检索结果-内蒙古大学图书馆

基础医学教育 2013年第12期15卷 1064-1066页

作者：李晋姜永帅张瑞杰张明明吕洪超尚振伟李霞哈尔滨医科大学生物信息科学与技术学院统计遗传学教研室哈尔滨150081

医学统计学是基础医学七年制专业的专业基础课之一。为了提高学生的理论基础和实践能力,解决以往重理论轻实践的问题,强调以学生为主体,通过让学生自学、讨论、试讲、提问,教师补充讲解的方式来改革课程教学方式。实践证明,该方法大大... 详细信息

医学统计学是基础医学七年制专业的专业基础课之一。为了提高学生的理论基础和实践能力,解决以往重理论轻实践的问题,强调以学生为主体,通过让学生自学、讨论、试讲、提问,教师补充讲解的方式来改革课程教学方式。实践证明,该方法大大提高了学生的学习积极性,得到了很好的教学效果。

关键词：医学统计学教学实践以学生为主体教学

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siIRE1α重组腺病毒构建及对C2C12细胞增殖凋亡的影响

siIRE1α重组腺病毒构建及对C2C12细胞增殖凋亡的影响

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：韩晓凤李美玲张鹏夏飞郭风劲重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室

目的构建内质网跨膜蛋白肌醇酶1α（inositol-requiring enzyme 1α,IRE 1α）基因干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）重组腺病毒,在小鼠成肌细胞系C2C12中鉴定其干扰作用,并探讨其对C2C12细胞增殖凋亡的影响。方法利用OligoEngin... 详细信息

目的构建内质网跨膜蛋白肌醇酶1α（inositol-requiring enzyme 1α,IRE 1α）基因干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）重组腺病毒,在小鼠成肌细胞系C2C12中鉴定其干扰作用,并探讨其对C2C12细胞增殖凋亡的影响。方法利用OligoEngine软件在线设计靶向IRE1α的siRNA干扰序列,送公司合成。用分子克降的方法插入到穿梭载体pSES-HUS上,酶切及基因测序鉴定。经pmeⅠ线性化后,与腺病毒骨架质粒pAdeasy-1通过电转法在大肠杆菌BJ5183感受态中进行同源重组,得到pAd-SES-HUS-IRE1αsiRNA重组质粒,pacI酶切鉴定。通过脂质体介导感染HEK293细胞,进行包装并扩增重组腺病毒Ad-IRE1αsiRNA,然后感染C2C12细胞,用RT-PCR和Western Blot方法检测其对IRE1 mRNA和蛋白表达的干扰效果。并通过FCM法检测在有和无Tm（tunicamycin）的条件下,对C2C12细胞增殖凋亡的影响。影响。结果酶切及基因测序证实,成功构建了pAd-IRE1αsiRNA重组干扰质粒,得到高滴度的Ad-IRE1αsiRNA重组腺病毒,病毒滴度约为4.3×10;RT-PCR和Western Blot结果表明,该重组腺病毒有效的抑制了C2C12细胞中IRE1的表达;FCM检测结果表明,ERS条件下,Tm+Ad-IRE1αsiRNA处理组G1期的细胞比例分别比Tm单独处理组和Tm+Ad-RFP组低14.47%和15.82%（P<0.5）,S期的细胞比例分别比Tm单独处理组和Tm+Ad-RFP组高12.62%和14.80%（P<0.5）;凋亡率比Tm单独处理组和Tm+Ad-RFP组低出16.64%和16.26%（P<0.5）。结论成功构建了靶向IRE1αsiRNA的重组腺病毒,在C2C12细胞中实现了IRE1α表达的抑制;RNA干扰IRE1α基因可促进C2C12细胞的增殖,抑制其凋亡。为进一步研究IRE1基因功能奠定了基础,也为内质网应激相关的骨骼肌疾病提供了一定的参考价值。

关键词： IRE1α基因 RNA干扰重组腺病毒 C2C12细胞

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肿瘤细胞分泌的VEGF-C和CCR7在恶黑淋巴道转移中的作用

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解剖科学进展 2013年第6期19卷 509-512页

作者：李雪梅海里斯王鑫宿菲张雅芳哈尔滨医科大学人体解剖学教研室哈尔滨150081 黑龙江护理高等专科学校哈尔滨150036 哈尔滨医科大学生物信息教研室哈尔滨150081

目的研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)和C-C家族趋化因子受体7(CCR7)与恶性黑色素瘤(恶黑)淋巴管浸润、淋巴结转移的关系及其预后价值。方法免疫组化方法检测56例恶黑组织中VEGF-C和CCR7的表达,淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE-1)标记... 详细信息

