检索结果-内蒙古大学图书馆

现代生物医学进展 2014年第1期14卷 77-81页

作者：刘婷婷张玥王丹丹张彤帅张瑶王菁华孙博尚小煜李呼伦王广友哈尔滨医科大学神经生物学教研室黑龙江省高校神经生物学重点实验室黑龙江哈尔滨150081 牡丹江市第二人民医院耳鼻喉科黑龙江牡丹江157005

目的:探讨CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中的作用及其机制。方法:线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO);激光共聚焦显微镜检测小鼠脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞浸润情况;流式细胞仪检测脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞的比例... 详细信息

目的:探讨CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中的作用及其机制。方法:线栓法建立小鼠大脑中动脉栓塞模型(MCAO);激光共聚焦显微镜检测小鼠脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞浸润情况;流式细胞仪检测脑缺血组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞的比例及脾和胸腺中CD8+CD122+T细胞数量变化;RT-PCR方法检测CD8+CD122+T细胞对氧糖剥夺(Oxygen-glucose deprivation,OGD)条件下星形胶质细胞表达TNF-α,IL-1β,IFN-γ的影响。结果:各时间点脑缺血组织中均有CD8+CD122+T细胞浸润,且随脑缺血时间延长,缺血侧脑组织中CD8+CD122+T细胞/CD3+T细胞比例逐渐增加,5 d和7 d组差异显著,与非缺血侧相比,P5d<0.05,P7d<0.05;MCAO小鼠脾及胸腺中CD8+CD122+T细胞呈现先增高后降低的趋势。星形胶质细胞经OGD处理后,与对照组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1β表达显著增高,PIFN-γ<0.01、PTNF-α<0.001、PIL-1β<0.01;CD122-blocked组与CD8+组相比,IFN-γ、TNF-α、IL-1β表达明显增高,PIFN-γ<0.05、PTNF-α<0.05、PIL-1β<0.01;CD8+组与HBSS组相比,IFN-γ表达降低,P<0.05;IL-1β表达有降低的趋势。结论:CD8+CD122+T细胞在脑缺血过程中发挥保护性作用,其保护作用通过CD122抑制星形胶质细胞TNF-α,IL-1β,IFN-γ炎症因子表达实现的。

关键词：脑缺血 CD8+CD122+T细胞氧糖剥夺星形胶质细胞

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上皮-间质转化在前列腺癌中的研究进展

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中华男科学杂志 2013年第4期19卷 360-364页

作者：刘莉王丽玲于晓光林锋哈尔滨医科大学药学院有机化学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室黑龙江哈尔滨150081

前列腺癌(PCa)是老年男性常见疾病,其发病率居西方国家男性恶性肿瘤第2位。近年来,我国的发病率呈上升趋势。肿瘤的转移是导致前列腺癌患者死亡的主要原因。在肿瘤的发生发展过程中,浸润区肿瘤细胞与其微环境相互作用,经历上皮-间质转化... 详细信息

前列腺癌(PCa)是老年男性常见疾病,其发病率居西方国家男性恶性肿瘤第2位。近年来,我国的发病率呈上升趋势。肿瘤的转移是导致前列腺癌患者死亡的主要原因。在肿瘤的发生发展过程中,浸润区肿瘤细胞与其微环境相互作用,经历上皮-间质转化(EMT),最终出现远处转移。因此研究EMT在前列腺癌发生发展中的作用,对前列腺癌治疗有重要意义。本文主要参考近3年相关的文献,以治疗靶点为方向,对促进前列腺癌EMT的因素,作一综述。

关键词：上皮-间质转化前列腺癌治疗靶点

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2型糖尿病患者红细胞膜流动性和血浆自体荧光变化的实验研究

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哈尔滨医科大学学报 2013年第5期47卷 422-424页

作者：陈丽娜张良才何月涵张帆孙红梅朱翔贾婿哈尔滨医科大学生物物理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的探讨脂代谢紊乱在2型糖尿病中的表现和作用。方法将2型糖尿病患者分为伴有高胰岛素血症(hyperinsulinemia,HINSE)和不伴有HINSE两组;用荧光偏振技术测量红细胞膜的流动性;用荧光分光光度计测量血浆的自体荧光发射光谱。结果伴HINSE... 详细信息

