检索结果-内蒙古大学图书馆

吉林大学学报（医学版） 2024年第3期50卷 718-727页

作者：袁博谢佳忆江思瑜孟亚军朱清华李晓飞付秀美谢利德承德医学院基础医学院人体解剖学教研室河北承德067000 承德护理职业学院病原生物与免疫教研室河北承德067000 河北省神经损伤与修复重点实验室河北承德067000 清华大学信息科学技术学院自动化系北京100062 河北医科大学第一医院中心实验室河北石家庄050000

目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测AD... 详细信息

目的:探讨脂肪干细胞源性外泌体(ADSC-Exos)对巨噬细胞RAW264.7迁移能力的影响,阐明其促进巨噬细胞功能的作用。方法:分离SD大鼠附睾旁脂肪组织,进行脂肪源性干细胞(ADSCs)原代培养,通过成脂和成骨分化诱导,结合油红O和茜素红染色检测ADSCs的多向分化潜能。采用Western blotting法和免疫荧光法检测ADSCs标记物CD29及CD44阳性表达情况,采用外泌体(Exos)分离试剂盒提取ADSC-Exos,透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪检测ADSC-Exos的形态大小和粒径分布范围,Western blotting法检测Exos特异性标记物CD9和TSG101蛋白表达情况,示踪法观察巨噬细胞摄取ADSC-Exos情况。将巨噬细胞RAW264.7分为对照组、10 mg·L^(-1)ADSCExos组、20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组。5-乙基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色检测各组巨噬细胞活性,Transwell小室实验检测各组巨噬细胞迁移细胞数,荧光显微镜观察各组巨噬细胞黏附情况。结果:原代ADSCs培养24 h后细胞贴壁生长,呈散在、长梭形;培养7 d,贴壁细胞呈齿梳状、旋涡状有序排列,呈成纤维细胞样外观;培养10代后ADSCs形态不规则,增殖速度减慢。分离提取的ADSCs具有成骨和成脂分化潜能,CD29和CD44蛋白表达阳性。透射电子显微镜下ADSC-Exos呈茶碟状,ADSC-Exos的粒径主峰分布于132 nm附近,ADSC-Exos中CD9和TSG101蛋白表达阳性,即ADSC-Exos提取成功。荧光显微镜下RAW264.7细胞核周围可检测到红色荧光信号,即ADSC-Exos可以被巨噬细胞摄取。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSC-Exos组EdU阳性细胞率均明显升高(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞迁移细胞数均明显增加(P<0.05)。与对照组比较,10、20和40 mg·L^(-1)ADSC-Exos组巨噬细胞黏附细胞数均明显增加(P<0.05);与10 mg·L^(-1)ADSC-Exos组比较,20 mg·L^(-1)ADSCExos组巨噬细胞黏附细胞数明显增加(P<0.05)。结论:ADSC-Exos可被巨噬细胞摄取,其通过影响细胞黏附提高巨噬细胞的迁移能力。

关键词：脂肪干细胞外泌体巨噬细胞细胞迁移细胞黏附

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TMEM240慢病毒载体构建及在人神经母细胞瘤细胞中的表达

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国际免疫学杂志 2022年第2期45卷 119-123页

作者：徐昊孙瑾张冲王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

目的构建跨膜蛋白(transmembrane protein,TMEM)240慢病毒载体,并在人神经母细胞瘤细胞中表达。方法提取人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的RNA,逆转录成cDNA并作为模板,聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增TMEM240的CDS序列,与pLVX-EGFP-N1载体连接,转化、验菌送公司测序,pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒与慢病毒包装质粒共转染293Ta细胞,收取上清,感染SH-SY5Y,嘌呤霉素筛选,获得表达TMEM240的SH-SY5Y细胞,将感染pLVX-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞作为对照组,感染pLVX-TMEM240-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞为实验组。通过共聚焦显微镜、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,Real-time PCR)和Western blot检测细胞中TMEM240表达。结果测序结果显示pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒构建成功;共聚焦显微镜下,表达TMEM240的细胞内出现点状绿色荧光;Real-time PCR及Western blot结果表明细胞内TMEM240表达。结论成功构建TMEM240慢病毒载体,慢病毒在基因和蛋白水平均引起TMEM240表达升高。

