检索结果-内蒙古大学图书馆

广东医学 2017年第21期38卷 3247-3252页

作者：余枫贤何毅强徐伟斌许莉凤玉足胡启平黄秒广西医科大学临床医学系广西南宁530021 广西医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021 广西医科大学附属肿瘤医院影像诊断中心广西南宁530021

目的探讨重组agkihpin将来作为抗血栓药物的可能性,为将来把重组agkihpin做成抗血栓药物提供实验依据。方法用肽指纹图谱验证重组agkihpin分子;以天然agkihpin、生理盐水(NS)或肝素为对照,分别用TAME水解、纤维蛋白平板、SDS-PAGE和纤... 详细信息

目的探讨重组agkihpin将来作为抗血栓药物的可能性,为将来把重组agkihpin做成抗血栓药物提供实验依据。方法用肽指纹图谱验证重组agkihpin分子;以天然agkihpin、生理盐水(NS)或肝素为对照,分别用TAME水解、纤维蛋白平板、SDS-PAGE和纤维蛋白原凝集法检测r-agkihpin-1的精氨酸酯酶、纤溶活性、纤维蛋白原溶解和类凝血酶等生物学活性;以NS或粗毒为对照,用剪尾法和皮下注射法检测r-agkihpin-1的出血活性。结果 r-agkihpin-1中38.7%序列、8个肽段与Gen Bank中agkihpin氨基酸序列是一致的。r-agkihpin-1体外水解TAME的比活性为8.74 U/mg。4~16μg/mL剂量r-agkihpin-1可形成纤维蛋白溶圈面积0.50~1.10cm^2,NS组不形成溶圈,差异有统计学意义(P<0.01);16μg/mL剂量r-agkihpin-1可使90%α链和70%γ链分解,而NS组中纤维蛋白原不被消化,差异有统计学意义(P<0.01)。4~16μg/mL剂量r-agkihpin-1可形成凝块体积0.07~0.23 mm^3,高于NS组的0.01 mm^3,差异有统计学意义(P<0.05)。体内4~16 mg/kg体重剂量的r-agkihpin-1形成血栓干重28.01~22.46 mg/kg体重,低于NS组的35.92 mg/kg体重,差异有统计学意义(P<0.01)。上述活性均稍低于相同剂量的天然agkihpin,差异有统计学意义(P<0.05)。剪尾法、皮下注射法显示4~16 mg/kg、4~32 mg/kg体重剂量的r-agkihpin-1在小鼠中出血时间和出血活性分别为1.81~11.32 min和0.00~0.01,显著低于1 mg/kg体重剂量粗毒的30.00 min(P<0.01)和7.85(P<0.01)。结论 r-agkihpin-1就是agkihpin的重组蛋白,r-agkihpin-1将来有望成为一种新的抗血栓药物。

关键词： Agkihpin 蛇毒类凝血酶溶纤重组蛋白抗血栓

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复制型天坛株痘苗病毒在免疫缺陷型大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响

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山西医科大学学报 2018年第7期49卷 779-784页

作者：彭泽旭刘甦苏王辰飞谷文达刘强刘建兵山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室太原030001 中国食品药品检定研究院实验动物资源研究所中国食品药品检定研究院卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(r TV)在免疫缺陷型Rag2基因敲除(Rag2-/-)大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响,为复制型痘苗病毒载体疫苗的应用和安全性评价提供参考。方法 r TV分别以尾静脉注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-... 详细信息

