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第十四届全国临床肿瘤学大会暨2011年CSCO学术年会

作者：隋红王凯冰李曦李乐静白彬 150040 哈尔滨哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科 150081 哈尔滨哈尔滨医科大学附属第二临床医学院介入科 150001 哈尔滨哈尔滨兽医研究所国家重点实验室猪病研究室

Background: The aim of our study was to use a rational molecular design to enhance the antitumor effect of the HN protein of *** transfected the recombined HN protein into lung cancer cell A549 and observed the biology action of lung cancer cell A549 is influenced by differential subcellular targeting HN protein of Newcastle Disease Virus.

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丙泊酚对全脑缺血／再灌注损伤大鼠保护作用研究

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国际麻醉学与复苏杂志 2011年第4期32卷 393-397页

作者：宋春雨陶涛崔晓光席宏杰岳子勇王楠黑龙江省哈尔滨医科大学附属第二临床医学院麻醉科&黑龙江省麻醉与危重病研究重点实验室 150086

目的探讨丙泊酚对大鼠全脑缺血／再灌注损伤（ischemia／reperfusion injury，I／RI）的保护作用。方法65只Wistar雄性大鼠采用完全随机法分为5组：假手术组（S组）、缺血，再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）组（I／R）组、丙泊酚... 详细信息

目的探讨丙泊酚对大鼠全脑缺血／再灌注损伤（ischemia／reperfusion injury，I／RI）的保护作用。方法65只Wistar雄性大鼠采用完全随机法分为5组：假手术组（S组）、缺血，再灌注（ischemia／reperfusion，I／R）组（I／R）组、丙泊酚组1（P1）、丙泊酚组2（P2）、丙泊酚组3（P3），每组13只。采用双侧颈总动脉夹闭＋全身低血压[平均动脉压（MAP）控制在35mmHg～45mmHg（1mmHg=0．133kPa）]法制备全脑I／RI模型，实验过程中监测脑电、MAP、血气、体温等指标。全脑缺血10min恢复灌注。P1、P2、P3组在全脑缺血前分别泵入丙泊酚0．5、1．0、1．5mg·***-1，维持1h。每组随机选8只大鼠分别再灌注后6、24、48、72h、4、5、6d和7d进行神经行为学评价，7d后处死大鼠，光镜下观察海马CA1区组织病理学改变（每组5只）。25只Wistar雄性大鼠（每组5只）于1／R24h后应用流式细胞仪检测全脑细胞凋亡情况。结果I／R导致大鼠出现行为学缺陷，除了P2组6h再灌注时间点的旷场实验和悬挂实验与I／R组差异无统计学意义外，P2、P3组再灌注各时间点神经行为学优于P1组和I／R组；病理形态学显示，HG评分S组、I／R组、P1组、P2组、P3组分别为0，2．8±0．4，2．6±0．5，2．0±0．7，1．4±0．5；异丙酚预处理组P2、P3能明显减轻全脑I／R后组织病理学改变；应用流式细胞仪检测神经细胞凋亡，5组的凋亡率分别为：S组（6．5±0．6）％，I／R组（51．5±2．8）％，P1组（48．2±0．6）％，P2组（24．7±1．2）％，P3组（18．6±0．8）％。与I／R组、P1组相比，P2、P3组大鼠脑细胞凋亡率降低（P〈0．05）。结论丙泊酚预处理对大鼠全脑I／RI的保护作用与剂量相关，可能与丙泊酚的抗凋亡作用有关。

关键词：脑缺血/再灌注损伤丙泊酚神经行为学凋亡

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HPLC法测定人血清中卡马西平及环氧化卡马西平的浓度

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哈尔滨医科大学学报 2010年第1期44卷 60-62,65页

作者：刘艳胡俊平朱雨岚哈尔滨医科大学第二临床医学院临床药学药物研究所黑龙江省高校重点实验室哈尔滨医科大学第二临床医学院神经科黑龙江哈尔滨150081

目的建立测定人血清中卡马西平和环氧化卡马西平浓度的高效液相色谱法。方法色谱柱为Dia-mond C18（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为：甲醇-水（65∶35）（0 min）→甲醇-水（55∶45）（10 min）→甲醇-水（55∶45）（12 min）→甲... 详细信息

