检索结果-内蒙古大学图书馆

中国地方病学杂志 2005年第4期24卷 392-395页

作者：陆莹杨爽马珊珊李呼伦于波哈尔滨医科大学附属第二医院心内科 150086 哈尔滨医科大学神经生物教研室

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激心肌细胞,造成心肌细胞肥大过程中组蛋白脱乙酰基酶2(histonedeacetylase2,HDAC2)的表达。方法培养原代心肌细胞,AngⅡ刺激心肌细胞造成肥大,在不同时间取细胞进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),观察HDAC2... 详细信息

目的观察血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)刺激心肌细胞,造成心肌细胞肥大过程中组蛋白脱乙酰基酶2(histonedeacetylase2,HDAC2)的表达。方法培养原代心肌细胞,AngⅡ刺激心肌细胞造成肥大,在不同时间取细胞进行反转录聚合酶链反应(RT-PCR),观察HDAC2mRNA表达,免疫组化法检测HDAC2蛋白表达,相差镜和电镜下观察细胞形态变化。结果经AngⅡ刺激后,相差镜下可见心肌细胞面积变大;电镜下见细胞内部结构亦发生明显的改变;HDAC2mRNA水平随着AngⅡ刺激时间延长而增高;HDAC2蛋白表达亦增加。结论AngⅡ致心肌细胞肥大过程中伴有HDAC2表达增加,HDAC2有可能参与心肌细胞的肥大机制。

关键词：组蛋白脱乙酰基酶2 血管紧张素Ⅱ 心肌细胞肥大

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构建Neuregulin1克隆载体的实验

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中国临床康复 2005年第15期9卷 117-119页

作者：张际绯金连弘傅松滨史忠诚于旸哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室哈尔滨医科大学医学遗传学教研室

目的:Schwann细胞具有促进神经元再生的作用,Neuregulin1(NRG1)具有促进神经元再生和Schwann细胞增殖的效应,构建NRG1克隆载体,可为下一步建立NRG1转染的Schwann细胞系,对神经损伤模型进行Schwann细胞移植,观察其对神经损伤的修复作用... 详细信息

目的:Schwann细胞具有促进神经元再生的作用,Neuregulin1(NRG1)具有促进神经元再生和Schwann细胞增殖的效应,构建NRG1克隆载体,可为下一步建立NRG1转染的Schwann细胞系,对神经损伤模型进行Schwann细胞移植,观察其对神经损伤的修复作用提供重要实验方法。方法:实验于2003-09/2004-01在哈尔滨医科大学医学遗传学研究室完成。提取幼龄大鼠脑RNA,反转录聚合酶链反应,用XbaⅠ和EcoRⅠ对目的基因和载体质粒进行双酶切,T4连接酶连接Schwann后转化Top10感受态大肠杆菌,挑取LB(Amp+)平板生长克隆菌摇菌扩增,用菌液扩增聚合酶链反应检测目的基因,同时提取质粒与空载体并列电泳验证克隆质粒,进行克隆载体测序。结果:获得一株NRG1克隆质粒,测序结果显示为NRG1新的异构体,用基因组DNA和cDNA为模板扩增聚合酶链反应验证是NRG1新的剪切体。结论:构建的NRG1克隆异构体是大鼠NRG1基因克隆载体,可用于进一步的细胞转染、蛋白表达功能检测和细胞移植研究。

关键词：克隆载体 Schwann细胞反转录聚合酶链反应聚合酶链反应检测哈尔滨医科大学神经元再生基因组DNA 细胞移植目的基因医学遗传学细胞增殖实验方法修复作用神经损伤损伤模型脑RNA 幼龄大鼠载体质粒大肠杆菌 cDNA

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柯萨奇B组病毒的RACE扩增与序列分析

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中国地方病学杂志 2005年第2期24卷 161-163页

作者：李小光张凤民马培林陈小贝杨爱英哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086

目的探讨3'RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术检测柯萨奇B组病毒(CVB)的可行性,并建立相应的实验检测方法。方法首先自行设计柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物sp1;然后从柯萨奇病毒(CVB1￣CVB6)感染的Hela细胞,... 详细信息