目的研究复制型天坛株痘苗病毒(r TV)在免疫缺陷型Rag2基因敲除(Rag2-/-)大鼠体内的生物分布特点及其对组织病理变化的影响,为复制型痘苗病毒载体疫苗的应用和安全性评价提供参考。方法 r TV分别以尾静脉注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠和野生型SD大鼠,以背部皮下注射途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠。利用Taq Man探针法实时荧光定量PCR检测痘苗病毒在大鼠体内的生物分布和病毒载量,比较分析两种模式动物Rag2-/-大鼠和SD大鼠感染r TV后的生物分布特点及r TV以不同途径感染Rag2-/-大鼠后的生物分布特点,并对感染过r TV的所有组织样本进行HE染色,比较分析不同分组大鼠感染r TV后的组织病理变化。结果与SD大鼠相比,r TV在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠的生物分布范围更广;在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠中,r TV尾静脉注射感染途径的效果要强于皮下注射的感染途径;r TV尾静脉注射途径感染Rag2-/-大鼠的心、睾丸和后爪的病毒载量显著高于尾静脉注射途径感染SD大鼠(P<0.001)和皮下注射途径感染Rag2-/-大鼠(P<0.001);与SD大鼠和皮下感染途径相比,通过尾静脉途径感染免疫缺陷型Rag2-/-大鼠的组织病理变化较明显,且均无由r TV引起的病理性损伤。结论复制型天坛株痘苗病毒在免疫缺陷型Rag2-/-大鼠体内表现出较广的组织分布、较高的表达水平及非特异性的组织病理变化,为其作为免疫缺陷类型患者的载体疫苗的应用的安全性提供了新的依据。

关键词：复制型天坛株痘苗病毒免疫缺陷 Rag2基因敲除大鼠生物分布

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长链非编码RNA-1700020I14Rik对高糖培养下小鼠肾系膜细胞纤维化的影响

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基础医学与临床 2017年第6期37卷 781-785页

作者：李爱玲彭睿孙艳彭惠民易红张政重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学生物信息学教研室重庆400016 重庆医科大学细胞生物与遗传学教研室重庆400016

目的探索长链非编码RNA表达质粒构建的方法,研究lncRNA-1700020I14Rik对肾系膜细胞纤维化的影响。方法从小鼠肾系膜细胞中提取RNA并反转录为c DNA作为模板,PCR法扩增目的片段,构建入载体pc DNA3.1(+)中。通过脂质体3000转染方法,将载体... 详细信息

目的探索长链非编码RNA表达质粒构建的方法,研究lncRNA-1700020I14Rik对肾系膜细胞纤维化的影响。方法从小鼠肾系膜细胞中提取RNA并反转录为c DNA作为模板,PCR法扩增目的片段,构建入载体pc DNA3.1(+)中。通过脂质体3000转染方法,将载体转染至高低糖培养的小鼠肾系膜细胞中。RT-q PCR法检测1700020I14Rik的表达水平;Western blot检测肾脏纤维化标记蛋白Col-4、FN及TGF-β1表达水平。结果1700020I14Rik在高糖培养的肾系膜细胞中显著性下调(P<0.01)。与转染空质粒组相比,转染表达质粒的肾系膜细胞中1700020I14Rik表达水平升高(P<0.01),且促使Col-4、FN以及TGF-β的表达水平下降(P<0.05)。结论pc DNA3.1(+)-1700020I14Rik表达质粒能高表达1700020I14Rik,长链非编码RNA-1700020I14Rik可以缓解高糖培养下肾系膜细胞的纤维化发展。

关键词：长链非编码RNA 表达质粒糖尿病糖尿病肾病

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稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白细胞的构建

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病毒学报 2017年第4期33卷 494-500页

作者：黄文波刘振卫周荣李潇曾军李小锋苏晓波广州医科大学生命科学学院医学遗传学与细胞生物学教研室广州511436 广州呼吸疾病研究所呼吸疾病国家重点实验室广州医科大学广州510230 广东和信健康科技有限公司广州510663

