检索结果-内蒙古大学图书馆

国际免疫学杂志 2017年第5期40卷 523-526页

作者：于波海滕旭哈尔滨市第一医院检验科 150010 哈尔滨医科大学微生物学教研室 150081

病毒组（virome）是指人体内所有病毒的基因组，包括感染宿主细胞的病毒、感染人类体内其他生物体的病毒以及经进化后整合到人类基因组中的病毒残余物。它数量庞大，拥有地球上变异速度最快的遗传物质。病毒组对宿主的影响非常复杂，单... 详细信息

病毒组（virome）是指人体内所有病毒的基因组，包括感染宿主细胞的病毒、感染人类体内其他生物体的病毒以及经进化后整合到人类基因组中的病毒残余物。它数量庞大，拥有地球上变异速度最快的遗传物质。病毒组对宿主的影响非常复杂，单纯作为病原体感染的观点已不能诠释与病毒相关人类疾病的发生与发展。相反，可以认为病毒组是人类基因组甚至转录组中的一部分，它们在一些特定组织或分化发育阶段的异常表达具有重要的生理意义。

关键词：病毒组微生物组宿主免疫

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β淀粉样蛋白对人神经母细胞瘤细胞内质网应激的影响

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环境与健康杂志 2017年第1期34卷 33-37页

作者：徐彦吉张金婵任启智孔庆博任锐哈尔滨医科大学公共卫生学院卫生毒理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨市南岗区疾病预防控制中心微生物检验科

目的研究β淀粉样蛋白(Aβ_(25~35))对人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)凋亡过程中内质网应激的影响,探讨在内质网应激过程中未折叠蛋白质反应途径(UPR pathway)在凋亡中的作用。方法将处于对数生长期的细胞分别暴露于含0(对照)、5、10、20... 详细信息

目的研究β淀粉样蛋白(Aβ_(25~35))对人神经母细胞瘤细胞(SHSY5Y)凋亡过程中内质网应激的影响,探讨在内质网应激过程中未折叠蛋白质反应途径(UPR pathway)在凋亡中的作用。方法将处于对数生长期的细胞分别暴露于含0(对照)、5、10、20、30、40μmol/L Aβ_(25~35)的培养基染毒48 h,采用CCK8法检测细胞活性。将对数生长期的细胞分别暴露于含0(对照)、5、10、15μmol/L Aβ_(25~35)的培养基染毒24、48和72 h。采用流式细胞仪检测细胞凋亡率,采用Western blotting法检测内质网应激分子伴侣葡萄糖调节蛋白GRP78以及跨膜蛋白活化转录因子-6(ATF-6)、蛋白激酶-1(IRE1α)和RNA-激活蛋白激酶样内质网激酶(PERK)蛋白的表达水平。结果与对照组比较,各浓度Aβ_(25~35)染毒组SHSY-5Y细胞的存活率均较低,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高,SHSY-5Y细胞的存活率呈下降趋势。与对照组比较,各浓度Aβ_(25~35)染毒组SHSY-5Y细胞的凋亡率均较高,除5μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h外,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高和染毒时间的延长,SHSY-5Y细胞的凋亡率均呈上升趋势。与对照组相比,各剂量、时间点Aβ_(25~35)染毒组SHSY5Y细胞内质网ATF-6蛋白的表达水平较高;15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24、48 h和各剂量Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞内质网GRP78蛋白的表达水平较高;10、15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h和15μmol/L Aβ_(25~35)染毒48 h及各剂量Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞内质网IRE-1α蛋白的表达水平较高;15μmol/L Aβ_(25~35)染毒24 h和10、15μmol/L Aβ_(25~35)染毒72 h后SHSY5Y细胞质网PERK蛋白的表达水平较高,差异均有统计学意义(P<0.05)。随着Aβ_(25~35)染毒浓度的升高和染毒时间的延长,细胞内GRP78、ATF-6、IRE1α和PERK蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论 Aβ_(25~35)可以诱导SHSY5Y神经细胞内质网应激,导致SHSY5Y细胞发生凋亡。

