检索结果-内蒙古大学图书馆

作者：陈秀杰陈胜李霞徐建凯黄邦清李晋马玲贾晓东边秀森谭福建刘磊生物信息学院哈尔滨医科大学哈尔滨生物信息学院哈尔滨医科大学哈尔滨药理教研室哈尔滨医科大学哈尔滨

Motivation: The high redundancy of and high degree of cross-talk between biological pathways hint that a sub-pathway may respond more effectively or sensitively than the whole ***, few current pathway enrichment analysis methods account for the sub-pathways or structures of the tested *** present a sub-pathway-based enrichment approach for identifying a drug response principal network, which takes into consideration the quantitative structures of the pathways.

关键词：

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BiP调控IRE1启动子转录活性及蛋白表达的效应

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遗传 2013年第3期35卷 343-351页

作者：周菁华韩晓凤刘艳娜张鹏郭风劲重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室发育生物学模式动物平台重庆400016

正常条件下,外分泌或者跨膜的蛋白需要在内质网中完成正确的折叠。在营养缺乏、分化或其他应激状态下,内质网中的蛋白质会发生错误折叠并不断积聚,形成内质网应激(Endoplasmic reticulum stress),引发未折叠蛋白反应(Unfolded protein r... 详细信息

正常条件下,外分泌或者跨膜的蛋白需要在内质网中完成正确的折叠。在营养缺乏、分化或其他应激状态下,内质网中的蛋白质会发生错误折叠并不断积聚,形成内质网应激(Endoplasmic reticulum stress),引发未折叠蛋白反应(Unfolded protein response)。内质网应激条件下,内质网腔中的分子伴侣结合免疫球蛋白BiP(Binding immunoglobulin protein)与需肌醇酶IRE1(Inositol-requiring kinase 1)解离并与未折叠蛋白结合从而帮助蛋白形成正确结构;同时未折叠蛋白通过与跨膜蛋白IRE1直接结合活化其内切核糖核酸酶结构域,活化的IRE1能够剪切Xbp1的mRNA使其形成有活性的转录因子进而起始分子伴侣与未折叠蛋白反应相关蛋白的表达使细胞脱离内质网应激状态。文章克隆了IRE1的启动子用荧光素酶报告基因法检测到BiP能够上调IRE1的启动子活性。通过构建IRE1启动子一系列截短体的报告基因载体确定了IRE1启动子活性的核心区域进一步通过逆转录PCR和免疫印迹在mRNA水平和蛋白水平分别检测BiP对IRE1启动子的调控作用。结果发现在内质网应激条件下分子伴侣BiP通过上调IRE1启动子转录活性增加IRE1的表达进而提高细胞处理内质网应激时未折叠蛋白的能力为揭示内质网应激条件下BiP调控IRE1转录调控机制提供理论依据,同时为阐明ER stress各信号分子之间的作用机制奠定实验基础。

关键词： BiP IRE1 内质网应激未折叠蛋白反应

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病毒与细胞的微生态学研究进展

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中国微生态学杂志 2014年第7期26卷 863-865,868页

作者：赵宏付英梅宋武琦张凤民哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江哈尔滨150086 黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江省普通高校病原生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150086

微生态学(microecology)是细胞水平或分子水平的生态学,它是研究微生物群的结构和功能,以及微生物与其宿主相互依赖、相互制约关系的科学。病毒(virus)是一种比细菌还要微小和简单的非细胞形态微生物(acellular microorganism),不仅可... 详细信息

微生态学(microecology)是细胞水平或分子水平的生态学,它是研究微生物群的结构和功能,以及微生物与其宿主相互依赖、相互制约关系的科学。病毒(virus)是一种比细菌还要微小和简单的非细胞形态微生物(acellular microorganism),不仅可寄生于动植物体的组织细胞表面或内部,还可寄生于细菌、真菌等微生物内部。作为宿主以及细胞内的寄生体,病毒除引起宿主多种类型的感染外,还可参与宿主组织细胞的微生态系的组成,赋予细胞干扰相关病毒增殖与复制、抵抗特定病毒感染感染的作用,并能引起宿主细胞产生特定毒素、获得新抗原性等改变。本研究通过微生态学角度,对病毒与细胞的相互关系及病毒与细胞微生态学在医学上的作用作一综述。

