检索结果-内蒙古大学图书馆

遗传 2016年第1期38卷 1-8页

作者：王大勇马宁惠洋高旭哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨150086 哈尔滨医科大学北方转化医学研究合作中心哈尔滨150086 黑龙江省医学科学院哈尔滨150086

CRISPR/cas9基因组编辑技术因其设计简单以及操作容易,使其在基因编辑的研究中越来越受到欢迎。利用该技术,科研人员可以实现在碱基的水平对基因组进行定点修饰。CRISPR系统现已经被广泛地应用到多个物种的基因组编辑以及癌症的相关研... 详细信息

CRISPR/cas9基因组编辑技术因其设计简单以及操作容易,使其在基因编辑的研究中越来越受到欢迎。利用该技术,科研人员可以实现在碱基的水平对基因组进行定点修饰。CRISPR系统现已经被广泛地应用到多个物种的基因组编辑以及癌症的相关研究中。本文在最新研究进展的基础上,结合对癌症研究及基因组编辑技术的理解,对CRISPR/Cas9技术在癌症研究中的应用进行了综述。

关键词： CRISPR CRISPR/Cas9 基因编辑癌症

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细粒棘球绦虫原头节抗原分子Eg-01883的克隆、表达及免疫原性分析

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中国寄生虫学与寄生虫病杂志 2016年第3期34卷 208-213页

作者：赵殷奇李子华王浩朱明星牛楠王娅娜赵嘉庆李娜佟雪琪宋佳卉赵巍宁夏医科大学基础医学院银川750004 宁夏医科大学包虫病实验室银川750004 宁夏医科大学科技中心银川750004 宁夏医科大学基础医学院病原与免疫教研室银川750004 宁夏医科大学临床学院检验系银川750004 宁夏医科大学基础医学院遗传与细胞生物教研室银川750004

目的筛选细粒棘球蚴原头节抗原分子Eg-01883,并进行克隆、表达及免疫原性分析,为寻找棘球蚴病特异性诊断抗原提供依据。方法分析已发表的细粒棘球绦虫mRNA测序数据,筛选六钩蚴中不表达、原头节中高表达的抗原分子Eg-01883。提取细粒棘... 详细信息

目的筛选细粒棘球蚴原头节抗原分子Eg-01883,并进行克隆、表达及免疫原性分析,为寻找棘球蚴病特异性诊断抗原提供依据。方法分析已发表的细粒棘球绦虫mRNA测序数据,筛选六钩蚴中不表达、原头节中高表达的抗原分子Eg-01883。提取细粒棘球蚴原头节总RNA,用RT-PCR对目的基因Eg-01883进行克隆,重组构建原核表达载体p ET28a-Eg-01883,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并纯化目的重组蛋白r Eg-01883。ICR小鼠随机分为3组(每组12只),免疫组小鼠的背部皮下多点注射r Eg-01883,2周后加强免疫1次(剂量均为10μg,100μl/只);佐剂组注射福氏佐剂和PBS,空白对照组不作任何处理。分别于免疫前,首次免疫后1、2、4周每组小鼠尾静脉采血,免疫后6周进行去眼球采血。用ELISA检测3组小鼠免疫后不同时间点的血清特异性Ig G抗体水平,及细胞因子白介素4(IL-4)和γ干扰素(IFN-γ)水平。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白r Eg-01883的免疫原性。结果筛选出在细粒棘球蚴原头节中高表达的抗原分子Eg-01883,克隆、表达和纯化后获得重组蛋白r Eg-01883,该蛋白主要以包涵体形式存在。ELISA检测结果显示,用纯化后的重组蛋白r Eg-01883免疫小鼠,可诱导产生特异性Ig G抗体,免疫组小鼠的血清Ig G抗体水平自首次免疫后1周开始上升,6周时达到最高水平(2.344±0.153),显著高于佐剂组(0.206 1±0.006)和空白对照组(0.241±0.01)(P<0.01)。首次免疫后6周,血清中的细胞因子IFN-γ和IL-4水平,免疫组分别为43.23 pg/ml和24.88 pg/ml,均显著高于佐剂组(21.77 pg/ml,13.27 pg/ml)和空白对照组(17.40 pg/ml,12.25 pg/ml)(P<0.05)。Western blotting分析结果显示,该重组蛋白r Eg-01883抗原可被His-Tag标签抗体、免疫组小鼠血清、原头节继发感染的小鼠血清识别。结论筛选获得细粒棘球绦虫原头节中高表达的抗原分子Eg-01883,克隆、表达、纯化后的重组蛋白r Eg-01883免疫ICR小鼠具有较好的免疫原性。

