检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2008年第4期42卷 330-333页

作者：潘国聘孙丽华张勇张高小王玲杨宝峰哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081

目的检测缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)在大鼠急性局灶性脑缺血模型心室肌中的表达,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法建立大鼠右侧局灶性脑缺血模型,检测心电,观察心肌细胞电镜下的亚显微结构,用Western blot的方法,... 详细信息

目的检测缝隙连接蛋白43(Connexin43,Cx43)在大鼠急性局灶性脑缺血模型心室肌中的表达,以探讨其与脑缺血后心律失常的关系。方法用线栓法建立大鼠右侧局灶性脑缺血模型,检测心电,观察心肌细胞电镜下的亚显微结构,用Western blot的方法,检测心室肌中Cx43表达的改变。结果电镜结果显示脑缺血后,心肌组织闰盘内桥粒和缝隙连接结构及分布改变。Western blot结果显示,缺血后2 h心室肌中Cx43的表达明显降低,分布紊乱。缺血后24 h,1 w心室肌中Cx43的表达随时间延长而增加,且均高于正常对照组。结论大鼠右侧局灶性脑缺血所引起的心律失常可能与心室肌Cx43蛋白表达和分布异常有关。

关键词：缝隙连接蛋白43 局灶性脑缺血心律失常

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抗菌肽SMAP-29衍生物的原核表达及纯化

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哈尔滨医科大学学报 2008年第6期42卷 563-567页

作者：肇晓光马洪星张宇雯董兴丽刘兴汉哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学第五临医学院检验科黑龙江大庆163311 大庆油田总医院检验科黑龙江大庆163001

目的利用大肠杆菌表达系统表达具有抗菌活性的SMAP-29衍生物,一步亲和层析法进行纯化。方法化学合成经改造的抗菌肽SMAP-29衍生物,纸片扩散法检测抗菌活性后,人工并用合成抗菌肽SMAP-29衍生物基因序列,克隆到表达载体pTYB11上,转化大肠... 详细信息

目的利用大肠杆菌表达系统表达具有抗菌活性的SMAP-29衍生物,一步亲和层析法进行纯化。方法化学合成经改造的抗菌肽SMAP-29衍生物,纸片扩散法检测抗菌活性后,人工并用合成抗菌肽SMAP-29衍生物基因序列,克隆到表达载体pTYB11上,转化大肠埃希菌BL-21(DE3),酶切和测序鉴定后,用异硫代β-D-半乳糖昔(isopropylβ-D-thiogalactoside IPTG)诱导表达融合蛋白。经几丁质亲和层析柱纯化。结果化学合成的抗菌肽SMAP-29衍生物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和绿脓杆菌具有一定的抑菌作用,SMAP-29衍生物的编码基因按正确方向和序列插入表达载体,融合蛋白的表达量达到大肠杆菌蛋白总量的40%,几丁质亲和层析后获得了可溶性SMAP-29衍生物。结论成功构建了以融合蛋白形式表达的抗菌肽SMAP-29衍生物大肠杆菌基因工程菌,克服了抗菌肽对宿主菌的毒性,实现了用大肠杆菌高效表达和一步亲和层析纯化,为进一步检测活性及临床应用奠定了基础。

关键词：抗菌肽 SMAP-29衍生物改造原核表达纯化

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双微体的研究进展

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国际遗传学杂志 2008年第4期31卷 258-266页

作者：范义辉毛仁芳傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室

双微体(double minute chromosomes,DMs)是基因扩增的主要细胞遗传学标志,是染色体外遗传单位的一种主要存在形式。大量研究表明,双微体与基因组不稳定、恶性肿瘤、细胞耐药及衰老密切相关。针对双微体的深入研究对于肿瘤遗传学的发展... 详细信息

