检索结果-内蒙古大学图书馆

国际病毒学杂志 2014年第6期21卷 253-259页

作者：王瑞雪吴珩陈阳潘博佟雷王天楹赵文然钟照华哈尔滨医科大学机能学实验教学中心哈尔滨150081 哈尔滨医科大学微生物学教研室哈尔滨150081 哈尔滨医科大学细胞生物学教研室哈尔滨150081

目的探讨柯萨奇病毒B组3型（CVB3） woodruff病毒2B蛋白对细胞自噬的诱导作用,及其自噬相关基序的鉴定.方法分别构建增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与CVB3 woodruff病毒2B蛋白及其9种截短蛋白的融合蛋白（EGFP-2B、EGFP-2B1-249、EGFP-2B... 详细信息

目的探讨柯萨奇病毒B组3型（CVB3） woodruff病毒2B蛋白对细胞自噬的诱导作用,及其自噬相关基序的鉴定.方法分别构建增强型绿色荧光蛋白（EGFP）与CVB3 woodruff病毒2B蛋白及其9种截短蛋白的融合蛋白（EGFP-2B、EGFP-2B1-249、EGFP-2B1-201、EGFP-2B1-153、EGFP-2B1-105、EGFP-2B1-57、EGFP-2B106.201、EGFP-2B106-249、EGFP-2 B205-297、EGFP-2B106-201）真核表达载体,红色荧光蛋白（mCherry）与微管相关蛋白轻链3（LC3）的融合蛋白真核表达载体pmCherry-LC3;应用激光共聚焦与蛋白质免疫印迹（Western blot）检测病毒2B蛋白对宫颈癌细胞（HeLa） LC3表达的影响;荧光显微镜观察9种截短蛋白在HeLa细胞中的表达;Western blot检测pEGFP-2B和pEGFP-2B106-249转染细胞后LC3的表达;观察自噬抑制剂3-甲基腺苷（3-MA）处理后,pEGFP-2B和pEGFP-2B106-249诱导细胞自噬的情况.结果 CVB3攻击HeLa细胞后,mCherry-LC3呈现细胞核周点状聚集表达,Western blot检测出现清晰LC3-Ⅱ条带;pEGFP-2B与pmCherry-LC3共转染后也可见细胞核周围绿色荧光与红色荧光均成点状聚集并相互重叠,且LC3-Ⅱ条带明显;9种截短融合蛋白质粒分别转染HeLa细胞后,其中可见细胞核周围绿色荧光点状聚集的最短截短蛋白为EGFP-2B106-249;pEGFP-2B和pEGFP-2B106-249转染细胞后可检测出现清晰LC3-Ⅱ条带;3-MA处理后,pEGFP-2B和pEGFP-2B106-249分别与pmCherry-LC3共转染的细胞均未见绿色和红色荧光的核周点状聚集.结论 CVB3 woodruff病毒2B蛋白可以诱导宿主细胞发生自噬,其中截短蛋白2B106-249是病毒蛋白2B诱导HeLa细胞发生自噬的功能基序.

关键词：柯萨奇病毒B组3型自噬基序融合蛋白微管相关蛋白轻链3 Microtubule-associated protein light chain 3

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沉默整合素连接激酶基因对TCA8113舌癌细胞移植瘤生长的影响

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第三军医大学学报 2014年第19期36卷 1996-2000页

作者：幸宇齐进邓世雄陈俊霞重庆医科大学基础医学院法医生物信息学研究室重庆400016 细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆医科大学附属口腔医院牙体牙髓科重庆400015

目的研究沉默TCA8113舌癌细胞整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,对其下游底物Akt和GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的影响。方法通过Lipofectamine 2000介导将特异性siILK表达载体和无同源性的对照载... 详细信息

目的研究沉默TCA8113舌癌细胞整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因的表达,对其下游底物Akt和GSK3β磷酸化状态及对移植瘤生长和自发性转移的影响。方法通过Lipofectamine 2000介导将特异性siILK表达载体和无同源性的对照载体,稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,将3组细胞分别注入裸鼠皮下构建移植瘤模型,5周后检测瘤质量,对裸鼠肺及瘤组织形态学行常规病理学检查,使用免疫荧光技术检测体外和体内癌细胞p-Akt和p-GSK3β等的表达,并观察瘤组织内血管生成情况。结果 TCA8113组、TCA8113 vector组肺组织均发生自发性转移瘤,TCA8113 siILK组肺组织未发现自发性转移瘤;TCA8113 siILK组移植瘤细胞形态较其他2组体积减小,核分裂象较少,核浆比例缩小;TCA8113 siILK组在体内和体外实验中的p-Akt和p-GSK3β表达较其他2组均明显下降(P<0.05);TCA8113 siILK组移植瘤质量较其他2组显著降低(P<0.05),抑瘤率分别为84%和92%;TCA8113 siILK组移植瘤血管生成较其他2组也明显减少(P<0.05)。结论沉默TCA8113舌癌细胞ILK表达可抑制其下游信号传导分子Akt和GSK3β的磷酸化,并抑制移植瘤血管生成,从而抑制移植瘤的生长。

