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哈尔滨医科大学学报 2006年第1期40卷 20-22页

作者：朴贤美初文峰乔国芬杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究槲寄生总黄酮苷对缺氧、急性心肌缺血和心律失常的预防作用。方法采用乙醇和有机溶剂萃取方法从槲寄生中提取总黄酮有效成分;用磨口瓶法观察完全密闭小鼠的存活时间;垂体后叶素(1U/kg)致心肌缺血模型,用分光光度法测LDH、MDA、... 详细信息

目的研究槲寄生总黄酮苷对缺氧、急性心肌缺血和心律失常的预防作用。方法采用乙醇和有机溶剂萃取方法从槲寄生中提取总黄酮有效成分;用磨口瓶法观察完全密闭小鼠的存活时间;垂体后叶素(1U/kg)致心肌缺血模型,用分光光度法测LDH、MDA、SOD值;用乌头碱(40μg/kg)建立心律失常模型,观测对室颤发生率等的影响。结果耐缺氧实验中给药组小鼠的平均存活时间显著长于对照组(P<0.05);在心肌缺血实验中,给药组血清中LDH、MDA、SOD的含量与模型组有显著差异(P<0.05);在心律失常实验中室性心动过速(VT)、室颤(VF)的发生率有降低趋势,室性早搏出现时间有延长趋势,对窦性节律恢复率没有影响。结论槲寄生总黄酮苷可显著增强小鼠耐缺氧能力;槲寄生总黄酮苷对垂体后叶素引起的大鼠急性心肌缺血损伤具有显著的保护作用;槲寄生总黄酮苷对大鼠心律失常有一定拮抗作用。

关键词：槲寄生黄酮苷垂体后叶素乌头碱

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白藜芦醇对冠脉结扎诱发大鼠急性心肌缺血的保护作用的研究

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哈尔滨医科大学学报 2006年第3期40卷 188-191页

作者：赵文晓杜娟张妍潘振伟李宝馨杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究白藜芦醇(resveratrol)对大鼠急性心肌缺血的保护作用,并进一步阐明其机制。方法建立急性心肌缺血模型,持续观察标准Ⅱ导联心电图30min,6h后进行心肌TTC染色测量心肌梗死面积,测定血清肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)活力,确定心... 详细信息

目的研究白藜芦醇(resveratrol)对大鼠急性心肌缺血的保护作用,并进一步阐明其机制。方法建立急性心肌缺血模型,持续观察标准Ⅱ导联心电图30min,6h后进行心肌TTC染色测量心肌梗死面积,测定血清肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH)活力,确定心肌损伤程度。心肌细胞凋亡的检测采用原位末端标记法(TUNEL),免疫组化法检测凋亡相关基因Fas、Bax及Bcl-2的蛋白表达。结果白藜芦醇能够剂量依赖性地降低大鼠心肌冠脉结扎后ST段抬高,降低CK、LDH活力,缩小心肌梗死面积,降低心肌细胞凋亡指数,抑制Fas、Bax的表达,增强Bcl-2的表达。结论白藜芦醇对冠脉结扎诱发的大鼠急性心肌缺血有保护作用,其机制可能与上调Bcl-2蛋白表达,下调Fas、Bax蛋白表达,抑制心肌细胞凋亡有关。

关键词：白藜芦醇心肌缺血细胞凋亡

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大明胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用

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哈尔滨医科大学学报 2006年第3期40卷 185-187,191页

作者：米彦军吴玲孙冰董志成初文峰潘振伟乔国芬杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究大明胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法结扎冠状动脉左前降支(LAD)建立大鼠急性心肌缺血模型,观察30min内心电图(ECG)变化和术后6h血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗超氧阴离子活性,以及心肌梗死面积来评价大明胶... 详细信息

目的研究大明胶囊对大鼠急性心肌缺血的保护作用。方法结扎冠状动脉左前降支(LAD)建立大鼠急性心肌缺血模型,观察30min内心电图(ECG)变化和术后6h血清中肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、抗超氧阴离子活性,以及心肌梗死面积来评价大明胶囊的作用。结果大明胶囊能显著缩小冠脉结扎所致急性心肌缺血大鼠的心肌梗死面积,降低血清中CK、LDH活性,提高血清中抗超氧阴离子浓度;ECG显示各给药组与病理模型组比较S-T段明显降低(P<0.05)。结论预防性给予大明胶囊对大鼠急性心肌缺血损伤具有保护作用。

