检索结果-内蒙古大学图书馆

贵州医科大学学报 2021年第2期46卷 152-158页

作者：程筱涵白玉华齐靖邢妍陈紫洁张渝王瞳李丽静郑晓东哈尔滨医科大学大庆校区药物化学与天然药物化学教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学哈尔滨医科大学大庆校区药理教研室黑龙江大庆163319 哈尔滨医科大学大庆校区遗传学与细胞生物学教研室黑龙江大庆163319

目的探讨肉桂醛(CA)对大鼠肠系膜动脉的作用和机制。方法 Sprague Dawley(SD)大鼠5只经水合氯醛麻醉后分离出肠系膜组织,取肠系膜动脉制备2~3 mm血管分为对照组、去内皮组(发丝刮除血管内皮)、左旋硝精氨酸甲酯(L-NAME)+吲哚美辛(Indo)... 详细信息

目的探讨肉桂醛(CA)对大鼠肠系膜动脉的作用和机制。方法 Sprague Dawley(SD)大鼠5只经水合氯醛麻醉后分离出肠系膜组织,取肠系膜动脉制备2~3 mm血管分为对照组、去内皮组(发丝刮除血管内皮)、左旋硝精氨酸甲酯(L-NAME)+吲哚美辛(Indo)组(100 mmol/L L-NAME和10μmol/L Indo孵育30 min)、KCl组(60 mmol/L KCl)及二硫苏糖醇(DTT)组(3 mmol/L DTT孵育30 min)、各组血管段分别用苯肾上腺素(1μmol/L PE)预收缩后,加不同浓度CA(1、10及30μmol/L),采用Myograph血管张力检测系统记录各组大鼠肠系膜动脉张力数值变化;SD大鼠6只水合氯醛麻醉分离肠系膜动脉,分离培养肠系膜动脉内皮细胞(MAECs)和动脉平滑肌细胞(MASMCs),利用细胞免疫荧光实验检测血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)和α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;将MAECs设置为常氧组(21%Fi O2)和缺氧组(3%Fi O2),分别均给予二甲基亚砜(DMSO)、10及30μmol/L CA处理24 h,采用Western blot实验检测各组MAECs中p-eNOS蛋白的表达;MASMCs分别加DMSO及1、10、30μmol/L CA,采用激光扫描共聚焦显微镜技术检测各组MASMCs中Ca2+浓度的变化。结果1、10及30μmol/LCA均可以舒张PE预收缩后的肠系膜动脉(P<0.001);L-NAME+Indo对1、10、30μmol/L CA舒张肠系膜动脉没有影响(P>0.05);去内皮组1和30μmol/L CA肠系膜动脉血管舒张程度明显低于对应浓度对照组(P<0.001);60 mmol/L KCl组和3 mmol/L DTT组血管舒张程度明显低于对照组血管舒张程度(P<0.001);细胞免疫荧光结果显示,不表达血小板-内皮细胞黏附分子CD31的MAECs数量少于表达CD31的MAECs数量,不表达α平滑肌肌动蛋白α-SMA的MASMCs数量少于表达α-SMA的MASMCs数量;不同浓度CA组大鼠MAECs中p-eNOS蛋白表达水平无差异(P>0.05);不同浓度CA对大鼠MASMCs中Ca2+浓度变化无影响(P>0.05)。结论 CA可以舒张肠系膜动脉,其机制不依赖COX及NO途径,可能与血管内皮完整性、内皮源性超极化因子途径及氧化还原途径有关。

关键词：肠系膜动脉二硫苏糖醇血管舒张氧化还原肉桂醛内皮源性超极化因子

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乙型肝炎病毒反转录酶区新型多重耐药突变的鉴定

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解放军医学杂志 2020年第6期45卷 633-638页

作者：陈容娟刘妍罗丹黄碧霞王钧思兰兰李晓东徐东平段昌柱重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室/分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 解放军总医院第五医学中心临床研究管理中心北京100039

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)反转录酶区rtA181S相关新型多重耐药突变的临床发生特点及表型特征。方法回顾性分析2012-2017年就诊于解放军总医院第五医学中心(原解放军第302医院)并接受核苷(酸)类似物(NAs)耐药检测的16443例慢性HBV感染... 详细信息

