检索结果-内蒙古大学图书馆

中华器官移植杂志 2005年第10期26卷 622-624页

作者：周毅许评邢军陈艳波李爱东宋纯宋春芳哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001

目的观察大鼠胰岛冻存后经三维微重力细胞旋转培养系统(RCCS)培养后移植给受者能否明显提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为3组。实验1组:即将胰岛在RCCS中培养3d后,悬浮于4℃低温保存液(HTS)中,放置30min,然后进行冻存步... 详细信息

目的观察大鼠胰岛冻存后经三维微重力细胞旋转培养系统(RCCS)培养后移植给受者能否明显提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为3组。实验1组:即将胰岛在RCCS中培养3d后,悬浮于4℃低温保存液(HTS)中,放置30min,然后进行冻存步骤;冻存1个月后进行复苏,继续在RCCS中培养30d;实验2组:新鲜大鼠胰岛在RCCS中培养30d;对照组:大鼠胰岛在冻存前后均在普通培养基中培养,培养步骤和时间同实验1组。上述3组胰岛复苏后再按各组应用的培养体系培养7d,然后分别以2000IEQ冻存或新鲜胰岛移植入糖尿病大鼠体内,并观察10周。结果每个胰腺纯化后最多收获胰岛1058.47IEQ,最少411.88IEQ,平均(826.95±93.42)IEQ。实验1组、实验2组的胰岛收获率、细胞内胰岛素和DNA含量以及胰岛素刺激指数均高于对照组(P<0.05);实验2组和实验1组的2000IEQ新鲜胰岛或冻存胰岛在移植后1周内可100%纠正糖尿病。结论大鼠胰岛冻存前后经微重力培养后移植可以明显提高1型糖尿病大鼠的治疗效果。

关键词：胰岛移植复苏旋转细胞培养微重力培养糖尿病大鼠冻存分离纯化三维微重力低温保存液

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一种提高犬胰岛体外培养质量的方法

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中华实验外科杂志 2006年第4期23卷 565-566页

作者：邢军许评周毅陈艳波李爱东宋纯宋春芳哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001

目的研究提高犬胰岛体外培养质量的方法。方法将犬胰岛分别进行普通培养 (A组)、常温(37℃)微重力培养(B组)和低温(26℃)微重力培养(C组),分别培养3、7、14和21 d, 并检测各组胰岛培养后收获率、存活率和功能。结果不同方法培养21 d后,... 详细信息

目的研究提高犬胰岛体外培养质量的方法。方法将犬胰岛分别进行普通培养 (A组)、常温(37℃)微重力培养(B组)和低温(26℃)微重力培养(C组),分别培养3、7、14和21 d, 并检测各组胰岛培养后收获率、存活率和功能。结果不同方法培养21 d后,B组和C组平均胰岛收获率为(66．2±4．1)％和(81．3±4．8)％高于A组的胰岛收获率(50．5±2．9)％,P<0．05。A组胰岛存活率降至(27．7±3．5)％,与B组的(49．7±3．2)％和C组的(64．8±4．7)％比较,P<0．05。 B组和C组DNA含量及胰岛素含量均维持较高的水平,B组和C组胰岛素储备能力较A组高,胰岛索刺激指数分别为(3．30±0．70)、(5．48±1．00)和(2．33±0．50),差异有统计学意义(P< 0．05)。结论低温微重力三维培养胰岛是提高胰岛培养质量的好方法。

关键词：胰岛低温微重力培养

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氯沙坦对体外培养的犬胰岛细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

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中华器官移植杂志 2006年第4期27卷 241-244页

作者：邢军许评周毅宋一民李爱东宋纯宋春芳哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001

目的探讨血管紧张素受体I拮抗剂(AT1Ra)氯沙坦对体外培养的犬胰岛细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响。方法机械自动化分离胰岛,纯化系统获得高纯度胰岛后,分为3组进行培养。(1)单纯培养组;(2)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组:培养基中加入不同浓... 详细信息