关键词：微生态病毒细胞的微生态学

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Caspase-3在牛膝多糖诱导肝癌细胞BEL-7402凋亡中的作用

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牡丹江师范学院学报（自然科学版） 2014年第3期40卷 31-32页

作者：宗灿华郭新民韩翠萍王桂云初彦辉田丽梅宋高臣包海花张淑芹牡丹江医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江牡丹江157011 哈尔滨医科大学大庆校区医学检验系黑龙江大庆163319

为研究牛膝多糖对肝癌BEL-7402细胞凋亡及相关蛋白Caspase-3表达的作用,采用不同浓度ABPS作用于肝癌BEL-7402细胞48h,MTT法检测细胞生长抑制率,荧光显微镜观察细胞形态变化,Western Blot检测Caspase-3蛋白表达.实验结果表明,ABPS对BEL-7... 详细信息

为研究牛膝多糖对肝癌BEL-7402细胞凋亡及相关蛋白Caspase-3表达的作用,采用不同浓度ABPS作用于肝癌BEL-7402细胞48h,MTT法检测细胞生长抑制率,荧光显微镜观察细胞形态变化,Western Blot检测Caspase-3蛋白表达.实验结果表明,ABPS对BEL-7402细胞具有生长抑制作用,促进细胞凋亡,作用机制可能与上调Caspase-3蛋白表达有关.

关键词：牛膝多糖人肝癌BEL-7402细胞细胞凋亡 Caspase-3蛋白

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诱导针对中国流行HIV-1交叉抗体反应的免疫原筛选、免疫策略及TFH辅助抗体产生机制研究

诱导针对中国流行HIV-1交叉抗体反应的免疫原筛选、免疫策略及TFH...

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第九届全国免疫学学术大会

作者：王甲业李妍于昊彤刘松任彩云田丹郭彩霞陈文江庄敏凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省“感染与免疫”重点实验室黑龙江省高等学校“病原生物学”重点实验室

研究背景:HIV-1包膜免疫原难以诱导有效中和抗体,但其免疫学机制尚不清楚。这已经成为HIV-1疫苗研制的主要障碍。我国流行HIV-1主要亚型为B'、CRF BC和CRF 01AE。分析流行毒株感染人群的抗体产生情况,明确其病毒包膜表位特征,在此... 详细信息

研究背景:HIV-1包膜免疫原难以诱导有效中和抗体,但其免疫学机制尚不清楚。这已经成为HIV-1疫苗研制的主要障碍。我国流行HIV-1主要亚型为B'、CRF BC和CRF 01AE。分析流行毒株感染人群的抗体产生情况,明确其病毒包膜表位特征,在此基础上筛选针对流行毒株的包膜免疫原,是研制疫苗的重要基础。同时,探索HIV-1包膜免疫后,Tfh细胞的辅助作用及其诱导中和抗体的规律,能够为研制有效HIV疫苗奠定实验和理论基础。目的:在调查中国流行HIV-1感染者中和抗体背景的基础上,筛选免疫原,检测免疫效果和免疫机制,与其他病毒疫苗产生抗体的机制进行比较研究,探讨包膜诱导抗体的规律。方法:首先调查我国HIV-1感染者抗HIV-1中和抗体反应情况,并筛选出广谱中和者;通过分析广谱中和者HIV-1包膜基因序列,了解HIV-1广谱中和者包膜序列特征及对广谱中和抗体产生的可能贡献。在此基础上,设计包膜免疫原,检测免疫效果,探讨不同免疫策略对抗体产生的影响;研究Tfh辅助、B细胞发育和分化在抗包膜糖蛋白抗体产生中的作用,并与其他病毒疫苗产生抗体的机制进行比较。结果:新疆未经治疗的HIV-1慢性感染者中10.6%有广谱中和能力;广西未经治疗的HIV-1慢性感染者中2.4%有广谱中和能力;广谱中和者病毒包膜在已知广谱中和抗体CD4BS、PG9/PG16和4E10及C2、C3、C4区多个位点比非广谱中和者的病毒有更高的稳定性;HIV-1包膜糖蛋白的三聚体、单体免疫产生的抗体水平、中和能力以及T辅助细胞的作用有明显差异;DNA和蛋白免疫原交叉免疫后,产生抗体的滴度有明显差异;单体或三聚体HIV-1包膜免疫原对T辅助细胞诱导抗体产生不同影响。结论:明确了中国HIV-1主要流行区感染者抗体反应情况;发现了一些对诱生广谱中和抗体活性有意义的病毒包膜位点;揭示了HIV-1包膜免疫中,免疫原形式、免疫策略对Tfh细胞辅助抗体生成的部分机制。