目的探讨脂代谢紊乱在2型糖尿病中的表现和作用。方法将2型糖尿病患者分为伴有高胰岛素血症(hyperinsulinemia,HINSE)和不伴有HINSE两组;用荧光偏振技术测量红细胞膜的流动性;用荧光分光光度计测量血浆的自体荧光发射光谱。结果伴HINSE组较不伴HINSE组,红细胞膜的微粘度增大,流动性降低;糖尿病患者在445 nm的荧光峰明显增强,且伴HINSE组较不伴HINSE组增强明显。结论 2型糖尿病患者高胰岛素血症导致脂质代谢紊乱,红细胞变形性下降,膜流动性和通透性改变。脂质过氧化反应和血脂异常导致血浆自体荧光光谱改变。

关键词： 2型糖尿病红细胞膜流动性脂质过氧化自体荧光

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呼吸道感染人腺病毒的分离培养和型别鉴定

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哈尔滨医科大学学报 2013年第5期47卷 385-387,F0004页

作者：王瑞琨商蕾王迎晨金玉霞齐桂云黄冬娟曲章义哈尔滨医科大学卫生微生物学教研室哈尔滨医科大学附属第二医院检验科黑龙江哈尔滨150081

目的从临床呼吸道感染样品中分离人腺病毒毒株并进行型别鉴定。方法将经免疫荧光检测确认为人腺病毒感染的痰标本经处理后接种宫颈癌HeLa细胞进行培养,用空斑试验进行病毒分离和纯化。从纯化后的毒株中提取DNA作为模板,用PCR法扩增腺病... 详细信息

目的从临床呼吸道感染样品中分离人腺病毒毒株并进行型别鉴定。方法将经免疫荧光检测确认为人腺病毒感染的痰标本经处理后接种宫颈癌HeLa细胞进行培养,用空斑试验进行病毒分离和纯化。从纯化后的毒株中提取DNA作为模板,用PCR法扩增腺病毒六邻体高变区基因,对扩增产物进行核酸序列测定,测序结果运用基本局部比对搜索工具以确定其型别。结果从临床样品中分离到一株人腺病毒毒株,其六邻体基因高变区序列同人3型腺病毒六邻体基因的同源性为100%。结论从哈尔滨地区呼吸道感染患者痰标本中分离到人3型腺病毒一株。

关键词：腺病毒呼吸道感染病毒培养空斑试验 PCR

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肿瘤型丙酮酸激酶的原核表达及单克隆抗体的制备

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哈尔滨医科大学学报 2013年第2期47卷 107-111页

作者：张天竹李淑珍李梅于华实孙晓林唐晓波哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的利用原核表达系统表达重组肿瘤型丙酮酸激酶(TU M2-PK),并制备TU M2-PK的单克隆抗体(mAb)。方法提取卵巢癌细胞株SKOV3的RNA,通过逆转录、PCR扩增TU M2-PK基因,将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签PGEX-4T-1载体连接,转化DH5... 详细信息

目的利用原核表达系统表达重组肿瘤型丙酮酸激酶(TU M2-PK),并制备TU M2-PK的单克隆抗体(mAb)。方法提取卵巢癌细胞株SKOV3的RNA,通过逆转录、PCR扩增TU M2-PK基因,将其分别与带有His标签的pET-32a及GST标签PGEX-4T-1载体连接,转化DH5α菌进行基因克隆并测序鉴定。进一步构建表达体系,用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导,最终在BL21菌中表达TU M2-PK融合蛋白(分别含有His、GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blot鉴定。获得的蛋白经纯化后作为免疫原及检测原,进行杂交瘤细胞的筛选。采用间接ELISA法测小鼠血清及细胞上清TU M2-PK抗体效价,Western blot分析mAb特异性。结果成功构建pET-32a-TU M2-PK、pGEX-4t-1-TU M2-PK工程质粒,获得两种标签的融合蛋白。将重组蛋白纯化后作为免疫原免疫小鼠,筛选获得两株稳定分泌TUM2-PK抗体的杂交瘤细胞株。分别命名为6A11、7C11,Western blot实验显示,两株均可以与重组蛋白特异性结合,并且能识别子宫颈癌细胞株(Hela)、胃腺癌细胞(SGC-7901)、肝癌细胞(HepG2)中的天然蛋白。结论成功制备了TU M2-PK蛋白及其单克隆抗体,为进一步开发TU M2-PK诊断试剂打下基础。

关键词： TU M2-PK 原核表达单克隆抗体生物标记物

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靶向抑制Fbxw8对前列腺癌细胞增殖能力的影响

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哈尔滨医科大学学报 2013年第1期47卷 14-18页