目的分析乙型肝炎病毒(HBV)反转录酶区rtA181S相关新型多重耐药突变的临床发生特点及表型特征。方法回顾性分析2012-2017年就诊于解放军总医院第五医学中心(原解放军第302医院)并接受核苷(酸)类似物(NAs)耐药检测的16443例慢性HBV感染者的临床资料和序列信息,统计经典NAs耐药突变以及rtA181S相关突变类型;对检出率最高的rtA181S+T184I+M204I突变样本进行克隆测序(≥20个克隆/样本);通过表型分析了解病毒的复制力及药物敏感性。结果16443例慢性HBV感染者中共检出124例rtA181S突变,其中21例与拉米夫定(LAM)耐药突变共存,74例与恩替卡韦耐药突变(ETVr)共存,rtA181S+T184I+M204I突变占rtA181S+ETVr突变的77.0%(57/74)。对有动态临床诊疗信息患者的分析显示,rtA181S+T184I+M204I突变可在使用阿德福韦酯(ADV)、ETV和(或)LAM/替比夫定(LdT)后出现,并伴随病毒学突破或应答不佳。体外表型耐药分析显示rtA181S+T184I+M204I突变株对LAM、ADV和ETV的耐药倍数为野生株的>1000倍、3.9倍和383.3倍,但对替诺福韦酯(TDF)仍敏感。结论rtA181S+T184I+M204I突变是一种新型多重耐药突变,与患者使用ADV、ETV和(或)LAM/LdT应答不佳相关,临床上可考虑用TDF对检出此类型多重耐药突变的患者进行挽救治疗。

关键词：乙型肝炎病毒反转录酶区多重耐药突变抗病毒治疗应答不佳

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LncRNA H2k2促进高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的研究

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中国细胞生物学学报 2020年第2期42卷 213-219页

作者：廖雨滋陈雯韵孙艳彭睿张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

该研究主要探讨lncRNA H2k2对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,采用qRTPCR检测lncH2k2在正常及糖尿病肾病小鼠肾脏组织中的表达,以及高低糖培养的系膜细胞中的表达;FISH与qRT-PCR检测lncH2k2的亚细胞定位;qRT-PCR检测lncH2k2过表达... 详细信息

该研究主要探讨lncRNA H2k2对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,采用qRTPCR检测lncH2k2在正常及糖尿病肾病小鼠肾脏组织中的表达,以及高低糖培养的系膜细胞中的表达;FISH与qRT-PCR检测lncH2k2的亚细胞定位;qRT-PCR检测lncH2k2过表达质粒及siRNA的转染效率;EdU检测转染lncH2k2过表达质粒或siRNA后系膜细胞增殖的变化。结果表明,lncH2k2在糖尿病肾病小鼠肾脏组织及高糖培养的系膜细胞中的表达升高,且lncH2k2主要分布于系膜细胞的细胞质中。在低糖培养的系膜细胞中转染lncH2k2过表达质粒后,与低糖培养的系膜细胞相比,过表达lncH2k2的低糖培养的系膜细胞增殖能力显著提高,并且将qRT-PCR检测筛选出的一条lncH2k2 siRNA转染到高糖培养的系膜细胞内,与高糖培养的系膜细胞相比,敲低lncH2k2后系膜细胞增殖能力显著降低。研究结果揭示,lncRNA H2k2在糖尿病肾病小鼠肾脏组织及系膜细胞中表达显著,lncRNA H2k2促进了系膜细胞增殖,这些结果表明,lncRNA H2k2可能参与了糖尿病肾病的发生发展。

关键词：糖尿病肾病长链非编码RNA 肾小球系膜细胞增殖

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PGRN缺陷抑制IMQ诱导小鼠皮肤炎症组织的自噬和凋亡

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重庆医科大学学报 2019年第11期44卷 1500-1505页

作者：郑维谢巍伟胡勤刘敏罗瑞郭风劲重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室、发育生物学与模式动物平台