目的探讨血管紧张素受体I拮抗剂(AT1Ra)氯沙坦对体外培养的犬胰岛细胞凋亡和凋亡相关基因表达的影响。方法机械自动化分离胰岛,纯化系统获得高纯度胰岛后,分为3组进行培养。(1)单纯培养组;(2)血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组:培养基中加入不同浓度的AngⅡ(0.1、1.0和10.0μmol/L);(3)氯沙坦组:在加人不同浓度的AngⅡ前30min给予氯沙坦10.0μmol/L。各组胰岛培养48h后,采用透射电镜观察胰岛细胞凋亡情况;原位末端脱氧核糖核酸转移酶标记法(TUNEL)检测胰岛细胞凋亡百分率;免疫组织化学法和流式细胞术检测胰岛细胞凋亡相关基因(Bax和Bcl-2)的表达。结果单纯培养组胰岛细胞凋亡百分率为(5.70±1.18)%,AngⅡ组在AngⅡ浓度为0.1μmol/L、1.0μmol/L和10.0μmol/L时,胰岛细胞凋亡百分率分别为(9.77±1.95)%、(16.42±3.01)%和(18.22±2.31)%,氯沙坦组分别为(6.56±1.85)%、(9.25±1.58)%和(11.20±2.48)%,AngⅡ组与单纯培养组和氯沙坦组相比较,差异有统计学意义(P<0.05)。AngⅡ组Bax和Bcl-2基因表达增强,荧光指数(FI)分别为1.86±0.15和1.43±0.07,Bax/Bcl-2比值(1.30)升高;而氯沙坦组Bax表达下调至1.56±0.14,Bcl-2表达上调至1.67±0.09,Bax/Bcl-2比值(0.93)降低,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ可以诱导体外培养的犬胰岛细胞凋亡;而氯沙坦对胰岛细胞具有保护作用,其可能机制是通过影响凋亡相关基因Bax和Bcl-2的表达实现的。

关键词：血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂胰岛细胞凋亡犬

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血管紧张素Ⅱ对胰岛凋亡及Fas/Fas-L表达影响的实验研究

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哈尔滨医科大学学报 2008年第5期42卷 468-471页

作者：刘锐代文杰周毅宋春芳邢军哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室黑龙江哈尔滨150001

目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对体外培养犬胰岛细胞凋亡的诱导作用及氯沙坦(losartan)抑制胰岛凋亡和对凋亡相关基因Fas和Fas-L表达的影响。方法将获得的纯化犬胰岛经不同处理培养48h后,采用光镜和透射电镜观察胰岛细胞... 详细信息

目的观察血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)对体外培养犬胰岛细胞凋亡的诱导作用及氯沙坦(losartan)抑制胰岛凋亡和对凋亡相关基因Fas和Fas-L表达的影响。方法将获得的纯化犬胰岛经不同处理培养48h后,采用光镜和透射电镜观察胰岛细胞凋亡情况,原位末端标记法检测胰岛细胞凋亡百分率,免疫组化法和流式细胞术检测胰岛细胞Fas和Fas-L表达。结果体外培养犬胰岛经1.0μmol/L AngⅡ处理48h后,胰岛细胞出现调亡(16.41±3.01)%现象,电镜见细胞皱缩、胞核裂解,电泳显示核酸断裂片呈"梯形"结构,Fas(11.46±1.97)%和Fas-L(14.68±3.51)%表达亦显著增强。氯沙坦组凋亡细胞数减少至(9.25±1.58)%,Fas(6.85±1.89)%和Fas-L(8.16±2.13)%表达减弱。两两比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论AngⅡ诱导胰岛细胞凋亡。凋亡由AT1受体介导,Fas和Fas-L参与其凋亡过程。氯沙坦具有胰岛保护作用。

关键词：糖尿病血管紧张素Ⅱ 氯沙坦胰岛细胞凋亡

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高压氧微重力培养提高冻存胰岛质量和移植效果的实验研究

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中华普通外科杂志 2009年第3期24卷 221-224页

作者：周毅刘锐吴舰宇代文杰宋春芳哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室黑龙江哈尔滨150001

目的探讨胰岛冻存前后经高压氧细胞旋转培养系统（HORCCS）培养后移植入糖尿病大鼠能否提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为：A.体外实验组：将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养30d，检测细胞内DNA和胰岛素含量，胰岛... 详细信息

目的探讨胰岛冻存前后经高压氧细胞旋转培养系统（HORCCS）培养后移植入糖尿病大鼠能否提高胰岛移植的效果。方法将分离纯化的大鼠胰岛分为：A.体外实验组：将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养30d，检测细胞内DNA和胰岛素含量，胰岛存活率，胰岛素分泌水平。B.胰岛移植实验组：将各组大鼠胰岛经HORCCS培养或普通培养7d，然后移植，观察移植受体血糖和胰岛素水平。电镜观察各胰岛移植实验组中培养7d时的胰岛的超微结构改变。结果经高压氧RCCS培养14d的胰岛存活率及胰岛素分泌水平高于普通培养组（P〈0.05）。移植了经HORCCS培养的胰岛后，受体血糖在移植后2周即恢复为正常值，并维持到移植后10周。全部受体维持正常血糖耐受曲线。电镜下可见经HORCCS培养后，冻存复苏胰岛表面形成微小的孔道。结论胰岛冻存前后经高压氧RCCS培养后可以建立营养输送管道，不但有利于氧和营养物质的运输，更有利于胰岛内细胞的均匀一致的冻存，从而减少冻存对胰岛的损害，提高胰岛的分泌活性和成活率。

