检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2005年第3期39卷 215-217页

作者：孙艳影李晓波钟照华孙博陈小雅哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的研究硝酸甘油(GTN)和硝酸异山梨酯(ISDN)对柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的体外抑制作用。方法用Hela细胞扩增并收获柯萨奇B组3型病毒(CVB3)后,测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑形成单位(PFU),应用MTT法测定实验所用药物的... 详细信息

目的研究硝酸甘油(GTN)和硝酸异山梨酯(ISDN)对柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的体外抑制作用。方法用Hela细胞扩增并收获柯萨奇B组3型病毒(CVB3)后,测定CVB3的半数组织培养感染剂量(TCID50)和空斑形成单位(PFU),应用MTT法测定实验所用药物的细胞毒性,用细胞病变效应(CPE)抑制实验和空斑减少实验,观察和分析研究GTN、ISDN对CVB3的抑制作用。结果GTN、ISDN可以明显抑制病毒的细胞病变效应以及空斑形成(P<0.05)。结论GTN、ISDN等临床常用于抗心绞痛的硝酸酯类药物具有明确的抗CVB3感染Hela细胞的作用。

关键词：硝酸甘油硝酸异山梨酯柯萨奇病毒一氧化氮

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华支睾吸虫病大鼠肝细胞凋亡的实验研究

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哈尔滨医科大学学报 2005年第1期39卷 55-57页

作者：张晓丽李懿宏王凯慧崔洪波哈尔滨医科大学寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　研究感染华支睾吸虫的大鼠肝细胞是否存在凋亡。方法　分离获得采自疫区麦穗鱼体内的囊蚴 ,分别以 5 0个、10 0个和 2 0 0个囊蚴经口饲法感染 3组实验大鼠 ,同时设立对照组。于感染后第 4 5天宰杀动物 ,取肝脏作组织切片。采用TU... 详细信息

目的　研究感染华支睾吸虫的大鼠肝细胞是否存在凋亡。方法　分离获得采自疫区麦穗鱼体内的囊蚴 ,分别以 5 0个、10 0个和 2 0 0个囊蚴经口饲法感染 3组实验大鼠 ,同时设立对照组。于感染后第 4 5天宰杀动物 ,取肝脏作组织切片。采用TUNEL法检测肝细胞的凋亡率。结果　观察有典型细胞凋亡形态学特征的肝细胞。感染组大鼠肝细胞凋亡率显著高于正常对照组。结论　感染华支睾吸虫的大鼠肝细胞存在凋亡。

关键词：华支睾吸虫病肝细胞凋亡大鼠

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SIVmac239对猕猴B淋巴细胞生长活性的抑制

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中国公共卫生 2005年第10期21卷 1195-1196页

作者：姚振江王滨有赵景波李洪源高桥めぐみ高桥秀实哈尔滨医科大学公共卫生学院哈尔滨150086 日本医科大学微生物学免疫学教研室

目的探讨恒河猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)感染CD4+T淋巴细胞后,可否产生某些抑制B淋巴细胞生长的活性因子,为HIV/AIDS病原学研究提供线索。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)实验观察不同时间收集的SIV-mac239感染的CD4+T淋巴细胞上清和未感染... 详细信息

目的探讨恒河猴免疫缺陷病毒(SIVmac239)感染CD4+T淋巴细胞后,可否产生某些抑制B淋巴细胞生长的活性因子,为HIV/AIDS病原学研究提供线索。方法用四甲基偶氮噻唑蓝(MTT)实验观察不同时间收集的SIV-mac239感染的CD4+T淋巴细胞上清和未感染SIVmac239的CD4+T淋巴细胞的上清对猕猴B淋巴细胞生长的抑制作用,用3H thymidine uptake assay判断其是否抑制B淋巴细胞的DNA合成,用凝胶电泳方法检测DNA合成抑制的凋亡机制,用Western blot方法检测Cyclin D1的表达情况。结果SIVmac239感染的CD4+T淋巴细胞上清含有抑制猕猴B淋巴细胞生长的因子,其抑制效果随作用时间的延长而增加。这些因子可较强的抑制CD4+T淋巴细胞的DNA合成,最高抑制率可达81%。凝胶电泳试验结果未见DNA梯状条带。Western blot试验发现Cyclin D1表达被抑制。结论SIVmac239感染CD4+T淋巴细胞可产生抑制B淋巴细胞生长的因子。此因子可较强的抑制猕猴B淋巴细胞DNA的合成,但并不引起B淋巴细胞凋亡。其主要机制为抑制猕猴B淋巴细胞的细胞周期蛋白D1的产生,使B淋巴细胞停止在G1期,即抑制作用的主要机制为细胞被捕获在细胞周期的G1期。

