检索结果-内蒙古大学图书馆

药学学报 2004年第5期39卷 338-341页

作者：刘艳荆玉红孙宏丽李呼伦杨宝峰哈尔滨医科大学药理教研室黑龙江哈尔滨150086 哈尔滨医科大学神经生物教研室黑龙江哈尔滨150086

目的观察M_3受体对大鼠缺血性心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型,给予M_3受体激动剂胆碱或阻断剂4DAMP进行干预,观察M_3受体对其的影响。结果缺血前15min ⅳ胆碱10mg·kg^(-1)可提... 详细信息

目的观察M_3受体对大鼠缺血性心肌细胞凋亡的作用及其机制。方法结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌缺血模型,给予M_3受体激动剂胆碱或阻断剂4DAMP进行干预,观察M_3受体对其的影响。结果缺血前15min ⅳ胆碱10mg·kg^(-1)可提高血清超氧化物歧化酶(SOD)活力,降低丙二醛(MDA)含量,减少凋亡细胞的数量(P<0.01),并可增加Bcl-2表达,减少Fas表达。预先5min ⅳ 4DAMP 0.12mg·kg^(-1)阻断心肌M_3受体可逆转胆碱的作用。结论激动M_3受体对结扎大鼠冠状动脉诱导的心肌损伤有保护作用,其机制可能与调节Bcl-2和Fas表达从而抑制心肌细胞凋亡有关。

关键词： M3受体大鼠心肌缺血细胞凋亡超氧化物歧化酶

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蓬子菜总黄酮对过氧化氢损伤的人脐静脉内皮细胞的保护作用

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中国新药杂志 2012年第13期21卷 1523-1527页

作者：史灵恩凌秋杨晓蕾李海霞马玲哈尔滨医科大学流行病教研室哈尔滨医科大学微生物教研室

目的:探讨蓬子菜总黄酮对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)的保护及损伤修复的作用。方法:采用台盼蓝染色法,观察不同剂量蓬子菜总黄酮(12.5～400μ***-1)对HUVECs生长的影响;建立过氧化氢(H2O2)诱导H... 详细信息

目的:探讨蓬子菜总黄酮对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HU-VECs)的保护及损伤修复的作用。方法:采用台盼蓝染色法,观察不同剂量蓬子菜总黄酮(12.5～400μ***-1)对HUVECs生长的影响;建立过氧化氢(H2O2)诱导HUVECs氧化损伤模型,采用MTT比色法检测细胞增殖,酶联免疫分析方法检测内皮素-1(endothelin,ET-1)和降钙素基因相关肽(calcitonin generelated peptide,CGRP)的分泌水平。AO/EB双染色法观察HUVECs的凋亡。结果:与模型组比较,蓬子菜总黄酮能减轻H2O2对HUVECs增殖抑制作用,促进CGRP的分泌,降低ET-1的分泌水平,抑制HUVECs的凋亡。结论:蓬子菜总黄酮对氧化损伤的HUVECs具有保护及修复作用,其机制与调节ET-1和CGRP的分泌有关。

关键词：蓬子菜总黄酮人脐静脉内皮细胞过氧化氢内皮素-1 降钙素基因相关肽凋亡

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转录因子X-box结合蛋白1相互作用蛋白的筛选和鉴定(英文)

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生物化学与生物物理进展 2006年第8期33卷 745-753页

作者：郭风劲宋方洲易发平成海恩重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室重庆400016

X-box 结合蛋白 1 是一种重要的转录因子,参与体内多项信号转导过程. 为进一步研究 XBP1 的生物学功能,运用酵母双杂交技术在肝细胞文库中筛选 XBP1 的结合蛋白. 首先运用 PCR 技术扩增获得 XBP1 的编码序列,克隆至 pGEM-T 载体,经测序... 详细信息