目的建立测定人血清中卡马西平和环氧化卡马西平浓度的高效液相色谱法。方法色谱柱为Dia-mond C18（200 mm×4.6 mm,5μm）;流动相为：甲醇-水（65∶35）（0 min）→甲醇-水（55∶45）（10 min）→甲醇-水（55∶45）（12 min）→甲醇-水（65∶35）（18 min）,流速1.0 ***-1,柱温25℃;检测波长215 nm。以艾司唑仑为内标。结果卡马西平和环氧化卡马西平的线性范围分别为1.08~21.60μ***-1（r=0.9958）和0.20~5.00μ***-1（r=0.9952）;高、中、低浓度卡马西平平均回收率为（98.5±5.1）%,（103.6±4.8）%,（100.0±4.9）%;高、中、低浓度环氧化卡马西平平均回收率为（95.8±3.6）%,（99.7±2.9）%,（93.0±5.7）%;日内及日间精密度均小于10%,最低检测浓度都为0.10μ***-1。结论本法简单、快速、准确,是一种有效的检测人血清中卡马西平和环氧化卡马西平的方法。

关键词：高效液相色谱法卡马西平环氧化卡马西平人血清

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定位表达的新城疫病毒HN蛋白对荷瘤小鼠的抗肿瘤免疫作用

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中国肺癌杂志 2010年第8期13卷 773-776页

作者：王凯冰隋红李乐静李曦王磊哈尔滨医科大学附属第二临床医学院介入室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院内科哈尔滨150040 哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室猪病组哈尔滨150001

背景与目的新城疫病毒HN蛋白是新城疫病毒产生溶瘤作用的重要免疫原。在前期体外实验基础上,比较定位表达细胞不同部位的HN蛋白体内抗肿瘤免疫作用。方法通过构建荷瘤小鼠,瘤内注射定位表达于细胞不同部位的新城疫病毒HN蛋白,即胞浆型(C... 详细信息

背景与目的新城疫病毒HN蛋白是新城疫病毒产生溶瘤作用的重要免疫原。在前期体外实验基础上,比较定位表达细胞不同部位的HN蛋白体内抗肿瘤免疫作用。方法通过构建荷瘤小鼠,瘤内注射定位表达于细胞不同部位的新城疫病毒HN蛋白,即胞浆型(Cy-HN)、跨膜型(M-HN)、分泌型(Sc-HN)重组真核表达质粒,比较荷瘤小鼠的肿瘤生长速度,脾淋巴细胞增殖反应和细胞毒T细胞活性。结果瘤内注射跨膜型重组真核表达质粒的荷瘤小鼠肿瘤生长缓慢,与瘤内注射胞浆型和分泌型重组真核表达质粒的荷瘤小鼠相比有统计学差异(第18天:P=0.022;第21天:P<0.01),同时,该组荷瘤小鼠的淋巴细胞增殖反应和细胞毒T细胞活性也较高[M-HNvsCy-HN,P=0.019;M-HNvsSc-HN,P=0.043;M-HNvspcDNA3.1(+),P<0.01]。结论定位表达于细胞不同部位的HN蛋白体内抗肿瘤免疫作用存在差异,跨膜型HN蛋白的重组DNA质粒能够提高荷瘤小鼠的特异性细胞免疫应答。

关键词： HN蛋白细胞定位抗肿瘤免疫细胞毒性T淋巴细胞

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叶酸修饰的G5-PAMAM-D介导HSV-TK/GCV自杀基因系统治疗前列腺癌的体外实验研究

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中国肿瘤临床 2010年第11期37卷 615-618页

作者：王刚陈岳徐勇张志宏杨阔王燕铭孔德领赵维明天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所天津市300211 南开大学生物活性材料教育部重点实验室哈尔滨医科大学第一临床医学院泌尿外科

目的:探讨叶酸修饰的第五代聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D-fol)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性。方法:以GS-PAMAM-D-fol为基因载体将含有自杀基因HSV-TK的重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和LNCaP,24h后... 详细信息

目的:探讨叶酸修饰的第五代聚酰胺-胺型树枝状聚合物(G5-PAMAM-D-fol)作为基因载体进行前列腺癌自杀基因治疗的可行性。方法:以GS-PAMAM-D-fol为基因载体将含有自杀基因HSV-TK的重组质粒pcDNA3-tk转染至前列腺癌细胞系PC-3和LNCaP,24h后以RT-PCR法检测HSV-TK基因在两种前列腺癌细胞系中的mRNA表达;再次转染后24h,对转染的两种细胞分别给予不同浓度的前体药物更昔洛韦(GCV),48h后采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测细胞抑制率。结果:RT-PCR结果证明G5-PAMAM-D-fol可将重组质粒pcDNA3-tk转染2种前列腺癌细胞并转录HSV-TK基因。MTT实验反映出A组(G5-PAMAM-D-fol/pcDNA3-tk)对PC-3和LNCaP细胞有明显的杀伤作用,并且比B组(G5-PAMAM-D/pcDNA3-tk)的细胞抑制率更高。C组(G5-PAMAM-D-fol)和D组(GS-PAMAM-D)随着GCV浓度的增加细胞生长并未受到明显的抑制,而且前者并未表现出比后者更明显的细胞杀伤作用。结论:G5-PAMAM-D-fol能够在体外将自杀基因重组质粒成功转入前列腺癌细胞并表达HSV-TK基因,其靶向性强且细胞毒性低。