关键词： SIVmac239 CD4^+T淋巴细胞 B淋巴细胞抑制机制

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尖锐湿疣组织中HPV型别检测及HPV11型L1基因的克隆与测序

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中国皮肤性病学杂志 2005年第9期19卷 519-521页

作者：庄敏谷鸿喜魏兰兰刘希君李迪崔洪波孔卫兰哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第一医院皮肤科黑龙江哈尔滨150086

目的分析黑龙江地区尖锐湿疣组织感染的HPV型别分布情况,并对HPV11型流行株L1基因进行克隆和测序,检测序列变异情况。方法提取30例尖锐湿疣组织标本中的DNA,用HPVL1区通用引物及特异性HPV6b,11,16,18型引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组... 详细信息

目的分析黑龙江地区尖锐湿疣组织感染的HPV型别分布情况,并对HPV11型流行株L1基因进行克隆和测序,检测序列变异情况。方法提取30例尖锐湿疣组织标本中的DNA,用HPVL1区通用引物及特异性HPV6b,11,16,18型引物进行PCR扩增,分析尖锐湿疣组织中感染的HPV型别分布。对其中4株HPV11型阳性标本L1基因,经酶切、连接,分别构建pSP73-HPV11L1重组质粒,并对其L1片段进行测序。结果30例标本中,HPV6b和11型感染数分别为11例,各占36.7%;有2例合并HPV6b/11/16型的混合感染,占总病例数的6.7%;1例HPV16型单独感染,未鉴定出HPV18型感染,其他型别5例。pSP73HPV11L1重组质粒测序后,4株HPV11L1基因序列完全一致,可认为是黑龙江省流行株。其序列与原始株序列相比,仅发现了两处同义点突变。结论黑龙江地区尖锐湿疣组织中HPVDNA检出率为100%,以6b和11型为主,偶见高危型别16型感染。克隆测序表明黑龙江省流行株HPV11型L1基因高度保守。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒 L1基因

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V3环缺失的HIV-1 ADA株包膜表达载体构建及鉴定

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哈尔滨医科大学学报 2005年第3期39卷 208-210页

作者：李妍周海舟服部俊夫凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室日本东北大学大学院医学系研究科感染症呼吸病态学分野哈尔滨医科大学寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的构建V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,进行HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体的构建。得到的PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,与pSM载体连接,构建HIV1ADA株... 详细信息

目的构建V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白表达体系。方法分别设计包膜糖蛋白两端及V3环两端的两对引物,采用重叠延伸剪接法,进行HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体的构建。得到的PCR产物经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,与pSM载体连接,构建HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失的表达载体(pSMADAΔV3),转化大肠杆菌后筛选阳性克隆,经PCR及基因序列测定进行鉴定。结果获得HIV1ADA株包膜糖蛋白V3环缺失体PCR产物,构建了其表达载体pSMADAΔV3,经转化和筛选获得了重组菌,经PCR及基因测序结果显示重组质粒序列正确,为预期目的片段。结论成功构建了V3环缺失的HIV1ADA株包膜糖蛋白的表达载体。此结果为进一步构建伪病毒,观察V3环完全或部分缺失对病毒侵入靶细胞过程的影响,为开发阻止HIV1进入靶细胞的药物或疫苗打下基础。

关键词： HIV-1 V3环缺失重叠延伸剪接法

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硝酸甘油抗B组柯萨奇病毒的作用特点和机制

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哈尔滨医科大学学报 2005年第5期39卷 399-401页