目的探讨3'RACE(rapidamplificationofcDNAends)技术检测柯萨奇B组病毒(CVB)的可行性,并建立相应的实验检测方法。方法首先自行设计柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物sp1;然后从柯萨奇病毒(CVB1￣CVB6)感染的Hela细胞,提取总RNA,用引物sp1结合OligodT进行3'RACE扩增,将产物克隆到pGEM-T载体上,挑取阳性菌落进行序列测定,与标准株进行同源性比对。结果获得了柯萨奇B组病毒6个型别的3'末端扩增产物及其核苷酸序列,同源性分析的结果显示扩增毒株与标准株之间的核苷酸同源性在95%￣99%之间,氨基酸同源性在98%￣100%之间。结论设计的引物“sp1”是柯萨奇B组病毒6个型别病毒基因组的一条通用引物;该引物结合OligodT进行的3'RACE扩增可用于柯萨奇B组病毒的检测。

关键词：柯萨奇B组病毒扩增产物型别 CVB 通用引物柯萨奇病毒阳性 RACE 病毒基因组毒株

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淀粉样前体蛋白过度表达细胞模型的建立及对细胞增殖和凋亡的影响

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中国临床康复 2005年第17期9卷 100-102,F003页

作者：安丽荣金连弘张际绯赵育桢傅松滨哈尔滨医科大学组胚教研室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学遗传教研室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:建立淀粉样前体蛋白过度表达的细胞模型,并观察其对PC12细胞形态及细胞增殖的影响和在氧化应激损伤时,对细胞生长及凋亡的影响。方法:实验于2003-09/2004-12在哈尔滨医科大学遗传与细胞生物学教研室完成。用脂质体转染对数生长期的... 详细信息

目的:建立淀粉样前体蛋白过度表达的细胞模型,并观察其对PC12细胞形态及细胞增殖的影响和在氧化应激损伤时,对细胞生长及凋亡的影响。方法:实验于2003-09/2004-12在哈尔滨医科大学遗传与细胞生物学教研室完成。用脂质体转染对数生长期的PC12细胞,细胞分为3组:转染真核表达载体的正常对照组;淀粉样前体蛋白过度表达组;642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变淀粉样前体蛋白过度表达组,建立稳定表达的细胞株。用Western印迹法验证转染效果。使用细胞形态学方法、四甲基氮唑兰法观察对细胞形态和生长的影响;使用四甲基氮唑兰法、Hoechst33342观察在无血清培养24h后,100μmol/L过氧化氢作用4h对PC12细胞(经神经生长因子处理分化为交感神经元样细胞而接近于神经元)的影响。结果:①Western印迹法结果:转染真核表达载体的正常对照组无人的淀粉样前体蛋白表达,而淀粉样前体蛋白过度表达组和642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组有人的淀粉样前体蛋白表达,说明转染成功。②野生型淀粉样前体蛋白和突变型642位由缬氨酸突变为异亮氨酸的突变:淀粉样前体蛋白过度表达组基因转染PC12细胞后,与转染真核表达载体的正常对照组相比细胞形态及细胞突起的数量和长度无明显改变。③四甲基氮唑兰法测定结?

关键词：阿尔茨海默病 PC12细胞转染细胞凋亡

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大鼠胚胎垂体生长激素细胞的体外诱导研究

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中国地方病学杂志 2005年第3期24卷 294-296页

作者：程玉胡志强项莹赵育桢杨孔宾初明付松滨哈尔滨医科大学第一临床医学院神经外科 150001 哈尔滨医科大学第二临床医学院内分泌科哈尔滨医科大学遗传教研室

目的探讨地塞米松和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用,为将来选择性细胞移植治疗生长激素缺乏症(GHD)奠定基础。方法利用免疫组织化学方法和放射免疫分析方法,在大鼠胚胎垂体组织的原代培养中,对糖皮质... 详细信息

目的探讨地塞米松和生长激素释放激素(GHRH)对大鼠胚胎垂体生长激素(GH)细胞分化的作用,为将来选择性细胞移植治疗生长激素缺乏症(GHD)奠定基础。方法利用免疫组织化学方法和放射免疫分析方法,在大鼠胚胎垂体组织的原代培养中,对糖皮质激素诱导GH细胞分化的最佳浓度、诱导GH细胞发生分化所需要的最短时间以及GHRH在大鼠胚胎垂体细胞分化中的作用进行实验研究。结果地塞米松诱导GH细胞分化的最佳浓度为50nmol/L(P<0.01)。体外培养的胚胎垂体细胞经地塞米松诱导16h,GH细胞开始分化,诱导48h,分化更明显,上清液中GH水平也明显增加(P<0.01);当GHRH的浓度达到10-7mol/L时,可以增强地塞米松对GH细胞的诱导分化作用,明显提高GH细胞的百分比和GH的分泌量(P<0.01)。结论地塞米松可以诱导生长激素前体细胞最终分化为具有功能活性的GH细胞,GHRH与地塞米松发挥协同作用,调节GH细胞的分化与GH分泌。

