检索结果-内蒙古大学图书馆

微生物与感染 2009年第3期4卷 152-155页

作者：刘爱平李玉军李小光宋武琦李爱梅周淑如张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室哈尔滨150086

本文旨在用原位杂交法探讨博尔纳病病毒(BDV)接种Wistar大鼠脑组织中BDV基因组的分布情况。DIG RNA labeling kit标记BDV p24正链探针后,用斑点实验检测该探针的标记效率,斑点杂交法检测该探针的特异性。在其标记效率与特异性均达到实... 详细信息

本文旨在用原位杂交法探讨博尔纳病病毒(BDV)接种Wistar大鼠脑组织中BDV基因组的分布情况。DIG RNA labeling kit标记BDV p24正链探针后,用斑点实验检测该探针的标记效率,斑点杂交法检测该探针的特异性。在其标记效率与特异性均达到实验要求后,用该探针对颅内接种BDV(H1766株)的Wistar大鼠脑组织中BDV基因组进行原位杂交检测。结果发现,接种3周后,BDV感染主要发生在皮质和海马,仅少量发生在丘脑和下丘脑;接种6周后,皮质和海马的BDV感染仍然存在,且丘脑和下丘脑的BDV感染明显增强,说明BDV在大鼠脑组织中的分布范围随着感染时间的延长而逐步扩大。本文建立的原位杂交法可用于检测BDV在Wistar大鼠脑组织内的分布与迁移情况。

关键词：博尔纳病病毒大鼠原位杂交斑点杂交

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PU-377博尔纳病病毒实时荧光定量PCR诊断试剂盒的评价与应用

PU-377博尔纳病病毒实时荧光定量PCR诊断试剂盒的评价与应用

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第十二届全国神经病学学术会议

作者：徐鸣明展群岭张英英宋武琦谢鹏重庆医科大学附属第一医院哈尔滨医科大学微生物学教研室

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博尔纳病病毒感染对少突胶质瘤细胞中IL-1β表达量的影响

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徐州医学院学报 2009年第4期29卷 230-232页

作者：张中海车洋徐州医学院生理学教研室江苏徐州221004 哈尔滨医科大学病原微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染对少突胶质瘤细胞(oligodendrocyte,OL)中白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)蛋白表达的影响。方法首先将OL和BDV感染的OL煮沸裂解,分别提取蛋白混合液,测定蛋白的浓度后,将二者... 详细信息

目的探讨博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)感染对少突胶质瘤细胞(oligodendrocyte,OL)中白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)蛋白表达的影响。方法首先将OL和BDV感染的OL煮沸裂解,分别提取蛋白混合液,测定蛋白的浓度后,将二者的蛋白混合液浓度均调至10 g/L,分别取蛋白混合液及其经10 000 r/min离心5 min后的上清,沉淀后分别进行斑点免疫印迹试验(dot-blot hybridization),检测OL和BDV感染的OL中IL-1β的存在;同时,对提取的OL和BDV感染的OL中的蛋白混合液进行2倍系列稀释后进行斑点免疫印迹试验,检测细胞中的IL-1β的表达量的变化。结果斑点免疫印迹试验表明,OL和BDV感染的OL中提取的蛋白混合液及收集的沉淀均出现杂交阳性信号,而蛋白混合液离心后的上清未出现杂交阳性信号。等量的OL和BDV感染的OL的蛋白混合液经2倍系列稀释后进行斑点免疫印迹试验,OL的蛋白混合液在≤32倍的稀释度范围内有杂交阳性信号,BDV感染的OL的蛋白混合液在≤8倍的稀释度范围内有杂交阳性信号。结论①IL-1β在OL和BDV感染的OL中均存在,且存在于本实验获得的蛋白混合液和沉淀中。②BDV感染使OL中的IL-1β的表达量降低,提示IL-1β的表达量下降,有可能使其参与的脑内的免疫生理及病理反应发生变化,这可能是BDV感染致病的机制之一。