关键词： β-淀粉样蛋白 SHSY5Y细胞株内质网应激阿尔茨海默病

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背部循经推拿手法对束缚应激所致亚健康模型大鼠海马神经元的影响

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辽宁中医杂志 2019年第3期46卷 639-641,I0006页

作者：韦小霞雷龙鸣邱石源唐宏亮庞军吴华裕王开龙伦轼芳广西中医药大学广西南宁530001 广西中医药大学第一附属医院推拿科广西南宁530023 右江民族医学院附属医院广西百色533000 广西中医药大学第一附属医院中医治未病中心广西南宁530023 广西医科大学细胞生物学与遗传学教研室广西南宁530021 广西中医药大学第一附属医院康复科广西南宁530023 广西元之源健康产业有限责任公司广西南宁530023

目的:观察背部循经推拿手法对束缚应激模型大鼠海马神经元的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和推拿组,后两组给予连续21 d束缚筒束缚,推拿组每天另给予背部循经推拿。观察实验过程中3组大鼠的一般情况。实验结束当... 详细信息

目的:观察背部循经推拿手法对束缚应激模型大鼠海马神经元的影响。方法:将60只Wistar大鼠随机分为正常组、模型组和推拿组,后两组给予连续21 d束缚筒束缚,推拿组每天另给予背部循经推拿。观察实验过程中3组大鼠的一般情况。实验结束当天处死大鼠后取材并制作标本,组织病理切片观察3组大鼠海马CA3区神经元形态学,原位末端标记法(TUNEL法)观测海马细胞凋亡情况。结果:模型组大鼠出现明显的疲劳状态,正常组外观无明显变化,推拿组大鼠一般情况介于模型组与正常组之间。正常组海马CA3区有大量排列规则整齐的锥体细胞,模型组锥体细胞数量减少,推拿组海马CA3区锥体细胞变化介于正常组与模型组之间。正常组海马CA3区可见TUNEL阳性细胞,但数量较少,模型组及推拿组TUNEL阳性细胞散布于整个海马组织。结论:亚健康主要症状的出现可能与海马神经元凋亡密切相关,海马神经细胞凋亡是亚健康状态器质性改变的病理基础。背部循经推拿作为一种良性刺激降低亚健康模型大鼠海马神经元损伤,是背部循经推拿调治亚健康有效性的作用机制之一。

关键词：亚健康应激推拿海马神经元

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聚腺苷二磷酸核糖聚合酶在酒精性脂肪肝中的研究进展

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中国医药导报 2017年第22期14卷 51-54页

作者：黄时顺刘洋张冰李欣包志伟王志刚哈尔滨医科大学(大庆)医学检验与技术学院生物化学教研室黑龙江大庆163319

酒精性脂肪肝(AFLD)是长期饮酒导致的肝脏疾病,长期的酒精摄入导致肝脏脂肪合成代谢增加和脂解作用减少,肝脏脂肪沉积增加,进而发生脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,其相关的病理机制尚未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是细胞内重要... 详细信息

酒精性脂肪肝(AFLD)是长期饮酒导致的肝脏疾病,长期的酒精摄入导致肝脏脂肪合成代谢增加和脂解作用减少,肝脏脂肪沉积增加,进而发生脂肪性肝炎、肝纤维化和肝硬化,其相关的病理机制尚未明确。聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)是细胞内重要的DNA修复酶,主要参与细胞的基因转录、DNA修复、基因组的稳定和细胞的凋亡、坏死。PARP是细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)的消耗酶,PARP的活性改变对细胞内NAD+水平的调控发挥重要作用。长期的酒精摄入导致PARP蛋白活化,在AFLD的发生、发展中发挥重要作用。PARP蛋白的基因缺失或活性抑制,对改善长期饮酒导致的肝脏脂肪沉积、炎性反应、氧化应激和肝细胞的凋亡、坏死发挥重要作用,本文对PARP蛋白在AFLD中的研究进展进行综述。