关键词：生长激素细胞分化糖皮质激素类促生长素释放激素大鼠胚胎垂体 GHRH

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硒对异丙肾上腺素致损伤大鼠心肌SCN5A基因表达的影响

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中国地方病学杂志 2005年第3期24卷 285-287页

作者：李凤兰李晖范启明杨宝峰于卓陈诗慧金剑峰马宁哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 150086

目的研究异丙肾上腺素(ISP)致大鼠心肌损伤模型中,编码电压门控Na+通道α亚单位基因SCN5A表达的变化,以及硒对其表达的影响。方法24只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为3组,即对照组、ISP组、硒+ISP组。测定心肌丙二醛(MDA)的水平;采用逆转... 详细信息

目的研究异丙肾上腺素(ISP)致大鼠心肌损伤模型中,编码电压门控Na+通道α亚单位基因SCN5A表达的变化,以及硒对其表达的影响。方法24只Wistar大鼠雌雄各半,随机分为3组,即对照组、ISP组、硒+ISP组。测定心肌丙二醛(MDA)的水平;采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western-blot方法检测心肌SCN5A基因的表达变化。结果与ISP组比较,硒+ISP组MDA显著降低(P<0.05),但高于对照组(P<0.05);ISP组SCN5A基因mRNA和蛋白的表达均较对照组显著增加,而硒+ISP组降低其表达。结论异丙肾上腺素可使心肌SCN5A基因mRNA和蛋白的表达显著增高;硒对异丙肾上腺素致大鼠心肌损伤有保护作用并能逆转ISP引起的SCN5A基因表达的改变。

关键词：异丙肾上腺素亚硒酸钠硒大鼠心肌 SCN5A 基因表达心肌细胞

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皮肤组织工程中表皮干细胞培养的实验研究

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中国临床康复 2005年第2期9卷 88-89,i004页

作者：张喜梅郭筠秋王少玲吴树亮金连弘刘慧雯哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室黑龙江省哈尔滨市150086 哈尔滨医科大学神经生物教研室龙江省哈尔滨市150086

目的:通过表皮干细胞对基底膜的黏附性,利用层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为递质,探索提取和培养表皮干细胞的技术方法。方法:取新生1～3d的Wistar大鼠全层皮肤,通过酶消化法获得幼鼠表皮,并制成单表皮细胞悬液。以层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为... 详细信息

目的:通过表皮干细胞对基底膜的黏附性,利用层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为递质,探索提取和培养表皮干细胞的技术方法。方法:取新生1～3d的Wistar大鼠全层皮肤,通过酶消化法获得幼鼠表皮,并制成单表皮细胞悬液。以层粘连蛋白和Ⅳ型胶原作为基底膜的替代物,利用表皮干细胞对基底膜的吸附性筛选表皮干细胞。结果:与角质细胞对照,表皮干细胞对层粘连蛋白和Ⅳ型胶原的吸附性很好,克隆形成率较高。用SABC法对其进行整合素β1单抗的免疫组化染色;广谱角蛋白单抗的免疫组化染色观察细胞克隆的细胞浆内出现棕黄色的阳性表达。结论:用层粘连蛋白和Ⅳ型胶原快速黏附法可从大鼠皮肤分离和富集表皮干细胞。

关键词：干细胞皮肤免疫组织化学

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肝硬化门静脉高压症患者脾切除术后血细胞数减少的病因分析

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中华医学杂志 2005年第18期85卷 1285-1286页

作者：张伟辉赵松付英梅刘连新王晓春武林枫哈尔滨医科大学第一临床医院普外科 150001 哈尔滨医科大学微生物学教研室

肝硬化门静脉高压症往往伴有脾肿大和 "脾功能亢进",表现为血细胞三系中至少一系异常或明显降低,多数患者以血小板明显降低为主要表现.目前以手术切除脾脏为主要治疗手段,术后多数患者血常规基本恢复正常.但近年来在临床工作... 详细信息