关键词：博尔纳病病毒少突胶质瘤细胞白细胞介素-1β 斑点免疫印迹试验

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采用正交设计优化HPV16L1重组蛋白表达的实验研究

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微生物学杂志 2009年第1期29卷 46-49页

作者：陈思佳商庆龙王燕李晓波刘希君谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150081

通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四... 详细信息

通过正交试验对构建的人乳头瘤病毒(HPV)16型L1蛋白的重组表达菌株pQE31-HPV16L1/M15(pREP4)进行表达条件的优化,以增加目的蛋白的表达量。实验选取影响蛋白表达的4个主要因素,分别为诱导时间、诱导剂浓度、细菌密度和诱导温度,采用四因素两水平正交试验,通过SDS-PAGE及Western blot测定重组表达蛋白,以Tanon凝胶成像系统分析目的蛋白含量作为检测条件优化效果的指标,所得数据采用SAS软件进行统计分析。实验结果表明在37℃、IPTG0.5mmol/L,菌密度OD600为1.0的条件下诱导4h所得蛋白量最大;经统计正交分析的最佳诱导条件为37℃、0.5mmol/LIPTG和菌密度OD600为1.0的条件下诱导7h。经实验验证,应用正交分析的最佳条件诱导所得目的蛋白量最大,但实际中通常采用诱导4h条件。实验证明正交试验可以用于基因工程菌株蛋白表达条件优化过程,提高工作效率。

关键词：人乳头瘤病毒16型 L1蛋白正交试验条件优化

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硝酸甘油和硝酸异山梨酯抗柯萨奇B组3型病毒感染的体内实验研究

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医学研究杂志 2009年第4期38卷 85-88页

作者：孙艳影杜凤霞夏美玲孙艳钟照华齐齐哈尔医学院医学技术学院病原教研室 161006 齐齐哈尔医学院医学技术学院检验中心哈尔滨医科大学微生物学研室

目的研究硝酸甘油(glyceryl trinatrate,GTN)和硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate,ISDN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用,为GTN和ISDN今后在抗CVB性心肌疾病的临床应用提供实验依据。方法用HeLa细胞扩增并收获CVB3后,测定CVB3的半数组... 详细信息

目的研究硝酸甘油(glyceryl trinatrate,GTN)和硝酸异山梨酯(isosorbide dinitrate,ISDN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用,为GTN和ISDN今后在抗CVB性心肌疾病的临床应用提供实验依据。方法用HeLa细胞扩增并收获CVB3后,测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50),BALB/c小鼠腹腔注射5000TCID50的CVB3,同时给予GTN和ISDN,14天后处死小鼠,取心脏做常规组织病理学检查。结果用GTN、ISDN保护的小鼠心肌病理标本每视野(×100)病灶数明显低于病毒对照组,GTN组为0.89±0.18,ISDN组为1.25±0.22,与病毒对照组差异显著(P<0.05)。结论GTN、ISDN等临床常用于抗心绞痛的硝酸酯类药物具有明确的抗CVB3感染BALB/c小鼠心肌细胞的作用。

关键词： B组柯萨奇病毒硝酸甘油硝酸异山梨酯一氧化氮抗病毒

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人呼吸道腺病毒通用特异检测试剂的研究及应用

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中国地方病学杂志 2008年第6期27卷 686-690页

作者：陈晶曲章义魏凤香张鸿彦王鹏王迎晨姜海英哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生微生物学教研室 150081

目的建立一种特异性强、灵敏度高、操作简便的呼吸道腺病毒检测方法，为临床呼吸道腺病毒通用特异诊断试剂的研发奠定实验基础。方法用生物信息学软件DNAMAN5．2．2、GeneRunner3．05、BLAST对GenBank中已收录的10个型别人呼吸道腺病毒... 详细信息