目的研究血管内皮生长因子C(VEGF-C)和C-C家族趋化因子受体7(CCR7)与恶性黑色素瘤(恶黑)淋巴管浸润、淋巴结转移的关系及其预后价值。方法免疫组化方法检测56例恶黑组织中VEGF-C和CCR7的表达,淋巴管内皮细胞透明质酸受体1(LYVE-1)标记肿瘤的淋巴管,Kaplan-Meier法进行生存检验,应用Cox比例危险度模型筛选与恶黑预后有关的指标。结果肿瘤细胞胞浆中可检测到VEGF-C和CCR7的表达。CCR7表达与VEGF-C表达和淋巴管浸润有关,CCR7和VEGF-C协同增加淋巴管浸润,CCR7表达与淋巴结转移及预后无关。结论在恶黑组织中VEGF-C和CCR7诱导肿瘤细胞侵入到淋巴管,但CCR7和淋巴管浸润不能作为恶黑的预后指标。

关键词：血管内皮生长因子C C—C家族趋化因子受体7 人恶性黑色素瘤淋巴管浸润

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曲细精管内移植多能干细胞的研究

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生殖与避孕 2013年第12期33卷 849-853,865页

作者：王嘉悦吴嫣爽单智焱孙瑞珍雷蕾哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室胚胎与干细胞工程校重点实验室哈尔滨150081

近年来,干细胞体内分化的研究得到了广泛的开展,其中干细胞曲细精管内移植与分化的相关研究取得了令人瞩目的进展,常用的曲细精管内移植的方法有曲细精管注射法、睾丸输出管注射法和睾丸网注射法,各有优缺点。所移植的细胞可以为精原干... 详细信息

近年来,干细胞体内分化的研究得到了广泛的开展,其中干细胞曲细精管内移植与分化的相关研究取得了令人瞩目的进展,常用的曲细精管内移植的方法有曲细精管注射法、睾丸输出管注射法和睾丸网注射法,各有优缺点。所移植的细胞可以为精原干细胞、体外分化的胚胎干细胞和诱导多能性干细胞及成体干细胞,从而为研究睾丸细胞功能、生物学特性及更好地保存个体基因组和治疗某些疾病所引起的少精子症、无精子症提供强而有力的生物学工具。

关键词：曲细精管干细胞移植体内分化

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BiP调控IRE1α启动子转录活性及蛋白表达的效应

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遗传 2013年第3期 343-351页

作者：周菁华韩晓凤刘艳娜张鹏郭风劲重庆医科大学细胞生物学与遗传学教研室发育生物学模式动物平台重庆400016

正常条件下,外分泌或者跨膜的蛋白需要在内质网中完成正确的折叠。在营养缺乏、分化或其他应激状态下,内质网中的蛋白质会发生错误折叠并不断积聚,形成内质网应激(Endoplasmic reticulum stress),引发未折叠蛋白反应(Unfolded protein r... 详细信息

正常条件下,外分泌或者跨膜的蛋白需要在内质网中完成正确的折叠。在营养缺乏、分化或其他应激状态下,内质网中的蛋白质会发生错误折叠并不断积聚,形成内质网应激(Endoplasmic reticulum stress),引发未折叠蛋白反应(Unfolded protein response)。内质网应激条件下,内质网腔中的分子伴侣结合免疫球蛋白BiP(Binding immunoglobulin protein)与需肌醇酶IRE1α(Inositol-requiring kinase 1)解离并与未折叠蛋白结合从而帮助蛋白形成正确结构;同时未折叠蛋白通过与跨膜蛋白IRE1α直接结合活化其内切核糖核酸酶结构域,活化的IRE1能够剪切Xbp1的mRNA使其形成有活性的转录因子进而起始分子伴侣与未折叠蛋白反应相关蛋白的表达使细胞脱离内质网应激状态。文章克隆了IRE1α的启动子用荧光素酶报告基因法检测到BiP能够上调IRE1的启动子活性。通过构建IRE1α启动子一系列截短体的报告基因载体确定了IRE1α启动子活性的核心区域进一步通过逆转录PCR和免疫印迹在mRNA水平和蛋白水平分别检测BiP对IRE1α启动子的调控作用。结果发现在内质网应激条件下分子伴侣BiP通过上调IRE1α启动子转录活性增加IRE1α的表达进而提高细胞处理内质网应激时未折叠蛋白的能力为揭示内质网应激条件下BiP调控IRE1α转录调控机制提供理论依据,同时为阐明ER stress各信号分子之间的作用机制奠定实验基础。

关键词： RNA 信使/分析操纵子蛋白质类/遗传学分子监控蛋白类基因报告肌醇内质网转录遗传

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鳞状细胞癌抗原SCCA基因的构建、表达及鉴定

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现代生物医学进展 2013年第18期13卷 3420-3423页