肝硬化门静脉高压症往往伴有脾肿大和 "脾功能亢进",表现为血细胞三系中至少一系异常或明显降低,多数患者以血小板明显降低为主要表现.目前以手术切除脾脏为主要治疗手段,术后多数患者血常规基本恢复正常.但近年来在临床工作中,我们发现部分患者脾切除后血常规不升反降低,此类患者往往肝功能很差,多数患者术后短期内死亡,提示随着肝硬化的进展,骨髓造血功能可能发生了一些不可逆的改变.因而,骨髓穿刺检查应当作为肝硬化患者常规检查项目.我们对部分肝硬化患者进行了骨髓穿刺检查,并结合其肝脏功能进行了分析,现将结果报道如下。

关键词：肝硬化门静脉高压症脾切除术后病因分析血细胞数骨髓造血功能常规检查项目骨髓穿刺检查脾功能亢进肝硬化患者主要表现治疗手段手术切除临床工作脾切除后血常规脾肿大血小板肝功能

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As_2O_3对胰腺癌细胞株的抑制作用及其机制的初步探讨

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中国病理生理杂志 2005年第8期21卷 1572-1574页

作者：史立军闫彬彬李双星孟艳玲马珊珊刘铁夫李呼伦哈尔滨医科大学附属第一医院消化内科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨三氧化二砷(arsenous oxide,As2O3)对胰腺癌PC2细胞的抑制作用及其作用机制。方法:用胰腺癌PC2细胞株进行培养传代,观察As2O3作用于细胞的不同时间,对细胞生长抑制情况;利用TUNEL染色检测胰腺癌细胞凋亡率;RT-PCR方法检测survi... 详细信息

目的:探讨三氧化二砷(arsenous oxide,As2O3)对胰腺癌PC2细胞的抑制作用及其作用机制。方法:用胰腺癌PC2细胞株进行培养传代,观察As2O3作用于细胞的不同时间,对细胞生长抑制情况;利用TUNEL染色检测胰腺癌细胞凋亡率;RT-PCR方法检测survivin基因的表达。结果:①随着药物对胰腺癌细胞作用时间的延长,细胞生存率明显降低,药物作用存在时间依赖性(P<0·05,P<0·01)。②TUNEL染色证实,As2O3对胰腺癌细胞的抑制作用是以促进细胞凋亡为主。③凋亡抑制因子survivin基因在胰腺癌细胞中表达;胰腺癌细胞经As2O3作用后,抑制sur-vivin基因的表达(P<0·05)。结论:As2O3可能通过抑制凋亡抑制因子survivin基因的表达,促进细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤的作用。

关键词：三氧化二砷细胞凋亡癌基因胰腺肿瘤

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体外诱导骨髓基质干细胞向神经元分化的机制研究

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细胞与分子免疫学杂志 2005年第3期21卷 301-304,308页

作者：闫彬彬王莉莉乔俊峰鹏海生曹京艳李呼伦金连弘哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学哈尔滨市第一医院心血管内科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学胚学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的:探讨神经细胞形成的体外微环境,诱导骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcell,BMSC)向神经元分化的机制。方法:从SD大鼠骨髓中提取BMSC进行体外培养、扩增,并用免疫组化染色进行鉴定。以绿色荧光染料PKH67标记BMSC后,将BMSC与神经细... 详细信息

目的:探讨神经细胞形成的体外微环境,诱导骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalcell,BMSC)向神经元分化的机制。方法:从SD大鼠骨髓中提取BMSC进行体外培养、扩增,并用免疫组化染色进行鉴定。以绿色荧光染料PKH67标记BMSC后,将BMSC与神经细胞共培养以及用双层培养皿联合培养8d后,用免疫荧光检测BMSC是否分化为神经元。结果:将BMSC与神经细胞共培养后,BMSC出现神经元的形态特点,且有(32.72±2.56)%的神经元表达特异性烯醇化酶(neuron specificenolase,NSE),与BMSC自然分化组(对照组)相比较差异非常显著(P<0.05);但用双层培养皿联合培养时,只有(4.87±0.79)%的BMSC表达NSE,与对照组相比较差异不显著(P>0.05),但与BMSC和神经细胞共培养组相比较差异显著(P<0.05)。结论:体外培养时,神经细胞形成的局部微环境可促进BMSC向神经元方向分化,并且细胞间的紧密接触是诱导BMSC向神经元分化的重要条件。

关键词：骨髓基质干细胞胎脑神经细胞共培养体外微环境

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