目的建立一种特异性强、灵敏度高、操作简便的呼吸道腺病毒检测方法，为临床呼吸道腺病毒通用特异诊断试剂的研发奠定实验基础。方法用生物信息学软件DNAMAN5．2．2、GeneRunner3．05、BLAST对GenBank中已收录的10个型别人呼吸道腺病毒核酸全序列进行比对分析，找m高度保守序列，设计5对腺病毒通用特异引物，同时确保PCR产物具有型别特异性。用NP-40裂解法制备模板，对引物的有效性、特异性及灵敏忡进行验证．并应用于64例急性呼吸道感染患儿咽拭子标本的检测，阳性标本的PCR产物直接测序鉴定血清型．将阳性标本接种HeLa细胞，光镜下观察细胞病变，电镜下观察病毒形态。结果BLAST结果表明，5对引物与其他病毒、细菌及人类基因组等无高度同源性，是腺病毒特异性引物。用5对引物扩增人3型腺病毒DNA，均出现阳性目的条带，但不能检测呼吸道合胞病毒和柯萨奇病毒，验证了引物的有效性和腺病毒特异性。模板稀释、病毒稀释均可检测到10。梯度，说明引物具有较高的灵敏性，同时验证了NP-40裂解法的稳定性。64例临床咽拭子标本巾检测出2例阳性标本，阳性率为3．13％（2／64）。阳性标本接种HeLa细胞，光镜下可见细胞变圆、聚集成葡萄串状、脱落等腺病毒所致细胞病变，电镜下可见细胞核内有典型的品格状排列的腺病毒颗粒。PCR产物测序结果表明，2株病毒均为B组腺病毒。结论成功设计了腺病毒通用的、特异的，同时扩增产物又具有腺病毒型别特异性的引物。用该引物建立的PCR方法检测呼吸道标本中的腺病毒DNA具有灵敏和特异的特点，适用于临床常规诊断腺病毒感染。

关键词：腺病毒,人呼吸系统诊断试验,常规聚合酶链反应

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纳米二氧化钛光催化技术消毒和净化空气的应用研究

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中华预防医学杂志 2008年第11期42卷 831-835页

作者：李秉杰杨德慧武帅钦李伯森孟浩姜思朋刘国军赵月辉崔洪波周雪媚钟照华民政部一零一研究所北京100070 哈尔滨医科大学微生物学教研室

目的研制纳米二氧化钛（TiO2）光催化空气净化消毒器，并测试其空气消毒净化效果。方法设计和制作纳米TiO2光催化空气净化消毒器样机。在封闭实验室将大肠埃希菌、克雷伯菌制成气雾，比较紫外线和纳米TiO2光催化空气净化消毒器消毒后残... 详细信息

目的研制纳米二氧化钛（TiO2）光催化空气净化消毒器，并测试其空气消毒净化效果。方法设计和制作纳米TiO2光催化空气净化消毒器样机。在封闭实验室将大肠埃希菌、克雷伯菌制成气雾，比较紫外线和纳米TiO2光催化空气净化消毒器消毒后残余细菌总数。在大型公共场所测试纳米TiO2光催化空气净化消毒器对空气净化和消毒的效率。结果纳米TiO2光催化空气净化消毒器由粗效过滤器、纳米TiO2光催化反应器、活性炭纤维吸附层、电空气负离子发生器和智能化微处理程序共5部分组成。纳米TiO2光催化法在30min、60min、90min、120min对空气大肠埃希菌的杀灭率分别为76．O％、81．8％、77．5％、80．7％。纳米TiO2光催化法上述时间点对空气克雷伯菌的杀灭率分别为78．4％、79．5％、67．3％、58．5％；30min、60min时间点紫外线对空气克雷伯菌的杀灭率56．1％、63．2％。结论纳米TiO2光催化空气净化消毒器的空气消毒效果等同或优于紫外线，可用于大型公共场所的空气净化和消毒作用。

关键词：钛纳米金属粒空气消毒

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microRNA与心脏疾病

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细胞生物学杂志 2008年第5期30卷 601-604页

