检索结果-内蒙古大学图书馆

中国公共卫生 2008年第8期24卷 1004-1005页

作者：李庆海陈文江刘树林凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学微生物基因组学和病原学研究中心

目的研究表达Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）2F5表位的重组沙门菌（SA-2F5）对BALB／c小鼠的半数致死量（LD50），并观察其在小鼠体内的生物学分布。方法BALB／c小鼠随机分8组，以0，10^4～10^10菌落形成单位（CFU）重组菌灌胃，30d后... 详细信息

目的研究表达Ⅰ型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）2F5表位的重组沙门菌（SA-2F5）对BALB／c小鼠的半数致死量（LD50），并观察其在小鼠体内的生物学分布。方法BALB／c小鼠随机分8组，以0，10^4～10^10菌落形成单位（CFU）重组菌灌胃，30d后用改良寇氏法测定LD50;BALB／c小鼠随机分2组，灌胃给予10^7 CFU重组沙门菌或磷酸盐缓冲液（PBS），分别于感染后第3，9，16，30d，无菌操作取各组肝、脾、肠系膜淋巴结，检测重组沙门菌在小鼠体内的分布。结果SA-2F5对BALB／c小鼠的LD，0为1．45×10^9CFU；感染后第3d，肝、脾、肠系膜淋巴结活菌数依次为5．38×10^4，4．87×10^4，9．08×10^3CFU。第9d各脏器活菌数分别降至7．35×10^2，7．50×10^2及3．00×10^2CFU。第16d各脏器活菌数基本与第9d相当。之后各脏器中活菌数持续下降，至第30d肝、脾内检测不到活菌，肠系膜淋巴结内活菌为2．1×10^2CFU。结论重组沙门菌SA-2F5毒力显著降低，在小鼠体内具有良好的生物学分布。

关键词： Ⅰ型人类免疫缺陷病毒包膜表位重组鼠伤寒沙门菌半数致死量(LD50)

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癫痫患者脑组织海马神经元的形态变化和神经元特异性烯醇化酶表达

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中国地方病学杂志 2008年第6期27卷 641-643页

作者：谷佳睿李小光谷佳傲林志国靳占峰刘玉芳张凤民哈尔滨医科大学基础医学院微生物学教研室 150081 第一临床医学院神经外科基础医学院病理学和法医学教研室

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和... 详细信息

目的观察癫痫患者脑组织中海马齿状回颗粒细胞层神经元的形态学变化和神经元特异性烯醇化酶（NSE）在脑组织中的表达，探讨癫痫患者脑组织海马神经元的病理学改变与癫痫发病的关系。方法脑海马组织标本来自于癫痫手术切除病人（9例）和正常无精神与神经疾病的尸检者（20例）。HE染色，光镜下观察脑组织中海马区齿状回颗粒细胞层神经元形态学改变；免疫组织化学方法检测NSE表达，比较两组NSE阳性表达率。结果癫痫患者脑组织海马颗粒细胞层中均可见核固缩的神经元，约占全部神经元的15．80％，还可见到肿胀的神经元：NSE阳性表达的神经元呈棕黄色，在出现核固缩的神经元中，发生NSE阳性表达占28．66％；癫痫病人脑组织海马NSE阳性表达率为（7．9±5．6）％。对照组脑组织海马神经元形态正常，细胞核大而圆，位于胞体中央。核仁明显，NSE阳性表达率为（39．0±17．4）％。与对照组相比，癫痫患者含棕黄色颗粒的神经元数目减少，两组NSE阳性表达率比较，差异有统计学意义（t=-5．13，P〈0．01）。结论癫痫患者脑组织中海马神经元形态改变和NSE表达异常．可能是癫痫患者发病的主要因素之一。

关键词：癫痫海马神经元特异性烯醇化酶免疫组织化学

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人乳头瘤病毒16型E5基因克隆、原核表达及产物鉴定

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国际遗传学杂志 2008年第4期31卷 254-257页