作者：赵彬佳惠林平陈媛媛肖莉杰林锋郑秀兰邹海峰于晓光哈尔滨医科大学生物化学与分子生物学教研室哈尔滨医科大学附属第三医院诊断科黑龙江哈尔滨150081

目的探讨Fbxw8对人前列腺癌DU145细胞增殖及对增殖相关基因cyclinA、cyclinB、CDK1、p21和p27表达的影响。方法 RT-PCR和Western blot法验证Fbxw8 siRNAs的干扰效率;利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期分布情况;... 详细信息

目的探讨Fbxw8对人前列腺癌DU145细胞增殖及对增殖相关基因cyclinA、cyclinB、CDK1、p21和p27表达的影响。方法 RT-PCR和Western blot法验证Fbxw8 siRNAs的干扰效率;利用CCK-8检测法检测细胞的增殖能力;流式细胞仪检测细胞周期分布情况;Western blot法检测细胞增殖相关蛋白CDK1、CDK2、cyclinA、cyclinB、P21、P27的表达。结果 Fbxw8 siRNAs显著下调DU145细胞中Fbxw8mRNA及蛋白水平的表达(P<0.01);Fbxw8 siRNAs显著抑制DU145细胞增殖活力,其中72 h抑制最明显(P<0.05);流式细胞术分析显示,Fbxw8 siRNAs可阻滞细胞于G2/M期,G2/M期细胞百分数由15.32%(control siRNA)增加到29.03%(Fbxw8 siRNA 1)和28.39%(Fbxw8 siRNA 2);Western blot结果显示,Fbxw8 siRNAs可促进周期蛋白依赖性激酶抑制剂p21、p27的表达,同时下调G2/M期调控蛋白CDK1、CDK2、cyclin A及cyclin B1的表达。结论靶向抑制DU145细胞中Fbxw8的表达可显著抑制细胞的增殖,使阻滞细胞于G2/M期,并且可能是通过下调CDK1、CDK2、cyclin A及cyclin B1的表达,上调P21、P27的表达实现的。

关键词： Fbxw8 前列腺癌 DU145 细胞增殖细胞周期

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FNBP1参与HeLa细胞的形态控制与生长调控

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第三军医大学学报 2013年第19期35卷 2046-2050页

作者：李鑫温泉周云飞何玉霞张军重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用。方法运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表... 详细信息

目的研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用。方法运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表达恢复2个时相点检测HeLa细胞在细胞形态、细胞周期等方面的变化。结果FNBP1在HeLa细胞中稳定表达;FNBP1表达沉默后,HeLa细胞形态发生纤维状转变;FNBP1表达恢复后,HeLa细胞形态恢复至上皮状;FNBP1表达沉默后,干扰组处于S期的细胞为30.36%,较正常组(25.45%)明显增多(P<0.05);而G2期干扰组细胞比例(9.28%)低于正常组(11.88%,P<0.05);HeLa细胞周期在S期出现阻滞。结论 FNBP1作为关键调控分子,为HeLa细胞的形态建成及维持所必需;FNBP1可能参与HeLa细胞周期调控相关过程。

关键词： FNBP1 HeLa细胞形态控制生长调控

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NIRF对HBV复制的影响及其对组蛋白H3乙酰化水平的修饰

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中国细胞生物学学报 2013年第3期35卷 322-327页

作者：周丹琳胡斌宣艳艳段昌柱重庆医科大学细胞生物学遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学临床检验诊断中心教育部重点实验室重庆400016

为研究NIRF(Np95/ICBP-90 like RING finger protein)对乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)的复制以及与乙型肝炎病毒共价环状闭合DNA(HBV cccDNA)结合的组蛋白H3乙酰化的影响,采用脂质体转染将pGEM-HBV1.3+pFLAG、pGEM-HBV1.3+pFLAG-NIRF、pGEM-HBV1.3质粒分别转入HepG2细胞,Western blot检测NIRF蛋白的表达,用ELISA结合RT-PCR检测HBsAg、HBeAg以及HBV cccDNA的量并同时说明HBV在细胞内是完成完整复制表达的,采用染色质免疫共沉淀(ChIP)的方法检测与HBV cccDNA结合的组蛋白H3以及H3乙酰化水平的动态变化。结果显示,NIRF蛋白下调HBV标志物HBeAg、HBsAg的分泌以及HBV cccDNA的表达,表明其对HBV复制具有抑制作用;组蛋白H3及乙酰化的组蛋白H3都与HBV cccDNA的动态变化水平呈现相似的平行性,而NIRF蛋白也明显抑制组蛋白H3的表达水平和乙酰化水平。结论证实NIRF不仅能抑制HBV在肝癌细胞中的复制,而且能下调与HBV cccDNA结合的组蛋白H3和乙酰化组蛋白H3的表达。期待NIRF能为后续的HBV致病机理、HBV复制表观遗传学水平研究及有效抗病毒药物的研究与开发提供理论上的支持与帮助。

