检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2003年第2期37卷 131-132,F003页

作者：韩振民谢遵江崔宏波刘颖贺业春哈尔滨医科大学解剖学教研室微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　探讨肠系膜淋巴结在病毒诱导的黏膜免疫应答中的形态特征。方法　采用荧光免疫组织化学和电镜方法 ,观察 30只BALB c小鼠灌服柯萨奇病毒后肠系膜淋巴结内淋巴细胞的组织学特征。结果　光镜下可见肠系膜淋巴结中淋巴小结和副皮质... 详细信息

目的　探讨肠系膜淋巴结在病毒诱导的黏膜免疫应答中的形态特征。方法　采用荧光免疫组织化学和电镜方法 ,观察 30只BALB c小鼠灌服柯萨奇病毒后肠系膜淋巴结内淋巴细胞的组织学特征。结果　光镜下可见肠系膜淋巴结中淋巴小结和副皮质区淋巴细胞增生活跃 ,荧光免疫组化方法观察肠系膜淋巴结中CD4 和CD8阳性细胞明显增多 (P值均 <0 .0 1)。电镜下淋巴细胞增生活跃 ,表现为淋巴细胞大小不等 ,多见细胞分裂相 ,可见大量的巨噬细胞淋巴细胞丛和树突状细胞淋巴细胞丛。结论　柯萨奇病毒可诱导小鼠肠系膜淋巴结的免疫应答。

关键词：小鼠肠系膜淋巴结黏膜免疫应答形态学观察

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硒对人脐静脉内皮细胞ECV-304单核细胞趋化蛋白-1表达的影响

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中国地方病学杂志 2003年第3期22卷 221-222页

作者：李艳波邓华聪郑丹李呼伦周宏博重庆医科大学附属一院内分泌科重庆400016 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学生物化学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　观察硒对人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达的影响。方法　分别用高葡萄糖、糖基化终末产物 ,高胰岛素和过氧化氢孵育人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4 ;在先加入 10 0 nmol/L硒后 ,再给予以上 4种因素 ,分... 详细信息

目的　观察硒对人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4单核细胞趋化蛋白 - 1(MCP- 1)表达的影响。方法　分别用高葡萄糖、糖基化终末产物 ,高胰岛素和过氧化氢孵育人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4 ;在先加入 10 0 nmol/L硒后 ,再给予以上 4种因素 ,分别检测人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4 MCP- 1m RNA的表达并比较。结果　 4种因素均可作为独立因素 ,导致人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4 MCP- 1m RNA表达量增加 ;硒能抑制 4种因素所致的MCP- 1m RNA表达。结论　硒抑制 MCP- 1m RNA在人脐静脉内皮细胞 ECV- 30 4中的表达。

关键词：硒脐静脉内皮细胞 ECV-304 单核细胞趋化蛋白-1 动脉粥样硬化抗氧化剂

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小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞在黏膜免疫应答中的形态学观察

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哈尔滨医科大学学报 2003年第2期37卷 135-136,F003页

作者：李志春谢遵江崔宏波刘颖贺业春哈尔滨医科大学解剖学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　探讨回肠黏膜固有层淋巴细胞在抗原诱导下的黏膜免疫应答中的形态特征。方法　采用光镜和电镜方法 ,观察BALB/c小鼠灌服伤寒杆菌后回肠黏膜固有层淋巴细胞的组织学特征。结果　光镜下黏膜固有层可见形态各异的淋巴细胞。电镜下可... 详细信息

目的　探讨回肠黏膜固有层淋巴细胞在抗原诱导下的黏膜免疫应答中的形态特征。方法　采用光镜和电镜方法 ,观察BALB/c小鼠灌服伤寒杆菌后回肠黏膜固有层淋巴细胞的组织学特征。结果　光镜下黏膜固有层可见形态各异的淋巴细胞。电镜下可见大量胞浆丰富而浅淡的淋巴细胞 ,有些淋巴细胞的突起穿越上皮的基膜 ,并可见大量浆细胞或浆细胞前体细胞 ,内质网丰富 ,可见其扩张形成囊泡和Russell小体。结论　伤寒杆菌可诱导小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞的免疫应答。