关键词：基因载体基因治疗自杀基因前列腺癌

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急诊PCI术对血小板功能的影响

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哈尔滨医科大学学报 2010年第5期44卷 478-480,483页

作者：杜洪伟杨光于波杨爽哈尔滨医科大学第二临床医学院心内科省部共建黑龙江省教育部心肌缺血机理与诊疗技术重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究冠心病患者经急诊皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)前后,二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)及胶原(collagen,COL)诱导血小板聚集功能的变化及临床意义。方法抽取52例保守治疗的急性心肌梗死患... 详细信息

目的研究冠心病患者经急诊皮冠状动脉介入治疗(percutaneous coronary intervention,PCI)前后,二磷酸腺苷(adenosine diphosphate,ADP)及胶原(collagen,COL)诱导血小板聚集功能的变化及临床意义。方法抽取52例保守治疗的急性心肌梗死患者、38例行急诊冠状动脉造影(coronary angiography,CAG)的患者及46例行急诊PCI的患者,分别于入院服药(阿司匹林、氯吡格雷)后即刻(即术前)、服药后2 h(即术后)及服药后24 h采取静脉血,测定ADP及COL诱导的血小板聚集功能。结果 PCI组ADP及COL诱导的血小板的聚集功能在术后即刻较术前明显增加(P<0.01),服药后24 h较术后即刻降低但较术前增高(P<0.01);CAG组ADP诱导的血小板聚集功能在术后即刻及服药后24 h较术前明显降低,(P<0.01),而COL诱导的血小板的聚集性在各时段无明显改变;保守治疗组服药后2 h的ADP诱导的血小板聚集率较服药即刻下降(P<0.01),服药后24 h的ADP诱导的血小板聚集率较服药即刻及服药2 h明显下降(P<0.01),而COL诱导的血小板聚集率在各时段无明显改变。结论 ADP及COL诱导的血小板的聚集功能在PCI后明显增强,应加强抗血小板治疗以降低血小板聚集功能。

关键词：经皮冠状动脉介入治疗二磷酸腺苷ADP诱导的血小板聚集胶原COL诱导的血小板聚集

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苏木单体物对大鼠心脏移植后NF-κB信号传导途径的影响

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哈尔滨医科大学学报 2010年第5期44卷 417-419页

作者：邹永鹏吴健张毛毛张奇侯静波于波哈尔滨医科大学第二临床医学院心内科教育部黑龙江省部共建心肌缺血机理与诊疗技术重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨苏木中药对移植心脏的保护作用及可能的作用机制。方法建立大鼠腹腔同种异位心脏移植模型。实验分为3组:A组为空白对照组;B组为苏木(Caesalpinia sappan,CS)中药组;C组为环孢素(CsA)组。每组8只大鼠。术后第2天开始灌药,第7天... 详细信息

目的探讨苏木中药对移植心脏的保护作用及可能的作用机制。方法建立大鼠腹腔同种异位心脏移植模型。实验分为3组:A组为空白对照组;B组为苏木(Caesalpinia sappan,CS)中药组;C组为环孢素(CsA)组。每组8只大鼠。术后第2天开始灌药,第7天取供心。Western blot法检测心肌组织中NF-κB及IκBα的表达水平。结果与移植对照组相比CsA及CS组移植物的病理损害明显减轻;NF-κB及IκBα的表达水平给药组较对照组差异显著(P<0.05),但两种药物组之间的差异不显著(P>0.05)。结论苏木中药可能通过抑制NF-κB信号传导途径的激活,减缓急性排斥反应的发生从而减轻移植物的病理损伤,发挥保护移植心脏的作用。

关键词：同种异体移植排斥反应心脏移植 NF-κB IκBα

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前列腺特异性双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43的构建及鉴定

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中华泌尿外科杂志 2010年第5期31卷 338-342页

作者：王刚陈岳徐勇张志宏杨阔赵维明孔德领天津医科大学第二医院泌尿外科天津市泌尿外科研究所 300211 哈尔滨医科大学第一临床医学院泌尿外科南开大学生物活性材料教育部重点实验室孔德领

目的构建前列腺特异性双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43,为前列腺癌基因治疗实验研究奠定基础. 方法获取Cx43基因并克隆至pMD19-T Simple载体;合成HSV-TK基因并克隆到pIRES载体的MCS A中,得pIRES-TK;获取PSMAe/p并克隆至pIRES-TK... 详细信息