X-box 结合蛋白 1 是一种重要的转录因子,参与体内多项信号转导过程. 为进一步研究 XBP1 的生物学功能,运用酵母双杂交技术在肝细胞文库中筛选 XBP1 的结合蛋白. 首先运用 PCR 技术扩增获得 XBP1 的编码序列,克隆至 pGEM-T 载体,经测序鉴定后,亚克隆至诱饵载体 pGBKT7 中,转化酵母 AH109(a type). 免疫印迹检测诱饵质粒 pGBKT7-XBP1 在AH109 酵母中的表达之后,含有诱饵质粒的酵母 AH109 与含有肝细胞 cDNA 文库质粒 pACT2 的酵母 Y187(αtype)配合,配合后的二倍体酵母生长在含有 X-α-gal 的营养缺陷型培养基上 (SD/-Trp-Leu-His-Ade) 进行选择和筛选,经测序和序列比对确定阳性克隆的开放读码框 ORF,得到 7 种不同的蛋白质. 为了进一步验证这些筛选蛋白质与 XBP1 的相互作用,克隆其中一种蛋白质 MT1E,并运用 GST pulldown 和免疫共沉淀技术成功检测了 MT1E 和 XBP1 的相互作用(体外 / 体内),结果提示,MT1E 可能是 XBP1 的一个新的调节蛋白. 通过酵母双杂交技术筛选得到的 7 种蛋白质分别与肝细胞基础代谢、蛋白质的合成与运输、细胞的增殖与凋亡密切相关. 上述结果有助于揭示 XBP1 的生物学功能,为进一步探讨 XBP1 的表达和调控机制提供新线索.

关键词： X-box结合蛋白1 酵母双杂交转录因子诱饵

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表观调控rDNA转录的研究进展

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生物化学与生物物理进展 2018年第5期45卷 485-493页

作者：程香荣魏艳军黄星卫王楠姜琦刘惠雷蕾哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学生物信息科学与技术学院哈尔滨150081

rDNA是控制细胞核糖体生物合成的串联重复基因,影响着整体蛋白质的翻译水平,与细胞生长代谢息息相关.由于rDNA序列具有多拷贝的重复特征,其转录除了受一般转录机制的调节外,还受多重表观调控机制的调节,精细调控着rDNA的转录状态.一般认... 详细信息

rDNA是控制细胞核糖体生物合成的串联重复基因,影响着整体蛋白质的翻译水平,与细胞生长代谢息息相关.由于rDNA序列具有多拷贝的重复特征,其转录除了受一般转录机制的调节外,还受多重表观调控机制的调节,精细调控着rDNA的转录状态.一般认为rDNA分为活跃和沉默两种状态,分别与活跃染色质标记和异染色质标记相关.近些年来,发现一种平衡态rDNA的存在,更加丰富了rDNA表观机制的研究.H3.3是一种H3组蛋白变体,是近些年来的研究热点,已有报道H3.3可能在分子伴侣HIRA的介导下整合进入活跃rDNA,然而沉默rDNA的维持是否也与H3.3的作用相关需要更多的探索.CTCF是rDNA重复单元间的绝缘子成分,与H3.3相关但并不清楚是否也调控着rDNA的转录.该综述讨论了几种调控rDNA表观状态的机制,并对可能参与该过程的新机制提出了设想.

关键词： rDNA 表观遗传调控 H3.3 分子伴侣 CTCF

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黑龙江省4例HIV-1感染者病毒包膜变异特征分析

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中华微生物学和免疫学杂志 2007年第1期27卷 18-23页

作者：张唯哲周海舟李妍王福祥马英骥凌虹哈尔滨医科大学寄生虫学教研室 150086 哈尔滨医科大学微生物学教研室 150086 哈尔滨医科大学第一临床医学院

目的调查HIV-1从供体到受体中病毒包膜序列变异情况，预测结构及其抗原性的变异趋势，为进一步的表型特征和抗HIV免疫研究奠定基础。方法从4例HIV-1感染者外周血单个核细胞中提取DNA，设计跨病毒包膜的保守引物，进行PCR扩增，将扩增产... 详细信息

目的调查HIV-1从供体到受体中病毒包膜序列变异情况，预测结构及其抗原性的变异趋势，为进一步的表型特征和抗HIV免疫研究奠定基础。方法从4例HIV-1感染者外周血单个核细胞中提取DNA，设计跨病毒包膜的保守引物，进行PCR扩增，将扩增产物克隆至表达质粒载体，筛选阳性克隆进行序列测定。采用生物信息学方法对其进行编码氨基酸的变异性、系统发育以及包膜抗原特征进行分析和预测。结果共获得4个病人的8个有完整开放读码框的包膜表达载体。在8个克隆中，包膜糖蛋白gp120内变异程度大的区域分别为信号肽区、可变区V1／V2区、恒定区C2区内近V3区部分、V4和V5区。变异包括点突变、氨基酸插入或缺失等。系统树分析发现所获得病毒克隆为B′型并与云南分离株LTG0218距离最近。抗原性分析结果表明，除CD4结合区相对保守外，4株病毒在多处抗原表位中呈现较大变异性。结论构建并鉴定了4例HIV-1 B′亚型感染者的8个包膜克隆的包膜表达载体。表型预测其均为R5亲嗜性毒株。生物信息学技术分析预测结果表明从供者到受者发生了包膜蛋白变异。