作者：商庆龙王燕陈思佳李承刚魏兰兰郝美丽李立群谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室

目的克隆 HPV16 E5基因,构建原核重组工程菌并诱导表达,对表达产物 HPV16E5蛋白进行鉴定。方法提取宫颈癌组织 DNA 作为模板,用 PCR 方法扩增 HPV16 E5基因,经 BamH I和 HindⅢ双酶切后,插入相同酶切的 pET21b 载体质粒,转化 DH5α,筛... 详细信息

目的克隆 HPV16 E5基因,构建原核重组工程菌并诱导表达,对表达产物 HPV16E5蛋白进行鉴定。方法提取宫颈癌组织 DNA 作为模板,用 PCR 方法扩增 HPV16 E5基因,经 BamH I和 HindⅢ双酶切后,插入相同酶切的 pET21b 载体质粒,转化 DH5α,筛选阳性克隆。经酶切和测序鉴定后转化大肠埃希菌 BL21(DE3),建立重组工程菌株 pET21b-HPV16E5/BL21(DE3)。经 IPTG 诱导表达,SDS-PAGE 和 Western 印迹检测表达产物。结果 HPV16 E5基因扩增片段0.27kb。测定序列与 HPV16原型株 E5基因比较,出现4处核苷酸变异,分别为3979、4042、4077和4089位,引起144L和165V 氨基酸改变。重组质粒经酶切和序列测定证实构建正确。SDS-PAGE 分析重组菌在16 kDa处出现蛋白条带。该蛋白条带可被组氨酸标签单克隆抗体特异性识别。结论成功克隆 HPV16E5基因,并构建原核表达质粒,E5蛋白在 BL21(DE3)中表达。本实验为进一步研究 E5生物学活性、转化活性和肿瘤杀伤免疫作用奠定了实验基础。

关键词：人乳头瘤病毒16型 E5蛋白原核表达克隆

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学导式教学法在微生物学教学中的改革实践

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2008年第6期10卷 643-645页

作者：付英梅谷鸿喜钟照华张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室

在医学微生物学的理论教学中,使用病案导入式教学方法,并加强学生在学导式教学中的角色,相应的采取形成式考核方式,这些方式在提高学生学习能力的同时,增加了其综合分析能力、知识的灵活运用和交流能力,是培养创造型、开拓型、实用型医... 详细信息

在医学微生物学的理论教学中,使用病案导入式教学方法,并加强学生在学导式教学中的角色,相应的采取形成式考核方式,这些方式在提高学生学习能力的同时,增加了其综合分析能力、知识的灵活运用和交流能力,是培养创造型、开拓型、实用型医学人才过程中的一次有益尝试。

关键词：微生物学教学方法教学改革

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黑龙江省尖锐湿疣组织HPV感染的型别分析

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哈尔滨医科大学学报 2008年第2期42卷 131-134页

作者：郭庆云于智明李迪谷鸿喜庄敏哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学第一临床医学院皮肤科黑龙江哈尔滨150001

目的分析黑龙江省尖锐湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒(HPV)基因型分布情况,比较保守引物和序列特异引物PCR扩增方法。方法提取26例尖锐湿疣组织标本中DNA,用HPV L1区通用引物及HPV 6b、HPV11、HPV16、HPV18型L1区特异引物进行PCR扩增,分... 详细信息

目的分析黑龙江省尖锐湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒(HPV)基因型分布情况,比较保守引物和序列特异引物PCR扩增方法。方法提取26例尖锐湿疣组织标本中DNA,用HPV L1区通用引物及HPV 6b、HPV11、HPV16、HPV18型L1区特异引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布并比较两种扩增方法的结果。结果26例标本中,HPV 6b和11型感染例数分别为4和11例,各占15.4%和65.4%;HPV 16型感染2例,占总例数7.7%;有2例合并HPV6b/11型混合感染,占7.7%;1例合并HPV11/16/18型的混合感染,占3.8%。用通用引物扩增后26例标本中1例为阴性。结论黑龙江省地区尖锐湿疣组织HPV DNA检出率为100%,以低危型别11和6b型为主,偶见高危型别16、18型感染。鉴定HPV感染保守引物与型别特异性引物PCR方法相比,前者可导致少量假阴性产生。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒 L1区