作者：于华实孙晓琳张天竹李梅李淑珍唐晓波哈尔滨医科大学药学院生物制药学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:重组人鳞状细胞癌抗原(SCCA)的基因及表达融合蛋白,为下一步建立新的肝癌诊断方法奠定基础。方法:提取子宫颈癌细胞株(hela)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出SCCA基因,将其分别与PET-32a及PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌... 详细信息

目的:重组人鳞状细胞癌抗原(SCCA)的基因及表达融合蛋白,为下一步建立新的肝癌诊断方法奠定基础。方法:提取子宫颈癌细胞株(hela)中的总RNA,应用RT-PCR、PCR等技术扩增出SCCA基因,将其分别与PET-32a及PGEX-4T-1载体连接,转化入DH5α菌中进行克隆,并测序鉴定。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导转入工程质粒的BL21菌中表达SCCA融合蛋白(分别含有HIS,GST-Tag),并进行SDS-PAGE及Western blotting鉴定。结果:经RT-PCR、PCR扩增后成功获得一条450 bp的DNA片段,经测序鉴定与预期序列一致;并成功在大肠杆菌中实现了高表达,经Western blotting鉴定为SCCA融合蛋白。结论:成功获得SCCA目的基因并获得高纯度的SCCA融合蛋白,为进一步开发针对肝癌的SCCA诊断试剂打下基础,开辟诊断肝癌新途径。

关键词：肝癌 SCCA基因克隆表达

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丙烯酰胺对小鼠睾丸生精细胞周期的影响

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毒理学杂志 2013年第2期27卷 115-117页

作者：杨建一张晓玲李媛李雅清祝建疆关丽王丹丹刘百岁张浩朱贵伟鲁晨阳薛国平山西医科大学细胞生物与遗传学教研室山西太原030001 长治市第二人民医院山西省煤炭中心医院

目的研究丙烯酰胺(Acrylamide,AA)对小鼠睾丸生殖细胞周期的影响。方法将7～8周龄40只清洁级健康雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组(蒸馏水),不同剂量的AA(10、20和40 mg/kg)组。对小鼠连续灌胃5周,每周6 d。于首次染毒后第36天处死小鼠... 详细信息

目的研究丙烯酰胺(Acrylamide,AA)对小鼠睾丸生殖细胞周期的影响。方法将7～8周龄40只清洁级健康雄性昆明种小鼠随机分为正常对照组(蒸馏水),不同剂量的AA(10、20和40 mg/kg)组。对小鼠连续灌胃5周,每周6 d。于首次染毒后第36天处死小鼠,采用流式细胞仪检测小鼠生精细胞的周期。结果 FCM结果显示,与对照组相比,各剂量染毒组的1C细胞明显减少,2C细胞的比例显著提高(P<0.01),且10和20 mg/kg剂量组1C和2C细胞的比例差异无统计学意义(P>0.05)。10和20 mg/kg剂量组4C细胞的比例较对照组增加,40 mg/kg组4C细胞的比例低于前两组,但仍高于对照组,且均有统计学意义(P<0.01)。各染毒组1C∶4C,及1C∶2C均明显低于对照组(P<0.01),但各染毒组两两比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。4C∶2C仅在40 mg/kg剂量组与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 AA对小鼠生精细胞有一定的抑制作用,降低了精原细胞转化为精子的效能,使生精过程发生障碍。其致细胞凋亡作用的靶细胞可能是精原细胞。

关键词：丙烯酰胺睾丸生精细胞细胞周期流式细胞术小鼠

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血管内皮细胞生长因子基因-2578C/A多态性与中国北方汉族人群银屑病易感性的相关性研究

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现代生物医学进展 2013年第4期13卷 678-680页

作者：徐杰黄承志黄承滨乔正学孙文靖哈尔滨医科大学生理学教研室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨市中医医院手术室黑龙江哈尔滨150010 哈尔滨医科大学医学遗传学研究室黑龙江哈尔滨150081 哈尔滨医科大学医学心理学教研室黑龙江哈尔滨150081

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)基因-2578 C/A单核苷酸多态性位点与中国北方地区银屑病易感性的相关性。方法:随机收集2005年10月至2007年5月在哈尔滨医科大学附属一、二院皮肤科门诊就... 详细信息

目的:探讨血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)基因-2578 C/A单核苷酸多态性位点与中国北方地区银屑病易感性的相关性。方法:随机收集2005年10月至2007年5月在哈尔滨医科大学附属一、二院皮肤科门诊就诊的246例寻常型银屑病患者(实验组)和271名正常对照个体(对照组)的外周静脉血,使用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法分析VEGF-2578 C/A多态位点基因型,并进行统计学分析。结果:在实验组中,VEGF-2578 C/A等位基因频率分别为74.80%、25.20%;在正常对照组中,VEGF-2578 C/A等位基因频率分别为76.59%、23.41%,两组VEGF-2578 C/A多态位点基因型的分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:VEGF基因-2578 C/A的多态性与中国北方汉族人群银屑病的易感性无明显相关性。