获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)P... 详细信息

获得稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞株。采用RT-PCR方法扩增乙型流感病毒的HA基因,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(+)上,构建pcDNA3.1(+)-HA重组质粒。将已鉴定正确的pcDNA3.1(+)-HA质粒与辅助质粒PLV-EF1a-EGFP(2A)Puro通过脂质体介导法共转染HEK293细胞,经嘌呤霉素筛选后得到重组细胞株HEK293-HA,通过流式细胞术法(FCM)来检测细胞中HA的表达情况。所得到的重组细胞经扩大培养后再连续培养15代,采用间接免疫荧光法(IFA)和蛋白免疫印迹法(WB)来检测HA蛋白表达的稳定性。结果表明重组质粒pcDNA3.1(+)-HA经双酶切及测序鉴定正确;共获得3株高表达阳性细胞株。细胞扩大培养后连续传代培养15代后进行Western blot和IFA检测结果表明,重组细胞的HA蛋白得到稳定的表达。已成功获得了能稳定表达乙型流感病毒血凝素蛋白的HEK-293-HA细胞,可为乙型流感病毒HA蛋白的进一步研究提供良好的基础。

关键词：乙型流感病毒血凝素(HA)蛋白细胞株

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多发性硬化外周全血mRNA差异表达的来源及其特异性分析

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国际免疫学杂志 2017年第5期40卷 485-488页

作者：王雯郭有李兆瀛敬佳关庆洲孙博哈尔滨医科大学神经生物学教研室 150081 福建医科大学生物信息学系福州350108

目的探究多发性硬化外周全血mRNA差异表达的来源及其特异性。方法利用外周全血mRNA表达谱数据，分别筛选多发性硬化和炎症性疾病（感染性休克、肺结核）患者相对正常人群的差异表达基因并进行比较。筛选正常外周血中髓系相对淋巴系... 详细信息

目的探究多发性硬化外周全血mRNA差异表达的来源及其特异性。方法利用外周全血mRNA表达谱数据，分别筛选多发性硬化和炎症性疾病（感染性休克、肺结核）患者相对正常人群的差异表达基因并进行比较。筛选正常外周血中髓系相对淋巴系细胞的差异表达基因，并与多发性硬化患者相对正常人群的差异表达基因作比较。结果比较多发性硬化患者与两种炎症性疾病（感染性休克、肺结核）患者相对正常人群的差异表达基因，发现交叠基因上/下调方向的一致性分别为91.32%（P〈0.05），93.23%（P〈0.05）。比较多发性硬化患者相对正常人群的差异表达基因及正常人群髓系相对淋巴系细胞的差异表达基因，发现交叠基因上/下调方向的一致性为96.82%（P〈0.05）。结论多发性硬化患者相对于正常人群的差异表达基因与炎症性疾病患者相对正常人群的差异表达基因高度一致，同时与髓系相对淋巴系细胞的差异表达基因同样高度一致。上述结果表明多发性硬化患者外周全血中观察到的基因表达的改变可能是由于髓系/淋巴系细胞构成比例改变所致，是非特异的炎症性改变。

关键词：多发性硬化炎症性疾病差异表达基因

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TRPM4通道在三氧化二砷诱导的早期内皮损伤中的作用研究

TRPM4通道在三氧化二砷诱导的早期内皮损伤中的作用研究

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首届东方药理论坛暨2018年全国心脑血管药理学术会议、上海市药理学会第十九届学术年会

作者：余春晓张玉瑶吴夏阳汤海霞梁雪琦薛周铭薛亚东李静朱辉霍蓉班涛中国黑龙江省哈尔滨医科大学药学院药理教研室(国家生物医药省重点实验室教育部心血管研究重点实验室) 中国黑龙江省哈尔滨市黑龙江中医药大学基础医学院解剖学与组织、胚胎学教研室中国福省厦门市建复旦大学儿童医院厦门分院(厦门儿童医院) 中国黑龙江省哈尔滨医科大学基础医学院生理学教研室

背景及目的:本研究探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对血管内皮细胞损伤的影响,并说明TRPM4通道(Transient receptor potential melastatin4)在ATO诱导的内皮损伤过程中所发挥的作用。方法:采用qRT-PCR技术检测ATO诱导的人脐静脉... 详细信息