作者：李晓波曾明孙艳影史巧云钟照华田野谷鸿喜张凤民周昌伟哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 基础医学研究所黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学黑龙江哈尔滨150086

目的研究硝酸甘油(GTN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用特点和机制。方法比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异;分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞... 详细信息

目的研究硝酸甘油(GTN)抗柯萨奇B组3型病毒(CVB3)的作用特点和机制。方法比较先经GTN预处理及与GTN同时加入的两种处理方法相同滴度的病毒所引起的CPE抑制率的差异;分别测定并比较多次给予GTN及不同时间点给予GTN对CVB3感染的HeLa细胞组间的细胞病变效应抑制效果;测定GTN在HeLa细胞中不同时间点代谢产生的NO浓度,并做NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果的相关性分析。结果预加GTN组与同时加GTN组经等量病毒攻击所引起的CPE无显著性差异(P>0.05);多次给药的组间CPE抑制率无显著性差异(P>0.05),但不同时间点给药的组间CPE抑制率具有显著差异(P<0.05),NO浓度与不同时间点给予GTN的细胞病变效应抑制结果呈正相关(r=0.97,P<0.01)。结论GTN是通过其代谢产物NO来发挥抗CVB3作用的。

关键词：硝酸甘油柯萨奇病毒一氧化氮

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抗感染免疫中CD14/TLR-MD-2复合体的信号转导作用

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生命的化学 2005年第3期25卷 205-208页

作者：宋岩李琳李一经东北农业大学动物医学学院微生物学与免疫学教研室哈尔滨150030 哈尔滨医科大学临床医学院哈尔滨150048

TOLL样受体(TOLL-likereceptor,TLR)是近年发现的一族天然受体,在机体内其主要成员可与MD-2蛋白及CD14结合形成CD14/TLR-MD-2复合体,特异性识别多种病原微生物,通过偶联信号转导途径,激活机体的免疫细胞,产生一系列的炎症反应,在抗感染... 详细信息

TOLL样受体(TOLL-likereceptor,TLR)是近年发现的一族天然受体,在机体内其主要成员可与MD-2蛋白及CD14结合形成CD14/TLR-MD-2复合体,特异性识别多种病原微生物,通过偶联信号转导途径,激活机体的免疫细胞,产生一系列的炎症反应,在抗感染免疫中发挥重要作用。

关键词： CDl4/TLR-MD-2复合体 TLR MD-2蛋白 CDl4 抗感染免疫信号转导

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HPV 6b L1基因原核表达系统的构建及鉴定

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微生物学杂志 2005年第4期25卷 25-27页

作者：刘希君庄敏商庆龙王燕魏兰兰李迪谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

克隆、构建人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)L1基因重组质粒,并进行表达和鉴定。用PCR方法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV6b型L1基因,构建重组克隆质粒pblue-HPV6bL1,测序分析其基因变异。将本地株HPV6b型L1基因酶切后连接到原核表达质粒pBAD,构建... 详细信息

克隆、构建人乳头瘤病毒6b型(HPV6b)L1基因重组质粒,并进行表达和鉴定。用PCR方法,从尖锐湿疣标本中扩增出HPV6b型L1基因,构建重组克隆质粒pblue-HPV6bL1,测序分析其基因变异。将本地株HPV6b型L1基因酶切后连接到原核表达质粒pBAD,构建原核表达系统pBAD-HPV6bL1/Top10,酶切鉴定证明重组质粒的正确性。经L-Arobinose诱导后表达HPV6b型L1蛋白,利用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。经酶切及序列分析鉴定,重组质粒pBAD-HPV6bL1构建成功,诱导后能够表达L1融合蛋白。HPV6bL1重组质粒构建成功,并获得HPV6bL1蛋白,为该蛋白的功能及HPV的基因工程疫苗研究提供了物质基础。

关键词：尖锐湿疣人乳头瘤病毒6b型 L1基因基因克隆基因表达原核表达系统酶切鉴定质粒构建 HPV 基因重组质粒

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HIV-1疫苗研究新策略

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中国艾滋病性病 2005年第6期11卷 468-470,473页