关键词：整合素连接激酶人舌鳞癌细胞移植瘤生长微血管

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Varp蛋白影响人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的研究

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激光生物学报 2014年第2期23卷 155-158页

作者：王芳张岚广州医科大学医学遗传学及细胞生物学教研室广东广州510182

目的:探讨Varp蛋白对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的Hela细胞株,通过氚标胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法及碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测Varp蛋白对Hela细胞增殖、凋亡等方面的影响。结果:稳定表达Var... 详细信息

目的:探讨Varp蛋白对人宫颈癌Hela细胞增殖及凋亡的影响。方法:构建稳定表达Varp蛋白的Hela细胞株,通过氚标胸腺嘧啶核苷酸(3H-TdR)掺入法及碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测Varp蛋白对Hela细胞增殖、凋亡等方面的影响。结果:稳定表达Varp蛋白的Hela细胞相对于对照细胞,其增殖明显下降,而凋亡明显增加。结论:Varp蛋白在Hela细胞中稳定过表达能够增加细胞凋亡,抑制细胞增殖。

关键词： Varp Hela 细胞增殖细胞凋亡

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思密达对大肠杆菌K88体外抑菌活性及吸附清除能力的研究

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医学信息（医学与计算机应用） 2014年第20期18卷 167-167,168页

作者：王芳李佩琼张岚广州医科大学医学遗传学及细胞生物学教研室广东广州510182

目的探讨体外思密达对大肠杆菌K88的抑菌活性及吸附清除能力。方法利用体外抑菌实验及吸附清除实验研究思密达在体外对大肠杆菌的抑菌活性及吸附清除能力。结果在体外抑菌实验中,思密达对大肠杆菌K88的生长较对照无明显抑制作用;而以不... 详细信息

目的探讨体外思密达对大肠杆菌K88的抑菌活性及吸附清除能力。方法利用体外抑菌实验及吸附清除实验研究思密达在体外对大肠杆菌的抑菌活性及吸附清除能力。结果在体外抑菌实验中,思密达对大肠杆菌K88的生长较对照无明显抑制作用;而以不同浓度思密达进行的体外吸附清除实验中,各浓度思密达处理后的大肠杆菌K88菌落形成较对照均明显减少。结论思密达在体外对大肠杆菌K88并无直接的抑制作用,但具明显的吸附清除能力。

关键词：思密达大肠杆菌抑菌吸附清除

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108例汉族人群let-7a基因调控区多态性与糖尿病肾病的相关性分析

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第三军医大学学报 2014年第12期36卷 1312-1316页

作者：周吉彭睿罗勇军李天驹孙艳尹频彭惠民张政重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心细胞生物学及遗传学教研室重庆400016 重庆医科大学生物信息学教研室重庆400016 第三军医大学高原军事医学系军事医学地理学教研室重庆400038 重庆医科大学附属第一医院感染科重庆400016 重庆医科大学实验教学中心重庆400016

目的探寻循环miRNA let-7a与糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)的关系,分析并评估let-7a调控区域单核甘酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)对DN疾病的易感性。方法 Real-time PCR检测病例组及对照组中let-7a的表达水平。生物信息学方法预测并筛选3个位于let-7a前体(let-7a-2)启动子调控区域标签SNP(Tag SNP),采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(RFLP-PCR)法对108例糖尿病肾病(DN)、104例糖尿病(DM)患者及62例健康人对照(CON)3个SNP进行基因分型。结果 Real-time PCR结果显示let-7a在DN、DM、CON三组中表达水平有显著差异(P<0.05)。let-7a-2基因调控区域rs1143770多态位点的CT杂合子基因型在DN、DM、CON三组间有显著差异(P<0.05),且在DM组和DN组CT+TT两基因型均依次较CON组显著升高(P=0.049;P=0.001)。结论 miRNA let-7a可能参与调控DN疾病,其启动子调控区rs1143770多态与中国汉族人群糖尿病肾病相关,可能是个潜在的功能位点。

关键词：糖尿病肾病 miRNA let-7a 单核苷酸多态性

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异色瓢虫取食蚕豆蚜及菜蚜的生物学特性研究

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生物技术世界 2014年第5期11卷 184-187页

作者：晏响唐健大理学院农学与生物科学学院云南大理671000 昆明医科大学基础学院细胞生物学及遗传学教研室云南昆明650031

原产于亚洲的异色瓢虫[Harmonia axyridis Pallas(Coleoptera:Coccinellidae)]是最重要的捕食性瓢虫种类之一,被广泛应用于农林业害虫的生物防治。通过室内给予异色瓢虫两种不同的食物(豆蚜、菜蚜)的饲养,观察其生物学特性(如生活史、... 详细信息