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乙型肝炎病毒YMDD变异与基因型相关性的研究

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中华医院感染学杂志 2008年第9期18卷 1216-1218页

作者：李迪穆锦江徐维祯李桂秋房勇谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第二医院感染科黑龙江哈尔滨150086

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系。方法首先HBV 6个主要基因型(A^F)特异性多引物用巢式PCR法对175例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析,再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异... 详细信息

目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)发生YMDD基因变异与HBV基因型的关系。方法首先HBV 6个主要基因型(A^F)特异性多引物用巢式PCR法对175例接受拉米夫定抗病毒治疗患者的血清HBV DNA进行基因分型和分析,再采用实时荧光PCR法对标本进行YMDD变异检测。结果在175例标本中B、C、D基因型阳性率分别为9.1%、88.6%、2.3%;103例标本发生YMDD变异,YMDD总变异率、B、C基因型标本YMDD变异率分别为58.9%、62.5%5、8.1%;HBV B、C两基因型间的YMDD的变异率差异无统计学意义(P>0.05);在10例B基因型YMDD变异的标本中,有2例发生YIDD变异;其余8例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异;68例C基因型YMDD变异的标本中,有44例发生YIDD(YMDD+YIDD)变异、24例发生YVDD(YMDD+YVDD)变异;HBV B、C两基因型间的YMDD不同变异类型发生率差异有统计学意义。结论在拉米夫定抗病毒治疗2~4年,HBV YMDD变异率为58.9%;HBV B、C基因型标本间发生YMDD变异率差异无统计学意义;HBV B、C基因型标本基因变异类型差异均有统计学意义(χ2=5.5,P<0.05)。

关键词：乙型肝炎基因型拉米夫定 YMDD基因变异

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B组柯萨奇病毒感染对H9c2细胞microRNA表达谱的影响

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国际免疫学杂志 2008年第5期31卷 321-324页

作者：佟雷赵文然林乐勋武帅钦刘惠敏刘惠彬钟照华哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081

目的观察B组柯萨奇病毒感染对大鼠心肌来源的H9c2细胞microRNA表达谱的影响。方法用B组柯萨奇病毒3型Nancy株（CVB3）攻击成层和未成层的H9c2细胞，6h后收获总RNA，基因芯片检测microRNA表达谱。结果比对未成层与成层的H9c2细胞的micro... 详细信息

目的观察B组柯萨奇病毒感染对大鼠心肌来源的H9c2细胞microRNA表达谱的影响。方法用B组柯萨奇病毒3型Nancy株（CVB3）攻击成层和未成层的H9c2细胞，6h后收获总RNA，基因芯片检测microRNA表达谱。结果比对未成层与成层的H9c2细胞的microRNA表达谱，H9c2细胞成层后有54种microRNA表达显著下调，7种microRNA表达显著上调。与未感染病毒的未成层细胞比较，CVB3感染的未成层H9c2细胞有35种microRNA表达显著下调，9种microRNA表达显著上调。与成层H9c2细胞比较，CVB3感染成层H9c2细胞后，有20种microRNA的表达显著下调，16种microRNA的表达显著上调。结论细胞生长状态、CVB3攻击均显著改变了H9c2细胞microRNA表达谱。

关键词： B组柯萨奇病毒 H9c2细胞 microRNA 基因芯片心肌

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TNF-α与特发性血小板减少性紫癜患者激素抵抗的相关性研究

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哈尔滨医科大学学报 2008年第4期42卷 381-384页