关键词：大明胶囊心肌梗死急性心肌缺血

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大明胶囊对大鼠实验性缺血心肌的保护作用

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哈尔滨医科大学学报 2006年第5期40卷 351-353,357页

作者：董志成孙冰米彦军吴玲初文峰潘振伟乔国芬杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的观察大明胶囊对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用。方法采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(Pit)诱发急性心肌缺血模型,观察各组注射Pit后15min内心电图ST段、心率的变化以及6h后血清乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(... 详细信息

目的观察大明胶囊对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用。方法采用大鼠舌下静脉注射垂体后叶素(Pit)诱发急性心肌缺血模型,观察各组注射Pit后15min内心电图ST段、心率的变化以及6h后血清乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、肌酸激酶(CK)浓度的变化。结果大明胶囊对Pit所致急性缺血性心电图ST段抬高、降低和心率的降低都有明显对抗作用,能明显增加血清SOD的活性,降低CK和LDH的含量(P<0.05)。结论预防性给予大明胶囊对Pit致大鼠急性心肌缺血具有明显的保护作用。

关键词：心肌缺血大明胶囊垂体后叶素

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用伊文思蓝染色观察血管移植过程中血管保存液对内皮的损害

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哈尔滨医科大学学报 2006年第3期40卷 192-195页

作者：侯云龙许超千班涛哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的通过伊文思蓝(Evans blue)染色观察维拉帕米、硝酸甘油混合液(VG液)和盐酸罂粟碱溶液作为血管移植过程中的保存液对内皮层的损害,为临床应用提供依据。方法实验用雄性SD大鼠10只,随机分为2组,分别命名为A组和B组,每组5只。麻醉后SD... 详细信息

目的通过伊文思蓝(Evans blue)染色观察维拉帕米、硝酸甘油混合液(VG液)和盐酸罂粟碱溶液作为血管移植过程中的保存液对内皮层的损害,为临床应用提供依据。方法实验用雄性SD大鼠10只,随机分为2组,分别命名为A组和B组,每组5只。麻醉后SD大鼠迅速摘出胸主动脉在Krebs henseleit buffer(KHB)溶液(4℃)分割,每段长度约1cm,A组中分段后的血管分别被放入4℃的2种由不同公司提供的VG溶液中(分别称为VG1,VG2)、盐酸罂粟碱(1mg/ml)、阴性对照(KHB溶液,pH7.4)以及阳性对照(KHB溶液,pH7.4)中培养30min。B组分段后的血管分别被放入4℃的由2种VG液中不同的成分在林格液中配制后的液体(分别称为PEVG1,MaVG2)、阴性对照(KHB溶液,pH7.4)以及阳性对照(KHB溶液,pH7.4)中培养30min。取出经过上述液体处理后的血管段再经过30min连续充氧的KHB(37℃)液培养,后用Evans blue(0.17%)染色15s。而后浸泡于100μl甲酰胺溶液中过夜,取上清用分光光度计测定Evans blue浓度,再通过蛋白定量测定血管蛋白质含量,得出每微克蛋白质中的Evans blue含量。结果在A组中3种保存液与阳性对照均有差异(P<0.05),2种VG液与罂粟碱溶液有显著性差异(P<0.01)。在B组PEVG 1与对照组有显著性差异(P<0.01)。结论VG液作为血管移植过程中的保存液可以最大限度的减少内皮细胞损伤,相反用盐酸罂粟碱溶液可造成内皮细胞的明显损伤。作为动脉移植过程的保存液VG液具有更安全更有效的优势。

关键词：伊文思蓝染色血管内皮完整性动脉旁路移植

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钾通道阻滞剂对人肺腺癌细胞增殖和凋亡的影响

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哈尔滨医科大学学报 2006年第1期40卷 13-16页

作者：李雪连乔国芬单宏丽杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的研究电压依赖性延迟整流钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、钙离子激活钾通道阻断剂四乙铵(tetraethylammonia,TEA)对人肺腺癌细胞(AGZY-83-a)的影响,并探讨人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法体外细胞培养法培养人肺腺... 详细信息