背景及目的:本研究探讨三氧化二砷(Arsenic Trioxide,ATO)对血管内皮细胞损伤的影响,并说明TRPM4通道(Transient receptor potential melastatin4)在ATO诱导的内皮损伤过程中所发挥的作用。方法:采用qRT-PCR技术检测ATO诱导的人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)中TRPM4的mRNA表达;采用Western blot技术和免疫荧光技术检测TRPM4在ATO诱导的HUVECs细胞中蛋白表达的变化;采用MTT法,TUNEL染色,Transwell小室分别检测TRPM4对HUVECs的细胞活力、

关键词：内皮损伤 siRNA HUVECs 三氧化二砷 TRPM4

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哺乳动物黄体生成素(LH)峰效应由颗粒细胞向卵母细胞传递的分子通路

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生殖与避孕 2016年第8期36卷 624-630页

作者：刘洋徐晋哈尔滨医科大学基础医学院细胞生物教研室哈尔滨150081

血液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)在排卵前形成一个极大的峰值,LH与壁层颗粒细胞中的LH受体(LHR)结合诱导类表皮生长因子(EGF)的表达,通过自分泌和旁分泌的作用激活颗粒细胞与卵丘细胞中的EGF受体(EGFR)、大鼠肉瘤病毒致癌基因... 详细信息

血液中黄体生成素(luteinizing hormone,LH)在排卵前形成一个极大的峰值,LH与壁层颗粒细胞中的LH受体(LHR)结合诱导类表皮生长因子(EGF)的表达,通过自分泌和旁分泌的作用激活颗粒细胞与卵丘细胞中的EGF受体(EGFR)、大鼠肉瘤病毒致癌基因(KRAS)、细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2),激活的ERK1/2诱导表达前列腺素合成酶2(PTGS2)、类固醇合成快速调节蛋白(STAR)、透明质酸合成酶2(HAS2)、肿瘤坏死因子α诱导蛋白6(TNFAIP6)产生的前列腺素又和卵丘细胞上的PTGER2结合,激活p38MAPK,这一LH作用的信号转导通路最终刺激卵丘扩展卵母细胞成熟并最终排卵。

关键词：排卵黄体生成素(LH) 分子机制细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)

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氯丙嗪上调大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ的表达

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国际遗传学杂志 2017年第1期40卷 13-18页

作者：吴静李洋韩秋媛于丽钱钧张文莉李爱梅李玉军张庆猛宋武琦考文萍潘超张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室伍连德研究所黑龙江省感染与免疫重点实验室哈尔滨医科大学附属第三医院放疗科哈尔滨医科大学附属第二医院重症医学科

目的对氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)处理后的大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ表达进行检测及分析。方法按每组6只,将wistar大鼠随机分为:正常对照组、CPZ高、中、低剂量(20 mg/kg、10 mg/kg、5 mg/kg)单次注射组以及中剂量连续注射组(10 mg/kg/2... 详细信息

目的对氯丙嗪(chlorpromazine,CPZ)处理后的大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ表达进行检测及分析。方法按每组6只,将wistar大鼠随机分为:正常对照组、CPZ高、中、低剂量(20 mg/kg、10 mg/kg、5 mg/kg)单次注射组以及中剂量连续注射组(10 mg/kg/2周),采用腹腔注射CPZ的方法制备动物模型。免疫组化和Western印迹法检测大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ的表达。结果免疫组化结果显示,中剂量(10 mg/kg)的CPZ单次注射及连续注射均能显著增加大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ的表达(P值分别为0.0007、0.0005)。Western印迹结果显示,与正常对照组相比,CPZ高、中剂量(20 mg/kg、10 mg/kg)单次注射(P值分别为0.0141、0.0163)以及中剂量(10 mg/kg)长期连续注射组大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ表达显著增加(P=0.0094)。结论 CPZ能够上调大鼠脑皮质中凝血因子Ⅲ的表达。除了已知的多巴胺受体和钙调素之外,凝血因子Ⅲ也是CPZ调控的靶分子之一。