作者：赵艳红周晋张凤民宋武琦哈尔滨医科大学第一临床医学院血液内科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的研究特发性血小板减少性紫癜(idiopathic thrombocytopenia purpura,ITP)患者肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达及其对糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)表达的影响,探讨TNF-α与糖皮质激素抵抗的相关性。方法ELISA方法检测ITP激素敏感型、激素抵抗型患者及正常对照组的血浆中TNF-α的含量;分离健康志愿者外周血单个核细胞(PBMC),一组用TNF-α刺激培养,一组单独培养作为对照,分别采用RT-PCR方法及Western blot法分析其GRα和GRβmRNA及蛋白表达的变化。结果血浆TNF-α浓度在ITP患者激素敏感组、激素抵抗组、正常对照组分别为(13.69±4.92)pg/mL、(19.73±4.66)pg/mL、(7.51±2.79)pg/mL,二组ITP患者血浆中TNF-α的含量均高于正常对照组(P<0.01),其中激素抵抗组ITP患者血浆中TNF-α的含量高于激素敏感组(P<0.05);经TNF-α刺激培养24 h后,培养组与对照组GRα/GAPDHmRNA分别为1.16±0.73,1.20±0.51,培养组与对照组相比,其GRαmRNA表达无显著变化(P>0.05);培养组与对照组GRβ/GAPDHmRNA分别为1.62±0.59,0.81±0.66,培养组与对照组相比,GRβmRNA表达明显增加(P<0.05);GRα蛋白的表达在各组之间无显著差别,但GRβ蛋白的表达在TNF-α刺激组较对照组明显增高。结论ITP激素抵抗型患者血浆TNF-α含量增高;TNF-α可以增加PBMC中GRβ的表达,这可能是炎性细胞因子诱发糖皮质激素抵抗的内在机制。

关键词：肿瘤坏死因子-α 特发性血小板减少性紫癜糖皮质激素受体糖皮质激素抵抗

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通用引物PCR研究进展

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国际检验医学杂志 2008年第6期29卷 522-524页

作者：袁晓辉（综述）曲章义（综述）王迎晨（综述）陈晶（综述）曲章义（审校）哈尔滨医科大学卫生微生物学教研室 150081

通用引物PCR是应用与不同序列的保守区互补的通用引物,来进行PCR扩增,它能够高通量地对相关微生物或其亚型进行检测与鉴定分型,是一种简便、快速、灵敏、特异的鉴定分型方法,目前广泛应用于病毒、细菌、支原体及真菌等微生物的检测与鉴定。

关键词：聚合酶链反应 DNA引物保守序列蛋白质亚型临床实验室技术

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粗提和纯化的HPV16L1重组蛋白为抗原的ELISA比较

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微生物学杂志 2008年第2期28卷 36-39页

作者：李茉王燕陈思佳魏兰兰谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

为评价真核及原核细胞表达的HPV16L1粗提蛋白代替纯化的16L1蛋白作为ELISA检测抗原的可行性。实验分别用大肠埃希菌表达的HPV16L1纯化蛋白,表达16L1的大肠埃希菌破碎物及表达16L1的昆虫细胞破碎物作为抗原。在ELISA试验中与抗HPV16L1的... 详细信息

为评价真核及原核细胞表达的HPV16L1粗提蛋白代替纯化的16L1蛋白作为ELISA检测抗原的可行性。实验分别用大肠埃希菌表达的HPV16L1纯化蛋白,表达16L1的大肠埃希菌破碎物及表达16L1的昆虫细胞破碎物作为抗原。在ELISA试验中与抗HPV16L1的单克隆抗体进行反应。结果证实3种包被抗原可以得出非常相近的OD值变化趋势。表明用表达16L1的大肠埃希菌破碎物和表达16L1的昆虫细胞破碎物可以代替纯化的HPV16L1蛋白作为抗原进行ELISA试验。

关键词： HPV16LI 重组蛋白 ELISA

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