关键词：细粒棘球绦虫原头节重组蛋白rEg-01883 原核表达免疫原性

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趋化因子受体CX3CR1基因T280M多态性在云南彝族人群中的分布

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昆明医科大学学报 2017年第8期38卷 35-39页

作者：陈志彬莫艳萍杨钰陈灿昆杨靖宜万瑞雪范志祥龙莉昆明医科大学云南昆明650500 昆明医科大学第一附属医院老干科云南昆明650032 昆明医科大学第二附属院生殖医学中心云南昆明650101 昆明医科大学细胞生物学和医学遗传学教研室云南昆明650500

目的研究云南省晋宁县彝族人群CX3CR1基因T280M多态性分布的情况,为探讨CX3CR1基因相关性疾病的发病机制奠定基础.方法采用PCR-RFLP技术对居住在云南省晋宁县268例彝族健康个体的CX3CR1基因T280M多态性进行分析,计算MM、MT、TT基因型频... 详细信息

目的研究云南省晋宁县彝族人群CX3CR1基因T280M多态性分布的情况,为探讨CX3CR1基因相关性疾病的发病机制奠定基础.方法采用PCR-RFLP技术对居住在云南省晋宁县268例彝族健康个体的CX3CR1基因T280M多态性进行分析,计算MM、MT、TT基因型频率和M、T等位基因频率,与其他人群该位点多态性进行比较.结果云南省晋宁县彝族CX3CR1基因的MM、MT、TT基因型频率分别为1.12%、11.94%和86.94%,M和T等位基因频率分别为7.09%和92.91%.与汉族、维吾尔族、希腊、法国、塞尔维亚、印度、意大利和高加索人群比较,无论是基因型分布还是基因频率差异有统计学意义(P<0.05);但与景颇族比较中差异无统计学意义(P>0.05).结论 CX3CR1基因T280M多态性分布存在民族、种族差异,且种族间的差异大于民族间的差异.

关键词： CX3CR1基因基因多态性彝族分布

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lncRNA与miRNA相互作用对疾病的影响

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基础医学与临床 2016年第2期36卷 267-271页

作者：易红张政重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

长链非编码RNA(lncRNA)与微小RNA(miRNA)之间存在相互调控关系。lncRNA可作为一种竞争性内源性RNA(ceRNA)与miRNA相互作用,参与靶基因的表达调控,反之,miRNA可通过RNA诱导沉默复合物(RISC)调控lncRNA发挥生物学功能,两者共同参与多种疾... 详细信息

长链非编码RNA(lncRNA)与微小RNA(miRNA)之间存在相互调控关系。lncRNA可作为一种竞争性内源性RNA(ceRNA)与miRNA相互作用,参与靶基因的表达调控,反之,miRNA可通过RNA诱导沉默复合物(RISC)调控lncRNA发挥生物学功能,两者共同参与多种疾病的发生。

关键词：长链非编码RNA 微小RNA 相互作用疾病

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Nanog通过升高PKCε的表达促进乳腺癌细胞的侵袭

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南方医科大学学报 2016年第5期36卷 639-644页

作者：邵文凤李福喜唐芮于晓然温桥生余焱林熊静波南方医科大学基础医学院细胞生物学教研室广东广州510515 国立癌症研究所肿瘤生物与遗传实验室国立卫生研究院

目的研究Nanog促进乳腺癌细胞侵袭与ezrinT567磷酸化的关系及Nanog调节ezrinT567磷酸化的可能机制。方法转染靶向Nanog的si RNA敲低乳腺癌细胞Nanog;用transwell法检测乳腺癌细胞侵袭;用免疫印迹检测乳腺癌细胞Nanog、PKCε表达水平和ez... 详细信息