关键词：氯丙嗪大鼠脑皮质凝血因子Ⅲ

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一个MYH9基因新突变导致的遗传性巨血小板减少症家系的遗传学分析

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中华医学遗传学杂志 2017年第3期34卷 352-356页

作者：廖文君罗晓成张学陈萍吴华裕舒伟袁志刚广西医科大学一广西地中海贫血防治重点实验室南宁530021 广西壮族自治区南宁市马山县人民医院 530600 中国医学科学院基础医学研究所北京100730 广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室南宁530021

目的探讨一个MYH9相关综合征（MYH9 -related disorders, MYH9 -RD）家系的基因突变及临床特征。方法检测血常规，用血涂片法检查血小板和包涵体。提取外周血mRNA和基因组DNA，用PCR扩增MYH9基因的片段，用克隆测序和酶切实验确定突变... 详细信息

目的探讨一个MYH9相关综合征（MYH9 -related disorders, MYH9 -RD）家系的基因突变及临床特征。方法检测血常规，用血涂片法检查血小板和包涵体。提取外周血mRNA和基因组DNA，用PCR扩增MYH9基因的片段，用克隆测序和酶切实验确定突变位点和类型。结果患者的血小板减少，可观察到中性粒细胞包涵体和巨大血小板，但患者之间的临床表现有所不同。家系中所有8例患者的MYH9基因第41外显子第37碱基G杂合性缺失（c．5803delG），导致移码突变，造成非肌肉肌球蛋白重链ⅡA （nonmuscle myosin heavy chain Ⅱ A, NMMHC-Ⅱ A）端杆状尾部26个氨基酸改变（***1935Profs＊13）。而家系和非家系正常人均无此突变。结论c．5803delG突变是该家系患者发病的原因，患者的临床表现提示发生在NMMHC-ⅡA蛋白C端杆状尾部的突变所导致的症状较轻。该突变为新突变，国际上尚未见报道。

关键词：巨血小板减少症 MYH9相关综合征基因突变测序

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猫科动物DNA条形码及线粒体假基因对物种鉴定的影响

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四川动物 2017年第4期36卷 425-430页

作者：蔡延森李佳凌赵矫张亮西南医科大学医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000 西南医科大学形态学研究室四川泸州646000 成都大熊猫繁育研究基地四川省濒危野生动物保护生物学重点实验室成都610081

在多种动物类群中,基于线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的DNA条形码是一种高效的物种鉴别手段,然而猫科Felidae动物中广泛存在的线粒体假基因可能影响DNA条形码的有效性。本研究共涉及猫科动物12属25种119个样本。采用3对条形码... 详细信息

在多种动物类群中,基于线粒体细胞色素c氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因的DNA条形码是一种高效的物种鉴别手段,然而猫科Felidae动物中广泛存在的线粒体假基因可能影响DNA条形码的有效性。本研究共涉及猫科动物12属25种119个样本。采用3对条形码通用引物对6属11种29个猫科动物样本进行了扩增及测序。结果3个样本扩增失败,8个样本得到假基因,18个样本获得了条形码序列。结合另外93条猫科动物条形码序列(源自BOLD Systems),采用Kimura 2-parameter模型计算遗传距离,构建Neighbor-Joining(NJ)树。结果显示,遗传距离种内为0%~8.1%,平均0.8%;种间为1.4%~13.1%,平均8.7%;属间为8.2%~21.8%,平均15.1%。NJ树显示,除3个种外,其余物种均以极高的置信度(99%)形成单系分支。而假基因序列有些可以单独形成分支,有些夹杂在COⅠ序列形成的分支中,对物种鉴定产生干扰。

关键词： COⅠ 猫科线粒体假基因

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