达及LDH水平,而抑制HXO-RB44细胞株的增殖。

关键词：绿原酸人视网膜母细胞瘤抑癌基因细胞周期蛋白2(Cyclin D2) 细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)

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12a-羟基明杜西酮通过Wnt/β-catenin信号通路促进人肝癌细胞凋亡的作用研究

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基因组学与应用生物学 2016年第8期35卷 1881-1886页

作者：巫鑫李飞龙廖红波仇双利吴华朱晓辉广东医科大学广东天然药物研究与开发实验室湛江524023 广东医科大学附属医院肿瘤科湛江524001 广东医科大学病理生理学教研室湛江524023

为了探讨化合物12a-羟基明杜西酮对人肝癌细胞系Hep G2增殖与凋亡的影响及其作用机制,本研究采用MTT法检测人肝癌细胞系Hep G2的增殖情况;应用流式细胞术检测细胞的周期分布、凋亡率和ROS水平;通过Western Blotting法检测Wnt/β-cateni... 详细信息

为了探讨化合物12a-羟基明杜西酮对人肝癌细胞系Hep G2增殖与凋亡的影响及其作用机制,本研究采用MTT法检测人肝癌细胞系Hep G2的增殖情况;应用流式细胞术检测细胞的周期分布、凋亡率和ROS水平;通过Western Blotting法检测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达情况。结果表明,化合物12a-羟基明杜西酮可抑制人肝癌细胞系Hep G2的增殖,其抑制率与作用浓度呈时间和剂量依赖性,24 h、48 h和72 h的IC50分别为(12.8±0.67)μmol/L、(8.8±0.43)μmol/L和(6.6±0.42)μmol/L;12a-羟基明杜西酮可剂量依赖性地(5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L)使Hep G2细胞阻滞在G2/M期(p>0.05),同时可增加细胞凋亡率(p>0.05),提高细胞内ROS水平(p>0.05)。此外,12a-羟基明杜西酮对Hep G2细胞内总的、细胞质的和细胞核的β-catenin蛋白表达均有降低作用,这说明Wnt/β-catenin通路可能受到了抑制。进一步的研究结果也证实了上述推测:12a-羟基明杜西酮可使Dvl-2、Dvl-3、GSK-3β(p-ser9)、c-myc、survivin的蛋白表达下降,而使GSK-3(p-tyr216)、Axin-2的蛋白表达水平升高,对总的GSK-3β蛋白水平则无明显影响。上述结果表明,化合物12a-羟基明杜西酮可以抑制人肝癌细胞系Hep G2的增殖并诱导其凋亡,其主要作用机制可能与升高细胞内ROS水平和抑制Dvl/GSK-3β/β-catenin信号通路有关。

关键词： 12a-羟基明杜西酮肝癌 HepG2 Wnt/β-catenin

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细胞角蛋白7的表达在肿瘤及炎症中的意义

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国际免疫学杂志 2016年第1期39卷 57-60页

作者：谢佳佳郭晓华南方医科大学病理生理学教研室广州510515

细胞角蛋白（Krt）作为一种中间丝,存在于所有的上皮细胞及部分非上皮细胞.主要作用是维持上皮细胞的机械稳定性和完整性.近年来细胞角蛋白的研究集中在肿瘤的诊断方面,即利用细胞角蛋白在上皮细胞表达的特异性,通过免疫组化技术,运用... 详细信息

细胞角蛋白（Krt）作为一种中间丝,存在于所有的上皮细胞及部分非上皮细胞.主要作用是维持上皮细胞的机械稳定性和完整性.近年来细胞角蛋白的研究集中在肿瘤的诊断方面,即利用细胞角蛋白在上皮细胞表达的特异性,通过免疫组化技术,运用单克隆抗体进行比对分析,来确定肿瘤的分类、分型或者来源.其中Krt7是一个代表.探讨Krt7的作用,在上皮肿瘤中的分布,以及与细胞角蛋白20（Krt20）在上皮肿瘤中的联合表达情况,对肿瘤的诊断、转移性与原发肿瘤的鉴别等有重要意义.除此之外,Krt7还是一个炎性指标,发挥信号转导中的作用,参与炎症的发生发展,其表达也有利于对某些疾病早期及预后进行监测.

关键词：细胞角蛋白7 肿瘤炎症 Keratin-7

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先天性巨结肠症SEMA3C/3D基因突变抑制肠神经嵴细胞的分化和成熟

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山西医科大学学报 2017年第8期48卷 817-822页

作者：姜茜蔚开慧张震李颀肖萍苏琳李龙潘尚领首都儿科研究所遗传研究室儿童发育营养组学北京市重点实验室北京100020 广西医科大学基础医学院病理生理学教研室首都儿科研究所附属儿童医院普通外科首都儿科研究所附属儿童医院病理科安徽医科大学

目的观察先天性巨结肠症(hirschsprung disease,HSCR)患者携带的SEMA3C/3D基因错义突变编码蛋白对原代培养的肠神经嵴细胞(enteric neural crest cell,ENCC)分化、成熟和迁移的影响。方法分别用野生型(wild type,WT)和突变型SEMA3C/3D... 详细信息