作者：钟国才李妍凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室寄生虫学教研室黑龙江哈尔滨150086

1981年发现艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)以来的20年间,AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和非洲地区人口死亡的首要原因.来自联合国艾滋病规划署(UNAIDS)最新的流行病学统计数据显示,到2004年底,全球感染艾滋病病毒... 详细信息

1981年发现艾滋病(Acquired immunodeficiency syndrome,AIDS)以来的20年间,AIDS已成为全球最严重的感染性疾病和非洲地区人口死亡的首要原因.来自联合国艾滋病规划署(UNAIDS)最新的流行病学统计数据显示,到2004年底,全球感染艾滋病病毒(HIV)的人已达3 940万,较前一年新增490万(http://***).HIV感染正以前所未有的速度蔓延,预防性疫苗是最有前景的控制HIV感染的策略,却面临着诸多科学的挑战,如:(1)缺乏对免疫与保护相关性的了解;(2)对灵长类保护试验与人体保护性疫苗相关性的知识有限;(3)HIV基因的变异及由此导致的病毒免疫学性状的变异对疫苗效力的影响.尽管如此,科学界一致认为研制出安全、有效的HIV疫苗完全可能.

关键词： immunodeficiency HIV-1 疫苗研究联合国艾滋病规划署 syndrome 感染性疾病艾滋病病毒 HIV感染免疫学性状流行病学统计

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荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法在临床的应用评价

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世界华人消化杂志 2005年第11期13卷 1291-1294页

作者：张淑云刘伟李迪谷鸿喜仰曙芬周志红杜博金茜常曼丽哈尔滨医科大学附属第二医院科研实验中心黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探... 详细信息

目的:对国产荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测乙型肝炎病毒聚合酶酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸基序(HBVYMDD)变异的试剂进行临床应用评价.方法:慢性乙型肝炎患者外周血浆标本217份,分别采用荧光标记Taqman探针定量PCR法(FT—PCR)和荧光标记杂交双探针PCR融解曲线法(FH—PCR—MC)检测HBVDNA含量和YMDD及其变异;其中78份HBVDNA阳性标本采用基因型特异性多引物对巢式PCR法进行基因分型(A—F),30份标本用PCR产物克隆测序法检测HBVYMDD及其变异.结果:血浆标本HBVDNA阳性率(≥1.0×106copies/L)为75.6%(164/217).YMDD及其变异检出率为67.7%(147/217).其中YMDD44.9%(66/147),YIDD22.5%(33/147).YVDD17.7%(26/147),YIDD/YVDD混合株10.9%(16/147),其他混合株4.0%(6/147);结合HBVDNA含量,HBVYMDD及其变异的检出下限为HBVDNA=5.0×106copies/L,但在106copies/L时检出率较低,仅为36.4%,随着HBVDNA含量增高,检出率显著增高(>80%),且在107copies/L时即有显著增高(χ2=7.177,P<0.01).在基因分型的78份标本中,C基因型占89.8%,B和D基因型分别占8.9%和1.3%,YMDD及其变异总检出率为100%,变异总检出率为59.0%;1份D基因型YMDD及其变异检测为YIDD/YVDD混合变异;B,C两种基因型变异检出率分别为71.4%和55.7%,但二者无统计学差异.以测序法的检测结果为相对标准,则FH—PCR—MC法检测HBVYMDD及其变异的相对敏感性、特异性和符合率分别为96.3%(26/27),100%(3/3)和96.7%(29/30);对于HBVYMDD及其变异的类型,两种方法检测结果一致.结论:FH—PCR—MC法是一种快速、特异的HBVYMDD及其变异检测方法,具有较高的检出率,且能区分YMDD及其变异的类型.

关键词：荧光标记曲线法双探针融解杂交乙型肝炎病毒聚合酶慢性乙型肝炎患者 DNA含量 YMDD 天门冬氨酸临床应用评价定量PCR法 Taqman 巢式PCR法 HBV 血浆标本基因分型 D基因型总检出率检测结果克隆测序法 PCR产物基因型变异

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