目的研究Nanog促进乳腺癌细胞侵袭与ezrinT567磷酸化的关系及Nanog调节ezrinT567磷酸化的可能机制。方法转染靶向Nanog的si RNA敲低乳腺癌细胞Nanog;用transwell法检测乳腺癌细胞侵袭;用免疫印迹检测乳腺癌细胞Nanog、PKCε表达水平和ezrinT567磷酸化水平;用免疫共沉淀和免疫印迹检测PKCε和ezrin蛋白的相互作用。结果敲低乳腺癌细胞的Nanog,PKCε蛋白表达下降、ezrinT567磷酸化水平下降、乳腺癌细胞的侵袭能力下降;敲低PKCε降低ezrinT567磷酸化水平;PKCε与ezrin可免疫共沉淀。结论 Nanog可上调PKCε的表达,后者可使ezrinT567磷酸化,这可能是Nanog促进肿瘤转移的一个新机制。

关键词： Nanog 埃兹蛋白蛋白激酶C 乳腺癌侵袭

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接种密度对C57BL/6小鼠CIK细胞增殖、分化及杀瘤作用的影响

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生物技术通讯 2017年第3期28卷 342-346页

作者：李光宗曾喜欢刘英富霍景瑞郁硕张益侯世科陈小义陈锋武警后勤学院附属医院救援医学研究所天津300162 锦州医科大学辽宁锦州121001 武警后勤学院细胞生物与医学遗传学教研室天津300309

目的:探讨不同接种密度对C57BL/6小鼠细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖分化及杀瘤作用的影响,进一步优化CIK细胞培养方法。方法:按照1×10~6/mL(A组)、4×10~6/mL(B组)、8×10~6/mL(C组)、12×10~6/mL(D组)4种接种... 详细信息

目的:探讨不同接种密度对C57BL/6小鼠细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)增殖分化及杀瘤作用的影响,进一步优化CIK细胞培养方法。方法:按照1×10~6/mL(A组)、4×10~6/mL(B组)、8×10~6/mL(C组)、12×10~6/mL(D组)4种接种密度培养细胞,加入必要的细胞因子,14 d后收获细胞,通过流式细胞术、CCK-8法对细胞增殖、分化、杀瘤作用进行分析。结果:培养过程中,C组细胞形态及增殖能力优于A、B组,在14 d时收获细胞并对其进行检测时发现,C组CD3^+/NK1.1^+细胞所占比例明显高于A、B组,杀瘤活性也优于A、B组;D组细胞密度过大,在7 d细胞进入快速增殖期后出现大面积死亡。结论:适当提高C57BL/6小鼠CIK细胞的接种密度利于细胞增殖、分化及杀瘤作用的形成,选择8×10~6/mL的接种密度是较为合适的。

关键词：细胞因子诱导的杀伤细胞密度细胞培养增殖杀瘤作用

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全人单克隆抗核抗体的制备和鉴定

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国际免疫学杂志 2017年第1期40卷 11-15页

作者：吴静李洋韩秋媛于鑫考文萍宋武琦翟爱霞李玉军李爱梅张庆猛潘超张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省感染与免疫科技创新团队伍连德研究所150081 哈尔滨医科大学附属第三医院放疗科 150081 哈尔滨医科大学附属第二医院重症医学科 150086 大连大学附属中山医院医学检验部 116001

目的本研究旨在从系统性红斑狼疮（systemmiclupuserythematosus，SLE）患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体，并从中鉴定筛选出抗核抗体。方法利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-... 详细信息

目的本研究旨在从系统性红斑狼疮（systemmiclupuserythematosus，SLE）患者外周血淋巴细胞中获得自身抗体，并从中鉴定筛选出抗核抗体。方法利用人B细胞杂交瘤技术制备SLE患者来源的全人单克隆自身抗体，采用酶联免疫吸附实验（enzyme-linkedimmunosorbenkassay，ELISA）方法测定阳性杂交瘤细胞上清抗体浓度，并以HEp-2细胞为底物，采用间接免疫荧光法鉴定筛选出抗核抗体。结果共获得48株稳定分泌IgG型全人单克隆自身抗体的杂交瘤细胞株，其中12种细胞上清抗体浓度大于1500ng／mL，占25％，通过免疫荧光鉴定从中筛选出3种抗核抗体，荧光核型分别为周边型、斑点型和核仁型。结论全人单克隆自身抗体的制备及抗核抗体的筛选鉴定，为开发新型单克隆抗体药物以及研究SLE的致病机制奠定了良好的实验基础。