关键词：酒精性脂肪肝聚腺苷二磷酸核糖聚合酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸肝脂肪沉积

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HIV-1gp120三聚体蛋白的小量表达与纯化的方法学研究

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中国病原生物学杂志 2017年第11期12卷 1084-1090,1094页

作者：张昊天凌虹哈尔滨市食品药品检验检测中心黑龙江哈尔滨150090 哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省教育厅病原生物学重点实验室

目的利用分子生物学方法获得HIV-gp120三聚体蛋白并进行纯化。以期建立一种适合中小型实验室获得HIV-1包膜糖蛋白(Env)的纯化方法。方法培养HEK 293T细胞,分别在2%和10%胎牛血清(10%FCS)两种浓度下表达pLH-06044gp120T-His质粒(gp120T-H... 详细信息

目的利用分子生物学方法获得HIV-gp120三聚体蛋白并进行纯化。以期建立一种适合中小型实验室获得HIV-1包膜糖蛋白(Env)的纯化方法。方法培养HEK 293T细胞,分别在2%和10%胎牛血清(10%FCS)两种浓度下表达pLH-06044gp120T-His质粒(gp120T-His),获取表达上清液,以pcDNA3.1(+)空质粒转染上清作对照进行SDS-PAGE电泳,根据BSA系列浓度SDS-PAGE电泳后绘制的标准曲线比较10%FCS与2%FCS培养转染细胞目的蛋白表达量的差异;利用Ni-IDA QTZ 6FF亲和层析以咪唑浓度梯度洗脱2%胎牛血清培养的上清液并以变性及非还原条件进行电泳验证,再降低上样量并以相同方法验证小量纯化的可行性;利用Native PAGE以已知浓度的gp120T为标准溶液绘制标准曲线,计算产量与得率;采用酶联吸附免疫试验(ELISA)与多种广谱中和抗体进行反应,分析产物的活性。结果通过小量表达与纯化得到较高纯度的06044-gp120三聚体(gp120T-His),纯化后每1ml转染上清液至少得到约0.5μg三聚体蛋白,得率约为20%。结论采用一步亲和层析法纯化少量gp120三聚体操作简单,试验成本较低,蛋白得率高,纯度高,活性好。该方法可用于备选免疫原的纯化。

关键词：人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白三聚体纯化

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大鼠早期酒精性肝损伤诱导模型的建立及观察

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中国当代医药 2017年第20期24卷 7-10页

作者：陈欢刘燕玲刘学睿蔡思宇王佳敏刘岚西南医科大学基础医学院四川泸州646000 西南医科大学医学细胞生物学与遗传学教研室四川泸州646000

目的探讨大鼠早期酒精性肝损伤模型的建立方法 ,为研究早期酒精性肝损伤的发病分子机制提供理想动物模型。方法 24只雄性SD大鼠随机分为模型组(16只)和对照组(8只)。对照组饮用自来水;模型组饮用7%~56%梯度递增的白酒12周。取材前24 h和... 详细信息

目的探讨大鼠早期酒精性肝损伤模型的建立方法 ,为研究早期酒精性肝损伤的发病分子机制提供理想动物模型。方法 24只雄性SD大鼠随机分为模型组(16只)和对照组(8只)。对照组饮用自来水;模型组饮用7%~56%梯度递增的白酒12周。取材前24 h和12 h,分别以56%白酒急性灌胃后处死大鼠。每天记录大鼠食用饲料量及饮用量;每周称量大鼠体重。采用全自动生化分析仪测定大鼠血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)含量。观察大鼠肝脏病理学和形态学改变。结果 12周后,模型组大鼠体重增长率为(61.67±1.98)%,明显低于对照组的(160.09±3.12)%(P<0.05),肝脏指数模型组(3.74±0.54)高于对照组(2.85±1.26)(P<0.05)。模型组大鼠ALT、AST、TG、TC均较对照组增高(P<0.05),病理学检查模型组肝组织明显脂肪变性,伴局部炎症、坏死。结论该模型操作简便,动物死亡率低,稳定,发病过程与临床类似,是研究早期酒精性肝损伤发病分子机制的理想模型。