双微体(double minute chromosomes,DMs)是基因扩增的主要细胞遗传学标志,是染色体外遗传单位的一种主要存在形式。大量研究表明,双微体与基因组不稳定、恶性肿瘤、细胞耐药及衰老密切相关。针对双微体的深入研究对于肿瘤遗传学的发展及其临床应用有着重要的意义。人类基因组计划的完成与功能基因组计划的深入,大大地加快了在序列水平对双微体的了解。对双微体的全面认识,将有助于理解基因扩增机制及基因组可塑性,并为后两者的研究提供全新的切入点。

关键词：双微体基因扩增基因组可塑性恶性肿瘤细胞耐药

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钾通道阻滞剂对AGZY-83-a细胞增殖和凋亡的影响

钾通道阻滞剂对AGZY-83-a细胞增殖和凋亡的影响

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中国药理学会化疗药理专业委员会第九届学术研讨会

作者：冯铁明李雪连乔国芬单宏丽杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室

[目的]研究电压依赖性延迟整流钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、钙离子激活钾通道阻断剂四乙铵(tetraethylammonium,TEA)对人肺腺癌细胞(AGZY-83-a)增殖和凋亡的影响及其作用的机制。[方法]体外细胞培养法培养人肺腺癌... 详细信息

[目的]研究电压依赖性延迟整流钾通道阻断剂4-氨基吡啶(4-aminopyridine,4-AP)、钙离子激活钾通道阻断剂四乙铵(tetraethylammonium,TEA)对人肺腺癌细胞(AGZY-83-a)增殖和凋亡的影响及其作用的机制。[方法]体外细胞培养法培养人肺腺癌细胞株,采用MTT法检测不同浓度4-AP、TEA对细胞增殖的影响。透射电镜、流式细胞术(FCM)检测细胞凋亡情况。比色法检测细胞内Caspase-3活性改变。

关键词：钾通道阻滞剂 AGZY-83-a 细胞增殖和凋亡

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Puma基因转染对胃癌SGC-7901细胞的促凋亡作用及机制

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中国肿瘤 2008年第2期17卷 137-141页

作者：张宇雯刘兴汉马洪星曲天舒李冀红栗亚哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室一省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑... 详细信息

[目的]探讨puma基因转染对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制。[方法]应用脂质体介导重组真核表达载体pEGFP-C1-PUMA瞬时转染至SGC-7901细胞。分别用荧光显微镜和RT-PCR法检测外源基因的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑制,Hoechst33342染色法检测细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞周期和线粒体膜电位的变化,Westernblot检测细胞色素C(CytC)和凋亡诱导因子(AIF)的转位。[结果]外源性puma基因在pEGFP-C1-PUMA转染的SGC-7901细胞中实现了表达。PUMA表达使SGC-7901细胞的增殖能力降低并诱导凋亡,转染24、48、72h的生长抑制率分别为19.3%、34.7%、42.2%,凋亡率分别为19.6%、35.4%、46.6%。PUMA表达的SGC-7901细胞DNA合成受到抑制,周期阻滞在G0/G1期;线粒体膜电位明显下降,CytC、AIF从线粒体进入胞浆。[结论]puma基因转染可有效抑制胃癌SGC-7901细胞的增殖,促进其凋亡。促凋亡机制主要是线粒体途径,与线粒体膜电位降低和CytC、AIF从线粒体释放有关。

关键词： puma基因凋亡胃肿瘤线粒体

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氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血时心肌细胞凋亡的影响

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中国药学杂志 2007年第7期42卷 501-504页

作者：商蕾王玲孙宏丽初文峰杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室哈尔滨150086

目的研究氧化苦参碱对大鼠急性缺血性心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法以结扎左冠状动脉前降支方法建立大鼠急性心肌缺血模型,缺血6h后分别测定心肌梗死范围,血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;采用HE染色检测心肌组织病... 详细信息

