检索结果-内蒙古大学图书馆

中国地方病学杂志 2004年第4期23卷 330-332页

作者：王秀宏赵炜明滕悦秋王志刚刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室 150086 军事医学科学院野战输血研究所

目的研究和探讨大鼠血红素加氧酶鄄1(RHO鄄1)中保守的碱性氨基酸精氨酸残基和赖氨酸残基对该酶催化功能的影响。方法应用定点诱变制备20种RHO鄄1的变异型酶质粒,其中RHO鄄1中保守的碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸被置换成谷氨酸,将它们在大... 详细信息

目的研究和探讨大鼠血红素加氧酶鄄1(RHO鄄1)中保守的碱性氨基酸精氨酸残基和赖氨酸残基对该酶催化功能的影响。方法应用定点诱变制备20种RHO鄄1的变异型酶质粒,其中RHO鄄1中保守的碱性氨基酸精氨酸和赖氨酸被置换成谷氨酸,将它们在大肠埃希菌中表达并纯化后,用光谱扫描方法在以NADPH-细胞色素P鄄450还原酶提供电子的模拟体内反应体系下测定变异型酶和野生型酶的活性,从而观察变异型酶的活性是否发生改变。结果变异型酶R35E、K39E、R44E、R136E、K148E、K149E、K153E、R185E和K196E对血红素的降解速度低于野生型酶。结论R35等9个精氨酸残基和赖氨酸残基在参与RHO鄄1催化血红素降解的反应中对该酶的催化功能有着重要影响。

关键词：精氨酸残基赖氨酸残基大鼠血红素加氧酶-1 催化功能氧化应激地方病

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大鼠骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞的实验研究

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哈尔滨医科大学学报 2004年第2期38卷 126-128页

作者：张宇金连弘李冬梅李呼伦刘慧雯张宝东哈尔滨医科大学组织胚胎学教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　采用 5 氮杂胞苷 (5 aza)诱导骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞。方法　分离培养骨髓间充质干细胞 ,采用密度为 1 .0 73的percoll分离液分离大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外培养和连续传代 ,在第 3代细胞以5 氮杂胞苷进行诱导 ... 详细信息

目的　采用 5 氮杂胞苷 (5 aza)诱导骨髓间充质干细胞分化成心肌细胞。方法　分离培养骨髓间充质干细胞 ,采用密度为 1 .0 73的percoll分离液分离大鼠骨髓间充质干细胞并进行体外培养和连续传代 ,在第 3代细胞以5 氮杂胞苷进行诱导 ,用免疫组化的方法鉴定心肌特异性肌钙蛋白I的表达。结果　诱导前 ,骨髓间充质干细胞形态均一 ,呈多突起扁平形态 ,诱导后细胞形态发生变化 ,细胞之间形成连接 ,排列方向渐趋一致 ,免疫组化显示表达阳性。结论　 5

关键词：大鼠骨髓间充质干细胞 5-氮杂胞苷 5-aza 心肌细胞

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应用体外实验对与人肺癌转移相关基因的研究

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中国临床康复 2004年第8期8卷 1492-1493页

作者：王春梅李钰高凌寒刘芳莉邹嵘李璞牡丹江医学院生物教研室黑龙江省牡丹江市157011 哈尔滨医科大学医学遗传学研究室黑龙江省哈尔滨市150086

目的:应用体外实验研究RAB5A基因过表达与人非小细胞肺癌转移相关,进一步确认该基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用以期待此研究能对肺癌转移的预防进而减少对肺癌患者造成的肺功能损害及为有效选择有利患者生活质量的治疗手段提... 详细信息