目的构建前列腺特异性双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43,为前列腺癌基因治疗实验研究奠定基础. 方法获取Cx43基因并克隆至pMD19-T Simple载体;合成HSV-TK基因并克隆到pIRES载体的MCS A中,得pIRES-TK;获取PSMAe/p并克隆至pIRES-TK中替换CMV启动子,得到pIRES-PSMAe/p-TK;将Cx43基因克隆到pIRES-PSMAe/p-TK的MCS B中,得到pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43,对此质粒双酶切鉴定并测序.pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43转染人前列腺癌细胞株LNcap,RT-PCR观察TK及Cx43基因表达. 结果合成的各质粒经双酶切、琼脂糖凝胶电泳可见目的基因条带;pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43经测序与预期设计相符.pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43转染LNCaP细胞,RT-PCR显示成功表达TK及Cx43 mRNA. 结论成功构建了含HSv-TK及Cx43的双基因表达载体pIRES-PSMAe/p-TK-Cx43.

关键词：前列腺肿瘤遗传载体 HSV-TK/GCV 前列腺特异性膜抗原启动子/增强子连接蛋白43

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厄贝沙坦对心肌梗死后大鼠心肌组织因子和组织因子途径抑制物的影响

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中国心血管病研究 2010年第8期8卷 588-592页

作者：于俊民杜永利葛振忠赵继义刘伟哈尔滨医科大学第四临床医学院VIP1科黑龙江省150001 内蒙古通辽市医院心内科哈尔滨医科大学第一临床医学院心内科哈尔滨医科大学第二临床医学院中心实验室

目的观察大鼠心肌梗死后心肌组织因子（TF）和组织因子途径抑制物（TFPI）的mRNA表达及厄贝沙坦对其的影响。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型组，另设假手术组（20只）。模型组术后24h存活大鼠随机分为安慰... 详细信息

目的观察大鼠心肌梗死后心肌组织因子（TF）和组织因子途径抑制物（TFPI）的mRNA表达及厄贝沙坦对其的影响。方法通过结扎大鼠左冠状动脉前降支建立大鼠急性心肌梗死模型组，另设假手术组（20只）。模型组术后24h存活大鼠随机分为安慰剂组（20只）和厄贝沙坦组（50mg·kg^-1d^-1，20只）。用药4周后处死各组大鼠并分别称其心室重量，计算左心室重量指数及心肌梗死面积，应用反转录聚合酶链反应（RT—PCR）方法检测心肌TFmRNA和TFPImRNA。结果模型组左心室重量指数大于假手术组（F=7．83，P〈0．05）。模型组内药物组左心室重量指数明显低于安慰剂组（F=8．96，P〈0．05），心肌梗死面积比较差异无统计学意义（F=0．96，P〉0．05）；模型组TFmRNA、TFPImRNA表达均高于假手术组（F：8．24，P〈0．05），其中药物组＇IFmRNA较安慰剂组明显降低（F=8．57，P〈0．05），药物组TFPI mRNA较安慰剂组增加（F=1．35，P〉0．05）。结论大鼠心肌梗死后心肌TF mRNA、TFPI mRNA表达均明显增高。厄贝沙坦可显著降低心肌梗死大鼠心肌TF mRNA的表达。

关键词：心肌梗死组织因子组织因子途径抑制物厄贝沙坦

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米诺地尔醇质体中药物含量及包封率的测定

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哈尔滨医科大学学报 2010年第3期44卷 224-226页

作者：纪宏宇王瑞红潘卫三刘晓放杨文秀刘红梅赵红光吴琳华沈阳药科大学药学院辽宁沈阳110016 哈尔滨医科大学第二临床医学院药学部黑龙江省高校重点实验室黑龙江省医药工业研究所黑龙江哈尔滨150081

目的建立米诺地尔醇质体中药物含量及包封率的测定方法。方法采用低温超速离心法分离游离药物和醇质体,高效液相色谱(HPLC)法检测醇质体中游离药物含量和总药量,并计算包封率。结果米诺地尔在10.0～300.0μ***-1范围内线性关系良好(r=0.... 详细信息

目的建立米诺地尔醇质体中药物含量及包封率的测定方法。方法采用低温超速离心法分离游离药物和醇质体,高效液相色谱(HPLC)法检测醇质体中游离药物含量和总药量,并计算包封率。结果米诺地尔在10.0～300.0μ***-1范围内线性关系良好(r=0.9996),标准曲线为:A=25365C+28487;空白回收率在99.6%～101.0%之间。用此方法测定3批米诺地尔醇质体的包封率在61.1%～63.3%之间。结论该方法操作简单,结果准确,适合于米诺地尔醇质体的含量和包封率的测定。

关键词：米诺地尔醇质体包封率高效液相色谱法

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