检索结果-内蒙古大学图书馆

哈尔滨医科大学学报 2003年第2期37卷 102-103页

作者：赵彦玲马培林徐晋薛雅丽张凤民傅松滨哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学医学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　探讨非小细胞肺腺癌与肺鳞癌DNA标本中EB病毒 (Epstein Barrvirus,EBV)的存在情况 ,以及EBV与非小细胞肺癌的关系。方法　以非小细胞肺腺癌和肺鳞癌DNA标本为模板 ,EBV持续感染细胞系B95 8细胞DNA为阳性对照 ,用PCR方法扩增EBV的... 详细信息

目的　探讨非小细胞肺腺癌与肺鳞癌DNA标本中EB病毒 (Epstein Barrvirus,EBV)的存在情况 ,以及EBV与非小细胞肺癌的关系。方法　以非小细胞肺腺癌和肺鳞癌DNA标本为模板 ,EBV持续感染细胞系B95 8细胞DNA为阳性对照 ,用PCR方法扩增EBV的BamHI W部分片段。结果　在 5 3例非小细胞肺癌标本中有 36例扩增出EBV基因的特异性产物 ,PCR扩增产物为 12 9bp ,与目的片段一致。其中肺腺癌中EBV基因的阳性检出率为 94 .1% (16 17) ,肺鳞癌中的阳性检出率为 5 5 .6 % (2 0 36 )。结论　非小细胞肺癌DNA标本中有EBV基因的存在 ,其阳性检出率与非小细胞肺癌的病理类型有关。

关键词：原发性非小细胞肺癌 DNA 标本 EBV基因 PCR扩增

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16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达

16型人乳头瘤病毒衣壳蛋白在真核细胞中的表达

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黑龙江省免疫学会成立十周年学术会议

作者：魏兰兰谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达.本文首先构建了2株重组杆状病毒转移质粒,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源... 详细信息

为了构建HPV16型晚期蛋白重组杆状病毒,并使其在昆虫细胞中获得高效表达.本文首先构建了2株重组杆状病毒转移质粒,分别携带人乳头瘤病毒晚期基因L1及L1和L2,再用线性化的杆状病毒DNA与该重组杆状病毒转移质粒共转染sf9昆虫细胞进行同源重组,获得2株重组杆状病毒.经鉴定该重组中有目的基因存在且可表达所编码的L1和L2晚期蛋白.结果表明HPV16型晚期蛋白在昆虫细胞中获得成功表达,为HPV16型预防性基因工程亚单位疫苗的研制和诊断试剂的研究开发奠定了基础.

关键词：人乳头瘤病毒病毒样颗粒重组杆状病毒真核细胞衣壳蛋白

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HPV16 L1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化

HPV16 L1蛋白在原核表达系统中的表达与纯化

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黑龙江省免疫学会成立十周年学术会议

作者：包广宇林道虹庄敏隋丽华王静李迪谷鸿喜哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属三院哈尔滨150040

本文建立了HPV16L1蛋白原核表达系统的纯化方法,纯化目的蛋白.方法：构建pGEX4T-HPV16L1表达质粒.在大肠杆菌BL21表达系统中表达,经过包涵体提取,8mol/L尿素溶解,分级透析除去尿素,亲和层析进行提纯.结果：HPV16L1蛋白在原核表达系统以... 详细信息

本文建立了HPV16L1蛋白原核表达系统的纯化方法,纯化目的蛋白.方法：构建pGEX4T-HPV16L1表达质粒.在大肠杆菌BL21表达系统中表达,经过包涵体提取,8mol/L尿素溶解,分级透析除去尿素,亲和层析进行提纯.结果：HPV16L1蛋白在原核表达系统以不溶性包涵体形式存在,通过本方法可以获得纯化的蛋白.结论：建立了一套纯化HPV16L1蛋白的方法.为研究HPV16L1的应用研究打下了基础.

关键词：人乳头瘤病毒原核表达系统晚期蛋白纯化大肠杆菌

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重组原核表达载体pQE30-HPV58L1的构建及鉴定

重组原核表达载体pQE30-HPV58L1的构建及鉴定

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黑龙江省免疫学会成立十周年学术会议

作者：肖鹏谷鸿喜王晶李迪凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属三院妇科哈尔滨150040

本文研究了构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础.方法：用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV58L1完整编码区基因,将PCR扩增产物克隆至pUC19质粒中并测序.利用pQE30质粒载体构建重组原核表达载体pQ... 详细信息

本文研究了构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础.方法：用聚合酶链反应(PCR)扩增HPV58L1完整编码区基因,将PCR扩增产物克隆至pUC19质粒中并测序.利用pQE30质粒载体构建重组原核表达载体pQE30-HPV58L1,并通过酶切电泳验证重组结果的正确性.结果：PCR扩增出1.6Kb特异性片段,经克隆至pUC19后测序表明序列同源性与GenBank报道一致.重组质粒pQE30-HPV58L1酶切后显示其大小约51Kb,酶切图谱与预期相同.结论：成功构建了重组原核表达载体pQE30-HPV58L1.