目的:应用体外实验研究RAB5A基因过表达与人非小细胞肺癌转移相关,进一步确认该基因在人肺腺癌细胞系侵袭和转移中的作用以期待此研究能对肺癌转移的预防进而减少对肺癌患者造成的肺功能损害及为有效选择有利患者生活质量的治疗手段提供理论基础。方法:采用体外重建基底膜侵袭实验和肿瘤细胞黏附能力的测定,分析RAB5A正义真核表达载体转染后的AGZY83-a和反义RNA转染后的A-nip973细胞的侵袭、转移能力的改变。结果:RAB5A正义表达载体PcDNA3.1-RAB5A转染的AGZY83-a重建基底膜侵袭能力明显增强,t检验P<0.005,差异有显著性意义;对基底膜成分的黏附能力增大;t检验P<0.05。PcDNA3-AntiRAB5A反义RNA表达载体对Anip973重建基底膜侵袭力明显下降,P<0.001;对基底膜成分黏附能力降低。结论:RAB5A在侵袭转移表型形成中发挥重要的作用。反义RNA可阻断RAB5A基因的翻译过程,相关体外试验研究结果为有效治疗肿瘤转移奠定了基础。

关键词：体外实验肺癌人肿瘤转移相关基因基因表达癌细胞

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维生素K_2对HL-60细胞生长及凋亡、分化的诱导作用

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哈尔滨医科大学学报 2004年第2期38卷 160-162页

作者：曲辉任立红冯玉芝李钰刘晓阳哈尔滨医科大学第二临床医学院儿内科哈尔滨医科大学遗传学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　观察维生素K2 (VK2 )对HL 6 0细胞生长及凋亡、分化的诱导作用。方法　通过四氮唑蓝比色 ,细胞形态 ,流式细胞仪测定细胞周期、凋亡率及CD1 4的表达 ,观察VK2 对HL 6 0细胞的影响。结果　HL 6 0细胞经1 0 μmol L以上浓度的VK2 ... 详细信息

目的　观察维生素K2 (VK2 )对HL 6 0细胞生长及凋亡、分化的诱导作用。方法　通过四氮唑蓝比色 ,细胞形态 ,流式细胞仪测定细胞周期、凋亡率及CD1 4的表达 ,观察VK2 对HL 6 0细胞的影响。结果　HL 6 0细胞经1 0 μmol L以上浓度的VK2 作用后增殖受到抑制 ,1 0 μmol L、2 0 μmol LVK2 作用 72h后 ,细胞形态呈现凋亡细胞的特征。 5 μmol L、1 0 μmol L、2 0 μmol LVK2 作用于HL 6 0细胞 72h凋亡率分别为 7.1 6 %、1 1 .31 %、2 0 .36 % ,与对照组相比差异显著。G0 G1 期细胞阻滞 ,CD1 4的表达与对照组相比无差异性。结论　VK2 对HL 6 0细胞有生长抑制作用 ,能诱导HL 6 0细胞发生凋亡 ,具有一定的量效和时效关系 ,单独使用VK2 的分化作用不显著。

关键词：维生素K2 HL-60细胞生长 VK2 细胞凋亡细胞分化基因表达

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阿尔茨海默病动物模型的建立及神经干细胞对阿尔茨海默病的治疗作用

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中国临床康复 2004年第19期8卷 3734-3736页

作者：吴树亮金连弘李竹英李呼伦王广友宋铁军哈尔滨医科大学神经生物教研室黑龙江省哈尔滨市150086 黑龙江中医药大学黑龙江省哈尔滨市150040

目的:建立大鼠阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)动物模型,并观察神经干细胞对AD的治疗作用。方法:30只SD大鼠(体质量250～300g)被随机分为3组:模型组(n=10)、对照组(n=10)和神经干细胞治疗组(n=10),模型组和神经干细胞治疗组用A... 详细信息