关键词： HIV-1 包膜中和抗体 Tfh细胞三聚体

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稳定表达HBx的肝前体细胞株的构建及其对增殖的影响

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第3期29卷 256-260页

作者：芦永良申利红李红丽胡代曦张锡峰胡斌冯涛黄佳祎重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学细胞生物学遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院病理生理学教研室重庆400016

目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组... 详细信息

目的构建稳定表达乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)的肝前体细胞株,检测对肝前体细胞增殖,细胞周期及Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法重组质粒pSEB-Flag-HBx与包装质粒pAmpho共同转染人胚胎肾上皮细胞系293T细胞,包装获得携带HBx基因的重组逆转录病毒,并感染小鼠肝前体细胞HP14.5,稻瘟菌素(blasticidin)筛选出稳定表达HBx基因的细胞克隆并扩大培养(HP14.5/HBx组),设HP14.5/Rv(空质粒pSEEB-Flag感染组)及空细胞组HP14.5组为对照组。MTS比色法检测各组细胞的增殖活力,流式细胞术检测细胞周期中各时相所占的比例,荧光定量PCR检测cyclin D1和c-myc mRNA的表达量,Western blot法检测HBx、GSK3β、p-GSK3β(ser-9)、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等蛋白的表达。结果 RT-PCR和Westernblot法检测到HBx基因和蛋白阳性表达,与对照组相比,HP14.5/HBx细胞增殖活力显著增加(P<0.05);G1细胞比例明显减少(P<0.05),S期和G2细胞比例显著升高(P<0.05);cyclin D1和c-myc mRNA的表达量显著升高(P<0.05);GSK3β蛋白水平表达无明显变化(P>0.05),p-GSK3β、β-catenin、cyclin D1和c-myc蛋白的表达水平显著升高(P<0.05)。结论成功筛选出稳定表达HBx的肝前体细胞株,HBx通过活化Wnt/β-catenin信号途径促进肝前体细胞的增殖。

关键词：乙型肝炎病毒X蛋白肝前体细胞细胞增殖 wnt β-catenin信号途径

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诱导针对中国流行HIV-1交叉抗体反应的免疫原筛选、免疫策略及TFH辅助抗体产生机制研究

诱导针对中国流行HIV-1交叉抗体反应的免疫原筛选、免疫策略及TFH...

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中国免疫学会第九届全国免疫学学术大会

作者：王甲业李妍于昊彤刘松任彩云田丹郭彩霞陈文江庄敏凌虹哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省"感染与免疫"重点实验室黑龙江省高等学校"病原生物学"重点实验室

研究背景:HIV-1包膜免疫原难以诱导有效中和抗体,但其免疫学机制尚不清楚.这已经成为HIV-1疫苗研制的主要障碍.我国流行HIV-1主要亚型为B'、CRF BC和CRF 01AE.分析流行毒株感染人群的抗体产生情况,明确其病毒包膜表位特征,在此基础... 详细信息

研究背景:HIV-1包膜免疫原难以诱导有效中和抗体,但其免疫学机制尚不清楚.这已经成为HIV-1疫苗研制的主要障碍.我国流行HIV-1主要亚型为B'、CRF BC和CRF 01AE.分析流行毒株感染人群的抗体产生情况,明确其病毒包膜表位特征,在此基础上筛选针对流行毒株的包膜免疫原,是研制疫苗的重要基础.同时,探索HIV-1包膜免疫后,Tfh细胞的辅助作用及其诱导中和抗体的规律,能够为研制有效HIV疫苗奠定实验和理论基础.