关键词：人类免疫缺陷病毒包膜变异性抗原性

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人肺腺癌细胞系GLC-82中p21^(WAF1)和p53基因的过表达

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中国医学科学院学报 2003年第2期25卷 149-152页

作者：吴焱闫承慧金焰张贵寅李璞傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室哈尔滨150086

目的探讨p21^(WAF1)和p53基因过表达对人肺腺癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法用带有p21cDNA的真核表达载体pCEP和带有p53的腺病毒表达载体pAdCMV,分别通过基因转染和腺病毒感染,使其在人肺腺癌细胞系(GLC-82)中过表达;通过流式细胞... 详细信息

目的探讨p21^(WAF1)和p53基因过表达对人肺腺癌细胞生长和细胞凋亡的影响。方法用带有p21cDNA的真核表达载体pCEP和带有p53的腺病毒表达载体pAdCMV,分别通过基因转染和腺病毒感染,使其在人肺腺癌细胞系(GLC-82)中过表达;通过流式细胞仪、透射电镜和原位末端分析(TUNEL)观察细胞的生长和凋亡情况。结果 p21过表达的细胞系G1期细胞增加,细胞生长抑制,克隆形成率下降,电镜下未见特征性凋亡小体,原位细胞凋亡分析未见凋亡信号;p53腺病毒感染的肿瘤细胞增殖明显抑制并出现死亡,原位细胞凋亡检测到凋亡信号。结论 p21和p53基因的过表达能够抑制人肺腺癌细胞的生长,其中p53能够诱发细胞凋亡,因此这两种基因在肿瘤基因治疗上有着广泛的应用前景。

关键词：肺腺癌基因转染 p21 p53 过表达

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钾通道阻断剂部分抑制三氧化二砷诱导的HeLa细胞死亡

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药学学报 2005年第7期40卷 644-648页

作者：董德利宋维华马培林杨宝峰哈尔滨医科大学药理学教研室哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086

目的研究钾通道阻滞剂对三氧化二砷诱导的 HeLa 细胞死亡的作用。方法采用 MTF 法评价 HeLa 细胞的存活情况,采用膜片钳技术记录 HeLa 细胞的电压依赖性钾电流。结果 As_2O_3(5 μmol·L^(-1))孵育24h 引起显著的 HeLa 细胞死亡,As_... 详细信息

目的研究钾通道阻滞剂对三氧化二砷诱导的 HeLa 细胞死亡的作用。方法采用 MTF 法评价 HeLa 细胞的存活情况,采用膜片钳技术记录 HeLa 细胞的电压依赖性钾电流。结果 As_2O_3(5 μmol·L^(-1))孵育24h 引起显著的 HeLa 细胞死亡,As_2O_3(5μmol·L^(-1))孵育24 h 后存活的细胞表现明显的电压依赖性钾电流密度增加。+80mV 电压下,As_2O_3(5μmol·L^(-1))孵育组电流密度(61±18)pA/10 pF(n=8)明显高于对照组(38±10)pA/10 pF(n=8,P<0.05)。As_2O_3诱导的 HeLa 细胞死亡可被共同孵育钾通道阻滞剂四氨基吡啶(3mmol·L^(-1))或四乙基铵(5mmol·L^(-1))所部分抑制。3 mmol·L^(-1)四氨基吡啶或5 mmol·L^(-1)四乙基铵对 HeLa 细胞无明显细胞毒作用。结论 As_2O_3长期处理增加 HeLa 细胞的电压依赖性钾电流。As_2O_3诱导的 HeLa 细胞死亡可被钾通道阻滞剂四氨基吡啶或四乙基铵部分抑制。

关键词：三氧化二砷 HeLa细胞电压依赖性钾电流四氨基吡啶四乙基铵

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滤泡辅助性T细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎发病过程中的作用

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中国免疫学杂志 2016年第6期32卷 787-793页