原产于亚洲的异色瓢虫[Harmonia axyridis Pallas(Coleoptera:Coccinellidae)]是最重要的捕食性瓢虫种类之一,被广泛应用于农林业害虫的生物防治。通过室内给予异色瓢虫两种不同的食物(豆蚜、菜蚜)的饲养,观察其生物学特性(如生活史、食性、龄期变化、羽化时间及产卵数量等)的区别,研究发现,对于给予不同的食物饲养,异色瓢虫会表现出某些差异性的生物学特性。二龄、三龄其历期各组都为3~5d,无区别;但以菜蚜饲养的异色瓢虫四龄、蛹期历时分别为7~11d、9~12d,而以豆蚜饲养的分别为9~11d、8~11d;异色瓢虫蛹的羽化率以菜蚜饲养:以豆蚜饲养为100%:95%;在产卵方面,以菜蚜饲养的异色瓢虫平均19粒/块、小于300粒/头,而以豆蚜饲养的异色瓢虫产卵平均大于22粒/块、大于600粒/头,在总体特性方面也有明显区别。另外,对以菜蚜饲养的异色瓢虫成活时间平均都在60d左右,而以豆蚜饲养的成活时间平均都在90d左右。研究表明,给予豆蚜饲养异色瓢虫优势略大于以菜蚜饲养。在得出结果后本文并对异色瓢虫在农业生产特别是果园、菜地、温室花卉上的应用前景作了讨论,指出异色瓢虫是一种很有利用前景和产业化生产价值的天敌生物。

关键词：异色瓢虫生物防治生物学特性食物饲养

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FNBP1参与HeLa细胞的形态控制与生长调控

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第三军医大学学报 2013年第19期35卷 2046-2050页

作者：李鑫温泉周云飞何玉霞张军重庆医科大学分子医学与肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用。方法运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表... 详细信息

目的研究FNBP1在HeLa细胞形态控制及生长调控过程中的作用。方法运用RT-PCR、Western blot法在mRNA和蛋白水平验证FNBP1在HeLa细胞中的表达;运用RT-PCR、Western blot法检测靶向siRNA干扰HeLa细胞内源FNBP1的表达情况,并于完全沉默和表达恢复2个时相点检测HeLa细胞在细胞形态、细胞周期等方面的变化。结果FNBP1在HeLa细胞中稳定表达;FNBP1表达沉默后,HeLa细胞形态发生纤维状转变;FNBP1表达恢复后,HeLa细胞形态恢复至上皮状;FNBP1表达沉默后,干扰组处于S期的细胞为30.36%,较正常组(25.45%)明显增多(P<0.05);而G2期干扰组细胞比例(9.28%)低于正常组(11.88%,P<0.05);HeLa细胞周期在S期出现阻滞。结论 FNBP1作为关键调控分子,为HeLa细胞的形态建成及维持所必需;FNBP1可能参与HeLa细胞周期调控相关过程。

关键词： FNBP1 HeLa细胞形态控制生长调控

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RNA干扰整合素连接激酶基因表达对人舌鳞癌Tb细胞生长、迁移和侵袭能力的影响

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中国生物制品学杂志 2013年第7期26卷 916-922页

作者：幸宇邓世雄陈俊霞重庆医科大学法医生物信息学研究室重庆400016 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心重庆400016

目的探讨沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达对人舌鳞癌Tb细胞生长、迁移和侵袭能力的影响。方法将ILK siRNA表达质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染人舌鳞癌Tb细胞,稳定表达细胞株分别命名为Tb siILK和Tb vec... 详细信息

目的探讨沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达对人舌鳞癌Tb细胞生长、迁移和侵袭能力的影响。方法将ILK siRNA表达质粒和阴性对照质粒在脂质体介导下转染人舌鳞癌Tb细胞,稳定表达细胞株分别命名为Tb siILK和Tb vector组,并设正常Tb细胞对照组(Tb组)。Western blot法检测细胞中ILK蛋白的表达;细胞免疫荧光法检测细胞中ILK、p-Akt和p-GSK3β的表达;光镜和HE染色观察细胞的形态学变化;划痕试验检测细胞的迁移能力;Transwell法检测细胞的侵袭能力;流式细胞术检测细胞的细胞周期和凋亡情况;MTT法检测细胞的增殖活力;Western blot法检测沉默ILK基因后细胞中p-Akt、Akt、p-GSK3β、GSK3α/β、Snail的表达。结果与Tb和Tb vector组相比,Tb siILK组细胞中ILK蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);ILK、p-Akt、p-GSK3β在胞质中的荧光信号明显减弱;大部分细胞的上皮形态特征更为明显;细胞的迁移距离和侵袭细胞数显著减少(P<0.05);G2-M期和G0-G1期细胞比例均显著增加(P<0.01);细胞的增殖活力显著减低;ILK基因沉默后,细胞中p-Akt、p-GSK3β和Snail蛋白的表达水平显著降低(P<0.05)。3组细胞的凋亡率差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制ILK基因的表达可通过Akt/GSK3β/Snail途径显著抑制人舌鳞癌Tb细胞的生长、迁移和侵袭能力,ILK有望作为治疗人舌鳞癌的靶基因。