作者：刘惠彬沈亚琪钟照华哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150081

microRNA是植物和动物基因组编码的小分子非编码RNA。这种高度保守、长21～25个碱基RNA分子通过与mRNA的3'非编码区结合来调控基因组表达。microRNA通过其转录后调控机制在胚胎发育、细胞增殖、细胞分化、细胞死亡及细胞凋亡中发挥... 详细信息

microRNA是植物和动物基因组编码的小分子非编码RNA。这种高度保守、长21～25个碱基RNA分子通过与mRNA的3'非编码区结合来调控基因组表达。microRNA通过其转录后调控机制在胚胎发育、细胞增殖、细胞分化、细胞死亡及细胞凋亡中发挥调控作用。近期研究发现,microRNA的异常表达可导致心脏疾病的发生、发展。现对microRNA在心脏发育、心肌肥厚和心肌重构、心力衰竭和心律失常等过程中的作用进行综述。

关键词： microRNA 心脏病心肌肥厚心力衰竭心律失常

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哈尔滨地区肺炎克雷伯菌质粒型AmpC酶基因型检测及耐药性分析

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中华医院感染学杂志 2008年第4期18卷 477-480页

作者：张文莉张凤民付英梅许建丰陈小贝马佳毓刘树林哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的确定哈尔滨地区临床分离产质粒型AmpC酶肺炎克雷伯菌基因型别,分析其耐药表型与基因的关系。方法收集临床分离头孢西丁抑菌环直径≤18mm的肺炎克雷伯菌,用6组PCR特异引物检测AmpC酶基因型别。结果231株肺炎克雷伯菌中,63株头孢西丁... 详细信息

目的确定哈尔滨地区临床分离产质粒型AmpC酶肺炎克雷伯菌基因型别,分析其耐药表型与基因的关系。方法收集临床分离头孢西丁抑菌环直径≤18mm的肺炎克雷伯菌,用6组PCR特异引物检测AmpC酶基因型别。结果231株肺炎克雷伯菌中,63株头孢西丁抑菌环直径≤18mm,其中产AmpC酶菌26株,占11.3%;PCR检测ACT、DHA和CIT型分别为13、8、5株,有5株菌同时产ACT型和DHA型AmpC酶,未检测到ACC、MOX和FOX型存在;AmpC阳性株对头孢西丁、头孢噻肟、头孢他啶、阿莫西林/克拉维酸、环丙沙星、阿米卡星、亚胺培南的耐药率分别是76.9%、70.2%、53.8%、50.0%、57.7%、38.5%、7.7%。结论哈尔滨地区产AmpC酶主要为ACT、DHA和CIT型,AmpC阳性株对头孢西丁和三代头孢菌素耐药性较高。

关键词：肺炎克雷伯菌 AmpC酶耐药基因

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哈尔滨地区肝炎患者血清中HBV DNA基因型分析

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哈尔滨医科大学学报 2008年第1期42卷 25-27页

作者：佟松李玉军苏辉包丽丽张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的分析哈尔滨地区乙型肝炎患者HBV基因型的分布情况。方法采用基因型特异性引物巢式聚合酶链式反应法对96例肝炎患者血清中HBV DNA基因型进行分析。结果96例肝炎患者中92例HBV DNA检测阳性,其中80例患者属于C基因型,占87.0%。2例为B... 详细信息

目的分析哈尔滨地区乙型肝炎患者HBV基因型的分布情况。方法采用基因型特异性引物巢式聚合酶链式反应法对96例肝炎患者血清中HBV DNA基因型进行分析。结果96例肝炎患者中92例HBV DNA检测阳性,其中80例患者属于C基因型,占87.0%。2例为B基因型,占2.2%。10例未检出型别。结论在哈尔滨地区HBV感染同时存在B和C基因型,以C基因型为主,且可能存在其他型别或发生基因突变。

关键词：乙型肝炎病毒聚合酶链反应基因型

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