关键词：人乳头瘤病毒基因重组原核表达表达载体

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流感病毒RNA聚合酶PB1-1亚基片段的克隆及表达

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哈尔滨医科大学学报 2003年第6期37卷 465-467页

作者：刘佳杨力明赵育莹郭彩玲杨宝峰曲章义哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学基础医学院办公室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学药理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　将流感病毒RNA聚合酶PB1 1亚基进行亚克隆、表达 ,获得重组的亚克隆多肽 ,为进一步研究PB1亚基功能奠定基础。方法　以PB1亚基cDNA为模板 ,用PCR方法扩增出PB1 1片段 ,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重组 ,... 详细信息

目的　将流感病毒RNA聚合酶PB1 1亚基进行亚克隆、表达 ,获得重组的亚克隆多肽 ,为进一步研究PB1亚基功能奠定基础。方法　以PB1亚基cDNA为模板 ,用PCR方法扩增出PB1 1片段 ,应用定向克隆策略将扩增后片段与高效表达载体pQE30重组 ,阳性克隆重组质粒经酶切及测序鉴定 ,IPTG诱导各亚克隆系高效表达 ;优化表达条件。结果　PCR法扩增出 4 87bp的片段 ,酶切及测序鉴定获得正确的重组质粒 ,在E .coliM1 5中表达得到相对分子量约为 2 0KD的重组蛋白 ,获得重组多肽。结论　成功地亚克隆及表达了流感病毒RNA聚合酶PB1

关键词：流感病毒 RNA聚合酶 PB1-1亚基片段克隆表达

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肠球菌属细菌的临床分布及耐药性分析

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哈尔滨医科大学学报 2003年第1期37卷 69-71页

作者：关庆柏马佳毓路娟哈尔滨医科大学第一临床医学院微生物科黑龙江哈尔滨150001 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　分析我院肠球菌属在临床标本中的分布 (临床分布 )及耐药状况。方法　应用Sensititre全自动细菌鉴定系统鉴定菌种 ;用纸片扩散法和Etest法进行药敏试验。结果　肠球菌分离率分别为尿液 38%、脓汁 19%、痰液 14 %、引流液 10 %、... 详细信息

目的　分析我院肠球菌属在临床标本中的分布 (临床分布 )及耐药状况。方法　应用Sensititre全自动细菌鉴定系统鉴定菌种 ;用纸片扩散法和Etest法进行药敏试验。结果　肠球菌分离率分别为尿液 38%、脓汁 19%、痰液 14 %、引流液 10 %、其他标本 19%。 91株肠球菌中粪肠球菌 6 7%、屎肠球菌 32 %、坚忍肠球菌 1%。粪肠球菌和屎肠球菌庆大霉素高耐株达 5 0 %以上。屎肠球菌对 β 内酰胺类抗生素的耐药率明显高于粪肠球菌 ,未发现万古霉素耐药株 ,但有两株Etest法呈中介水平。结论　肠球菌在我院临床标本中分布较广 ,以粪肠球菌和屎肠球菌为主 ;除对万古霉素敏感外。

关键词：肠球菌属临床分布耐药性 Sensititre全自动细菌鉴定系统纸片扩散法 Etest法药敏实验万古霉素

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重组原核表达载体pQE30-HPV58L1的构建及鉴定

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中国微生态学杂志 2003年第1期15卷 24-25页

作者：肖鹏谷鸿喜王晶李迪凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学附属第三医院妇科黑龙江哈尔滨150040

目的 :构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白 ,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础。方法 :用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV58L1完整编码区基因 ,将PCR扩增产物克隆至 pUC1 9质粒中并测序。利用 pQE30质粒载体构建重组原核表达载... 详细信息

目的 :构建重组原核表达载体以获得HPV58L1活性蛋白 ,为进一步研制HPV58基因工程疫苗打下基础。方法 :用聚合酶链反应 (PCR)扩增HPV58L1完整编码区基因 ,将PCR扩增产物克隆至 pUC1 9质粒中并测序。利用 pQE30质粒载体构建重组原核表达载体 pQE30 HPV58L1 ,并通过酶切电泳验证重组结果的正确性。结果 :PCR扩增出 1 6Kb特异性片段 ,经克隆至pUC1 9后测序表明序列同源性与Gen Bank报道一致。重组质粒 pQE30 HPV58L1酶切后显示其大小约 5 1Kb ,酶切图谱与预期相同。结论 :成功构建了重组原核表达载体 pQE30 HPV58L1。

关键词：人乳头瘤病毒58型 L1基因基因重组

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人乳头瘤病毒16型和11型L1基因双价重组杆状病毒转移质粒的构建及鉴定