作者：平昌昀李呼伦詹晓霞孙博哈尔滨医科大学神经生物教研室哈尔滨150081

目的:探讨滤泡辅助性T细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用机制。方法:随机将C57BL/6小鼠分为CFA组、EAE组、anti-ICOSL组和control组。用流式细胞术检测不同时间点Tfh细胞的变化及T细胞的活化情况,石蜡切片染色观察炎细胞浸润、脱... 详细信息

目的:探讨滤泡辅助性T细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用机制。方法:随机将C57BL/6小鼠分为CFA组、EAE组、anti-ICOSL组和control组。用流式细胞术检测不同时间点Tfh细胞的变化及T细胞的活化情况,石蜡切片染色观察炎细胞浸润、脱髓鞘及生发中心的改变,ELISA法检测髓鞘蛋白特异性抗体的分泌水平。结果:anti-ICOSL治疗组较EAE对照组临床评分低(P<0.05),炎症浸润减轻,无脱髓鞘病变,Tfh细胞比例降低,但活性不受影响,不能够形成生发中心,并且髓鞘蛋白特异性抗体的分泌减少。结论:滤泡辅助性T细胞通过与B细胞的相互作用促进生发中心形成,分泌抗神经髓鞘蛋白MOG35-55特异性抗体发挥致病性作用。

关键词：滤泡辅助性T细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎生发中心

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利用pcDNA3．1／TOPO~TA克隆构建ANNEXIN A2基因的真核表达载体

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中国地方病学杂志 2006年第3期25卷 323-325页

作者：黄昀金焰于旸刘芳莉傅松滨哈尔滨医科大学医学遗传学教研室 150081

目的克隆人类ANNEXIN A2基因,构建其正义真核表达质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应技术,从人类正常肺组织中扩增出人类ANNEXIN A2基因的完整编码区全长序列,通过DNA重组技术将该基因重组于pcDNA3．1／TOPO(?)TA真核表达载体上,构建... 详细信息

目的克隆人类ANNEXIN A2基因,构建其正义真核表达质粒。方法采用逆转录聚合酶链式反应技术,从人类正常肺组织中扩增出人类ANNEXIN A2基因的完整编码区全长序列,通过DNA重组技术将该基因重组于pcDNA3．1／TOPO(?)TA真核表达载体上,构建出人类ANNEXIN A2基因正义表达质粒。通过DNA 测序方法对重组表达质粒进行鉴定。结果通过测序分析证实,构建的重组表达质粒目的基因片段为人类 ANNEXIN A2基因的完整编码区1 032 bp。结论构建真核表达载体的方法快速简便,适于进一步研究基因的细胞生物学作用。

关键词： ANNEXIN A2基因 DNA,重组遗传载体基因表达

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钙敏感受体参与心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制

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中国地方病学杂志 2007年第4期26卷 364-366页

作者：张伟华傅松滨吴博龚冬梅赵雅君李全凤张力徐长庆哈尔滨医科大学病理生理学教研室 150081 哈尔滨医科大学遗传学教研室 150081 哈尔滨医科大学药理教研室 150081

目的探讨钙敏感受体（CaSR）参与心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制。方法采用离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。实验分5组：对照组灌注2h；缺血组单纯缺血40min；缺血再灌注组缺血40min再灌注2h；激动剂组同缺血再灌注组，在再... 详细信息

目的探讨钙敏感受体（CaSR）参与心肌缺血再灌注损伤诱发细胞凋亡的机制。方法采用离体大鼠心肌缺血再灌注损伤模型。实验分5组：对照组灌注2h；缺血组单纯缺血40min；缺血再灌注组缺血40min再灌注2h；激动剂组同缺血再灌注组，在再灌注液中加入氯化钆（GdCl3）；阻断剂组同缺血再灌注组，在再灌注液中加入氯化镍（NiCl2）和氯化镉（CdCl2）。利用光镜观察各组心肌细胞凋亡情况；检测各组乳酸脱氢酶（LDH）活力和丙二醛（MDA）水平变化；Western Blot分析各组心肌组织中CaSR、Bcl-2和Caspase-3的表达。结果缺血再灌注和激动剂组细胞凋亡指数、LDH活力和MDA水平明显高于对照组；同时CaSR、细胞浆中的Caspase-3表达也明显高于对照组．反之，Bcl-2表达低于对照组。结论 CaSR参与缺血再灌注损伤所诱发的细胞凋亡。

关键词：钙细胞凋亡缺血再灌注损伤

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