关键词：跨膜蛋白240 慢病毒载体人神经母细胞瘤细胞

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失神经骨骼肌中自噬介导肌萎缩的研究进展

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神经损伤与功能重建 2022年第5期17卷 275-276,288页

作者：张冲孙瑾王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

骨骼肌是人体最有活力并且最有可塑性的组织之一,它占人体总体重的40%,并且包含人体所有蛋白质的50%~75%。在骨骼肌运动过程中,每条肌纤维的收缩都受运动神经元的一个分支支配。骨骼肌失神经后,在结构、形态和超微结构等方面都会产生巨... 详细信息

骨骼肌是人体最有活力并且最有可塑性的组织之一,它占人体总体重的40%,并且包含人体所有蛋白质的50%~75%。在骨骼肌运动过程中,每条肌纤维的收缩都受运动神经元的一个分支支配。骨骼肌失神经后,在结构、形态和超微结构等方面都会产生巨大的变化。自噬是细胞自杀的一种保守的形式,是失神经骨骼肌中卫星细胞耗竭的潜在机制。TGF-β1是TGF-β家族成员之一,并且通过自噬途径介导骨骼肌的萎缩效应。

关键词：失神经骨骼肌肌萎缩自噬

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骨骼肌减少症中免疫衰老阻碍肌肉再生的研究进展

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国际免疫学杂志 2022年第1期45卷 74-77页

作者：田思嘉张冲王菁华哈尔滨医科大学基础医学院神经生物学教研室哈尔滨150081

骨骼肌减少症是老年人常见的肌肉疾病,主要表现为肌肉力量和质量的下降。肌肉再生能力下降是骨骼肌减少症的发病机制之一。免疫系统在肌肉再生过程中发挥了重要作用,促进了肌肉中卫星细胞的增殖和分化,肌肉也可以通过分泌肌肉因子的方... 详细信息

骨骼肌减少症是老年人常见的肌肉疾病,主要表现为肌肉力量和质量的下降。肌肉再生能力下降是骨骼肌减少症的发病机制之一。免疫系统在肌肉再生过程中发挥了重要作用,促进了肌肉中卫星细胞的增殖和分化,肌肉也可以通过分泌肌肉因子的方式调节免疫细胞的功能。随着年龄的增长,免疫衰老导致的慢性低级别炎症破坏了免疫细胞和肌肉的相互作用,导致肌肉再生能力下降、肌纤维萎缩,最终导致了骨骼肌减少症的出现。文章概述了免疫衰老诱导骨骼肌减少症的机制和过程。

关键词：骨骼肌减少症免疫衰老肌肉再生

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叉头框转录因子D3在恶性肿瘤进程中的作用

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国际遗传学杂志 2021年第6期44卷 475-480页

作者：刘四卫杨树才哈尔滨医科大学人体解剖学教研室

叉头框转录因子D3(forkhead box D3, FOXD3)对于胚胎干细胞的自我更新和调控具有重要作用, 并且其在生物发育过程中很关键。近年来, 许多文献报道FOXD3表达失调参与多种肿瘤的发生和演进。FOXD3在多种肿瘤中表达下调, 其下调主要与启动... 详细信息

叉头框转录因子D3(forkhead box D3, FOXD3)对于胚胎干细胞的自我更新和调控具有重要作用, 并且其在生物发育过程中很关键。近年来, 许多文献报道FOXD3表达失调参与多种肿瘤的发生和演进。FOXD3在多种肿瘤中表达下调, 其下调主要与启动子区高甲基化相关, 肿瘤中FOXD3的表达下调会促进肿瘤细胞的增殖、迁移、上皮间质转化和血管生成, 并且对肿瘤患者临床分期和预后有重要影响。本文对其在肿瘤中的作用进行综述。

关键词：叉头框转录因子肿瘤迁移侵袭

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超声检查结合PBL、CBL教学法在头颈肿瘤外科研究生颈部解剖教学中的应用研究