目的研究氧化苦参碱对大鼠急性缺血性心肌细胞凋亡的影响及其机制。方法以结扎左冠状动脉前降支方法建立大鼠急性心肌缺血模型,缺血6h后分别测定心肌梗死范围,血清超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量;采用HE染色检测心肌组织病理学改变;分别采用原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导的d-UTP缺口末端标记(TUNEL)法及SP免疫组织化学法检测心肌细胞凋亡指数,凋亡相关蛋白Fas/FasL和Bcl-2的表达情况。结果氧化苦参碱能缩小大鼠缺血心肌梗死范围,提高血清SOD活力,降低MDA含量,减轻心肌组织病理性损伤,降低心肌细胞凋亡指数,抑制Fas蛋白表达,增强Bcl-2蛋白表达,但对FasL蛋白表达无明显影响。结论氧化苦参碱对大鼠急性心肌缺血损伤保护作用的机制可能与其抗脂质过氧化作用,抑制Fas蛋白和增强Bcl-2蛋白表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。

关键词：氧化苦参碱心肌缺血细胞凋亡

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苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对HERG钾通道表达的影响

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药学学报 2007年第2期42卷 139-144页

作者：张莹杜娟张勇孙宏丽潘振伟吕延杰李宝馨杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

由于HERG钾通道在心律失常的发生与治疗中具有双重作用,因此成为近年来研究的热点。本文主要通过免疫荧光化学染色法、激光共聚焦显微镜及Western blotting法分别定性、定量地检测不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对稳定转染在HE... 详细信息

由于HERG钾通道在心律失常的发生与治疗中具有双重作用,因此成为近年来研究的热点。本文主要通过免疫荧光化学染色法、激光共聚焦显微镜及Western blotting法分别定性、定量地检测不同浓度的苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇对稳定转染在HEK-293细胞中HERG钾通道表达的影响。研究发现,苦参碱(1μmol·L-1)和氧化苦参碱(1μmol·L-1)均能够促进定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道的表达(n=5,P<0·05),苦参碱(100μmol·L-1)能够抑制定位于HERG-HEK细胞膜上的HERG钾通道表达(n=5,P<0·05),氧化苦参碱(100μmol·L-1)对HERG钾通道表达没有影响,白藜芦醇不影响HERG-HEK细胞中HERG钾通道表达。结果表明,低浓度的苦参碱促进HERG钾通道表达,高浓度的苦参碱抑制HERG钾通道表达,低浓度的氧化苦参碱促进HERG钾通道表达,白藜芦醇不影响HERG钾通道表达。这为苦参碱、氧化苦参碱和白藜芦醇抗心律失常作用机制及安全性提供了理论依据。

关键词：苦参碱氧化苦参碱白藜芦醇 HERG

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大明胶囊对高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43表达水平的影响

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中国中药杂志 2007年第14期32卷 1440-1445页

作者：邢妍岳朋孙丽华赵文晓王莹张勇刘鑫吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药工程重点实验室-省部共建国家重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的:通过观察大明胶囊治疗前后的高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43的表达,阐述大明胶囊降血脂作用的分子机制。方法:Wistar大鼠40只分组,建立实验性大鼠高脂血症模型,分别是正常组、高脂模型组、大明胶囊高、中、低(200,100,50 mg·... 详细信息

目的:通过观察大明胶囊治疗前后的高脂血症大鼠心肌间隙连接蛋白43的表达,阐述大明胶囊降血脂作用的分子机制。方法:Wistar大鼠40只分组,建立实验性大鼠高脂血症模型,分别是正常组、高脂模型组、大明胶囊高、中、低(200,100,50 mg·kg-1.d-1)剂量组,每组8只。尾静脉取血测血清中的总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、游离脂肪酸(NEFA)等血脂指标;Trizol法提取心肌总RNA,利用RT-PCR技术和免疫组织化学方法结合激光共聚焦技术,测定间隙连接蛋白43在正常、高脂、给药3种情况下的差异。结果:高脂血症时血清中的TC,TG,LDL及NEFA含量升高(P<0.05),HDL含量降低(P<0.05),经大明胶囊治疗后TC,TG,LDL及NEFA含量降低(P<0.05),HDL含量上调(P<0.05)至接近正常水平;与正常组比较高脂组和给药组心电图无明显改变,心率无显著性差异;高脂组与正常组比较间隙连接蛋白43mRNA表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较间隙连接蛋白43 mRNA表达显著增强(P<0.05);免疫组织化学结果高脂组与正常组比较间隙连接蛋白43表达显著减弱(P<0.05),给药组与高脂组比较间隙连接蛋白43表达显著增强(P<0.05)。结论:大明胶囊具有降血脂作用,其降血脂的药效机制与间隙连接蛋白43的表达改变有一定联系。