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中国微生态学杂志 2003年第6期15卷 323-325页

作者：庄敏谷鸿喜李迪孔卫兰林道红凌虹魏兰兰哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学第一临床医学院皮肤科

目的 :构建人乳头瘤病毒 16型与 11型 L 1基因双价重组杆状病毒转移质粒并对其进行鉴定。方法 :采用 PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒 11型晚期基因 L 1,并对其进行克隆测序 ;利用基因重组技术将人乳头瘤病毒 16型和 11型 L ... 详细信息

目的 :构建人乳头瘤病毒 16型与 11型 L 1基因双价重组杆状病毒转移质粒并对其进行鉴定。方法 :采用 PCR法从尖锐湿疣组织标本中扩增人乳头瘤病毒 11型晚期基因 L 1,并对其进行克隆测序 ;利用基因重组技术将人乳头瘤病毒 16型和 11型 L 1晚期基因共同装入杆状病毒转移载体中 ,分别位于强启动子 Ppolh和弱启动子 P10之下 ;利用酶切和 PCR技术对双价重组杆状病毒转移质粒进行鉴定。结果 :PCR扩增法获得尖税湿疣组织中感染的人乳头瘤病毒 11型的 L1基因 ,得到人乳头瘤病毒 16型 L1和 11型 L1基因双价重组杆状病毒转移质粒 ,经酶切电泳鉴定验证重组成功。结论 :本研究成功构建了双价重组杆状病毒转移质粒 ,为进一步构建双价 L 1蛋白表达系统进而建立双价基因工程亚单位疫苗打下基础。

关键词：人乳头瘤病毒16型杆状病毒转移载体人乳头瘤病毒11型转移质粒

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HFRS病毒特异性抗体与淋巴细胞亚群检测的意义

引用

微生物学杂志 2003年第1期23卷 26-27,32页

作者：黄云彤王晓燕马培林范业宏张凤民哈尔滨铁路卫生学校基础教研室黑龙江哈尔滨150006 哈尔滨医科大学第二临床医学院传染科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

研究了肾综合征出血热病毒的特异抗体与淋巴细胞亚群检测对临床诊断的意义。用ELISA法对 30例临床诊断肾综合征出血热患者进行特异性IgM抗体检测 ,进而用流式细胞仪对IgM抗体阳性患者进行淋巴细胞亚群测定。正常对照 30例 ,均为健康人... 详细信息

研究了肾综合征出血热病毒的特异抗体与淋巴细胞亚群检测对临床诊断的意义。用ELISA法对 30例临床诊断肾综合征出血热患者进行特异性IgM抗体检测 ,进而用流式细胞仪对IgM抗体阳性患者进行淋巴细胞亚群测定。正常对照 30例 ,均为健康人。肾综合征出血热患者特异性IgM抗体阳性 2 2例 ,检出率为 73 .33 % ,正常对照标本均未检出病毒特异性IgM抗体。肾综合征出血热患者CD4 +细胞百分比较正常对照组降低 ,CD8+细胞百分比较正常对照组增高 ,CD4 +/CD8+比值下降或倒置。肾综合征出血热病毒的特异性IgM抗体特异性强 ,可作为该病早期临床诊断的重要依据。肾综合征出血热患者的免疫功能明显下降 ,对于判定疗效和疾病预后等具有参考价值。

关键词：肾综合征出血热特异性抗体IgM 淋巴细胞亚群肾综合征出血热病毒

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HPV18 L1基因重组DNA构建及其免疫小鼠体内特异抗体的测定

HPV18 L1基因重组DNA构建及其免疫小鼠体内特异抗体的测定

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黑龙江省免疫学会成立十周年学术会议

作者：贾士东谷鸿喜王文阁钟照华郭淑元凌虹贺福初哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150086 中国军事医学科学院北京100850

人类乳头瘤病毒18型(HPV18)感染与宫颈癌的发生高度相关.其晚期基因L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原.本文利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究.方法：从HPV18-pBR322质粒中扩增HPV18L1基因,测序证明扩增... 详细信息

人类乳头瘤病毒18型(HPV18)感染与宫颈癌的发生高度相关.其晚期基因L1结构蛋白是刺激机体产生中和抗体的主要抗原.本文利用HPVL1基因重组质粒进行DNA疫苗的初步免疫学实验研究.方法：从HPV18-pBR322质粒中扩增HPV18L1基因,测序证明扩增片段的可靠性,构建了两个真核表达重组质粒HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1-pcEP4.将提纯的质粒DNA直接免疫小鼠,用HPV18L1抗原经ELISA检测小鼠血清相应抗体.结果：HPV18L1-pcDNA3和HPV18L1-pcEP4质粒DNA均能在小鼠体内表达并诱导产生HPV18特异性抗体.结论：HPV18L1重组质DNA直接注射小鼠可以刺激机体产生抗体.

关键词：人乳头瘤病毒基因表达基因重组抗体

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