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解剖科学进展 2022年第6期28卷 786-788页

作者：苗素生王磊毛雄辉杨慧科哈尔滨医科大学附属肿瘤医院头颈外科黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学人体解剖学教研室黑龙江哈尔滨150081

头颈部肿瘤是常见的恶性肿瘤之一,由于颈部解剖结构复杂,解剖学对于头颈外科研究生的培养显得尤为重要。传统的解剖学授课方式枯燥无味,无法帮助学生形成立体化的三维解剖结构,也无法清晰地了解颈部重要的器官、血管和神经的毗邻关系。

关键词：颈部解剖毗邻关系研究生头颈部肿瘤头颈外科头颈肿瘤外科超声检查解剖学

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miR-132在神经系统疾病中作用的研究进展

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国际免疫学杂志 2021年第1期44卷 59-64页

作者：姜茗月张瑶王广友哈尔滨医科大学神经生物学教研室 150086

MicroRNAs(miRNAs)作为基因表达的关键调控因子,主要通过在转录后调控大量靶信使RNA(messenger RNA,mRNA)的表达,参与大部分生物学过程以及许多疾病的发病机制。miR-132的表达在神经元发育、成熟过程中是必要的。同时,miR-132作为一种... 详细信息

MicroRNAs(miRNAs)作为基因表达的关键调控因子,主要通过在转录后调控大量靶信使RNA(messenger RNA,mRNA)的表达,参与大部分生物学过程以及许多疾病的发病机制。miR-132的表达在神经元发育、成熟过程中是必要的。同时,miR-132作为一种最重要的神经相关miRNAs之一,在神经系统和免疫系统之间起到了关键的调节作用。这表明miR-132在多种疾病的病理进程中扮演了重要角色,尤其在神经系统疾病中。miR-132失调可导致神经发育性疾病,退行性疾病,神经感染以及脑卒中等疾病的发生和发展,现就miR-132在神经系统疾病中发挥的作用及机制进行综述。

关键词： miR-132 神经系统疾病脑卒中

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孕期应激致卵巢恢复功能减弱及氧化应激水平增加

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生殖医学杂志 2024年第5期33卷 612-617页

作者：吴文星高力健李晓晓白云飞徐志卿石翠格李慧首都医科大学基础医学院人体解剖学教研室北京100069 首都医科大学基础医学院神经生物学系北京100069 首都医科大学基础医学院病理学系北京100069 国家卫生健康委科学技术研究所北京100081

目的利用孕期束缚应激诱导的产后抑郁大鼠模型,探索孕期应激对卵巢生殖激素分泌水平及氧化应激反应等的影响。方法孕鼠随机分为两组,每组6只。对照组不做处理,实验组(PPD组)在孕8~21 d进行为期两周、每天2 h的束缚应激,产后1周内进行抑... 详细信息

目的利用孕期束缚应激诱导的产后抑郁大鼠模型,探索孕期应激对卵巢生殖激素分泌水平及氧化应激反应等的影响。方法孕鼠随机分为两组,每组6只。对照组不做处理,实验组(PPD组)在孕8~21 d进行为期两周、每天2 h的束缚应激,产后1周内进行抑郁行为的检测。分娩后采用酶联免疫吸附法检测血浆卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的水平;蛋白免疫印迹方法检测卵巢ERα、ERβ、ERK1/2、Nrf2、HO-1以及炎症因子IL-6的表达水平;HE染色观察卵泡发育情况。结果孕期束缚后,与对照组大鼠比较,PPD组的糖水偏好率显著降低(P<0.01)且强迫游泳不动时间显著延长(P<0.001),血浆FSH水平显著降低(P<0.001)、LH水平显著升高(P<0.01)。与对照组大鼠比较,PPD组的卵巢组织中ERβ、p-ERK1/2、Nrf2、HO-1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05),而炎症因子IL-6蛋白相对表达量显著升高(P<0.05)。HE染色结果显示,PPD组大鼠卵巢组织中闭锁卵泡增多。结论孕期束缚应激可导致大鼠卵巢组织中氧化应激及炎性因子水平增加,闭锁卵泡增多,提示孕期束缚应激可致产后卵巢的恢复能力减弱。