目的研究电压依赖性延迟整流钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、钙离子激活钾通道阻断剂四乙铵(tetraethylammonia,TEA)对人肺腺癌细胞(AGZY-83-a)的影响,并探讨人肺腺癌细胞株凋亡的机制。方法体外细胞培养法培养人肺腺癌细胞株,采用MTT法检测不同浓度4-AP、TEA对细胞增殖的影响。透射电镜、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况。比色法检测细胞内Caspase-3活性改变。结果不同浓度的4-AP、TEA作用于细胞48h后,与对照组相比各组吸光度值(A490)均明显降低(n=10,P<0.001),并且呈浓度依赖关系。4-AP、TEA组的IC50为3.59mmol/L和3.97mmol/L。4-AP及高浓度的TEA使人肺腺癌细胞株细胞凋亡率增加。经4-AP、TEA处理48h的AGZY-83-a细胞内Caspase-3的A405较正常对照组有显著增加(n=6,P<0.001)。结论钾通道阻滞剂4-AP、TEA对AGZY-83-a细胞增殖有明显的抑制作用,抑制率与药物浓度正相关。诱导人AGZY-83-a细胞凋亡,4-AP和TEA诱导AGZY-83-a细胞凋亡的过程中细胞内Caspase-3活性增加。

关键词：钾通道阻滞剂 4-氨基吡啶四乙铵 AGZY-83-a 半胱氨酸酶3

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胆碱对急性心肌缺血心律失常的作用

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哈尔滨医科大学学报 2006年第6期40卷 446-449页

作者：刘振洪龚冬梅潘振伟单璐琛乔国芬吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150081

目的观察胆碱对大鼠急性心肌缺血的作用,并探讨其作用机制。方法以结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,给予M受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干预。观察大鼠急性心肌缺血模型心律失常发生情况和心肌细胞L型钙通道蛋白... 详细信息

目的观察胆碱对大鼠急性心肌缺血的作用,并探讨其作用机制。方法以结扎大鼠左冠状动脉前降支造成急性心肌缺血模型,给予M受体激动剂胆碱和M3受体阻断剂4DAMP进行干预。观察大鼠急性心肌缺血模型心律失常发生情况和心肌细胞L型钙通道蛋白mRNA的表达。结果①胆碱可降低大鼠急性心肌缺血模型的心律失常发生率(P<0.05);②胆碱能够使L型钙通道mRNA表达增加;③M3受体阻断剂4DAMP可逆转胆碱的上述作用(P<0.05)。结论胆碱通过激活M3受体降低了急性心肌缺血大鼠心律失常的发生率。

关键词：胆碱急性心肌缺血心律失常 L型钙通道蛋白mRNA M3受体

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穿膜肽-凋亡蛋白融合蛋白导入人脐静脉内皮细胞和人肺腺癌Anip973细胞的生物学特性

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中国临床康复 2006年第20期10卷 104-106页

作者：陶站华刘兴汉张宇雯马洪星刘远莉栗亚黑龙江省生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:在大肠杆菌内表达穿膜肽与凋亡蛋白的融合蛋白,观察其诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的活性,并了解其是否有剂量依赖性。方法:实验于2005-08/2006-01在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。①在大肠杆菌中表达穿膜肽-凋亡... 详细信息

目的:在大肠杆菌内表达穿膜肽与凋亡蛋白的融合蛋白,观察其诱导肺腺癌Anip973细胞凋亡的活性,并了解其是否有剂量依赖性。方法:实验于2005-08/2006-01在哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室完成。①在大肠杆菌中表达穿膜肽-凋亡蛋白并用IDA-Ni2+亲和层析纯化。②细胞增殖抑制实验:取对数生长期人脐静脉内皮细胞和Anip973细胞接种于96孔培养板中,培养12h后加入终浓度分别为0,10,20,30,40,50mg/L融合蛋白培养48h,弃上清,每孔中加入四甲基偶氮唑盐溶液穴5g/L雪20μL,继续孵育4h,检测吸光度,计算肿瘤生长抑制率。③取对数生长期人脐静脉内皮细胞、Anip973细胞,每种细胞分成两组:给药组加入终浓度为30mg/L穿膜肽-凋亡蛋白,对照组加入相同体积的磷酸盐缓冲液,继续培养48h。苏木精-伊红染色,光镜下观察细胞形态;溴乙啶/丫啶橙荧光染色观察细胞凋亡率。结果:①细胞增殖抑制实验结果表明浓度为10～50mg/L穿膜肽-凋亡蛋白对人脐静脉内皮细胞没有明显抑制作用,对Anip973细胞呈剂量依赖性抑制作用,半数抑制浓度为27mg/L。②30mg/L穿膜肽-凋亡蛋白作用48h后,人脐静脉内皮细胞形态没有显著改变,对照组和给药组的凋亡率分别为穴2.9±0.4雪%和穴3.1±0.6雪%,没有显著差异(P>0.05);Anip973细胞可见到细胞皱缩,染色质浓缩和出现凋亡小体等凋亡特征性形态变化,给药组和对照组凋亡率分别为穴36.8±1.7雪%和穴6.7±0.5雪%,差异显著(P<0.01)。结论:穿膜肽-凋亡蛋白能诱导肿瘤细胞凋亡,这种作用呈剂量依赖性,而对正常细胞没有毒性作用。