关键词：整合素连接激酶 RNA干扰人舌鳞癌细胞细胞生长细胞迁移侵袭

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沉默整合素连接激酶基因抑制TCA8113舌癌细胞生长和侵袭

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第三军医大学学报 2013年第15期35卷 1552-1557页

作者：幸宇邓世雄陈俊霞重庆医科大学基础医学院法医生物信息学研究室 400016 重庆医科大学基础医学院:细胞生物学及遗传学教研室分子医学与肿瘤研究中心 400016

目的研究沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达,对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移能力的影响。方法通过用ILK mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA811... 详细信息

目的研究沉默整合素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)基因表达,对人舌鳞癌细胞生长、侵袭和转移能力的影响。方法通过用ILK mRNA的特异性siRNA表达载体和无同源性的对照载体,在脂质体介导下稳定转染人舌鳞癌TCA8113细胞,分为TCA8113组、TCA8113 vector组和TCA8113 siILK组,通过筛选鉴定后,用MTT法、划痕试验和Transwell法分别检测细胞生长、迁移和侵袭能力,用Western blot分析细胞中ILK、p-Akt、p-GSK3β及Snail等的表达。结果沉默ILK基因表达显著抑制了细胞的生长、迁移和侵袭能力,接种的第48、72、96、120小时,TCA8113 siILK组的抑制率分别为17%、29%、25%、42%,迁移能力较TCA8113组和TCA8113 vector组分别下降67%和66%,侵袭能力则较两个对照组下降了67%和68%,p-Akt、p-GSK3β及Snail的表达较TCA8113组和TCA8113 vector组分别降低了45%和53%,57%和61%,74%和73%。结论抑制ILK基因的表达可通过Akt/GSK3β/Snail途径,显著抑制人舌鳞癌TCA8113细胞的生长、迁移和侵袭潜能,可作为治疗人舌鳞癌的靶蛋白。

关键词：整合素连接激酶人舌鳞癌细胞肿瘤生长转移侵袭

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miR-451靶向调控肾小球系膜细胞Ywhaz基因的表达

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中国生物制品学杂志 2013年第8期26卷 1107-1112页

作者：查何彭惠民马晶周吉王瑞敏尹频文利张政重庆医科大学分子医学及肿瘤研究中心重庆400016 重庆医科大学基础医学实验教学中心重庆401331 重庆医科大学细胞生物学及遗传学教研室重庆400016

目的探讨miR-451对肾小球系膜细胞Ywhaz基因表达的靶向调控。方法应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3′UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTMvector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-Ywhaz-3′UTR... 详细信息

目的探讨miR-451对肾小球系膜细胞Ywhaz基因表达的靶向调控。方法应用生物信息学技术对miR-451的靶基因进行预测,PCR法扩增靶基因3′UTR全长片段,插入荧光素酶报告载体pmiR-RB-REPORTTMvector中,构建荧光素酶报告质粒pmiR-Ywhaz-3′UTR。将miR-451 mimics和NC mimics分别转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,将miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,采用Real-time RT-PCR和Westernblot法检测miR-451和Ywhaz的表达水平;将miR-451 mimics和NC mimics分别与pmiR-Ywhaz-3′UTR共转染高糖培养条件下的小鼠系膜细胞,miR-451 inhibitor和NC inhibitor分别与pmiR-Ywhaz-3′UTR共转染低糖培养条件下的小鼠系膜细胞,检测各组细胞荧光素酶活性。结果 Ywhaz基因3′UTR区有11个碱基与miR-451种子序列匹配,其中7个碱基呈高度保守性;荧光素酶报告质粒经测序鉴定构建正确;miR-451在miR-451 mimics组呈高表达,在miR-451 inhibitor组表达降低;miR-451可抑制Ywhaz的蛋白表达;荧光素酶活性检测发现,miR-451可通过与Ywhaz3′UTR的结合,抑制Ywhaz的表达。结论 miR-451可直接靶向糖尿病相关基因Ywhaz,抑制其蛋白表达,为进一步研究miR-451调控早期糖尿病肾病发生发展的机制提供了依据。

关键词： miR-451 Ywhaz基因靶基因早期糖尿病肾病

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