关键词：胰岛移植高压氧大鼠 Wistar 冻存微重力旋转培养

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胰岛细胞移植治疗Ⅰ型糖尿病研究的新进展

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中华实验外科杂志 2007年第1期24卷 125-126页

作者：赵勇许评宋春芳哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001 青岛市市立医院肝胆外科 266071

经过多年的临床实践，已证实胰岛细胞移植可以有效降低血糖，使糖尿病患者由胰岛素依赖型转为非依赖型，或减少胰岛素的用量，并可在很大程度上改善患者依靠胰岛素治疗时不能防止的糖尿病慢性并发症；此外胰岛细胞移植还具有安全、基本... 详细信息

经过多年的临床实践，已证实胰岛细胞移植可以有效降低血糖，使糖尿病患者由胰岛素依赖型转为非依赖型，或减少胰岛素的用量，并可在很大程度上改善患者依靠胰岛素治疗时不能防止的糖尿病慢性并发症；此外胰岛细胞移植还具有安全、基本无创伤性、并发症少及易重复多次移植的特点。现对胰岛细胞移植治疗Ⅰ型糖尿病研究的新进展加以综述。

关键词：胰岛细胞移植细胞移植治疗 Ⅰ型糖尿病糖尿病慢性并发症胰岛素依赖型胰岛素治疗临床实践降低血糖

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三维微重力培养大鼠胰岛细胞的实验研究

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中华外科杂志 2004年第9期42卷 559-561页

作者：宋纯段秀庆周毅李曦韩礼欧许评宋春芳金连弘哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室 150001 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室哈尔滨医科大学组织学与胚胎学教研室组织工程研究中心

目的　应用三维微重力组织培养对大鼠胰岛细胞的存活率及分泌功能进行研究。方法将大鼠胰岛细胞分离消化后分别进行二维普通培养 (Ⅰ组 )及三维微重力条件培养 (Ⅱ组 ) ,应用双硫腙 (DTZ)染色法 ,对胰岛细胞进行特异性染色鉴定 ;采用AO... 详细信息

目的　应用三维微重力组织培养对大鼠胰岛细胞的存活率及分泌功能进行研究。方法将大鼠胰岛细胞分离消化后分别进行二维普通培养 (Ⅰ组 )及三维微重力条件培养 (Ⅱ组 ) ,应用双硫腙 (DTZ)染色法 ,对胰岛细胞进行特异性染色鉴定 ;采用AO PI双染色法对两组培养 3d、7d、14d的胰岛细胞存活率进行检测 ;应用放射免疫法检测两种不同培养方法培养液中胰岛素分泌水平。结果　DTZ染色后胰岛呈桔红色 ,清晰可见。培养 7d和 14d时 ,Ⅱ组胰岛细胞存活率分别为(0 90 0 0± 0 0 10 7) %和 (0 80 38± 0 0 0 92 ) % ,均明显高于Ⅰ组 (P <0 0 1)。胰岛素测定结果表明 ,培养 7d时 ,Ⅱ组胰岛素水平为 (70 875± 0 31)mU/L ,Ⅰ组胰岛素水平为 (41 2 4 6± 0 35 )mU/L ,二者差异有显著意义 (P <0 0 1)。在培养的 14d、2 1d和 30d时 ,Ⅱ组胰岛素的分泌水平也均高于Ⅰ组(P <0 0 1)。结论　三维微重力培养组的胰岛细胞存活率及胰岛素分泌功能都优于二维普通培养组。

关键词：三维微重力大鼠胰岛细胞实验研究细胞培养

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异搏定对缺血-再灌注大鼠胰腺细胞凋亡、组织钙及bcl-2、c-myc表达的影响

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中国普外基础与临床杂志 2006年第5期13卷 545-549页

作者：邢军许评梁德森陈艳波李爱东宋纯宋春芳哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室哈尔滨150001

目的探讨异搏定对缺血-再灌注损伤大鼠胰腺组织钙、胰腺细胞凋亡及凋亡相关基因(bcl-2、c-myc)的影响。方法取Wistar大鼠30只,随机均分为假手术组、缺血-再灌注组及异搏定治疗组。缺血-再灌注组和异搏定治疗组钳闭大鼠腹腔干及肠系膜上... 详细信息