关键词：乙型肝炎病毒 NIRF 组蛋白H3 乙酰化

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UHRF2不同结构域缺失突变体的真核表达

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中国生物制品学杂志 2013年第1期26卷 44-47页

作者：白露王筱绘胡斌周丹琳段昌柱重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的构建UHRF2不同结构域缺失突变体,并在HEK293细胞中表达。方法根据UHRF2不同结构域位置特征,构建5种不同结构域缺失突变体;以重组质粒pCMV-3xFlag-UHRF2为模板,PCR法直接扩增△UBL、△RING和△YDG+△RING编码基因,重叠PCR法扩增△PH... 详细信息

目的构建UHRF2不同结构域缺失突变体,并在HEK293细胞中表达。方法根据UHRF2不同结构域位置特征,构建5种不同结构域缺失突变体;以重组质粒pCMV-3xFlag-UHRF2为模板,PCR法直接扩增△UBL、△RING和△YDG+△RING编码基因,重叠PCR法扩增△PHD和△YDG编码基因,定向克隆至pCMV-3xFlag真核表达载体中,构建重组表达质粒,转染HEK293细胞,Western blot鉴定重组蛋白的表达。结果 UHRF2的结构域缺失体△UBL、△PHD的上游和下游及上下游合并、△YDG的上游和下游及上下游合并、△RING和△YDG+△RING的PCR产物分别可见2 018、987、1 152、2 272、1 232、629、1 827、2 163和1 287 bp的特异条带;UHRF2各结构域缺失体的重组表达质粒经双酶切和测序鉴定,证明构建正确;重组质粒转染HEK293细胞表达的重组蛋白大小均与理论值相符。结论成功在HEK293细胞中表达了UHRF2不同结构域缺失突变体,为进一步研究UHRF2各结构域的功能及其与其他蛋白质的相互作用位点奠定了基础。

关键词： UHRF2 结构域缺失体真核细胞表达

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齐墩果酸与环磷酰胺联合应用对H-22荷瘤小鼠P53突变及TNF-α的影响

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中医药学报 2014年第3期42卷 32-33页

作者：郭艳莹吴勃岩董静李巍哈尔滨市妇幼保健医院黑龙江哈尔滨150010 黑龙江中医药大学生物学教研室黑龙江哈尔滨150040 齐齐哈尔医学院黑龙江齐齐哈尔161006 哈尔滨医科大学附属第四医院黑龙江哈尔滨150001

目的:探讨齐墩果酸及环磷酰胺对H-22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用机制。方法:肝癌H-22肿瘤细胞的小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、齐墩果酸组、齐墩果酸组与环磷酰胺联合应用组。连续给药8天后剥离瘤组织,采用免疫组化法检测肿瘤组织中突变型... 详细信息

目的:探讨齐墩果酸及环磷酰胺对H-22荷瘤小鼠的抗肿瘤作用机制。方法:肝癌H-22肿瘤细胞的小鼠随机分为模型组、环磷酰胺组、齐墩果酸组、齐墩果酸组与环磷酰胺联合应用组。连续给药8天后剥离瘤组织,采用免疫组化法检测肿瘤组织中突变型P53蛋白及肿瘤坏死因子(TNF-α)的含量。结果:齐墩果酸组与环磷酰胺联合应用对H-22荷瘤小鼠TNF-α含量明显提高,与模型组比较差异显著(P<0.05);齐墩果酸组与环磷酰胺联合应用对H-22荷瘤小鼠突变型P53蛋白表达明显降低,与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论:齐墩果酸组与环磷酰胺联合应用能下调H-22荷瘤小鼠肿瘤细胞内突变型P53蛋白的表达,对H-22荷瘤小鼠肿瘤细胞内TNF-α有明显的诱生作用。

关键词：齐墩果酸环磷酰胺 P53蛋白 TNF-α 抗肿瘤

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