关键词：酒精性肝病大鼠肝病模型肝功能

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全反式维甲酸对乙酰胆碱受体特异性淋巴细胞的免疫调控作用

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现代生物医学进展 2017年第23期17卷 4426-4431页

作者：孔庆飞张晓莉朱伟王丹丹谢晓丽穆莉莉么秀华李呼伦哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江哈尔滨150081 牡丹江医学院黑龙江牡丹江157000

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对乙酰胆碱受体(AChR)特异性淋巴细胞的体外调控作用,探讨其治疗重症肌无力(MG)的可能机制。方法:建立完全弗氏佐剂(CFA)对照组及实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)组大鼠,并获取淋巴结单个细胞悬液,以ACh R... 详细信息

目的:观察全反式维甲酸(ATRA)对乙酰胆碱受体(AChR)特异性淋巴细胞的体外调控作用,探讨其治疗重症肌无力(MG)的可能机制。方法:建立完全弗氏佐剂(CFA)对照组及实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)组大鼠,并获取淋巴结单个细胞悬液,以ACh R97-116多肽片段以及不同浓度的ATRA体外培养72 h,采用流式细胞仪法、CCK-8法、ELISA法分别检测活细胞比例、细胞凋亡和周期的改变以及Th亚群的格局和B细胞抗体分泌能力的变化。结果:ATRA显著降低活细胞比例(P<0.001);不同浓度的ATRA均促进了特异性细胞群的凋亡(P<0.001),且呈剂量依赖性,而ATRA未改变AChR特异性淋巴细胞的生长周期;ATRA处理后,CFA和EAMG组的淋巴细胞增殖均受到明显抑制,且ATRA对ACh R特异性的淋巴细胞的抑制明显(EAMG组,P<0.01)于CFA组(P<0.05);ATRA干预后,ACh R特异性CD4+T淋巴细胞的比例下降(P<0.01),且ATRA促进了Th2、Treg细胞亚群百分比(P_(IL-4)<0.001,P_(Foxp3)<0.001),而抑制了促炎性的Th17、Th1细胞亚群百分比(P_(IL-17)<0.05,P_(IFN-γ)<0.001);ATRA能够降低ACh R特异性B细胞的抗体分泌能力(P<0.01)。结论:ATRA不仅能抑制ACh R特异性T细胞功能,同时也能抑制ACh R特异性B细胞功能,其在MG的临床治疗中可能起治疗作用。

关键词：全反式维甲酸乙酰胆碱受体重症肌无力实验性自身免疫性重症肌无力辅助性T细胞

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维生素D对肝星状细胞增殖和凋亡影响的机制

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中华肝脏病杂志 2017年第4期25卷 297-299页

作者：李进王海鑫崔照琼南阳医学高等专科学校第一附属医院消化内科 473000 南阳医学高等专科学校教务处 473000 昆明医科大学海源学院细胞生物学暨医学遗传学教研室 650106

目前认为肝纤维化的形成是由于肝星状细胞（HSC）被激活，进而大量增殖并释放胶原、纤维蛋白沉积于胞外而行成。1，25-二羟基维生素D3[1，25（OH）2D3]作为维生素D在体内最终的生物活性形式，最新研究结果显示其能抑制HSC的激活并诱导... 详细信息

目前认为肝纤维化的形成是由于肝星状细胞（HSC）被激活，进而大量增殖并释放胶原、纤维蛋白沉积于胞外而行成。1，25-二羟基维生素D3[1，25（OH）2D3]作为维生素D在体内最终的生物活性形式，最新研究结果显示其能抑制HSC的激活并诱导其凋亡，最终逆转肝纤维化。

关键词：细胞凋亡肝星状细胞细胞增殖 1,25(OH)2D3 P13K/Akt信号通路

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电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激关键因子GRP-78、caspese-12表达的影响

电针对脑缺血再灌注大鼠内质网应激关键因子GRP-78、caspese-12表...