关键词：产后抑郁卵巢氧化应激炎性因子

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研究生教学中的基因克隆与病毒载体的构建

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实验室研究与探索 2020年第9期39卷 195-197页

作者：王菁华孙瑾穆莉莉哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081

在医学类研究生的科研教学与实验研究中,如何帮助硕士研究生更好地开展科研实验活动既是教学活动的出发点也是落脚点,如何搭建起理论教学与实验室实践的桥梁是研究生教学工作的核心。基因克隆技术,特别是该技术中的病毒载体构建部分,大... 详细信息

在医学类研究生的科研教学与实验研究中,如何帮助硕士研究生更好地开展科研实验活动既是教学活动的出发点也是落脚点,如何搭建起理论教学与实验室实践的桥梁是研究生教学工作的核心。基因克隆技术,特别是该技术中的病毒载体构建部分,大部分硕士研究生新生对此掌握不足。理论知识与实践经验的不足对于研究生开展实验室实验有着诸多的影响和限制。通过开展基因克隆与病毒载体的构建专业选修课程,为医学类研究生提供理论知识的引导与专业技能的指导,通过案例指导教学方式,深入浅出地讲解知识要点,为医学专业研究生科研实验之路提供必要的帮助。

关键词：基因克隆病毒载体的构建研究生教学

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RGS5过表达腺病毒载体构建及其在神经元发育中作用的初步研究

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国际免疫学杂志 2022年第1期45卷 21-26页

作者：赵崴刘传亮徐昊李高驰王金彩哈尔滨医科大学神经生物学教研室哈尔滨150081 深圳市龙岗区妇幼保健院中心实验室广东深圳518172 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内七科 150081

目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建G蛋白信号调节蛋白5(regulator of G-protein signaling 5,RGS5)重组腺病毒载体,初步探讨RGS5在神经元发育过程中的作用。方法以C57BL/6小鼠大脑皮层神经元cDNA为模板,利用PCR扩增RGS5基因,构建腺病毒... 详细信息

目的利用AdEasy腺病毒载体系统构建G蛋白信号调节蛋白5(regulator of G-protein signaling 5,RGS5)重组腺病毒载体,初步探讨RGS5在神经元发育过程中的作用。方法以C57BL/6小鼠大脑皮层神经元cDNA为模板,利用PCR扩增RGS5基因,构建腺病毒重组质粒pAD-Track-RGS5。重组质粒pAD-Track-RGS5经PacI酶切线性化后与pADEasy-1骨架质粒共同转化BJ5183感受态细胞,筛选重组成功的质粒,命名为pAD-RGS5。用293A细胞包装重组腺病毒AD-RGS5,并纯化病毒,以pAD-Track包装的腺病毒(AD-EGFP)作为对照组检测重组腺病毒RNA水平RGS5表达情况。将重组腺病毒AD-RGS5感染培养的原代皮层神经元,以AD-EGFP作为对照组检测RGS5对原代皮层神经元发育的影响。结果与Neuro 2a、CATH.a和C17.2细胞系比较,大脑原代皮层神经元RGS5相对表达量明显升高,差异具有统计学意义(t值分别为7.40、7.58和7.60,P值均<0.05)。pAD-Track-RGS5转染Hela细胞中RGS5表达量较pAD-EGFP组明显升高,差异显著具有统计学意义(t=7.58,P<0.05),成功构建了过表达RGS5基因的腺病毒载体。与AD-EGFP腺病毒组相比,AD-RGS5腺病毒组神经元对突触囊泡内吞的能力变弱,荧光染色变弱,差异具有统计学意义(t=5.372,P<0.05),提示RGS5对皮层神经元的突起发育具有明显的抑制作用。结论成功构建了RGS5过表达的AD-RGS5腺病毒载体,RGS5对原代皮层神经元胞吞突触囊泡的能力有抑制作用。

关键词：腺病毒 G蛋白信号调节蛋白5 神经元载体构建

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