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)缺陷型小鼠与野生(wild type,WT)型小鼠在咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)诱导皮肤炎症模型中炎症及自噬的差异性。方法:运用IMQ涂抹WT(44只)和PGRN-/-(16只)小鼠背部皮肤构建银屑样皮肤炎症模型,并通... 详细信息

目的:探讨颗粒蛋白前体(progranulin,PGRN)缺陷型小鼠与野生(wild type,WT)型小鼠在咪喹莫特(Imiquimod,IMQ)诱导皮肤炎症模型中炎症及自噬的差异性。方法:运用IMQ涂抹WT(44只)和PGRN-/-(16只)小鼠背部皮肤构建银屑样皮肤炎症模型,并通过蛋白质印迹(Western blot)、定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)、苏木精-伊红(hematoxylin and eosin,HE)染色等方法检测小鼠组织结构、炎性因子[白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、一氧化氮合酶2(nitric oxide synthase 2,NOS2)、环氧化酶2(cyclo-oxygen-ase 2,COX2)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)]、凋亡相关蛋白[半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase 3,Caspase 3)]以及自噬相关蛋白[微管相关蛋白1轻链3(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3)、泛素结合蛋白(ubiquitin binding protein,P62)、自噬相关蛋白5(autophagy related protein 5,ATG5)、自噬相关蛋白7(autophagy related protein 7,ATG7)、自噬相关蛋白5和12的复合物(complex of autophagy related protein 5 and 12,ATG5-ATG12)]的变化。结果:成功建立了小鼠皮肤炎症模型,在WT小鼠模型中观察到上皮组织明显增厚,炎性细胞浸润增多,血管生成增加,炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α、NOS2、COX2在第6天表达最高(P<0.05),自噬随着时间的增加而增加;此外,第6天脾脏比重明显增加(P<0.05),炎性因子IL-6、IL-10、TNF-α、NOS2、COX2、IL-1β表达最高(P<0.05)。与WT模型小鼠相比,PGRN-/-模型小鼠背部皮肤加厚更加明显,炎性因子IL-6、NOS2表达更高(P<0.05),组织自噬与凋亡水平明显降低(P<0.05)。结论:WT小鼠和PGRN-/-小鼠都能够在第6天成功建立小鼠皮肤炎症模型;与WT小鼠皮肤炎症模型相比,PGRN-/-小鼠加重了皮肤炎症模型症状,这一过程可能与PGRN缺陷阻碍了自噬的产生有关。

关键词：咪喹莫特颗粒蛋白前体自噬炎症凋亡

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miR-449a通过Trim11影响高糖培养的肾小球系膜细胞增殖

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第三军医大学学报 2019年第16期41卷 1520-1526页

作者：陈雯韵孙艳彭睿彭惠民张政重庆医科大学基础医学院:细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院:分子肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用。方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-4... 详细信息

目的探讨在高糖培养的系膜细胞中miR-449a与Trim11结合对细胞增殖的调控作用。方法 RT-qPCR检测miR-449a在高糖(25 mmol/L)和低糖(5.5 mmol/L)培养的系膜细胞中的表达;EdU检测miR-449a及Trim11对系膜细胞增殖的影响;生物信息学预测miR-449a与Trim11的结合位点;双荧光素酶验证miR-449a与Trim11靶向作用;Western blot检测上调、下调miR-449a后Trim11蛋白的变化。结果与低糖组比较,miR-449a在高糖培养的系膜细胞中的表达显著降低(P<0.01);双荧光素酶证实miR-449a直接靶向Trim11,过表达miR-449a后,细胞增殖减少,Trim11蛋白水平显著降低(P<0.01);沉默miR-449a,细胞增殖增加,Trim11蛋白水平显著上调(P<0.01);沉默Trim11后,抑制miR-449a对于细胞增殖促进作用被阻止。结论 miR-449a可抑制系膜细胞增殖,其机制可能与抑制靶基因Trim11的表达有关,可能是糖尿病肾病的重要保护性因子。

关键词：肾小球系膜细胞 miR-449a Trim11 细胞增殖

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抗人CLC-7多克隆抗体的制备

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国际免疫学杂志 2019年第2期42卷 127-130页