目的探讨异搏定对缺血-再灌注损伤大鼠胰腺组织钙、胰腺细胞凋亡及凋亡相关基因(bcl-2、c-myc)的影响。方法取Wistar大鼠30只,随机均分为假手术组、缺血-再灌注组及异搏定治疗组。缺血-再灌注组和异搏定治疗组钳闭大鼠腹腔干及肠系膜上动脉15min,再灌注12h,制备胰腺缺血-再灌注损伤模型。异搏定治疗组分别于缺血前15min及再灌注1h后经大鼠尾静脉注射异搏定溶液0.1mg/100g;缺血-再灌注组2次经尾静脉注射等体积生理盐水。再灌注12h后,活杀大鼠取胰腺,进行组织学观察,测定组织钙含量、胰腺细胞凋亡率和bcl-2、c-myc的表达。结果异搏定治疗组大鼠胰腺病理改变较缺血-再灌注组轻微;异搏定治疗组组织钙含量和胰腺细胞凋亡率均明显低于缺血-再灌注组(411.1±55.8)μg/g干重vs(470.9±31.9)μg/g干重;(9.5±2.9)%vs(18.4±3.1)%,P均<0.05;bcl-2、c-myc表达阳性细胞率及荧光指数异搏定治疗组均明显高于缺血-再灌注组(8.7±0.6)%vs(6.9±1.2)%,(13.6±2.4)%vs(10.3±1.9)%;1.72±0.11vs1.41±0.07,1.76±0.19vs1.55±0.13,P均<0.05。结论胰腺缺血-再灌注损伤中存在细胞凋亡机理的参与,异搏定降低胰腺组织钙含量,并促进凋亡相关基因bcl-2、c-myc的表达,抑制细胞凋亡,保护了缺血-再灌注损伤的胰腺。

关键词：胰腺缺血-再灌注损伤细胞凋亡钙超载异搏定

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丹参对大鼠胰岛获取和冻存及体外培养影响的实验研究

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中华肝胆外科杂志 2006年第11期12卷 787-788页

作者：邢军许评周毅陈艳波李爱东宋纯宋春芳哈尔滨医科大学附属第一临床医学院普外一科卫生部细胞移植重点实验室哈尔滨市150001

胰岛移植是治疗I型糖尿病较理想方法，移植成功的关键是胰岛足够数量和良好功能。细胞冻存是收集足够胰岛、建立胰岛库的可行手段。但冻存复苏过程可引起细胞的破坏和死亡，使细胞数量减少、活性及功能降低。本实验探讨丹参能否有益于... 详细信息

胰岛移植是治疗I型糖尿病较理想方法，移植成功的关键是胰岛足够数量和良好功能。细胞冻存是收集足够胰岛、建立胰岛库的可行手段。但冻存复苏过程可引起细胞的破坏和死亡，使细胞数量减少、活性及功能降低。本实验探讨丹参能否有益于胰岛获取及冻存前后的存活和功能，及其作用的可能机制。

关键词：胰岛移植细胞冻存实验研究体外培养丹参大鼠 I型糖尿病复苏过程

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模拟微重力培养大鼠胰岛的形态学观察

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中华普通外科杂志 2004年第7期19卷 398-400页

作者：宋纯段秀庆孙野青李曦韩礼欧许评宋春芳金连弘哈尔滨医科大学第一临床医学院卫生部细胞移植重点实验室 150001 哈尔滨医科大学第一临床医学院普外一科 150001 哈尔滨工业大学生命科学院中国农业科学院哈尔滨兽医研究所生物技术国家重点实验室哈尔滨医科大学组胚教研室

目的应用电子显微镜观察模拟微重力培养对大鼠胰岛形态的影响。方法将新鲜分离和消化的大鼠胰岛分别进行普通培养和模拟微重力条件培养 ,应用扫描电镜和透射电镜观察各组大鼠胰岛的大体结构及超微结构的变化 ,并与新鲜分离的胰岛对照。... 详细信息

目的应用电子显微镜观察模拟微重力培养对大鼠胰岛形态的影响。方法将新鲜分离和消化的大鼠胰岛分别进行普通培养和模拟微重力条件培养 ,应用扫描电镜和透射电镜观察各组大鼠胰岛的大体结构及超微结构的变化 ,并与新鲜分离的胰岛对照。结果培养 7d时透射电镜下观察微重力组的胰岛形态类似新鲜组的胰岛 ,胞浆内有发育良好的分泌颗粒和丰富的线粒体 ;扫描电镜显示只有微重力组胰岛与胰岛之间形成了许多小洞。结论模拟微重力培养时 ,胰岛的形态保持良好。

关键词：模拟微重力大鼠胰岛形态学细胞培养

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