关键词：小鼠回肠黏膜固有层淋巴细胞免疫应答

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流感病毒RNA聚合酶的分离与纯化

流感病毒RNA聚合酶的分离与纯化

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作者：曲章义赵育莹崔洪波石浜明谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

流感病毒的RNA pol是由3个亚基组成的复合物,这3个亚基统称为3P蛋白,分别由2个碱性亚基PB1、PB2和1个酸性亚基PA组成。在病毒体内,3P与RNA形成较紧密的3P-RNA复合物,该复合物又往往与NP形成核蛋白体(ribonucleoprotein, RNP)。3P与RNA及... 详细信息

流感病毒的RNA pol是由3个亚基组成的复合物,这3个亚基统称为3P蛋白,分别由2个碱性亚基PB1、PB2和1个酸性亚基PA组成。在病毒体内,3P与RNA形成较紧密的3P-RNA复合物,该复合物又往往与NP形成核蛋白体(ribonucleoprotein, RNP)。3P与RNA及3P-RN与NP之间结合都比较紧密,三者之间不易被分离。本文用不同介质组合

关键词：流感病毒 RNP 聚合酶 RNA 分离与纯化

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开展读书报告活动,提高学生科学素质

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山西医科大学学报（基础医学教育版） 2003年第4期5卷 374-375页

作者：谷鸿喜张凤民钟照华程志哈尔滨医科大学微生物学教研室

七年制医学微生物学教学过程中,连续多年以第二课堂方式开展本专业读书报告活动,调动了学生主动学习的积极性,培养了学生阅读、总结、表达等多种能力,达到了提高学生科学素质的目的.

关键词：读书报告医学生科学素质七年制医学微生物学教学过程医学教育

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重组原核表达载体pQE30-HPV58L1的构建及鉴定

重组原核表达载体pQE30-HPV58L1的构建及鉴定

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作者：肖鹏谷鸿喜王晶李迪凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学附属三院妇科哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

目的构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV58 L1完整编码区基因,将PCR扩增产物克隆至pUC19质粒中并测序。利用 pQE30质粒载体构建重组原核表达载体pQE30-... 详细信息

目的构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础。方法用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV58 L1完整编码区基因,将PCR扩增产物克隆至pUC19质粒中并测序。利用 pQE30质粒载体构建重组原核表达载体pQE30-HPV58L1,并通过酶切电泳验证重组结果的正确性。结果 PER扩增出1．6Kb特异性片段,经克隆至pUC19后测序表明序列同源性与GenBank报道一致。重组质粒pQE30-HPV58L1 酶切后显示其大小约5．1Kb,酶切图谱与预期相同。结论成功构建了重组原核表达载体pQE30-HPV58L1。

关键词：人乳头瘤病毒58型 L1基因基因重组

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流感病毒RNA聚合酶PA亚基重组质粒pQE32-PA-2转化效率的实验研究

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齐齐哈尔医学院学报 2003年第2期24卷 121-123页

作者：郭英曲章义哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086

目的　将甲型流感病毒RNA聚合酶PA亚基的基因工程重组质粒pQE3 2 -PA - 2转化入受体菌 ,并优化转化条件 ,以建立其高效、快速的转化体系。方法　以大肠杆菌DH5α菌株为受体菌 ,研究了氯化钙溶液浓度 ( 0、2 5、5 0、75、10 0、15 0mmol/... 详细信息