目的:建立大鼠阿尔茨海默病(Alzheimer'sdisease,AD)动物模型,并观察神经干细胞对AD的治疗作用。方法:30只SD大鼠(体质量250～300g)被随机分为3组:模型组(n=10)、对照组(n=10)和神经干细胞治疗组(n=10),模型组和神经干细胞治疗组用ALZET微型渗透泵侧脑室内慢性灌注Okadaicacid(OA);对照组灌注等量的磷酸缓冲液。56d后神经干细胞治疗组在海马处进行神经干细胞移植。76d后用Morris水迷宫实验检测3组大鼠学习记忆能力;用旷场实验观察3组大鼠探究活动能力和紧张度;随后处死大鼠,分别用硫磺素-S法和镀银法检测3组大鼠海马中老年斑和神经元纤维缠结形成情况。结果:模型组的平均逃避潜伏期(meanescapelatency,MEL)第1天为84s,第4天为60s;对照组的MEL第1天为66s,第4天为15s;治疗组的MEL第1天为68s,第4天为18s。模型组通过的格子数为21个,对照组为69个,治疗组为61个。模型组大鼠的学习、记忆功能和探究活动与对照组和神经干细胞治疗组相比均明显下降(P<0.05);神经干细胞治疗组与对照组相比差异无显著性意义(P>0.05)。显微镜下,模型组大鼠在海马可见到大量老年斑沉积和神经元纤维缠结形成;神经干细胞治疗组可见少量老年斑沉积和神经元纤维缠结形成;而对照组大鼠未见老年斑沉积和神经元纤维缠结形成。

关键词：阿尔茨海默病动物模型治疗神经干细胞移植 β-淀粉样沉淀神经元纤维缠结

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维生素K_2在恶性血液病治疗中的作用

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国际儿科学杂志 2004年第S1期32卷 63-65页

作者：曲辉任立红李钰哈尔滨医科大学第二临床学院儿内科黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学遗传教研室黑龙江哈尔滨150086

维生素K2(VK2)是一种有效的肿瘤诱导剂,体内外实验证明,VK2能诱导多种血液肿瘤细胞株及原代培养的白血病细胞、骨髓异常增生细胞发生凋亡,并且当凋亡受到抑制时,能诱导细胞向单核细胞分化。它的作用机制与多种因素如细胞内特异性受体、... 详细信息

维生素K2(VK2)是一种有效的肿瘤诱导剂,体内外实验证明,VK2能诱导多种血液肿瘤细胞株及原代培养的白血病细胞、骨髓异常增生细胞发生凋亡,并且当凋亡受到抑制时,能诱导细胞向单核细胞分化。它的作用机制与多种因素如细胞内特异性受体、癌基因的表达、氧自由基产生增多、细胞内谷胱甘肽耗竭及促使蛋白巯基芳香化有关。VK2已用于骨髓异常增生综合征、急性髓性白血病患者的临床治疗,并取得了很好的疗效。VK2临床应用的安全性及低毒性副作用在临床观察中得到证实。

关键词：维生素K 白血病

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模拟微重力培养大鼠胰岛的形态学观察

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中华普通外科杂志 2004年第7期19卷 398-400页

作者：宋纯段秀庆孙野青李曦韩礼欧许评宋春芳金连弘哈尔滨医科大学第一临床医学院卫生部细胞移植重点实验室 150001 哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科 150001 哈尔滨工业大学生命科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室哈尔滨医科大学组胚教研室

目的应用电子显微镜观察模拟微重力培养对大鼠胰岛形态的影响。方法将新鲜分离和消化的大鼠胰岛分别进行普通培养和模拟微重力条件培养 ,应用扫描电镜和透射电镜观察各组大鼠胰岛的大体结构及超微结构的变化 ,并与新鲜分离的胰岛对照。... 详细信息

目的应用电子显微镜观察模拟微重力培养对大鼠胰岛形态的影响。方法将新鲜分离和消化的大鼠胰岛分别进行普通培养和模拟微重力条件培养 ,应用扫描电镜和透射电镜观察各组大鼠胰岛的大体结构及超微结构的变化 ,并与新鲜分离的胰岛对照。结果培养 7d时透射电镜下观察微重力组的胰岛形态类似新鲜组的胰岛 ,胞浆内有发育良好的分泌颗粒和丰富的线粒体 ;扫描电镜显示只有微重力组胰岛与胰岛之间形成了许多小洞。结论模拟微重力培养时 ,胰岛的形态保持良好。

关键词：模拟微重力大鼠胰岛形态学细胞培养

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中频电对大鼠血液流变学指标的影响

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哈尔滨医科大学学报 2004年第5期38卷 477-479页

作者：马波许艳高佩琦关微华哈尔滨医科大学生物物理学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　从宏观、微观水平研究中频电对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法　 4 0只动物被随机分成3组 :假手术组、模型组、中频疗组 ,其中后两组参考Longa法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,中频疗组于缺血再灌注后立即将电极安置... 详细信息