关键词：银屑病血管内皮细胞生长因子基因多态性疾病易感性

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Varp过表达降低腺病毒感染细胞效率的研究

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激光生物学报 2013年第5期22卷 436-440页

作者：王芳苏晓波张岚广州医科大学医学遗传学及细胞生物学教研室广东广州510182

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定... 详细信息

目的:探讨Varp蛋白对腺病毒感染细胞效率的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的HEK293细胞株,用携带EGFP基因的腺病毒载体感染细胞,通过荧光显微镜观察及Western Blotting等方法检测腺病毒对不同细胞感染效率的差别。结果:腺病毒对稳定过表达Varp蛋白的细胞的感染效率较对照细胞明显下降。结论:Varp蛋白在细胞中稳定过表达能够降低腺病毒感染细胞的效率。

关键词： Varp 腺病毒增强型绿色荧光蛋白 HEK293细胞

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PBL教学法在医学遗传学教学中的实施与探索

PBL教学法在医学遗传学教学中的实施与探索

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中国遗传学会第九次全国会员代表大会暨学术研讨会

作者：张娟李莉刘铭杨建一山西医科大学基础医学院细胞生物与遗传学教研室

随着现代生物学和现代遗传学研究技术的蓬勃发展,医学模式及疾病谱的改变,新技术、新方法的不断出现,医学遗传学教学也需要不断改革以适应学科发展和学生培养的需要,应将重点转向培养学生的创新思维,提高综合素质上来。为提高医学遗传... 详细信息

随着现代生物学和现代遗传学研究技术的蓬勃发展,医学模式及疾病谱的改变,新技术、新方法的不断出现,医学遗传学教学也需要不断改革以适应学科发展和学生培养的需要,应将重点转向培养学生的创新思维,提高综合素质上来。为提高医学遗传学教学水平,切实达到培养目标,激发学生的主动刨新思维和实践能力为目标,以教学内容的设置和教学手段、方法改革为突破口积极实施教学改革。我们就医学遗传学教学进行了新的改革和探索。我们尝试运用PBL教学与经典讲授相结合的教学方法,使学生在掌握了相关的基本知识结构,获得较系统的知识框架的基础上,在课外根据PBL教学模式的特点组织活动小组教学,以"遗传性疾病"课外活动小组为突破口,将基础学科知识与临床病例联系起来,探讨了PBL教学法于《医学遗传学》教学中的运用。采用的方法是教师课前提出问题—学生查找资料—分组讨论—课堂汇报—教师总结。具体的实施过程分为下面几个环节。①课前准备根据教学大纲和教学计划的要求,结合医学院校学生学习的特点,将医学遗传学课程中涉及的有关疾病,选择白化病、苯丙酮尿症、人类红绿色盲、糖原累积症、Leber遗传性视神经病、Down综合征、猫叫综合征、先天性卵巢发育不全综合征、先天性睾丸发育不全综合征九个题目。针对2011级七年制临床医学专、每组约10人左右,组长负责组织,组员分工合作,每组选一个题目进行讨论。围绕学过的医学遗传学知识结合疾病,就疾病简介、临床症状、发病机制/病因、类型、发病率、治疗、预防等方面,查阅相关资料,利用教科书、相关书籍上信息及网络等媒体获取信息,教师因势利导分阶段提供相应指导。②课堂汇报及讨论根据收集的资料,采用PPT多媒体的形式各组报告准备的材料,之后,自由发言,讨论并提出疑问,形成师生有效互动。③教师总结由于问题设置均为医学遗传学教学过程中较常见的遗传性疾病,学生都非常感兴趣,在课堂上积极发言和参与讨论,在探讨中发展理性思维和增强对知识的理解。最后由教师综合不同组的讨沦进行小结,进一步加深对遗传病病案的理解和掌握。PBL教学模式能够激发学生学习的积檄性、主动性和创造性,能扩大学生知识面,锻炼学生自主学习能力,培养学生的团队合作能力及综合解决问题的能力。PBL教学模式还锻炼学生的表达能力,提高学生的综合素质。存在的问题是.自律性差的学生不能充分被调动主观能动性,得不到良好的学习机会;指导教师缺乏,不能及时地指导学生时论:少数基础差的学生不能适应PBL。看来,在教学叶不不能机械套用PBL,而应根据具体的教学目标、学生的特点,因人施教,以达到更好的教学效果。创立一套符合实际的教学方法是教学改革的一项长期而艰巨的任务。

关键词：医学遗传学 PBL教学教学改革

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