作者：徐勇王瑶袁园赵朔暄赵文然哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081

目的制备抗氯离子通道蛋白(chloride channel 7,CLC-7)多克隆抗体.方法将表达载体pEGFP-CLC-7导入感受态大肠杆菌DH-5α,利用异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-d-thiogalacto-side,IPTG)诱导细菌表达CLC-7蛋白;经SDS-PAGE电泳后切胶获得纯化的CLC-7蛋白,与免疫佐剂乳化后免疫新西兰大白兔,免疫5次后,经心脏采血获取抗血清,用Western blot检测抗血清特异性及效价.结果与市售的CLC-7抗体比较,所获抗CLC-7抗血清可识别细菌及HeLa细胞表达的CLC-7蛋白,表明抗血清有较好的特异性;1:4000倍稀释抗血清时,Western blot实验仍可获得清晰的反应带,表明所制备的抗CLC-7多克隆抗体有较高的效价.结论利用原核表达的CLC-7蛋白作为抗原免疫动物,获得了高效价且特异性好的抗人CLC-7蛋白多克隆抗体,该抗体可用于后续研究.

关键词：氯离子通道蛋白7 抗体

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长链非编码RNA Rpph1对高糖培养的肾小球系膜细胞炎症因子表达的影响

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第三军医大学学报 2019年第1期41卷 33-40页

作者：张攀扬孙艳彭睿彭惠民张政重庆医科大学基础医学院细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学基础医学院分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨长链非编码RNA (long non-coding RNA,lncRNA) Rpph1对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)肾小球系膜细胞炎症因子的影响。方法采用荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)检测Rpph1细胞定位,实时定量PCR (quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测Rpph1在DN小鼠肾脏组织和系膜细胞中的水平;生物信息学技术预测Rpph1的编码蛋白能力。构建Rpph1的过表达质粒,并设计合成Rpph1的siRNAs,用qRT-PCR验证其转染效率。在高糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1-siRNA;在低糖培养的肾小球系膜细胞中转染Rpph1过表达质粒,通过Western blot检测转染Rpph1的siRNA和过表达Rpph1后肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)以及单核细胞趋化蛋白-1(macrophage cationic peptide 1,MCP-1)的表达情况。结果与正常小鼠比较,Rpph1在DN小鼠肾脏组织中显著上调(P <0. 01);同样,高糖培养的系膜细胞中Rpph1表达较低糖培养的系膜细胞显著上调(P <0. 01),其主要定位于系膜细胞的细胞质。此外,生物信息学证实Rpph1不具有编码蛋白的能力。且过表达Rpph1后炎症相关因子TNF-α和MCP-1的水平明显上调(P <0. 05);在下调Rpph1后,炎症相关因子TNF-α和MCP-1的表达也随之下降(P <0. 05)。结论在DN小鼠肾脏组织和高糖环境下的系膜细胞中lncRNA Rpph1显著高表达,且增强炎症相关因子的表达。Rpph1可能与糖尿病肾病炎症的发生相关。

关键词：糖尿病肾病长链非编码RNA Rpph1 肾小球系膜细胞炎症

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运动神经元疾病中TDP43的翻译后修饰研究进展

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国际免疫学杂志 2019年第6期42卷 623-627页

作者：袁园赵文然哈尔滨医科大学基础医学院细胞生物学教研室 150081

肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是成人中最常见的运动神经元疾病.反式激活反应-DNA结合蛋白(TAR DNA-binding protein 43,TDP43)是ALS患者神经元内泛素化蛋白聚集物的主要成分.这些异常TDP43聚集物中存在多种修... 详细信息

肌萎缩性侧索硬化症(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)是成人中最常见的运动神经元疾病.反式激活反应-DNA结合蛋白(TAR DNA-binding protein 43,TDP43)是ALS患者神经元内泛素化蛋白聚集物的主要成分.这些异常TDP43聚集物中存在多种修饰,如磷酸化、泛素化、乙酰化或SUMO化.这些翻译后的修饰如何以及在多大程度上促成病理TDP43聚集物的形成,有待进一步研究.