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2017世界针灸学术大会暨2017中国针灸学会年会

作者：余琴华于涛徐建永谢天炽广州医科大学卫生职业技术学院针灸推拿教研室广东省中医院针灸科广州医科大学卫生职业技术学院生物化学教研室广州医科大学遗传与细胞生物学教研室

目的:观察电针对脑缺血再灌注不同时点模型大鼠GRP78、caspase-12水平的影响,探讨电针对神经元细胞凋亡通路分子机制的可能影响。方法:126只SD大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型对照组（I/R组）、电针治疗组（EA组）,sham组6只,I/R... 详细信息

目的:观察电针对脑缺血再灌注不同时点模型大鼠GRP78、caspase-12水平的影响,探讨电针对神经元细胞凋亡通路分子机制的可能影响。方法:126只SD大鼠随机分为假手术组（sham组）、模型对照组（I/R组）、电针治疗组（EA组）,sham组6只,I/R组和EA组各60只。采用改良线栓法制备局灶性脑缺血再灌注模型,对再灌注6、12、24、48、72h等不同时间点进行神经学分级评定,观察再灌注24h脑片皮质和海马CA1区的形态学改变,TUNEL法检测各组神经细胞凋亡指数。采用免疫组化和Western blotting观察不同组别不同时间点损伤区皮质、海马内GRP78、caspase-12蛋白表达的变化。结果:与I/R组比较,除再灌注6h时间点外,其余各个时间段,EA组神经学评分降低（P＜0.01）;各再灌注时点EA组的凋亡指数降低（P＜0.01）。各组比较,EA组的GRP78和caspase-12蛋白表达量均比I/R组降低（P＜O.05）。结论:电针对脑缺血再灌注后不同时间所致缺血脑神经细胞凋亡有减轻作用可能通过抑制GRP78、caspase-12的释放和激活,降低凋亡率,发挥神经保护作用。

关键词：电针脑缺血再灌注损伤细胞凋亡内质网 GRP78 caspase-12

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限制性内切酶策略鉴定CRISPR/Cas9介导的Chrm3基因敲除小鼠

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中国生物化学与分子生物学报 2016年第4期32卷 404-409页

作者：高旭马宁王大勇张赫张艳芬徐亚贺军徐书会霍亚丽杜智敏哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二临床医学院实验诊断教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第二医院临床药学药物研究所哈尔滨150081

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶... 详细信息

CRISPR/Cas9技术是近年发展起来的快速基因编辑技术。通过该技术已对多种生物的基因组进行了编辑。由此产生的基因编辑动物的建系与鉴定是随之而来较为繁琐的工作。单导向RNA(single-guide RNA,sgRNA)靶序列的设计和确定不仅影响后续靶向基因组的效率,还可作为优化鉴定、筛选方法的参考。本研究在选取sgRNA靶序列时,不仅依据软件的评分,还分析了sgRNA靶序列是否含有酶切位点,以便对后续纯合子/杂合子进行鉴定。结果显示,以特异引物扩增的野生型小鼠Chrm3基因片段可被限制性内切酶BanⅡ切为两个片段;而纯合子小鼠"丢失"该酶切位点,其PCR产物不能被切开;杂合子小鼠PCR产物被不完全切开,凝胶电泳结果可见三条带。本研究结果提示该策略可有效简化基因编辑动物建系鉴定工作,提高鉴定效率及改善阳性动物辨识效果。

关键词： CRISPR/Cas9 毒蕈碱型乙酰胆碱受体M3亚型遗传改变小鼠纯合子

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