关键词：肿瘤细胞凋亡抗肿瘤药重组融合蛋白质类

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容量敏感外向整流性氯通道参与氧化应激介导的系膜细胞凋亡

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中华肾脏病杂志 2006年第7期22卷 416-420页

作者：焦军东李哲艾维李策刘素雁李文志杨宝峰哈尔滨医科大学附属第二医院肾内科 150086 哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江生物医药工程重点实验室哈尔滨医科大学附属第二医院麻醉科 150086

目的探讨容量敏感外向整流性(VSOR)氯通道在H2O2介导系膜细胞凋亡中的作用和可能的机制。方法全细胞膜片钳技术用于检测VSOR氯电流。细胞凋亡通过吖啶橙／溴化乙锭荧光染色、电子显微镜、TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3... 详细信息

目的探讨容量敏感外向整流性(VSOR)氯通道在H2O2介导系膜细胞凋亡中的作用和可能的机制。方法全细胞膜片钳技术用于检测VSOR氯电流。细胞凋亡通过吖啶橙／溴化乙锭荧光染色、电子显微镜、TUNEL染色和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3活性确定。结果150μmol／L H2O2激活系膜细胞VSOR氯电流,H2O2激活的氯电流具有典型的VSOR氯电流电生理特性。包括:外向整流性、电压依赖性失活。对细胞外高渗透压敏感及被VSOR氯通道阻断剂抑制。VSOR氯通道阻断剂DIDS(100μmol／L),NPPB(10μmol／L)和尼氟灭酸(10μmol／L)明显抑制H2O2介导的系膜细胞凋亡。150μmol／L H2O2处理2 h内,细胞容量明显下降,但这种细胞容量下降被100μmol／L DIDS,10μmol／L NPPB和10μmol／L尼氟灭酸抑制。结论VSOR氯通道参与H2O2介导的系膜细胞凋亡,其机制与介导凋亡性容量下降有关。

关键词：细胞凋亡氯化物通道氧化性应激膜片钳术细胞容量系膜细胞

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钙敏感受体和多胺代谢在心肌缺血-再灌注损伤和细胞凋亡中的作用和机制

钙敏感受体和多胺代谢在心肌缺血-再灌注损伤和细胞凋亡中的作用...

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2006年全国微循环与血液流变学暨分子生物学新进展学术研讨会

作者：徐长庆赵雅君张伟华孙怡华张艳桥张力李全凤李弘时飒李宏霞 RuiWang 杨宝峰哈尔滨医科大学病理生理教研室哈尔滨医科大学黑龙江省生物制药重点实验室加拿大 Lakehead University 生物教研室哈尔滨医科大学药理教研室

【研究背景】钙敏感受体（Calcium-sensing receptor,CaSR）是G蛋白偶联受体超家族C家族的成员,广泛分布在甲状旁腺、肾肠道、骨细胞及其他细胞。1993年,人们首先由牛甲状旁腺中克隆出CaSR。CaSR在维持机体Ca等金属离子稳态、调节细胞... 详细信息

【研究背景】钙敏感受体（Calcium-sensing receptor,CaSR）是G蛋白偶联受体超家族C家族的成员,广泛分布在甲状旁腺、肾肠道、骨细胞及其他细胞。1993年,人们首先由牛甲状旁腺中克隆出CaSR。CaSR在维持机体Ca等金属离子稳态、调节细胞分化和增殖等生理功能中,发挥至关重要的作用。多价阳离子,例如,Ca、Gd、精胺（spermine）等,均是CaSR的激动剂。

关键词：多胺代谢外源性 ODC 流出液 LDH 心肌缺血-再灌注损伤心肌细胞凋亡钙敏感受体

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