关键词： HIV-1 包膜中和抗体 Tfh细胞三聚体

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人乳头瘤病毒16型E2蛋白表达、纯化及抗血清制备

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细胞与分子免疫学杂志 2013年第9期29卷 940-944页

作者：孙宇辉张沿君刘明明唐丽萍张光虹魏兰兰谷鸿喜商庆龙哈尔滨医科大学微生物学教研室黑龙江省感染与免疫重点实验室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学附属第一医学院妇科黑龙江哈尔滨150040 哈尔滨医科大学附属肿瘤医院妇科黑龙江哈尔滨150086

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法... 详细信息

目的表达人乳头瘤病毒16型(HPV16)E2蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E2血清。方法采用PCR技术扩增HPV16E2基因,构建入pET21b载体,重组表达载体pET21b-HPV16E2经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3),诱导表达并鉴定表达产物。经纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E2蛋白。免疫BALB/c小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果酶切和测序结果表明pET21b-HPV16 E2构建成功。表达蛋白相对分子质量(M_r)为42 000,Western blot法证明具有较高特异性。小鼠抗血清效价升高,CD4^+T细胞数量和CD4/CD8比值升高,小鼠IFN-γ无升高。结论成功制备可溶性HPV16 E2蛋白和小鼠抗HPV16 E2高效价的抗血清。

关键词：人乳头瘤病毒16型 E2蛋白表达抗血清

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神经干细胞向神经元定向诱导分化方法的研究进展

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医学综述 2014年第18期20卷 3268-3270页

作者：杨晓青刘英富徐云强陈旭义李建国天津中医药大学天津300193 武警后勤学院附属医院脑系科天津300162 武警后勤学院细胞生物学与医学遗传学教研室天津300162 天津医科大学总医院骨科天津300193

神经干细胞(NSCs)是一类具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞,它来源于神经组织,在适当条件下可分化成神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。NSCs体外诱导分化的成体细胞可以用于中枢神经损伤疾病及退行性神经系统疾病的... 详细信息

神经干细胞(NSCs)是一类具有自我更新能力和多种分化潜能的细胞,它来源于神经组织,在适当条件下可分化成神经元、少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞。NSCs体外诱导分化的成体细胞可以用于中枢神经损伤疾病及退行性神经系统疾病的治疗。因此,找到一系列体外诱导NSCs定向分化的模式,诱导其分化为特定的神经细胞,达到神经修复和细胞治疗的目的乃当今神经科学界的研究热点之一。该文主要阐述NSCs向神经元诱导分化方法的研究进展。

关键词：神经干细胞神经元分化

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rhAng-1对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障血管内皮细胞间连接的影响

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中国应用生理学杂志 2013年第2期29卷 147-152页

作者：于航贾庆波薛一雪哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院生理教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学附属第五医院胸外科黑龙江大庆163319 中国医科大学基础医学院神经生物学教研室辽宁沈阳110001

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng... 详细信息

目的:研究重组人血管生成素1(rhAng-1)对局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性的影响及脑微血管内皮细胞间连接蛋白表达的变化。方法:大鼠随机分8组(n=10):①手术组;②缺血组;③～⑤生理盐水+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组;⑥～⑧rhAng-1+缺血/再灌注12 h,48 h,7 d组。用伊文思兰渗透性实验检测血脑屏障通透性;TTC法检测脑梗死面积;按Zea Longer评分标准对大鼠神经功能损伤进行评分;用免疫组化、RT-PCR和West-ern blot法检测occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达。结果:rhAng-1可明显降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性,降低脑梗死面积;rhAng-1可使细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达增加。结论:rhAng-1通过上调脑微血管内皮细胞间连接蛋白occludin、ZO-1和VE-cadherin的表达降低局灶性脑缺血/再灌注大鼠血脑屏障通透性。

关键词：重组人血管生成素1 局灶性脑缺血/再灌注 ZO-1 occludin VE-cadherin

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