关键词：肌萎缩性侧索硬化症反式激活反应-DNA结合蛋白43 翻译后修饰

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Sulforaphane抑制热灭活大肠杆菌诱导的HeLa细胞凋亡

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国际免疫学杂志 2019年第3期42卷 235-240页

作者：张箭董艳艳瞿丛王瑶赵朔暄赵文然哈尔滨医科机能实验教学中心 150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室 150081

目的研究Sulforaphane(SFN)对细胞凋亡的抑制作用及其在脓毒症中对细胞的保护作用。方法将HeLa细胞分为4组:对照组、热灭活大肠杆菌(Escherichia coli,***)处理组、SFN处理组(SFN组)和热灭活***+SFN组。酶联免疫反应检测炎症因子白细胞... 详细信息

目的研究Sulforaphane(SFN)对细胞凋亡的抑制作用及其在脓毒症中对细胞的保护作用。方法将HeLa细胞分为4组:对照组、热灭活大肠杆菌(Escherichia coli,***)处理组、SFN处理组(SFN组)和热灭活***+SFN组。酶联免疫反应检测炎症因子白细胞介素(interleukin,IL)-1β和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α;流式细胞术(annexin V/propidium iodide双染)检测细胞凋亡;免疫荧光检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量及线粒体膜电位的变化;Western blot检测活化的caspase 3、bax和bcl-2水平。结果热灭活***处理后,细胞产生的炎症因子IL-1β[(121.13±8.44)pg/mL比(36.67±5.82)pg/mL,P<0.05]和TNF-α[(123.83±7.32)pg/mL比(20.63±1.91)pg/mL,P<0.05]明显升高、凋亡细胞数明显增加[(32.49±3.96)%比(12.52±1.37)%,P<0.05]、活化的caspase 3[(2.28±0.19)比(1.01±0.19),P<0.05)]和BAX[(4.81±0.80)比(1.04±0.25),P<0.05)]水平明显升高,而bcl-2[(0.27±0.08)比(0.96±0.18),P<0.05)]水平明显降低。用SFN处理后(包括SFN组、热灭活***+SFN组),IL-1β[(45.41±13.16)pg/mL比(121.13±8.44)pg/mL,P<0.05],TNF-α[(30.3±6.0)pg/mL比(123.8±7.3)pg/mL,P<0.05]水平明显降低、凋亡细胞明显减少[(11.34±2.05)%比(32.49±3.96)%,P<0.05]、活化的caspase3[(1.01±0.07)比(2.282±0.19),P<0.05)]、BAX[(2.15±0.14)比(4.81±0.80),P<0.05)]明显减少,而bcl-2[(1.34±0.18)比(0.27±0.08),P<0.05)]水平明显增加。与此相对应,与灭活***处理的细胞相比较,加入SFN(包括SFN组和热灭活***+SFN组),ROS水平明显下降[(1.27±0.17)比(6.30±1.50),P<0.05)],而线粒体膜电位明显上升[(1.18±0.10)比(0.14±0.01),P<0.05)]。结论SFN可有效抑制热灭活***诱导的HeLa细胞调亡、稳定线粒体膜电位、降低ROS、抑制炎性因子的产生。因此,SFN可能作为脓毒血症时保护细胞的药物。

关键词： Sulforaphane 细胞凋亡活性氧炎症因子

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三明治教学法在医学细胞生物学教学中的应用

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基础医学教育 2019年第1期21卷 20-21页

作者：路博宫婷白冰哈尔滨医科大学大庆校区基础医学院遗传学与细胞生物学教研室大庆163319

医学细胞生物学是医学院校的基础课程,是学生学习其他基础课及专业课的基础。文章以精神医学本科专业为研究对象,根据课程知识体系选取部分内容开展三明治教学法。学生成绩及问卷调查结果显示,采用三明治教学法有助于激发学生的学习兴趣... 详细信息

医学细胞生物学是医学院校的基础课程,是学生学习其他基础课及专业课的基础。文章以精神医学本科专业为研究对象,根据课程知识体系选取部分内容开展三明治教学法。学生成绩及问卷调查结果显示,采用三明治教学法有助于激发学生的学习兴趣,加强学生的自主学习能力,提升课堂教学效果。

关键词：医学细胞生物学三明治教学法自主学习能力课堂教学

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