关键词：大明胶囊高脂血症间隙连接蛋白43 RT-PCR 免疫组织化学激光共聚焦

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白藜芦醇能够修复离体缺血再灌注损伤大鼠心脏M_3受体与间隙连接蛋白43间结构及功能性整合

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药学学报 2007年第1期42卷 19-25页

作者：肖静岳朋王莹张勇霍蓉王宁林道红吕延杰杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江省生物医药重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地黑龙江哈尔滨150086

为了探讨白藜芦醇是否能通过影响M3受体和间隙连接蛋白43(Cx43)间结构及功能性整合发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用,应用免疫共沉淀、免疫印迹及免疫荧光技术研究白藜芦醇对M3受体与Cx43间结构及功能性整合的影响。结合大鼠离体II导联... 详细信息

为了探讨白藜芦醇是否能通过影响M3受体和间隙连接蛋白43(Cx43)间结构及功能性整合发挥其抗心肌缺血再灌注损伤作用,应用免疫共沉淀、免疫印迹及免疫荧光技术研究白藜芦醇对M3受体与Cx43间结构及功能性整合的影响。结合大鼠离体II导联心电图及心肌超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)的检测观察白藜芦醇是否能恢复心肌缺血再灌注损伤。白藜芦醇能修复心肌缺血再灌注损伤所致的M3受体与Cx43间结构及功能性整合的破坏及纠正Cx43表达异常。同时QRS波时限?SOD及MDA的改变也得到相应恢复。白藜芦醇能修复M3受体与Cx43间结构及功能性整合而发挥抗缺血再灌注损伤作用。

关键词：白藜芦醇缺血再灌注损伤 M3受体间隙连接蛋白43

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双嘧达莫对腺苷抗心律失常作用的影响

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中国药理学通报 2007年第8期23卷 1080-1083页

作者：张俊范常龙栾彦冯铁明张婉陈燕杨宝峰董德利哈尔滨医科大学药学院药理学教研室黑龙江省生物医药重点实验室黑龙江哈尔滨150086

目的探讨腺苷在整体水平下的抗心律失常作用以及双嘧达莫对腺苷抗心律失常作用的增效作用。方法经大鼠尾静脉快速推注不同药物,应用BL-420E生物机能实验系统记录和分析单独应用腺苷以及双嘧达莫合用腺苷对正常大鼠、肾上腺素诱导心律失... 详细信息

目的探讨腺苷在整体水平下的抗心律失常作用以及双嘧达莫对腺苷抗心律失常作用的增效作用。方法经大鼠尾静脉快速推注不同药物,应用BL-420E生物机能实验系统记录和分析单独应用腺苷以及双嘧达莫合用腺苷对正常大鼠、肾上腺素诱导心律失常大鼠、氯化钡诱导心律失常大鼠心电变化的影响。结果腺苷能够明显减慢健康大鼠的心律,延长R-R间期,并且这种作用具有剂量依赖性;腺苷此作用还可被双嘧达莫增强;腺苷在作用时间内还能够快速终止肾上腺素和氯化钡所致的大鼠室性心律失常,合用双嘧达莫能够明显延长腺苷的抗心律失常作用时间。结论腺苷能够有效对抗肾上腺素和氯化钡所致室性心律失常,合用双嘧达莫可增强腺苷的抗心律失常作用。

关键词：腺苷双嘧达莫肾上腺素氯化钡心律失常

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