目的　将甲型流感病毒RNA聚合酶PA亚基的基因工程重组质粒pQE3 2 -PA - 2转化入受体菌 ,并优化转化条件 ,以建立其高效、快速的转化体系。方法　以大肠杆菌DH5α菌株为受体菌 ,研究了氯化钙溶液浓度 ( 0、2 5、5 0、75、10 0、15 0mmol/L) ,热休克温度 ( 0、3 0、3 7、42、5 0℃ ) ,转化时间 ( 7、15、3 0、45、60、75、90、10 5、12 0min)及转化后的温浴时间 ( 0、0 .5、1、1.5、2hr)对基因工程重组质粒pQE3 2 -PA - 2转化效率的影响。结果　氯化钙溶液浓度及热休克温度对转化效率的影响极为显著 ,转化时间在一定范围内对转化效率有明显的影响 ,而转化后的温浴时间对转化效率的影响不明显。结论　在本实验条件下 ,以 75mmol/L氯化钙制备感受态细胞 ,转化 3 0分钟 ,经 42℃热休克作用 90秒后直接涂平板选择转化子 ,可获得高效。

关键词：流感病毒重组质粒基因工程亚基 RNA 聚合酶 PA PBl PB2

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HPV16 L1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化

HPV16 L1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化

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作者：包广宇林道虹庄敏隋丽华王静李迪谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学附属三院哈尔滨医科大学附属三院哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

目的建立HPV16L1蛋白原核表达系统的纯化方法,纯化目的蛋白。方法构建pGEX4T-HPV16L1表达质粒。在大肠杆菌BL21表达系统中表达,经过包涵体提取,8mol／L尿素溶解,分级透析除去尿素,亲和层析进行提纯。结果 HPV16LI蛋白在原核表达系统以... 详细信息

目的建立HPV16L1蛋白原核表达系统的纯化方法,纯化目的蛋白。方法构建pGEX4T-HPV16L1表达质粒。在大肠杆菌BL21表达系统中表达,经过包涵体提取,8mol／L尿素溶解,分级透析除去尿素,亲和层析进行提纯。结果 HPV16LI蛋白在原核表达系统以不溶性包涵体形式存在,通过本方法可以获得纯化的蛋白。结论建立了一套纯化HPV16L1蛋白的方法。为研究HPV16L1的应用研究打下了基础。

关键词：人乳头瘤病毒16型原核表达系统晚期蛋白纯化

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HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究

HPV16 L1蛋白在大肠杆菌中的表达、纯化及免疫原性研究

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作者：商庆龙谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

用IPTG诱导目的工程菌pQE31-HPV16L1／M15(pREP4),对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;用表达的L1蛋白免疫BALB／C小鼠得到抗血清后,利用真核源性的VLP粗提物验证小鼠抗血清的特异性。利用 IMAC金属亲和层析柱纯化L1蛋白。SDS-P... 详细信息

用IPTG诱导目的工程菌pQE31-HPV16L1／M15(pREP4),对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析;用表达的L1蛋白免疫BALB／C小鼠得到抗血清后,利用真核源性的VLP粗提物验证小鼠抗血清的特异性。利用 IMAC金属亲和层析柱纯化L1蛋白。SDS-PAGE结果显示表达产物在57ku处有蛋白条带;Western blot结果证实此条带可与HPV16 L1蛋白的单克隆抗体反应;纯化后的L1蛋白也同样保留免疫特异性;小鼠抗血清可与HPV16L1 VLP(病毒样颗粒)发生特异性反应,证实重组表达的L1蛋白具有免疫原性。本实验表明HPV16 L1蛋白在工程菌 M15(pREP4)中高效表达,为研制HPV16预防性基因工程疫苗和感染的诊断试剂提供了物质基础和技术方法。

关键词：人乳头瘤病毒16型 L1蛋白表达免疫原性

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16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达

16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达

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作者：魏兰兰谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室

为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。首先构建了2株重组杆状病毒转移质粒,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组... 详细信息

为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达。首先构建了2株重组杆状病毒转移质粒,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组,获得2株重组杆状病毒。经鉴定该重组中有目的基因存在且可表达所编码的L1和L2晚期蛋白。结果表明HPV16型晚期蛋白在昆虫细胞中获得成功表达,为HPV16型预防性基因工程亚单位疫苗的研制和诊断试剂的研究开发奠定了基础。

关键词：人乳头瘤病毒16型病毒样颗粒重组杆状病毒

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