目的观察先天性巨结肠症(hirschsprung disease,HSCR)患者携带的SEMA3C/3D基因错义突变编码蛋白对原代培养的肠神经嵴细胞(enteric neural crest cell,ENCC)分化、成熟和迁移的影响。方法分别用野生型(wild type,WT)和突变型SEMA3C/3D质粒瞬时转染HEK293T细胞获取上清液,用含0.5 nmol/ml相应蛋白的上清液处理ENCC 72 h,分别用神经元、胶质细胞和未成熟神经元特异性标志物(Peripherin、GFAP、MASH1)多重免疫荧光染色法检测处理后细胞的分化倾向和分化后神经元的成熟速度,用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力的变化。结果与WT相比,突变型SEMA3C(S329G、V337M)处理组的ENCC分化为神经元和成熟神经元的能力均下降(WT,S329G,V337M组的Peripherin/GFAP比值分别为0.95±0.34,0.53±0.35,0.28±0.07;Peripherin/MASH1比值分别为1.14±0.17,0.95±0.38,0.60±0.19),其中以V337M突变型SEMA3C处理组的下降最为明显(P<0.01),而野生型和突变型SEMA3C/3D对神经球的迁移均没有明显影响。结论突变型SEMA3C可以抑制ENCC分化为神经元/成熟神经元,从而影响肠神经系统的正常发育,这可能为HSCR的发病机制研究提供新的线索。

关键词：先天性巨结肠症 SEMA3C/3D 肠神经嵴细胞细胞分化

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维生素D干预对自发性高血压大鼠RAAS系统活性、心血管重构的影响

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海南医学院学报 2017年第7期23卷 872-874,878页

作者：黎慧凌灿新疆维吾尔自治区乌鲁木齐市新疆维吾尔自治区人民医院米东医院内四科新疆乌鲁木齐830021 新疆医科大学基础医学院病理生理学教研室新疆乌鲁木齐830054

目的:研究维生素D干预对自发性高血压大鼠RAAS系统活性、心血管重构的影响。方法:选择健康SD大鼠作为对照组,自发性高血压大鼠并随机分为高血压组和VitD组,对照组和高血压组给予丙二醇腹腔注射,VitD给予维生素D溶解于丙二醇腹腔注射。... 详细信息

目的:研究维生素D干预对自发性高血压大鼠RAAS系统活性、心血管重构的影响。方法:选择健康SD大鼠作为对照组,自发性高血压大鼠并随机分为高血压组和VitD组,对照组和高血压组给予丙二醇腹腔注射,VitD给予维生素D溶解于丙二醇腹腔注射。干预后6、12、18周时,处死大鼠后收集血清并测定RAAS系统分子的含量,收集心肌组织并测定心血管重构相关分子的含量。结果:干预后6、12、18周时,高血压组大鼠血清中PRA、AngⅡ、ALD的含量以及肌组织中Col-I、Col-Ⅲ、TGF-β1、α-actin、Myom-1的含量均呈逐步升高趋势且均显著高于对照组;VitD组大鼠血清中PRA、AngⅡ、ALD的含量以及肌组织中Col-I、Col-Ⅲ、TGF-β1、α-actin、Myom-1的含量均呈逐步降低趋势且均显著低于高血压组。结论:自发性高血压大鼠接受维生素D干预后能够降低RAAS系统活性、改善心血管重构。

关键词：原发性高血压维生素D 肾素-血管紧张素-醛固酮心肌重构

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如何改革病理生理学的研究型教学

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教育教学论坛 2016年第47期 113-114页

作者：赵美平王万铁温州医科大学病理生理学教研室浙江温州325035

病理生理学是临床医学领域的一门非常重要的专业基础课。为了培养理论基础扎实、高素质综合型的临床医学后备人才,必须重视病理生理学的研究型教学,不断改革教学方式和教学内容,建设优良的教学团队。本文对目前病理生理学教学中存在的... 详细信息

病理生理学是临床医学领域的一门非常重要的专业基础课。为了培养理论基础扎实、高素质综合型的临床医学后备人才,必须重视病理生理学的研究型教学,不断改革教学方式和教学内容,建设优良的教学团队。本文对目前病理生理学教学中存在的一些问题,如怎样深入改革教学方式和考核方式,激发学生在学习过程中的主动性和学习热情,以及加强教学管理等进行探讨,希望能够与同行交流经验,促进病理生理学的教学工作。

关键词：病理生理学研究型教学教学管理

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CPBL教学法在成人教育病理生理学教学中的应用

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牡丹江医学院学报 2016年第2期37卷 148-150页

作者：孙兰石明隽贵州医科大学病理生理学教研室贵州贵阳550004

目的探讨CPBL(基于临床病案问题的教学法)在病理生理学教学中的应用及QQ群辅助教学法的作用及意义。方法选取2014级成教临床医学专升本两个班分别作为实验班与对照班。实验班采用CPBL教学法、QQ群辅助互动教学,对照班采用传统教学法进... 详细信息

目的探讨CPBL(基于临床病案问题的教学法)在病理生理学教学中的应用及QQ群辅助教学法的作用及意义。方法选取2014级成教临床医学专升本两个班分别作为实验班与对照班。实验班采用CPBL教学法、QQ群辅助互动教学,对照班采用传统教学法进行教学。采用期末考试成绩和问卷调查相结合的形式,进行教学效果的评估。结果实验班同学考试成绩略高于对照班,但两组差异不具有统计学意义(P>0.05);而病案分析题成绩两组有显著性差异(P<0.01),并且实验班学生对CPBL教学法的评价明显优于传统教学法(P<0.05)。结论 CPBL教学法在病理生理学教学中的应用效果良好,QQ群辅助互动式教学在教学中也发挥了积极的作用,值得推广。

关键词：病理生理学 CPBL教学法教学

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