关键词：系统性红斑狼疮自身抗体抗核抗体人B细胞杂交瘤技术

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热休克蛋白70与肠道病毒感染

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国际免疫学杂志 2016年第2期39卷 184-188页

作者：王华鹏赵文然哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081

热休克蛋白70（HSP70）是HSP70家族中的重要成员。HSP70的主要功能是作为分子伴侣参与蛋白质的折叠与修饰。在病毒感染时，HSP70参与机体的抗感染免疫，从而保护细胞。因而研究HSP70与肠道病毒的相互作用具有意义。

关键词：热休克蛋白70 肠道病毒 TOLL样受体细胞凋亡

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几种新现人体隐孢子虫种和基因型流行现状

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中国人兽共患病学报 2017年第2期33卷 148-155页

作者：杨子吟曹建平沈玉娟刘爱芹哈尔滨医科大学寄生虫学教研室哈尔滨150081 中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所世界卫生组织热带病合作中心科技部国家级热带病国际联合研究中心卫生部寄生虫病原与媒介生物学重点实验室上海200025

隐孢子虫是一种寄生于宿主胃肠道上皮细胞内的原虫。人感染后,免疫功能正常者,常引起自限性腹泻;但在高危人群(如儿童、老人和免疫缺陷者等)中可发生严重腹泻和肠外感染,尤其是艾滋病患者。目前,隐孢子虫的分子流行病学研究已鉴定了30... 详细信息

隐孢子虫是一种寄生于宿主胃肠道上皮细胞内的原虫。人感染后,免疫功能正常者,常引起自限性腹泻;但在高危人群(如儿童、老人和免疫缺陷者等)中可发生严重腹泻和肠外感染,尤其是艾滋病患者。目前,隐孢子虫的分子流行病学研究已鉴定了30个有效种和40多种基因型,其中21个隐孢子虫种和基因型在人体发现。人体隐孢子虫病多数由人隐孢子虫(***)和微小隐孢子虫(***)引起。火鸡隐孢子虫(***)、泛在隐孢子虫(***)、猫隐孢子虫(***)和犬隐孢子虫(***)引起的隐孢子虫病例也逐渐增多。除此之外,随着人体隐孢子虫病分子流行病学数据的增加,在人体内鉴定到一些新的隐孢子虫和基因型。特对上述新现的人体隐孢子虫种和基因型的流行现状进行综述。

关键词：隐孢子虫隐孢子虫病分子流行病学

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食管鳞癌KYSE30细胞系中基因断裂和重排研究

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国际遗传学杂志 2017年第6期40卷 323-330页

作者：宫婷史志周詹厅张钰徐昕蔡岩白静傅松滨于旸郝佳洁王明荣哈尔滨医科大学大庆校区病理生理学教研室国家癌症中心/中国医学科学院北京协和医学院肿瘤医院分子肿瘤学国家重点实验室哈尔滨医科大学医学遗传学研究室昆明理工大学医学院

目的分析食管鳞癌KYSE30细胞系中的基因断裂和重排,为食管癌基因重排及其作用的研究提供新的信息。方法通过比较基因组杂交微阵列(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)筛选和双色荧光原位杂交(fluorescence in si... 详细信息

目的分析食管鳞癌KYSE30细胞系中的基因断裂和重排,为食管癌基因重排及其作用的研究提供新的信息。方法通过比较基因组杂交微阵列(array-based comparative genomic hybridization,array-CGH)筛选和双色荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)分析断裂基因,采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)、RT-PCR和双色FISH等技术对断裂基因进行鉴定。结果 array-CGH筛选和双色FISH分析显示,PLCL1、SCFD2、JARID2、LHFPL3、GABBR2、GPC6、MYH10、MCTP1发生了断裂。通过分子水平的鉴定,发现了MYH10基因与13q21.32的融合、MCTP1基因的截短以及GPC6基因的重排。进一步通过FISH分析,在食管癌组织中发现了MYH10基因的断裂。结论在食管鳞癌KYSE30细胞系中存在PLCL1、SCFD2、JARID2、LHFPL3、GABBR2、GPC6、MYH10、MCTP等基因的断裂,其中MYH10、MCTP1和GPC6基因发生了重排,形成了融合和截短新的异常转录本。这些结果为深入探索影响食管癌发生发展的关键基因提供了新的线索。

关键词：食管鳞癌 KYSE30 断点基因重排

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