目的　从宏观、微观水平研究中频电对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用。方法　 4 0只动物被随机分成3组 :假手术组、模型组、中频疗组 ,其中后两组参考Longa法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型 ,中频疗组于缺血再灌注后立即将电极安置于大鼠耳后两侧乳突处 ,仪器设置参数为 :模式Ⅴ ,电流强度 :3～ 4级 ,每次通电 30min ,每日 1次 ,连续 7天为 1疗程。假手术组和模型组不做上述两种处理。 7天后全部大鼠眼球取血测量血液流变学、红细胞膜流动性等各项指标的变化。结果　模型组大鼠血液流变学、红细胞膜流动性等各项指标显著高于假手术组 (P <0 .0 5或P <0 .0 1) ,中频电治疗作用后血液流变学各项指标均发生显著下降 ,差异有显著性 (P <0 .0 5或P<0 .0 1)。结论　中频电能显著改善大鼠的血液流变学特性 ,提高红细胞膜流动性 ,对脑缺血再灌注损伤起到一定的保护作用。

关键词：大鼠中频电血液流变学指标红细胞膜流动性手术脑缺血再灌注损伤保护作用标的法制显著性

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分化抑制因子Id在若干种癌及永生性细胞中的表达

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中国生物工程杂志 2004年第3期24卷 59-62,72页

作者：刘欣曾少举何大澄彭安王永潮首都医科大学基础医学院细胞遗传教研室北京100054 北京师范大学教育部细胞增殖及调控生物学重点实验室北京100875

利用半定量RT PCR方法对 1 7种细胞的Id基因表达进行了检测 ,发现在CD34+阳性干细胞增殖过程中 ,Id1由不表达到适度表达 ,而Id2由中等程度表达到高表达。Id3、Id4的表达在扩增前后变化不大。说明Id1和Id2在脐带造血细胞扩增过程中可能... 详细信息

利用半定量RT PCR方法对 1 7种细胞的Id基因表达进行了检测 ,发现在CD34+阳性干细胞增殖过程中 ,Id1由不表达到适度表达 ,而Id2由中等程度表达到高表达。Id3、Id4的表达在扩增前后变化不大。说明Id1和Id2在脐带造血细胞扩增过程中可能参与作用。在 2种肺癌、2种肠癌及一种肝癌、乳腺癌细胞中Id1～Id4的表达呈现一定的规律 ,对于同一类癌细胞株其表达基本相同或相似 ,而不同类癌细胞株其表达则相差较大 ,说明对某一类细胞株 ,Id1～Id4有相对稳定的作用。实验对深入认识Id基因的作用。

关键词： Id基因分化抑制因子癌细胞 RT-PCR 表达永生性细胞

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重组NADPH-细胞色素P450还原酶在大肠杆菌中的表达和纯化

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哈尔滨医科大学学报 2004年第2期38卷 99-101,106页

作者：王志刚王秀宏滕悦秋刘明周虹哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的　在大肠杆菌中表达重组NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶 (CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白。方法　将已构建的NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶重组质粒pMW1 72a CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL 2 1中 ,依次使用超速离心、DE5 2纤维素阴... 详细信息

目的　在大肠杆菌中表达重组NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶 (CPR)并纯化获得有活性的CPR蛋白。方法　将已构建的NADPH -细胞色素P4 5 0还原酶重组质粒pMW1 72a CPR采用温和转化法转入大肠杆菌BL 2 1中 ,依次使用超速离心、DE5 2纤维素阴离子交换层析和 2′ 5′ADP亲和层析的方法纯化CPR ,并检测酶的活性。结果　获得了纯度达 99%以上的可溶性CPR蛋白 ,纯化倍数 5 .2 0倍 ,检测酶的比活性为每分钟 1 0 4 5 .4 9nmol mg。结论　获得了纯度高、有活性的CPR蛋白 ,可作为工具酶用于某些相关酶的研究。

关键词：重组NADPH-细胞色素 P450还原酶大肠杆菌基因表达 CPR 生物医学

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